一種抗性處理提高齒瓣石斛試管苗移栽成活率的方法
2023-05-23 08:46:01
專利名稱：一種抗性處理提高齒瓣石斛試管苗移栽成活率的方法
技術領域：
本發明涉及一種提高齒瓣石斛移栽成活率的方法，更具體的說涉及一種抗性處理
提高齒瓣石斛試管苗移栽成活率的方法。
背景技術：
石斛屬(Dendrobium)是蘭科第二大屬，全球約有1500種，我國有74種2個變種， 其中可供藥用的有40多種，主要分布於我國的華南和西南地區。其中，主要有鐵皮石斛，紫 皮石斛，金釵石斛，齒瓣石斛、霍山石斛，密花石斛；石斛為名貴中藥材，在我國有悠久的歷 史，藥用始載於《神農本草經》，列為上品，"味甘，平。主傷中，除痺，下氣，補五臟虛勞贏瘦， 強陰。久服厚腸胃，輕身延年。"其有效成分主要是石斛鹼和多糖，目前廣泛用於加工成保健 品、藥品及石斛湯、石斛酒等飲品。藥用植物栽培是保護、擴大、再生利用藥用植物資源的最 直接、有效的手段。石斛屬植物對生態條件的要求較高，栽培難度大，其栽培面積和規模受 到很大限制。通過在栽培的過程中進行煉苗是一種有效的提高種苗存活率的方法。中國專 利申請(200810195801.2)公開了一種鐵皮石斛組培實生苗的煉苗方法，其主要是在組培 的瓶苗分別在瓶蓋密封時、松蓋時、揭蓋、分別光照由若到強煉苗；並且在移栽是光照由弱 到強、溼度由大到小煉苗；上述專利期望通過煉苗達到提高鐵皮石斛抗性的目的；但是效 果並不理想。
發明內容
本發明提供了一種抗性處理提高齒瓣石斛試管苗移栽成活率的方法，該方法包括 以下步驟 1)配製生根培養基在基本培養基加入香蕉提取液和蔗糖，香蕉提取液在生根培 養基中的重量百分比為15 30%，蔗糖在生根培養基中的重量百分比為1.5 3% ;每L 培養基加入激素0. 1 1. 0mg、瓊脂2 4g，調pH5. 6 6. O，得到生根培養基;
2)前期培養試管苗有3 5條根、根長度> 2cm、植株高度〉3cm時移栽到生根
培養基上。 3)抗性處理將移栽到生根培養基上的試管苗置於可控溫的環境中，升溫至40 50。C或降溫至2 8°C ，培養24 48小時； 4)後期培育將試管苗移栽到培養室大棚裡培養20 40天，觀察植株的變化，判 斷是否達到抗性處理標準，未達到移栽標準則重複進行抗性處理；
5)幼苗移栽至苗床。 步驟1)所述的基本培養基為MS、1/2MS、N6、KC、KS或SH中的一種。
步驟1)所述的激素為NAA或IAA的一種。 步驟4)所述的判斷是否達到抗性處理標準為期間觀察，植株是否減緩伸長生長 並莖條長粗，若是則已達到處理標準；若仍保持旺盛的生長，則需要重新進行處理。保證培 育20天後，莖條變粗，部分葉片變黃或脫落為正常現象。
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步驟5)所述的苗床為床高10 15釐米、床寬1 1. 2米、支架0. 8 1. 0米，苗 床上的底料為木材加工的邊皮廢料或石棉瓦為下層，上層為碎樹皮鋪墊，厚度為5 10釐 米。 本發明的有益技術效果本發明通過植株在極端溫度條件下，降低植株的生長代 謝速度，促進莖幹的纖維化，增強強植株對環境的適應能力；使其在人工創造的逆境下儘快 莖條膨大，葉片脫落，抗性增強，進而提高移栽成活率，為一種較為簡單的抗性處理工藝，可 操作性強，成本較低。
具體實施例方式
增殖培養基的製備在1L的KC加入1毫克NAA，製成固體培養基。 生根培養基的製備在MS加入香蕉提取液和蔗糖，香蕉提取液濃度為15 30%，
蔗糖濃度為1. 5 3% ;每L培養基加入NAAO. 1 1. 0mg、瓊脂2 4g，調pH5. 6 6. 0制
成升根培養基。 苗床的製備利用木材加工的邊皮廢料或石棉瓦作底，做成床高10 15釐米、床
寬1 1. 2米、床長因地而定、支架0. 8 1. 0米的種植床。以碎樹皮作為基質鋪於苗床上，
