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一種凝結芽孢桿菌及高密度培養的芽孢製劑的製備及其應用的製作方法

2023-12-01 02:58:06 2

專利名稱:一種凝結芽孢桿菌及高密度培養的芽孢製劑的製備及其應用的製作方法
技術領域:
一種凝結芽孢桿菌及高密度培養的芽孢製劑的製備及其應用,屬於微生物 技術領域。
背景技術:
我國是一個農業大國,養殖業在整個農業中佔有相當的比重,隨著我國畜 牧、水產養殖業的迅猛發展,肉類和禽類產量躍居世界前列,但是,養殖業經 濟迅速發展的同時卻忽視了畜禽、水產品的食用安全問題。近年來高密度集約 化的人工養殖以重數量輕質量的方式發展,導致養殖生態環境遭到了破環,養 殖動物病害頻繁爆發;人們長期大量使用抗生素及化學合成藥物導致抗藥性、 耐藥性越來越明顯,養殖動物抗病能力不斷下降,並且藥物殘留帶來二次汙染 直接影響人類的免疫和健康,從而使畜禽、水產品的食用安全遭到威脅,嚴重 影響養殖業的可持續發展。近幾年間,全球相繼發生了包括比利時二惡英事件、 英國狂牛症事件、日本大腸桿菌"0—157"食物中毒事件、法國李斯特桿菌汙染事 件、中國的"瘦肉精"事件、多寶魚事件等一系列重大食品安全事件,使食品安全 問題迅速引起全球關注。氯黴素、孔雀石綠、硝基呋喃等藥物殘留問題使我國 的水產品在國際市場上屢遭"綠色貿易壁壘"。近期三鹿奶粉三聚氰胺汙染事件 再次敲響了食品安全的警鐘,同時也向人們警示在農產品生產的源頭上消除食 品安全問題是當務之急。因此,在不影響畜禽產品、水產品產量和質量的前提 下,如何降低畜禽、水產養殖業所帶來的環境汙染,提高畜禽、水產品的食用 安全性已成為人們關注的焦點,同時也是研究的熱點。水產養殖、畜禽養殖行 業在向高產、優質、高效、生態、安全的現代養殖方式轉變和發展過程中,都 急需能夠替代或部分替代抗生素和化學藥物的新型綠色、安全詞料添加劑及水 質、環境調控技術。
用微生態制齊U(Microbial ecological agent)進行畜禽、水產養殖動物病害的防 治,修復養殖汙染環境,是近年發展起來的一種新方法。微生態製劑是基於微 生態平衡理論、微生態營養理論及微生態防治理論而發展起來的微生物產品, 它對動物疾病的防治是一種主動形式的防治,微生態製劑有助於扶持體內益生 菌生長,拮抗致病菌繁殖,增強機體免疫功能,防治並減少疾病的發生,提高 宿主健康水平,促進營養物質消化吸收,淨化動物體內外環境,抑制腐敗細菌 的生長,進而減少氨、胺等有害物質的產生,減少環境中臭氣的汙染;除此之 外,它可直接用於畜禽汙染環境中,依靠微生物對畜禽糞便中有機物的降解作用,來降低畜禽糞便對環境的汙染;或應用於養殖水體中,通過對水體有害物 質的分解、病原菌的抑制及水體有益菌群的培育,來改善水質,維持水體生態 平衡,從而保持畜禽、水產養殖生產與環境保護的協調發展。