結合使用可溶性補體受體-1(scr1)和脒基苯基或脒基萘基酯治療炎症的製作方法
2023-10-10 12:06:04
>123456[BRAPAN]μMIH(BRAPAN)IH50(BRL55730)μg/ml0.5-IH(BRAPAN)調整的[BRL55730]μg/ml協同作用因子000.0210.50.02110.100.0150.50.0211.40.200.0130.50.0211.620.30.010.0110.490.021.820.40.030.0130.470.0191.460.50.040.0120.460.0181.50.60.060.0080.440.0162.000.70.090.0070.410.0152.140.80.130.0070.370.0131.860.90.160.00590.340.0111.86i.BRAPAN對BRL55730的影響的等效線圖解法分析用實例1h中BRAPAN的數據繪製等效線圖。所有的數據點均位於疊加性直線的下面，表明產生了協同作用。實施例2sCR1(BRL55730)和APAN(BRL24894A)的組合製劑將D-甘露糖醇(Sigma.UK，60mg)溶於注射用水(9.5ml)中。再將APAN溶解於HPLC級甲醇中，在室溫(20-25℃)下攪拌5分鐘，使最後的濃度為6mg/ml。然後立刻將此溶液(0.5ml)加入甘露糖醇溶液中，振搖混勻。再加入BRL55730溶液0.2ml(濃度為5mg/ml，溶於0.2ml10mMpH7.2的磷酸鈉中)，振搖並立即在固體CO2中冷凍。再在平均壓力2-3毫巴、冷凝器溫度-60℃下冷凍乾燥20小時。得到的白色固體的組成如下，將其在-70℃下乾燥保存BRL557301mg；BRL24894A3mg；D-甘露糖醇60mg；磷酸鈉微量。實施例34′-甲氧基苯甲酸4-脒基-2-溴苯酯鹽酸鹽(BRAPAN)的製備此化合物由2-溴-4-氰基苯酚經兩步製得。a.2-溴-4-脒基苯酚鹽酸鹽的製備將2-溴-4-氰基苯酚(1.35g，6.8mmol)溶於20ml乙醇中。然後將氯化氫氣體通入此經冷卻的溶液，45分鐘後形成白色沉澱。2小時後停止通氣，將溶液中的固體於4℃放置2天。過濾分出白色固體。將此固體迅速懸浮於50ml乙醇溶液中，並加入氨在乙醇中的飽和溶液75ml。此懸浮液幾乎立即變澄清，將其攪拌24小時，再靜置類似時間。將所有的揮發性物質除去，將白色固體溶於20ml水中。加濃鹽酸5ml，致使迅速形成白色晶體，過濾分出晶體，然後用20ml乙醇和100ml乙醚重結晶。產量860mg(50％)，熔點279-80℃。1H核磁共振譜(CDCl3-d6DMSO)69.2(4H，brd，脒)，8.2(1H，d，J＝2Hz，芳基-H)，7.8(1H，m，芳基-H)，7.25(1H，J＝9Hz，芳基-H)紅外光譜(液體石蠟法)3325,3125,2300-3400,1670,1610,1585,1410,1300,1175,1045,880,835,725,620cm-1。元素分析C33.45，H3.28，N10.95％理論值C7H8N2OBrClC33.43，H3.21，N11.14％b.標題化合物的製備向4-甲氧基苯甲醯氯(271mg，1.59mmol)的無水吡啶(5ml)溶液中，加入2-溴-4-脒基苯酚鹽酸鹽(400mg，1.59mmol)。最初的懸浮液變為澄清的溶液，然後再生成沉澱。攪拌1小時後，紅外分析表明酯已形成。減壓除去吡啶，最後的微量吡啶通過與乙醇共沸除去。所得的白色固體用5∶1乙醚/乙醇(約100ml)重結晶兩次，得到白色的標題化合物。產量225mg(37％)。熔點212-3℃。1H核磁共振譜(d6DMSO-微量CDCl3)δ9.55(4H，br，脒基苯酚NH)6.95-8.25(7H，m，芳基-H)，3.9(1H，s，OCH3)紅外光譜(液體石蠟法)2500-3400,1735,1665,1605,1580,1260,1230,1170,1070,1020和830cm-1元素分析C46.66，H3.74，N7.19％理論值C15H12N2BrClC46.72％，H3.66％，N7.26％附圖中圖1表示不同濃度的APAN對BRL55730的作用；圖2表示APAN對補體激活的抑制作用；圖3是按標準測定方法繪製的BRL55730和APAN的等效線圖。權利要求1.一種治療與炎症或不適當的補體激活有關的疾病或失調的方法，該方法包括對需要治療的哺乳動物施與有效劑量的可溶性CR1蛋白質和有效劑量的具有補體抑制活性的式(I)的脒基苯基酯或脒基萘基酯及其藥學上可以接受的鹽，其中，A是可被下述基團任意取代的苯基C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧羰基、滷素、NH2、磺醯基、苯甲醯基或C1-4烷基苯甲醯氨基，或者萘基B是可被下述基團之一任意取代的CH2＝CH-基C1-5烷基、苯基和C1-6烷基取代的苯基；被一個或兩個各自選自下述基團的取代基任意取代的苯基滷素、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C1-6烷氧基、C1-6鏈烯醯氧基、C1-6鏈烷醯氨基、氨基、二甲氨基或胍基；或者萘基。2.可溶性CR1蛋白質和具有補體抑制活性的如權利要求1所述的式(I)的脒基苯基酯或脒基萘基酯在製備用於治療與炎症或不適當的補體激活作用有關的疾病或失調的藥物中的應用。3.一種藥物組合物，該組合物含有可溶性CR1蛋白質和具有補體抑制活性的如權利要求1所述的式(I)的脒基苯基酯或脒基萘基酯以及藥學上可以接受的載體。4.一種治療與炎症或不適當的補體激活作用有關的疾病或失調的方法，該方法包括對需要這種治療的患者施與治療上有效劑量的權利要求3的組合物。5.一種包含一個或多個包裝物的藥劑盒，所述包裝物內裝有一種或多種權利要求3所述的藥物組合物的成分。6.一種製備權利要求3所述的藥物組合物的方法，該方法包括將可溶性CR1蛋白質和權利要求1所述的式(I)的脒基苯基酯或脒基萘基酯的混合物進行混合。7.根據權利要求1、2、3、4、5或6分別所述的治療方法、用途、組合物、治療方法、藥劑盒和製備方法，其中可溶性CR1蛋白質是由核酸媒介體pBSCR1c/pTCSgpt編碼的蛋白質，酯是4′-甲氧基苯甲酸4-脒基苯酯鹽酸鹽或4′-甲氧基苯甲酸4-脒基-2-溴苯酯鹽酸鹽。全文摘要一種治療與炎症或不適當的補體激活作用有關的疾病或失調的方法，該方法包括對需要治療的哺乳動物施與有效劑量的可溶性CR1蛋白質和有效劑量的脒基苯基或脒基萘基酯及其藥學上可以接受的鹽。文檔編號A61P29/00GK1118141SQ94191260公開日1996年3月6日申請日期1994年1月21日優先權日1993年1月22日發明者D·E·I·莫沙考斯卡,R·A·G·史密夫申請人:史密絲克萊恩比徹姆有限公司