殼寡糖在製備防治心腦血管疾病藥物中的應用的製作方法

2023-05-04 04:18:06 1

專利名稱：殼寡糖在製備防治心腦血管疾病藥物中的應用的製作方法
技術領域：
本發明屬於醫藥技術領域，涉及殼寡糖在製備防治心腦血管疾病藥物中的應用， 具體涉及殼寡糖在製備防治腦血管疾病藥物中的應用。
背景技術：
近年來，隨著生活水平的提高和飲食方式的改變，作為人類「頭號殺手」的心腦血管疾病的發病率和死亡率均呈上升趨勢。每年數千萬的患者死於心腦血管疾病，雖約有一半患者經搶救而倖存，但留下殘疾，生活不能自理，承受著身體與心理雙重壓力。流行病學資料推測，到2020年，心腦血管疾病仍將是人類的首位死因。因此，殼寡糖在製備防治心腦血管疾病藥物中的應用，為治療心腦血管疾病開闢新途徑具有積極的作用。殼寡糖(chitooligosaccharides，COS)，係指由甲殼素或殼聚糖經水解後產生的一類聚合度低且可溶於水的氨基糖類化合物，可被機體吸收利用。殼寡糖不僅具有甲殼素和殼聚糖相似的性質，而且一些生理活性或功能更為顯著，甚至顯示出甲殼素和殼聚糖所不具備的生理活性(魏新林，夏文水.甲殼低聚糖的生理活性研究進展[J].中國藥理學通報，2003，19(6) :614-7)。國內外實驗研究表明，殼寡糖具有抗氧化、神經保護、抗腫瘤等多種藥理作用(Sun R, Yao Q, Zhou D, et al. Antioxidant activity of N-carboxymethylchitosan oligosaccharides[J]. Bioorg Med Chem Lett,2008,18(21) 5774-6 ；KhodagholiF, Eftekharzadeh B, Maghsoudi N, et al. Chitosan prevents oxidative stress-inducedamyloid beta formation and cytotoxicity in NT2 neurons involvement of transcriptionfactors Nrf2 and NF-kappaB[J].Mol Cell Biochem, 2010,337(1-2) :39-51 ；Shen K Τ, ChenM H, Chan H Y, et al. Inhibitory effects of chitooligosaccharides on tumor growthand metastasis[J]. Food Chem Toxicol,2009, 47(8) :1864-71)。但尚未有關殼寡糖治療腦血管疾病的報導。