微生態製劑具有 無毒害、無副作用、無殘留、無汙染、無耐藥性,能提高動物生產性能,提高 飼料轉化率等諸多的優點,因此正日益受到人們的重視,其廣闊前景是毋庸置 疑的。
目前,微生態製劑已經廣泛應用於畜禽、水產養殖業中,對微生態製劑的 開發和研究,國內外己進入高潮,並且已形成強大的產業,每年的收入相當可 觀。有學者指出"抗生素之後的時代,將是微生態製劑的時代"。作為飼用微生物 添加劑,乳酸菌類益生菌是目前我國農業部、美國食品及藥物管理局等國內外 政府批准使用的數量最多、效果較好的一類安全微生物菌種,具有良好的生物 學功能,它具有提高飼料轉化率、提高增重,補充、調節、維持動物腸道內微 生物平衡,抑制病原菌,增強機體免疫力,防止疾病發生、治療己發疾病、降 低死亡率,促進消化等作用,還可提高畜禽漁類成品質量,避免大量使用化學 藥物和抗生素造成的藥物殘留和汙染,因此,它具有無毒、無抗藥性、無殘留、 無副作用等特點。此外,乳酸菌能利用有機物進行生長,降低汙染水體的生物 耗氧量和化學耗氧量,是一類重要的汙水處理微生物,可修復養殖水體環境。
由於菌株自身的生物學特性是影響乳酸菌類詞用微生物添加劑應用效果的 關鍵因素,大多數乳酸菌不產芽孢,營養菌體對環境抗逆性差,不耐氧,不耐 熱,不利於飼料加工和保存,嚴重影響其質量及應用效果,在水產養殖和飼料 工業中的應用受到很大的限制。由此,基於上述背景,如果可以開發出兼有直 接參與養殖動物體內微生態平衡的調整、促進生長,防治疾病,同時又能改善 養殖環境的微生態製劑,則對減少抗生素和化學藥物的使用,生產無汙染的綠色 畜禽、水產品,提高養殖經濟效益具有重要意義。
乳酸是廣泛存在於人、動物、植物和微生物等生物體中的有機酸。其分子 結構中含有一個不對稱碳原子,因此具有旋光性,按其構型可分D(-)-乳酸、L(+)-乳酸和DL-乳酸三種。人體只含有L-乳酸脫氫酶,因此只能代謝利用L-乳酸,過 多食用D-乳酸或DL-乳酸都會導致人體代謝功能的紊亂,危害人體健康,而對L-乳酸則不加限制。因此,人類服用能夠在體內產L-乳酸的益生菌就成為一種十 分綠色健康的食用選擇,它能降低消化道pH,使腸道處於酸性環境,抑制病原 菌生長,對人體腸道健康起到積極的作用。哺乳動物與人類一樣,都只能代謝 利用L-乳酸,因此在飼料中添加在動物體內能夠產L-乳酸的乳酸菌就具有十分廣 闊的市場前景,而且也將成為發展無公害產品的有效途徑。

