一種單萜二氫喹啉酮生物鹼化合物及其晶體的製備方法與作為海洋防汙劑的應用的製作方法
2023-04-26 18:37:56
一種單萜二氫喹啉酮生物鹼化合物及其晶體的製備方法與作為海洋防汙劑的應用的製作方法
【專利摘要】一種單萜二氫喹啉酮生物鹼化合物及其晶體的製備方法與作為海洋防汙劑的應用，製備時先對真菌Scopulariopsis?sp.(TA01-33)進行菌種培養，再對該真菌進行發酵培養，過濾除去菌體，濾液濃縮後，用乙酸乙酯萃取；依次進行正相矽膠柱層析、Sephadex?LH-20凝膠柱層析、HPLC高效液相色譜，即得式I化合物。本發明提供一種海洋生物防汙劑，其特徵在於以本發明的式I化合物、其藥學上可接受的鹽或其晶體，用於防治藤壺附著引起的海洋生物汙損。
【專利說明】一種單萜二氫喹啉酮生物鹼化合物及其晶體的製備方法與作為海洋防汙劑的應用【技術領域】
[0001]本發明涉及一種單職二氫喹啉酮（monoterpenoid-dihydroquinolone)生物鹼化合物及其晶體的製備方法與應用，特別是涉及一種對海洋汙損生物藤壺Balanusamphitrite幼蟲具有極強的抑制活性的單萜二氫喹啉酮生物鹼化合物及其晶體的製備方
法與應用。
【背景技術】
[0002]海洋生物汙損是有機分子、微生物、動物、植物、以及它們的副產物在海洋潛沒設施表面的危害性積聚。這種危害性積聚經常發生在沒有保護的海洋潛沒設施的表面，包括海運和旅遊的船舶，海軍軍艦，熱交換器，海洋傳感器以及水產養殖基地等。生物汙損引起了巨大的經濟損失，僅以美國海軍軍艦為例，每年在這方面的經濟損失在18到26億美元之間，而美國海軍軍艦數量僅佔全球船舶數量的0. 5%，因此海洋生物汙損是極其嚴重的自然危害。藤壺因其很強的黏附能力是目前所知的汙損生物中非常普遍的代表性生物。自2008年全球取消了有毒防汙劑有機錫的使用後，尋找安全高效的海洋防汙劑成為國際上急需解決的課題。海洋天然產物被認為是新型海洋防汙劑的重要來源。實際上，在過去的幾十年裡已經從海綿，珊瑚和海藻等海洋生物中發現了很多有強抗汙損活性的化合物。然而，從上述大型生物中發現的活性化合物由於受到量的限制而大大影響了其潛在的應用。海洋微生物由於在實驗室中可以大規模發酵，不易破壞自然環境，而成為活性海洋化合物的最重要來源。然而，近年來尚未見到從海洋微生物中獲得有重要抗汙損活性的單萜二氫喹啉酮生物鹼化合物作 為防汙劑的使用。（J.A. Callow, Μ. E. Callow, Nat. Commun. 2011,2,244-253 ；C. M. Kirschner, A. B. Brennan, Annu. Rev. Mater. Res. 2012,42,1-19 ；M. Schultz,J. Bendick, E. Holm, ff. Hertel, Biofouling 2011，27，87-98 ；N. Fusetani, Nat. Prod.Rep. 2004,21,94-104 ；N.Fusetani, Nat.Prod. Rep. 2011,28,400-410 ；P.-Y. Qian, Y. Xu,N. Fusetani, Biofouling 2010, 26, 223-234。)
【發明內容】
[0003]本發明的目的在於提供一種來源於海洋真菌的單萜二氫喹啉酮生物鹼化合物及其晶體的製備方法與作為海洋防汙劑的應用，它能滿足現有技術的上述需求。菌種保藏信息：保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路I號院3號中國科學院微生物研究所；保藏日期：2012年12月17日；保藏編號：CGMCC6959 ;分類命名：Scopulariopsis sp.。
[0004]本發明提供式I化合物或其藥學上可接受的鹽：
[0005]
【權利要求】
1.一種式I結構的單萜二氫喹啉酮生物鹼化合物的製備方法，其特徵在於包括以下步驟：先在菌種培養基中對真菌Scopulariopsis sp. (TA01-33)進行菌種培養,再在發酵培養基中對該真菌進行發酵培養，將所得發酵液過濾，除去菌體，將濾液濃縮後，用乙酸乙酯萃取；萃取液濃縮後分別進行正相矽膠柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析後，再經HPLC高效液相製備色譜，將所得洗脫液濃縮，得到式I化合物；其中式I化合物結構為：
2.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於所述菌種培養基優選含有葡萄糖O. 1 % -5.0 %、酵母膏 0.01 % -1 %、蛋白腖 0.01 % -1 %、瓊脂 O. 1 % -3.0 %、氯化鈉O.05% _5%，其餘為水，上述百分含量均為重量百分比，培養溫度優選為0-30°C，培養時間優選為3-15天。
3.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於所述發酵培養基優選含有葡萄糖O.1% -5.0%、酵母膏0.01% -1%、蛋白腖0.01% -1%、氯化鈉0.05% _5%，其餘為水，上述百分含量均為重量百分比，培養溫度優選為0-30°C，培養時間優選為10-60天。
4.如權利要求2-3任一項所述的製備方法，其特徵在於所述的正相矽膠柱層析採用的固定相為200-300目矽膠，流動相為體積比為15%-40%的乙酸乙酯-石油醚混合溶劑；所述Sephadex LH-20凝膠柱層析採用的流動相為體積比為石油醚：氯仿：甲醇=2 : I : I的混合溶劑；所述HPLC高效液相製備色譜中採用的色譜柱為Kromasi110 X 250mm, 7 μ m，流速為I. 0-5.0mL/min，流動相為體積比50% -80%的甲醇-水混合溶劑。
5.權利要求1所述的式I化合物為晶體，其特徵在於該晶體的空間群為P2(l)2(l)2(l)，晶胞參數為a = 7.84270(10) λ, b = 11.7905(2) A, c = 50.2903(8) A, α=90。，β = 90。，y = 90。，V =4650.31(12) Α3，ζ = 4，Dc = I. 243g/cm3, F(OOO)=1852，μ = O. 697mm_1, Flack 常數為 0. 00 (16)。
6.權利要求5所述晶體的製備方法，其特徵在於將式I化合物溶於甲醇、乙醇、水、四氫呋喃或丙酮中的任一種或幾種，靜置緩慢結晶即可得到式I化合物的晶體。
7.如權利要求6所述的製備方法，其特徵在於靜置緩慢結晶的條件為在0-30°C下，靜置1-30天。
8.一種海洋生物防汙劑，其特徵在於其含有權利要求1所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽作為有效成分。
9.一種海洋生物防汙劑，其特徵在於其含有權利要求5所述的晶體作為有效成分。
10.權利要求1所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽在製備海洋防汙劑中的應用。
11.權利要求6所述的晶體在製備海洋防汙劑中的應用。
【文檔編號】C07D215/22GK104031954SQ201410254818
【公開日】2014年9月10日 申請日期:2014年6月6日 優先權日:2014年6月6日
【發明者】邵長倫, 王長雲, 胥汝芳, 王開玲 申請人:中國海洋大學