鹼性磷酸酶的酶促化學發光底物液的製作方法

2023-09-21 00:16:55 1

鹼性磷酸酶的酶促化學發光底物液的製作方法
【專利摘要】本發明提供一種鹼性磷酸酶的酶促化學發光底物液，含有0.4mg/mL的9,10-二氫吖啶衍生物，0.05mol/L的三羥基甲烷和0.5%的十二烷基磺酸鈉。本發明的酶促化學發光底物液發光快，強度高，持續時間長，可達30～60分鐘，可完全滿足臨床檢測的需要，其主要性能指標達到了國外產品水平，大大降低了發光底物的成本。本發明的酶促化學發光底物液本底值相對發光強度不高於3000，AP濃度在0.1U/mL時，發光強度RLU值可達315000±65000，信號強，靈敏度高，特異性強。
【專利說明】鹼性磷酸酶的酶促化學發光底物液
【技術領域】
[0001]本發明涉及免疫檢測【技術領域】，具體地說，涉及鹼性磷酸酶的酶促化學發光底物液。
【背景技術】
[0002]酶促化學發光底物液屬於免疫診斷【技術領域】。本世紀70年代中期Arakawe首次報導用發光信號進行酶免疫分析，利用發光的化學反應分析超微量物質，特別是用於臨床免疫分析中檢驗超微量活性物質。目前，這一技術已成為臨床醫學的常規檢測手段。化學發光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay, CLIA)是將化學發光或生物發光體系與免疫反應相結合，用於檢測微量抗原或抗體的一種新型標記免疫測定技術。其檢測原理與放射免疫(RIA)和酶免疫(EIA)相似，不同之處是以發光物質代替放射性核素或酶作為標記物，並藉助其自身的發光強度直接進行測定。
[0003]化學發光免疫分析既具有放射免疫的高靈敏度，又具有酶聯免疫的操作簡便、快速的特點，易於標準化操作。且測試中不使用有毒有害的試劑，試劑保持期長，應用於生物學、醫學研究和臨床實驗診斷工作，成為非放射性免疫分析法中最有前途的方法之一。
[0004]化學發光系統的原理在於免疫反應中的酶作用於發光底物。發光底物在酶的作用下，底物發生化學反應並釋放出大量的能量，產生激發態的中間體。這種激發態中間體，當其回到穩定的基態時，可同時發射出光子。利用發光信號測量儀器即可測量光量子產額，該光量子產額與樣品中的待測物質的量成正比。由此可以建立標準曲線並計算樣品中待測物質的含量。
[0005]與放射免疫試劑(RIA)相比，化學發光避免了放射性核素的汙染以及對操作人員的傷害，大大縮短了反應時間，同時兼具高靈敏度的優勢。
[0006]與酶免(ELISA)產品相比，靈敏度與可測範圍遠遠高於酶免產品，兼具ELISA法簡便的操作方法與較短的反應時間。
[0007]與進口全自動發光相比，試劑成本遠遠低於進口全自動發光試劑，為開放體系，也可適用其他發光檢測儀器檢測。

【發明內容】

[0008]本發明的目的是提供鹼性磷酸酶的酶促化學發光底物液。
[0009]為了實現本發明目的，本發明提供的鹼性磷酸酶(AP)的酶促化學發光底物液，含有0.05-1.0mg/mL的9，10- 二氫吖啶衍生物，0.01-0.2mol/L的三羥基甲烷(Tris)和5g/L的十二烷基磺酸鈉(SDS)。
[0010]優選地，所述底物液中含有0.4mg/mL的9，10- 二氫吖啶衍生物，0.05mol/L的三羥基甲烷和5g/L的十二烷基磺酸鈉。
[0011]其中，所述9，10- 二氫吖啶衍生物的分子式如下:
[0012]
【權利要求】
1.鹼性磷酸酶的酶促化學發光底物液，其特徵在於，含有0.05-1.0mg/mL的9，10-二氫吖啶衍生物，0.01-0.2mol/L的三羥基甲烷和0.05_10g/L的十二烷基磺酸鈉； 其中，所述9，10-二氫吖啶衍生物的分子式如下:
2.根據權利要求1所述的底物液，其特徵在於，含有0.4mg/mL的9，10- 二氫吖啶衍生物，0.05mol/L的三羥基甲烷和5g/L的十二烷基磺酸鈉。
3.權利要求1所述底物液的製備方法，其特徵在於，先配製0.01-0.2mol/L的三羥基甲烷溶液，其中含有0.05-10g/L的十二烷基磺酸鈉，調節pH值後，加入9，10- 二氫吖啶衍生物，攪拌均勻，避光保存。
4.權利要求1或2所述底物液在化學發光免疫分析中的應用，其特徵在於，在180C -26°C溫度範圍內pH值為9.3±0.2，相對發光強度RLU ( 3000，鹼性磷酸酶濃度為.0.lU/mL 時，發光強度 RLU 值達 315000±65000。
【文檔編號】G01N21/76GK103868913SQ201410047286
【公開日】2014年6月18日 申請日期:2014年2月11日 優先權日:2014年2月11日
【發明者】張志棟, 趙文姬, 陳志強, 高芬, 陳歡 申請人:中生北控生物科技股份有限公司