發明內容
本發明的目的在於提供一種凝結芽孢桿菌芽孢的高密度培養方法及其應用,在這種培養方法下凝結芽孢桿菌在有氧條件下能夠產芽孢,在發酵過程中 代謝產出少量L-乳酸;在厭氧靜置條件下凝結芽孢桿菌能夠產出純度較高的L-乳酸。
本發明的技術方案 一株凝結芽孢桿菌菌株,其分類命名為凝結芽孢杆 菌(^acz7/w coagw/a"力JSSW-LA-07,巳保藏於中國微生物菌種保藏管理委員會 普通微生物中心,保藏號為CGMCCNo.2602;該菌株JSSW-LA-07在有氧條件 下能夠產芽孢,並在發酵過程中代謝產出少量L-乳酸;在靜置厭氧條件下能夠 產出純度較高的L-乳酸。
所述凝結芽孢桿菌的高密度芽孢製劑的製備方法,是通過以下步驟來完成
(1) 斜面菌體活化
無菌開啟菌株JSSW-LA-07的凍幹保藏菌種,劃線接種於麩皮營養瓊脂試管 斜面,斜面培養基(麩皮營養瓊脂培養基)組成以g/L計為蛋白腖10,牛肉 膏3, NaC15,麩皮10,瓊脂15-20, pH 7.0-7.2; 30-60。C培養24-48h;然後劃 線轉接於麩皮營養瓊脂茄子瓶斜面,30-6(TC培養24-48h,鏡檢,當90%以上菌 體形成芽孢時,即為成熟,準備移種;
(2) 搖瓶及種子罐培養 準備一個內裝玻璃珠的無菌三角瓶,用無菌水將茄子瓶斜面上的成熟菌泥
刮洗下來,裝入三角瓶,振蕩分散菌泥,獲得均勻的菌懸液,將菌懸液在80°C 水浴中加熱10分鐘,以體積比l。/。-10。/。的接種量接入250mL三角瓶,裝液量為 15mL;或500mL三角瓶,裝液量為30mL;搖瓶培養,或接入種子罐培養,種 子罐體積選用IOL、 20L、 50L或100L,種子罐的裝量係數體積比為60%-70%;
培養基組成為以g/L計麩皮5-20,酵母膏5.0-10,豆粕粉5-10, K2HP043, NaC15, MnSO4,H2O0.3, pH7.0;
培養條件為搖瓶轉速200r/min;種子罐攪拌轉速^150 r/min,通氣量 l-2m3/h,培養溫度為30-60°C,培養時間為18-48h;
(3) 發酵罐培養
種子培養液以體積比1%-10%的接種量接入發酵罐,發酵罐選用1T、 2T、 或3T體積的發酵罐,發酵罐裝量係數體積比為60%-70%; 發酵罐培養基組成
發酵培養基由碳源、氮源和無機鹽組成,以g/L計碳源5-20,氮源5-20, K2HP043, NaC15, MnS04.H20 0.3,碳酸轉2-10, pH 6.0-8.0;
發酵罐培養條件為攪拌轉速2150 r/min,通氣量l-2m3/h,培養溫度為 30-60°C,培養時間為18-48h;在培養過程中根據泡沫的高漲情況加豆油或泡敵 進行消泡,防止因泡沫逃逸出發酵罐而引起雜菌汙染;取發酵液進行鏡檢,當 90%以上的菌體已形成芽孢時,即可放罐結束培養;取樣測總菌數及芽孢數;活菌及芽孢檢測用番茄汁瓊脂計數培養基以g/L計酵母膏10,蛋白腖10,
番茄汁200mL, CaC03 5,瓊脂15-20,蒸餾水800mL, pH7.0-7.2;測得發酵液 芽孢數量達lxl09cfb/mL以上;
(4)芽孢收集及菌粉製備
將培養液泵入轉速為15000r/min的連續式離心機進行離心,獲得芽孢,將 芽孢與幹澱粉以重量比1:1-5混合,在40-50'C乾燥20-24h,粉碎機粉碎,過40 目篩,加入配料石粉、麩皮或玉米芯粉中的一種或幾種,混合後製成微生態制 劑,芽孢含量達lxl09cfWmL以上。