發明內容
本發明提供了殼寡糖的新用途，即殼寡糖在製備防治心腦血管疾病的藥物中的應用，特別是殼寡糖在製備防治腦血管疾病藥物中的應用，包括但不限於腦缺血、腦缺氧等腦血管疾病。本發明提供了一種包含殼寡糖及常規藥用載體的藥物組合物，其特徵是所述藥物組合物是採用常規或特殊製劑工藝製備而成的口服或非口服途徑方式給藥的製劑。本發明提供了預防或治療心腦血管疾病的方法，包括向心腦血管病人給予殼寡糖或前面所述藥物組合物。本發明提供的殼寡糖可以長期應用，具有明顯的預防或改善心腦功能作用，來源廣泛，成本低，安全性高。
具體實施例方式
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心腦血管疾病繫心血管病和腦血管病的統稱。心血管病包括但不限於高血壓、高血壓性心臟病、冠心病、心絞痛、心肌梗塞、心肌缺血、心率失常、肺心病及高脂血症等；腦血管疾病包括但不限於腦血栓、腦栓塞、腦中風及腦溢血等。本發明提供了殼寡糖在製備防治心腦血管疾病的藥物中的應用，特別是殼寡糖在製備防治腦血管疾病藥物中的應用，包括但不限於腦缺血、腦缺氧等腦血管疾病。本發明所述的殼寡糖可以根據臨床需要，加入相應藥用載體，以片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊、懸浮液、溶液、糖漿、注射劑、霜劑、軟膏、凝膠劑、噴霧劑、口嚼劑或貼劑等製劑形式存在。本發明所述的殼寡糖可根據臨床需要，採用口服或非口服方式用藥，優選口服給藥方式。本發明所述的殼寡糖製劑採用口服方式用藥時，人用劑量優選I-IOOOmg/人/日， 其中更優選為10-500mg/人/日，最優選為50-100mg/人/日。本發明所述的殼寡糖是由甲殼素或殼聚糖經解聚後獲得，可採用任何已公開文獻或專利方法提取製備(舒德海，錢俊青，吳薇.過氧化氫製備殼寡糖的工藝[J].食品與發酵工業，2009，35 (6) :121-125;蔡聖寶，邢榮娥，劉松，等.兩種方法製備殼寡糖平均分子質量與氨基含量分析[J].海洋科學，2009，33 (5) :70-73)。採用各種不同方法製備的殼寡糖對本發明的用途沒有影響。以下結合實驗例對本發明進行說明，但本發明並不受限於該實施例。實施例1殼寡糖抗腦缺血再灌注作用1材料與方法1.1 材料1.1.1實驗動物雄性ICR小鼠，體重25 ^g，北京維通利華實驗動物技術有限公司，許可證號 SCXK(京)2007-001。自然光照周期飼養，術前1 禁食，自由飲水。1. 1. 2藥品及試劑殼寡糖(純度彡90%，平均分子量1500，脫乙醯度彡90%)北京聯合大學生物化學工程學院；依達拉奉南京先聲東元製藥有限公司；紅四氮唑(2，3， 5-triphenyltetrazolium chloride, TTC)，北京拜爾迪生物技術有限公司；丙二醛(MDA)、 羰基、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、穀胱甘肽-過氧化物酶(GSH-Px)、考馬斯亮蘭試劑盒，南京建成生物工程研究所；其他試劑均為國產分析純。1. 1.3實驗儀器水浴鍋北京市長風儀器儀表公司；多功能酶標儀=Sigma公司；TGL 16M離心機 湖南凱達科學儀器有限公司；渦旋混合器金壇市醫療器械廠。1. 2 方法1.2. 1動物分組及給藥將小鼠隨機分為6組，即假手術組、模型組、依達拉奉(3mg · kg_S陽性對照藥)組及殼寡糖高、中、低劑量(200、100、50mg · kg-1)組。藥物用前溶於蒸餾水，按照IOml · kg-1 體重灌胃給藥，每天1次，連續7d，末次給藥後Ih製備腦缺血/再灌注模型。1. 2. 2局灶性腦缺血/再灌注模型的製備
採用線栓法製備小鼠左側大腦中動脈栓塞模型。用4%水合氯醛GOOmg · kg—1) 腹腔注射麻醉小鼠，仰臥固定，頸部皮膚去毛消毒後作正中切口，分離出左側頸總動脈、頸內動脈和頸外動脈，結紮頸外動脈，在頸總動脈上開一小口，將一頭端用矽橡膠包裹的直徑為0. Ilmm的魚線沿頸總動脈，經頸內動脈向顱內插至大腦中動脈分叉處，插入深度約12 13mm，結紮頸內動脈和頸總動脈，固定魚線，縫合皮膚。缺血池後將魚線拉出至頸內外動脈分叉處，即實現再灌注。假手術組僅分離頸總動脈、頸外動脈和頸內動脈，但不插入魚線。小鼠甦醒後出現手術對側肢體運動障礙即為模型製備成功。1. 2. 3神經功能缺陷評分參照Longa的五分制評分標準進行神經功能缺陷評分0分正常，無神經損傷症狀；1分不能完全伸展對側前爪；2分提尾後向外側轉圈；3分行走時向對側傾倒；4分 不能自發行走或意識喪失。1.2. 4腦梗死面積測定缺血池再灌2 後，迅速將小鼠斷頭，去除嗅球、小腦和低位腦幹，取出完整前腦， 冠狀切成1.5mm厚的腦片，於0.5% TTC溶液中37°C水浴孵育15min。然後置於10%的中性甲醛溶液中固定。對每腦片正反兩面進行掃描，用圖像分析軟體Wiotoshop 6.0求出梗死區和非梗死區面積。1. 2. 5生化指標測定小鼠斷頭取腦，用濾紙吸乾腦表面殘血，去除嗅腦、腦幹、小腦。將大腦分別置於勻漿器中，用冰生理鹽水按質量與體積比為1 9的比例冰浴下製備成10%的腦組織勻漿，立即放入-20°C冰箱中保存。按照南京建成生物工程研究所提供的試劑盒說明書測定腦組織中MDA、羰基含量、SOD、CAT及GSH-Px活性。蛋白質含量採用考馬斯亮蘭法測定。1.2.6統計學處理採用SPSS 13. 0 For Windows統計軟體進行分析。實驗數據均以I士 s表示，多組間數據比較採用單因素方差分析，兩組間數據比較採用TTEST檢驗。P < 0. 05表明差異有統計學意義。2 結果2. 1殼寡糖對腦缺血/再灌注小鼠神經功能缺陷評分和腦梗死面積的影響從表1可以得知，腦缺血/再灌注後，模型組和給藥組小鼠顯現出明顯的神經功能缺陷症狀、腦組織梗死。殼寡糖呈劑量依賴性地降低神經功能缺陷評分和腦梗死面積，尤其是殼寡糖高、中劑量OOOUOOmg · kg—1)組與模型組有顯著性差異。表1殼寡糖對腦缺血/再灌注小鼠神經功能缺陷評分及腦梗死面積的影響G士 S， η = 9)
權利要求
1.殼寡糖在製備防治心腦血管疾病藥物中的應用。
2.根據權利要求1所述的用途，其特徵是殼寡糖在製備防治腦血管疾病藥物中的應用。
3.根據權利要求1所述的用途，其特徵是殼寡糖在製備防治腦缺血疾病藥物中的應用。
4.根據權利要求1所述的用途，其特徵是殼寡糖在製備防治腦缺氧疾病藥物中的應用。
5.一種藥物組合物，其特徵是所述藥物組合物包含殼寡糖及常規藥用載體。
6.根據權利要求5所述的藥物組合物，其特徵在於所述藥物組合物是採用常規或特殊製劑工藝製備而成的口服或非口服途徑方式給藥的製劑。
7.一種預防或治療心腦血管疾病的方法，包括向心腦血管疾病患者給予殼寡糖。
8.一種預防或治療心腦血管疾病的方法，包括向心腦血管疾病患者給予權利要求5或 6所述的藥物組合物。
全文摘要
本發明屬於醫藥技術領域，涉及殼寡糖在製備防治心腦血管疾病藥物中的應用。藥效學實驗證實，殼寡糖具有顯著的抗腦缺血、抗腦缺氧等作用，來源廣泛，機體易吸收，毒副作用小，具有良好的應用前景。
文檔編號A61P9/00GK102210699SQ20101013945
公開日2011年10月12日 申請日期2010年4月6日 優先權日2010年4月6日
發明者劉婷, 姜招峰, 孫雅煊, 張靜, 戴雪伶, 王振華, 鄭秋生, 高兆蘭 申請人:北京聯合大學應用文理學院