厚度5 10釐米。碎樹皮在使用前最好選用高溫或藥物消毒。 外植體的採集與滅菌，其操作步驟為 1)選擇生長健壯的3cm 6cm長的新芽作外植體。 2)用消了毒的利刃將新芽從從母體切下。 3)經自來水衝洗30分鐘後，剝去最外面一層葉鞘，在75%的酒精中迅速蘸一下， 立即放入15%次氯酸鈉溶液中浸泡15分鐘，或放入0. 1%的升滎溶液中8 10分鐘，並不 時用手輕搖。 4)取出後再剝去多餘的組織，再放入5%次氯酸鈉溶液中浸泡5 10分鐘，取出 後用無菌水衝洗數次，然後在無菌條件下剝去葉苞片，以頂芽或側芽作為外植體接種於裝 有增殖培養基的試管中進行增殖培養。 待到試管苗有3 5條根、根長度> 2cm、植株高度〉3cm時移栽到生根培養基上。
試管苗置於可控溫的環境中，相對溼度控制為70 90 % ，光照強度2000 4000lx，升溫至40 50°C ，培養36小時； 抗性處理後，用鑷子或筷子輕輕取出幼苗，用自來水將根系上瓊脂衝洗乾淨以防 止微生物的滋生。洗淨後的試管苗用0.01%高錳酸鉀或0. 1%的多菌靈或百菌清等殺菌 劑浸泡3 5分鐘，稍微晾乾後再栽入大棚裡已準備好的苗床中。在大棚裡(保證溫度在 20 3(TC之間)培養20 40天。期間觀察，植株是否減緩伸長生長並莖條長粗，若是則 已達到處理標準；若仍保持旺盛的生長，則需要重新進行上述的升溫抗性處理。保證培育 20天後，莖條變粗，部分葉片變黃或脫落。 試管苗移栽前期要適當遮陰，並加強水分管理，一般用玻璃或塑料薄膜覆蓋以保 持較高的空氣溼度，但注意基質不宜過溼積水，以防爛苗。剛移栽成活的試管苗，可施用 1/2MS營養液補充營養促進小苗生長。此外，溫度對成活率影響也很大，一般以23t: 28t: 最適宜，夏季溫度過高、冬季溫度過低時均較難管理，水少生長受影響，水多又易腐爛，成活 率下降。試管苗在移栽4 6周後，新梢開始生長，可用0. 1%的尿素和磷酸二氫鉀作根外追肥，此時小苗即可轉入正常管理。
權利要求
一種抗性處理提高齒瓣石斛試管苗移栽成活率的方法，其特徵在於該方法包括以下步驟1)配製生根培養基在基本培養基加入香蕉提取液和蔗糖，香蕉提取液在生根培養基中的重量百分比為15～30％，蔗糖在生根培養基中的重量百分比為1.5～3％；每L培養基加入激素0.1～1.0mg、瓊脂2～4g，調pH5.6～6.0，得到生根培養基；2)前期培養試管苗有3～5條根、根長度＞2cm、植株高度＞3cm時移栽到生根培養基上；3)抗性處理將移栽到生根培養基上的試管苗置於可控溫的環境中，升溫至40～50℃或降溫至2～8℃，培養24～48小時；4)後期培育將試管苗移栽到培養室大棚裡培養20～40天，觀察植株的變化，判斷是否達到抗性處理標準，未達到移栽標準則重複進行抗性處理；5)幼苗移栽至苗床。
2. 根據權利要求1所述的抗性處理提高齒瓣石斛試管苗移栽成活率的方法，其特徵在 於步驟1)所述的基本培養基為MS、l/2MS、Ne、KC、KS或SH中的一種。
3. 根據權利要求1所述的抗性處理提高齒瓣石斛試管苗移栽成活率的方法，其特徵在 於步驟1)所述的激素為NAA或IAA的一種。
4. 根據權利要求1所述的抗性處理提高齒瓣石斛試管苗移栽成活率的方法，其特徵在於步驟4)所述的判斷是否達到抗性處理標準為期間觀察，植株是否減緩伸長生長並莖條長粗，若是則已達到處理標準；若仍保持旺盛的生長，則需要重新進行處理。保證培育20 天后，莖條變粗，部分葉片變黃或脫落為正常現象。
5. 根據權利要求1所述的抗性處理提高齒瓣石斛試管苗移栽成活率的方法，其特徵在 於步驟5)所述的苗床為床高10 15釐米、床寬1 1. 2米、支架0. 8 1. 0米，苗床上 的底料為木材加工的邊皮廢料或石棉瓦為下層，上層為碎樹皮鋪墊，厚度為5 10釐米。
全文摘要
本發明公開了一種抗性處理提高齒瓣石斛試管苗移栽成活率的方法，包括前期培育，抗性處理，後期培育，幼苗移栽四個步驟，其有益技術效果是通過植株在極端溫度條件下，降低植株的生長代謝速度，促進莖幹的纖維化，增強強植株對環境的適應能力；使其在人工創造的逆境下儘快莖條膨大，葉片脫落，抗性增強，進而提高移栽成活率，為一種較為簡單的抗性處理工藝，可操作性強，成本較低。
文檔編號A01H4/00GK101695282SQ20091019121
公開日2010年4月21日 申請日期2009年10月26日 優先權日2009年10月26日
發明者孫年喜, 明興加, 王昌華, 秦松雲, 蔣渝, 鍾國躍 申請人:重慶市中藥研究院;