所述的製備方法,其凝結芽孢桿菌好氧液體發酵的碳源和氮源的選擇十分 廣泛,碳源選用麩皮、葡萄糖、蔗糖、乳糖、麥芽糖、果糖、阿拉伯糖、玉米 糖、大米糖、可溶性澱粉、玉米澱粉、木薯澱粉、小麥澱粉、紅薯澱粉或馬鈴 薯澱粉中的一種或幾種;氮源選用蛋白腖、酵母膏、牛肉膏、玉米漿粉、豆粕 粉、大豆肽、棉籽蛋白、黃豆餅粉或花生餅粉中的一種或幾種。
靜置厭氧發酵產L-乳酸將凝結芽孢桿菌芽孢接入下述培養基中,培養基 組成以g/L計為蛋白腖5-10,酵母膏5-10,葡萄糖10-20,牛肉膏l-3,吐溫 -80 0.5, pH7.0。培養條件培養溫度30-60°C,靜置厭氧發酵培養,培養時間 24-72h。
L-乳酸檢測將發酵液先加熱至80-100°C,然後於4000rpm/min離心5分 鍾,取上清液用L-乳酸脫氫酶法測定或以此方法為原理的SBA-40C生物傳感分 析儀(山東科學院生物研究所研製)測L-乳酸含量,測得L-乳酸含量達8.0 g/L 以上。
本發明的有益效果
1. 凝結芽孢桿菌屬於兼性好(厭)氧菌,在有氧條件下,能發酵形成高濃 度、高活性的芽孢;在靜置無氧條件下,能發酵產生對人和動物有益的L-乳酸。
2. 發酵培養基中可選擇的C源、N源十分廣泛,所以運用於生產時,可以選 用經濟實惠的原料作為C、 N源;並且其溫度生長範圍廣,在30。C-6(TC範圍均能 生長,在較高溫度下生長,減少了染菌的機會,單罐培養獲得芽孢濃度可達 lxl。9cfU/ml以上。
3. 凝結芽孢桿菌是乳酸菌類的一種益生菌,它具有一般乳酸菌的維持腸道 微生態平衡,刺激免疫,提高機體健康水平,提高人和動物消化功能等作用外, 同時還具有普通乳酸菌所不具備的環境抗逆性強、抗胃酸、抗乾燥、耐高溫高 壓、易貯存等獨特的生物特性。
4. 凝結芽孢桿菌可作為動物益生素,直接添加於畜禽類飼料、水產餌料中, 補充、調節、維持動物腸道內微生物的平衡,提高動物機體免疫力、抑制有害 細菌的生長繁殖,並且凝結芽孢桿菌在哺乳動物體內無氧條件下產生的L-乳酸能夠直接被機體吸收,提高動物免疫力和抵抗力,從而減少抗生素藥物的使用。 它還可應用於養殖生態環境的調控,通過對養殖環境中有機汙染物、有害物質 的分解,病原菌的抑制等,對養殖環境進行微生態修復,從而改善養殖環境, 維持環境生態平衡。
5.該菌不產生對人體、養殖動物有害的物質,具有無毒、無殘留、無副作 用等特點,同時它對環境的保護及治理也起到了積極的作用。因此,它對生產 綠色、安全的畜禽、水產品,改善養殖生態環境都具有重要意義,廣泛應用於 高產、優質、高效、生態、安全的畜禽、水產養殖生產及養殖生態環境的調控。 生物材料樣品保藏
一株凝結芽孢桿菌菌株,其分類命名為凝結芽孢桿菌^""7/M "g"/"""
JSSW-LA-07,巳保藏於中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏
日期2008年7月28日,保藏號為CGMCC No.2602。
具體實施例方式
實施例l:高密度凝結芽孢桿菌芽孢的培養
1、 菌體的活化
無菌開啟凝結芽孢桿菌JSSW-LA-07的凍幹菌種,劃線接種於試管麩皮營養 瓊脂斜面,斜面培養基組成為蛋白腖10g/L,牛肉膏3g/L, NaCl 5g/L,麩皮 10g/L,瓊脂15-20g/L,蒸熘水1L, pH 7.0-7.2。 4(TC培養20-24小時,然後劃線 轉接於麩皮營養瓊脂茄子瓶斜面,4(TC培養20-24小時,鏡檢,當90%以上菌體 形成芽孢時,即為成熟,可準備移種。
