特異性結合鹼性成纖維細胞生長因子受體的肽的製作方法
2023-10-18 09:53:39 1
專利名稱：特異性結合鹼性成纖維細胞生長因子受體的肽的製作方法
技術領域：
本發明屬於肽技術領域，具體而言，本發明涉及特異性結合鹼性成纖維細胞生長因子受體的肽，其可用於抑制高表達bFGF受體的細胞增殖並阻斷bFGF誘導的Erkl和Erk2 激酶活化，從而可用於治療黑素瘤等腫瘤。本發明還涉及了包含該肽的藥物組合物和製備方法等。
背景技術：
鹼性成纖維細胞生長因子，即bFGF (basic fibroblast growth factor)，又稱 FGF-2，是成纖維細胞生長因子(fibroblast growth factor, FGF)家族的成員之一。bFGF 通過結合和活化細胞表面受體而激活胞內信號轉導通路，介導細胞增殖等生物反應，是廣譜的促有絲分裂原。bFGF在體內分布廣泛且具有多種重要的生物學功能，其時空表達及表達水平受到嚴謹的調控。研究表明，bFGF及其受體表達的異常上調與腫瘤等疾病密切相關° (參見 Beenken A, Mohammadi M. The FGF family: biology, pathophysiology and therapy. Nat Rev Drug Discov. 2009，8(3) : 235-253; Korc M, Friesel RE. The role of fibroblast growth factors in tumor growth. Curr Cancer Drug Targets. 2009, 9(5): 639-651 ； Rusnati Μ, Presta Μ. Fibroblast growth factors/fibroblast growth factor receptors as targets for the development of anti-angiogenesis strategies. Curr Pharm Des. 2007，13(20) : 2025-2044 ；以及，Cronauer MV, Schulz WA, Seifert HH, Ackermann R, Burchardt Μ, Fibroblast growth factors and their receptors in urological cancers: basic research and clinical implications. Eur Urol. 2003, 43(3) : 309-319)。經過長期艱苦的研究，並結合一些篩選的運氣，本發明人獲得了一種肽，令人驚訝的是，其能夠有效而且特異地結合鹼性成纖維細胞生長因子受體，阻斷bFGF所介導的細胞增殖，可用於抑制高表達bFGF受體的細胞增殖並阻斷bFGF誘導的Erkl和Erk2激酶活化， 從而可用於治療黑素瘤等腫瘤。該肽可以採用現有技術合成，成本低，但是效果好，適用範圍廣。
發明內容
本發明的目的在於提供特異性結合鹼性成纖維細胞生長因子受體的肽，優選是特異結合表達鹼性成纖維細胞生長因子受體的細胞的肽，其可用於抑制高表達bFGF受體的細胞增殖並阻斷bFGF誘導的Erkl和Erk2激酶活化，從而可用於治療黑素瘤等腫瘤；另外， 該肽可以採用現有技術合成，成本低，但是效果好，適用範圍廣。具體而言，在第一個方面，本發明提供了包括序列Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro 的肽或其藥學上可接受的鹽或酯。所述肽優選可以是由序列 Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro 組成的肽，也可以是在 Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro 肽的N末端和/或C末端增加一個或多個(如，一個或幾個，優選如一個至五個)胺基酸殘基，
3更優選在Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro肽的C末端增加一個或多個(如，一個或幾個，優選如一個至五個)胺基酸殘基。對於在C末端增加胺基酸殘基的情況，在本發明的具體實施方式
中，所述肽的具體實例是序列為Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro-Gly-Gly-Gly-Ser的肽。本文中的肽中各胺基酸殘基之間通常是通過肽鍵相連的，儘管其他鍵相連的肽也涵蓋在本發明的範圍內。優選在本發明的第一方面中，包括序列 Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro的肽中任意兩個相鄰的胺基酸都是通過肽鍵相連的。本文中所使用的肽及胺基酸、胺基酸殘基和化學基團的表示方法均為所屬領域公認的表示方法。其中胺基酸或胺基酸殘基的縮寫可參照表1中定義，這些縮寫可以指L-型的胺基酸，也可以指D-型的胺基酸。在本發明的具體實施方式
中，胺基酸或胺基酸殘基指 L-型的胺基酸或胺基酸殘基。其中，胺基酸或胺基酸殘基可以根據其側鏈性質的相似性而分成以下組疏水性胺基酸(A、I、L、M、F、P、W、Y、V)、親水性胺基酸(R、D、N、C、E、Q、G、H、K、 S、T)、脂肪族側鏈的胺基酸(G、A、V、L、I、P)、含羥基側鏈的胺基酸(S、T、Y)、含硫原子側鏈的胺基酸(C、M)、含羧酸和醯胺側鏈的胺基酸(D、N、E、Q)、含鹼性基團側鏈的胺基酸(R、K、 H)、含芳香族側鏈的胺基酸(H、F、Y、W)。通常，處於同組中的胺基酸或胺基酸殘基具有相似的性質。表1胺基酸縮寫表
權利要求
1.包括序列Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro的肽或其藥學上可接受的鹽或酯，優選所述肽是序列為 Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro 的肽或是序列為 Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr -Pro-Gly-Gly-Gly-Ser 的肽。
2.組合物，其包括權利要求1所述的肽或其藥學上可接受的鹽或酯，以及藥學上可接受的載體。
3.權利要求1所述的肽或其藥學上可接受的鹽或酯在製備特異性結合表達bFGF受體的細胞的組合物中的應用。
4.權利要求1所述的肽或其藥學上可接受的鹽或酯在製備抑制細胞增殖的組合物中的應用。
5.權利要求4所述的應用，其中細胞增殖是由鹼性成纖維細胞生長因子誘導的。
6.權利要求4或5所述的應用，其中細胞是腫瘤細胞，優選是黑素瘤細胞。
7.權利要求1或2所述的肽或其藥學上可接受的鹽或酯在製備抗Erkl和Erk2激酶活化的藥物或試劑中的應用。
8.權利要求1或2所述的肽或其藥學上可接受的鹽或酯在製備抗腫瘤的藥物中的應用。
9.權利要求8所述的應用，其中腫瘤是黑素瘤。
10.類似於Leuler-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro的肽，優選所述肽能夠通過噬菌體展示來篩選得到。
全文摘要
本發明公開了特異性結合鹼性成纖維細胞生長因子受體的肽，其包括序列Leu-Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro，其可用於抑制高表達bFGF受體的細胞增殖並阻斷bFGF誘導的Erk1和Erk2激酶活化，從而可用於治療黑素瘤等腫瘤。本發明還公開了包含該肽的藥物組合物和製備方法等。
文檔編號C07K1/00GK102453079SQ20101052595
公開日2012年5月16日 申請日期2010年11月1日 優先權日2010年11月1日
發明者吳曉萍, 李校堃 申請人:李校堃