酶法測定d－3－羥基丁酸試劑盒的製作方法

2023-09-19 21:56:50

專利名稱：酶法測定d－3－羥基丁酸試劑盒的製作方法
技術領域：
；本發明涉及一種酶法測定D-3-羥基丁酸試劑盒。該產品為生物工程領域高科技產品，是國家按醫療器械管理的體外診斷試劑。
背景技術：
；糖尿病酮症酸中毒是一臨床常見病，多發病，原因是血酮體增高引起，D-3-羥基丁酸酮體重要組成部分，佔酮體總量70％，酮症診斷治療不及時將有生命危險，D-3-羥基丁酸測定有顯色法，氣相色譜法，放射化學法，毛細管等速電泳法等。放射化學法因有射線，化學品難於接受，毛細管等速電泳操作時間長，複雜不適於批量檢測。氣相色譜特導性差。目前，在《臨床化學診斷方法大全》中介紹了酶法測定D-3-羥基丁酸方法，但未涉及D-3-羥基丁酸試劑盒，文獻介紹的方法只能現配現用，不能長期保存，本試劑盒可冷藏保存一年以上，長期使用。

發明內容
；本發明的目的在於提供一種長期保存的酶法D-3-羥基丁酸測定試劑盒。
1本發明的技術方案一種酶法測定D-3-羥基丁酸試劑盒。其特徵在於試劑盒含有D-3-羥基丁酸脫氫酶、氧化型輔酶I、3羥甲基氨基甲烷、吐溫-80、2-甲基-4-異噻唑-3-酮、乳糖。各組份含量最佳毫摩爾比為每升3羥甲基氨基甲烷60-140，氧化型輔酶I 2.0-3.4，D-3-羥丁酸脫氫酶30-100IU，保護劑兼賦型劑乳糖1-5克，2-甲基-4-異噻唑-3-酮0.1-0.6活性單位、吐溫-80 0.1-0.6克。上述成分加水至一升，調PH在6.5-7.1
2.意義陳述；本發明配方中，3羥甲基氨基甲烷作為緩衝劑有維持PH的作用，吐溫-80有乳化作用，D-3-羥基丁酸脫氫酶起催化劑作用、2-甲基-4-異噻唑-3-酮起防腐作用，保護劑乳糖對D-3-羥基丁酸脫氫酶有保護作用、氧化型輔酶I參與底物反應，以上各成分含量濃度為測量D-3-羥基丁酸最佳濃度值。
本發明的有益效果本發明配方中3羥甲基氨基甲烷作為緩衝劑有維持PH的作用，吐溫-80有乳化作用，D-3-羥基丁酸脫氫酶起催化劑作用、2-甲基-4-異噻唑-3-酮起防腐作用，保護劑乳糖既對β-羥丁酸脫氫酶有保護作用、氧化型輔酶I參與底物反應，試劑抗幹擾能力強，中等程度溶血，乳糜血，血糖20mmOl/l以下，膽紅素100umol/l以下對測定不產生幹擾，本試劑盒為液體試劑，有效期一年。冷藏一年試劑盒中酶活力損失小於5％。
具體實施例方式
；取超純水一升用前將水加熱至沸，密封備用。將3羥甲基氨基甲烷60-140mmol，氧化型輔酶I 2.0-3.4mmOl，D-3-羥基丁酸脫氫酶30-100IU，保護劑乳糖1-5克，2-甲基-4-異噻唑-3-酮0.1-0.6活性單位、吐溫-80 0.1-0.6克。上述成分加水至一升，調PH在6.5-7.1，將試劑溶液分裝成5-10毫升/瓶，隨時備用。本試劑盒比原來試劑盒的優越性是省去了冷凍乾燥工藝，降低成本，使用方便。
權利要求
本發明涉及一種酶法測定D-3-羥基丁酸試劑盒。1.一種酶法測定D-3-羥基丁酸試劑盒，其特徵在於含有D-3-羥基丁酸脫氫酶、氧化型輔酶I、3羥甲基氨基甲烷、吐溫-80、2-甲基-4-異噻唑-3-酮、乳糖。各組份含量最佳毫摩爾比為每升3羥甲基氨基甲烷60-140，氧化型輔酶I 2.0-3.4，D-3-羥基丁酸脫氫酶30-100IU，保護劑乳糖1-5克，2-甲基-4-異噻唑-3-酮0.1-0.6活性單位、吐溫-80 0.1-0.6克。意義陳述本發明配方中本發明配方中3羥甲基氨基甲烷作為緩衝劑有維持PH的作用，吐溫-80有乳化作用，D-3-羥基丁酸脫氫酶起催化劑作用、2-甲基-4-異噻唑-3-酮起防腐作用，保護劑乳糖對D-3-羥基丁酸脫氫酶有保護作用、氧化型輔酶I參與底物反應，試劑抗幹擾能力強，中等程度溶血，乳糜血，血糖20mmOl/l以下，膽紅素100umol/l以下對測定不產生幹擾，本試劑盒為液體試劑，有效期一年。冷藏一年試劑盒中酶活力破壞小於5％，氧化型輔酶I小於10％，本試劑盒線性範圍達5.0mmol/l，正常參考範圍0.038-0.286mmol/l，回收率96.5-103.8％之間，變異係數CV＝5.7％，X＝0.26mmol/l，SD＝0.015，n＝20。由3羥甲基氨基甲烷組成的緩衝系統作為緩衝劑PH6.8以上各成分含量濃度為測量D-3-羥基丁酸最佳濃度值。本發明的有益效果3羥甲基氨基甲烷作為緩衝劑有維持PH的作用，吐溫-80有乳化作用，D-3-羥基丁酸脫氫酶起催化劑作用、2-甲基-4-異噻唑-3-酮可防腐，本試劑盒使用的保護劑可有效穩定氧化型輔酶I。試劑抗幹擾能力強，中等程度溶血，乳糜血，血糖20mmOl/l以下，膽紅素100umol/l以下對測定不產生幹擾，凍幹試劑冷藏一年，試劑盒中活力小於5％，還原型輔酶I破壞小於10％，本試劑盒線性範圍達5.0mmol/l，正常參考範圍0.038-0.286mmol/l，回收率96.5-103.8％之間，變異係數CV＝5.7％，X＝0.26mmol/l，SD＝0.015，n＝20。本項產品為液體試劑無需冷凍乾燥，冷藏有效期一年。
全文摘要
本發明涉及一種酶法測定D－3－羥基丁酸試劑盒。本產品是生物工程領域高科技產品，是一種體外診斷試劑。本產品經檢索填補了國內空白，本產品經多年研究，解決了酶試劑盒的穩定性問題，省略了原來試劑盒需要冷凍乾燥的工藝，降低成本，使用者更加方便。為解決這些問題試劑盒使用了新型防腐劑2－甲基－4－異噻唑－3－酮、抗幹擾試劑吐溫－80、新型緩衝劑3羥甲基氨基甲烷－鹽酸緩衝系統，酶穩定劑乳糖。這種配方可以使試劑盒由凍幹型改為液體型，本產品主要提供全國大中小醫院檢驗科使用，糖尿病酮症酸中毒是一臨床常見病多發病，原因是血酮體增高引起，D－3－羥基丁酸是酮體重要組成部分，佔酮體總量70％，酮症診斷治療不及時將有生命危險，D－3－羥基丁酸檢測對糖尿病酮症酸中毒具有特異的診斷價值。
文檔編號G01N33/68GK1962876SQ20061015102
公開日2007年5月16日 申請日期2006年11月13日 優先權日2006年11月13日
發明者於永光 申請人:於永光