2、 IOOL種子罐培養
準備一個內裝玻璃珠的無菌三角瓶,用無菌水將茄子瓶斜面上的成熟菌泥 刮洗下來,裝入三角瓶,振蕩分散菌泥,獲得均勻的菌懸液。將菌懸液在80°C 水浴中加熱10分鐘,以體積比2。/。-10。/。的接種量接入100L種子罐,種子罐的裝 量係數為60°/。-70°/。(v/v),艮卩100L種子罐裝培養基60-70L。
種子培養基組成為麩皮20g/L,酵母膏5g/L,豆粕粉10g/L, K2HP043g/L, NaC15g/L, MnS04.H20 0.3g/L, pH7,0。
種子罐培養條件為攪拌轉速200r/min,通氣量l-2m3/h,培養溫度為4(TC, 培養時間為20-24h。
3、 1T發酵罐培養
種子培養液以體積比5%-10%的接種量接入1T發酵罐,發酵罐裝量係數為 60%-70%(v/v),即IT發酵罐裝培養基600-700L。
發酵培養基組成為麩皮20g/L,酵母膏5g/L,豆粕粉10g/L, K2HP043g/L, NaC15g/L, MnSO4.H2O0.3g/L,碳酸f丐5g/L, pH7.0。
發酵罐培養條件為攪拌轉速200r/min,通氣量1.5mVh,培養溫度為45°C,培養時間為48h。在培養過程中根據泡沬的高漲情況加豆油或泡敵進行消泡,防 止因泡沫逃逸出發酵罐而引起雜菌汙染;取發酵液進行鏡檢,當90%以上的菌 體已形成芽孢時,即可放罐結束培養;取樣測總菌數及芽孢數;
番茄汁瓊脂計數培養基酵母膏10g/L,蛋白腖10g/L,番茄汁200mL,蒸 餾水800mL,瓊脂15-20g/L, CaC03 5g/L, pH7.0-7.2。
發酵結束後,測得發酵液總菌數為6.0x109 CFU/mL,芽孢數達 5.8xl09CFU/mL,芽孢率96.7%。 SBA生物傳感分析儀測得L-乳酸的濃度為 3.0g/L。
實施例2:凝結芽孢桿菌靜置培養產L-乳酸
1、 靜置發酵培養
將凝結芽孢桿菌芽孢接入下述培養基中,培養基組成為蛋白腖5g/L,酵 母浸膏5g/L,葡萄糖10g/L,牛肉膏lg/L,吐溫-80 0.5g/L,蒸餾水1000mL,pH7.0。 培養條件培養溫度45°C,培養時間72h,靜置厭氧培養。
2、 L-乳酸檢測
將發酵液先加熱至80-100°C,然後於4000rpm/min離心5分鐘,取上清液 用SBA-40C生物傳感分析儀測L-乳酸含量,測得L-乳酸含量為8.5 g/L。 實施例3:製作微生態製劑
1、 凝結芽孢桿菌芽孢的培養方法與實施例l所述相同
2、 凝結芽孢桿菌菌粉的製備
將高密度純培養收集的凝結芽孢桿菌溼菌體與幹澱粉1 : 1-5混合,在 40-5(TC下乾燥20-24h,粉碎機粉碎,過40目篩,最後用幹澱粉調整菌粉中的芽 孢數,使菌粉中凝結芽孢桿菌的芽孢數25xi(^個/克。
3、 成品製備
取輔料石粉過40目篩後,與凝結芽孢桿菌菌粉混合,用詞料混合機拌勻, 使成品中凝結芽孢桿菌芽孢總數2lxl(^個/克。成品採用鋁箔袋裝,每袋裝量lkg, 15袋為1個紙箱包裝,紙箱材料採用瓦楞紙。
實施例4:凝結芽孢桿菌製劑的應用實例1
取養殖池塘水,在實驗室的水池中進行凝結芽孢桿菌製劑產品淨化水質的 試驗。實驗用水池為瓷磚貼片水泥池,水體體積0.05m3。水溫25°C,曝氣20 小時後,添加氯化銨、亞硝酸鉀調整起始氨氮和亞硝酸鹽濃度。起始氨氮濃度 為1.20mg/L,亞硝酸鹽濃度0.50mg/L,化學需氧量COD為12.36 mg/L,試驗分 為對照組和試驗組,每組3個平行,按0.3ppm的添加量將凝結芽孢桿菌製劑加 入每個試驗組,5天後分別檢測試驗組和對照組的水質變化,水質各指標變化平 均值如下
試驗組氨氮含量為0.23 mg/L,亞硝酸鹽含量為0 mg/L, COD為6.92 mg/L。對照組氨氮含量1.26 mg/L,亞硝酸鹽含量0.68 mg/L, COD為14.22 mg/L。 因此,凝結芽孢桿菌JSSW-LA-07可明顯降低養殖水體中的氨氮、亞硝酸 鹽等有害物質含量,改善養殖池塘水質,可作為水質淨化劑應用於水產養殖中。 實施例5:凝結芽孢桿菌製劑的應用實例2
試驗選擇出生重相近的l日齡彼德遜雞300隻,試驗分為對照組和試驗組, 每組3個平行,分別於同一養殖大棚內地面平養。對照組,只飼餵基礎日糧,不 添加凝結芽孢桿菌製劑,試驗組在基礎日糧中添加重量比0.5%的凝結芽孢桿菌 製劑。在開食前各組全部稱出出生重量,出生後24h開食,將凝結芽孢桿菌製劑 和飼料充分混勻後飼喂。試驗期為49d,每周稱重1次,並空腹取腸內容物,將 其稀釋後,以塗布方法接種在SS瓊脂培養基上進行細菌培養,37。C有氧培養24h 後進行菌落計數。到7周齡時,試驗結果如下
對照組平均增重2058g,料重比2.20,存活率94.67%,沙門氏菌陽性率29.60% 試驗組:平均增重2385g,料重比1.90,存活率97.33%,沙門氏菌陽性率23.50% 試驗組與對照組比較,試驗組平均增重比對照組提高15.89%,經單因素方 差分析,差異極顯著(PO.01);試驗組比對照組料重比降低極顯著;從存活率情 況看,試驗組比對照組存活率提高;試驗組比對照組沙門氏菌陽性率降低 20.61%。以上結果表明,在雞飼料中添加凝結芽孢桿菌製劑對雞的生長發育大 有益處,它在提高增重,提高飼料轉化率,降低料重比,提高存活率,增強抗 病能力及免疫力方面效果明顯。因此,該凝結芽孢桿菌製劑能夠替代抗生素或 抗菌藥作為生長促進劑使用。
權利要求
1、一株凝結芽孢桿菌菌株,其分類命名為凝結芽孢桿菌(Bacillus coagulans)JSSW-LA-07,巳保藏於中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏號為CGMCC No.2602;該菌株JSSW-LA-07在有氧條件下能夠產芽孢,並在發酵過程中代謝產出少量L-乳酸;在靜置厭氧條件下能夠產出純度較高的L-乳酸。
2、 一種權利要求1所述凝結芽孢桿菌的高密度芽孢製劑的製備方法,其特 徵是通過以下步驟來完成(1) 斜面菌體活化無菌開啟菌株JSSW-LA-07的凍幹保藏菌種,劃線接種於麩皮營養瓊脂試管 斜面,斜面培養基組成以g/L計為蛋白腖10,牛肉膏3, NaC15,麩皮10, 瓊月旨15-20, pH 7.0-7.2; 30-6(TC培養24-48h;然後劃線轉接於麩皮營養瓊脂茄 子瓶斜面,30-60。C培養24-48h,鏡檢,當90%以上菌體形成芽孢時,即為成熟, 準備移種;(2) 搖瓶及種子罐培養 準備一個內裝玻璃珠的無菌三角瓶,用無菌水將茄子瓶斜面上的成熟菌泥刮洗下來,裝入三角瓶,振蕩分散菌泥,獲得均勻的菌懸液,將菌懸液在8(TC 水浴中加熱10分鐘,以體積比1。/。-10。/。的接種量接入250mL三角瓶,裝液量為 15mL;或500mL三角瓶,裝液量為30mL;搖瓶培養,或接入種子罐培養,種 子罐體積選用IOL、 20L、 50L或100L,種子罐的裝量係數體積比為60%-70%;培養基組成為以g/L計麩皮5-20,酵母膏5.0-10,豆粕粉5-10, K2HP04 3, NaC15, MnSO4'H2O0.3, pH7.0;培養條件為搖瓶轉速200r/min;種子罐攪拌轉速^150 r/min,通氣量 l-2mVh,培養溫度為30-60°C,培養時間為18-48h;(3) 發酵罐培養種子培養液以體積比1%-10%的接種量接入發酵罐,發酵罐選用1T、 2T、 或3T體積的發酵罐,發酵罐裝量係數體積比為60%-70%; 發酵罐培養基組成發酵培養基由碳源、氮源和無機鹽組成,以g/L計碳源5-20,氮源5-20, K2HP043, NaC15, MnS04'H20 0.3,碳酸韓2-10, pH 6.0-8.0;發酵罐培養條件為攪拌轉速2150 r/min,通氣量l-2m3/h,培養溫度為 30-60°C,培養時間為18-48h;在培養過程中根據泡沬的高漲情況加豆油或泡敵 進行消泡,防止因泡沫逃逸出發酵罐而引起雜菌汙染;取發酵液進行鏡檢,當 90%以上的菌體已形成芽孢時,即可放罐結束培養;取樣測總菌數及芽孢數;活菌及芽孢檢測用番茄汁瓊脂計數培養基以g/L計酵母膏10,蛋白腖10,番茄汁200mL, CaC03 5,瓊脂15-20,蒸餾水800mL, pH 7.0-7.2;測得發酵液 芽孢數量達lxl09cfWmL以上;(4)芽孢收集及菌粉製備將培養液泵入轉速為15000r/min的連續式離心機進行離心,獲得芽孢,將 芽孢與幹澱粉以重量比1:1-5混合,在40-50'C乾燥20-24h,粉碎機粉碎,過40 目篩,加入配料石粉、麩皮或玉米芯粉中的一種或幾種,混合後製成微生態制 劑,芽孢含量達lxl09cfii/mL以上。
3、根據權利要求2所述的製備方法,其特徵是凝結芽孢桿菌液體發酵的碳 源和氮源的選擇十分廣泛,碳源選用麩皮、葡萄糖、蔗糖、乳糖、麥芽糖、果 糖、阿拉伯糖、玉米糖、大米糖、可溶性澱粉、玉米澱粉、木薯澱粉、小麥澱 粉、紅薯澱粉或馬鈴薯澱粉中的一種或幾種;氮源選用蛋白腖、酵母膏、牛肉 膏、玉米漿粉、豆粕粉、大豆肽、棉籽蛋白、黃豆餅粉或花生餅粉中的一種或 幾種。
全文摘要
一種凝結芽孢桿菌及高密度培養的芽孢製劑的製備及其應用,屬於微生物技術領域。一株凝結芽孢桿菌菌株,其分類命名為凝結芽孢桿菌(Bacilluscoagulans)JSSW-LA-07,已保藏於中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏號為CGMCC No.2602;該凝結芽孢桿菌菌株JSSW-LA-07在有氧條件下能夠產芽孢,並在發酵過程中代謝產出少量L-乳酸;在無氧靜置條件下能夠產出純度較高的L-乳酸。該菌不產生對人體、養殖動物有害的物質,具有無毒、無殘留、無副作用等特點,它對生產綠色、安全的畜禽、水產品,改善養殖生態環境都具有重要意義,可廣泛應用於高產、優質、高效、生態、安全的畜禽、水產養殖生產及養殖生態環境的調控。
文檔編號C02F3/34GK101412983SQ20081023551
公開日2009年4月22日 申請日期2008年11月20日 優先權日2008年11月20日
發明者何義進, 群 匡, 冬 夏, 梅 孫, 施大林, 陳秋紅 申請人:江蘇省蘇微微生物研究有限公司;中國水產科學研究院淡水漁業研究中心

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專利名稱::個性化檯曆的製作方法技術領域::本實用新型涉及一種檯曆,尤其涉及一種既顯示月曆、又能插入照片的個性化檯曆,屬於生活文化藝術用品領域。背景技術::公知的立式檯曆每頁皆由月曆和畫面兩部分構成,這兩部分都是事先印刷好,固定而不能更換的。畫面或為風景,或為模特、明星。功能單一局限性較大。特別是畫

一種實現縮放的視頻解碼方法

專利名稱:一種實現縮放的視頻解碼方法技術領域:本發明涉及視頻信號處理領域,特別是一種實現縮放的視頻解碼方法。背景技術: Mpeg標準是由運動圖像專家組(Moving Picture Expert Group,MPEG)開發的用於視頻和音頻壓縮的一系列演進的標準。按照Mpeg標準,視頻圖像壓縮編碼後包

基於加熱模壓的纖維增強PBT複合材料成型工藝的製作方法

本發明涉及一種基於加熱模壓的纖維增強pbt複合材料成型工藝。背景技術:熱塑性複合材料與傳統熱固性複合材料相比其具有較好的韌性和抗衝擊性能,此外其還具有可回收利用等優點。熱塑性塑料在液態時流動能力差,使得其與纖維結合浸潤困難。環狀對苯二甲酸丁二醇酯(cbt)是一種環狀預聚物,該材料力學性能差不適合做纖

一種pe滾塑儲槽的製作方法

專利名稱:一種pe滾塑儲槽的製作方法技術領域:一種PE滾塑儲槽一、 技術領域 本實用新型涉及一種PE滾塑儲槽,主要用於化工、染料、醫藥、農藥、冶金、稀土、機械、電子、電力、環保、紡織、釀造、釀造、食品、給水、排水等行業儲存液體使用。二、 背景技術 目前,化工液體耐腐蝕貯運設備,普遍使用傳統的玻璃鋼容

釘的製作方法

專利名稱:釘的製作方法技術領域:本實用新型涉及一種釘,尤其涉及一種可提供方便拔除的鐵(鋼)釘。背景技術:考慮到廢木材回收後再加工利用作業的方便性與安全性,根據環保規定,廢木材的回收是必須將釘於廢木材上的鐵(鋼)釘拔除。如圖1、圖2所示,目前用以釘入木材的鐵(鋼)釘10主要是在一釘體11的一端形成一尖

直流氧噴裝置的製作方法

專利名稱:直流氧噴裝置的製作方法技術領域:本實用新型涉及ー種醫療器械,具體地說是ー種直流氧噴裝置。背景技術:臨床上的放療過程極易造成患者的局部皮膚損傷和炎症,被稱為「放射性皮炎」。目前對於放射性皮炎的主要治療措施是塗抹藥膏,而放射性皮炎患者多伴有局部疼痛,對於止痛,多是通過ロ服或靜脈注射進行止痛治療

新型熱網閥門操作手輪的製作方法

專利名稱:新型熱網閥門操作手輪的製作方法技術領域:新型熱網閥門操作手輪技術領域:本實用新型涉及一種新型熱網閥門操作手輪,屬於機械領域。背景技術::閥門作為流體控制裝置應用廣泛,手輪傳動的閥門使用比例佔90%以上。國家標準中提及手輪所起作用為傳動功能,不作為閥門的運輸、起吊裝置,不承受軸向力。現有閥門

用來自動讀取管狀容器所載識別碼的裝置的製作方法

專利名稱:用來自動讀取管狀容器所載識別碼的裝置的製作方法背景技術:1-本發明所屬領域本發明涉及一種用來自動讀取管狀容器所載識別碼的裝置,其中的管狀容器被放在循環於配送鏈上的文檔匣或託架裝置中。本發明特別適用於,然而並非僅僅專用於,對引入自動分析系統的血液樣本試管之類的自動識別。本發明還涉及專為實現讀