通過組織培養大規模生產膏桐種苗的方法
2023-12-05 02:15:56 2
專利名稱：通過組織培養大規模生產膏桐種苗的方法
技術領域：
本發明屬植物種苗的生產技術領域，具體涉及通過組織培養大規模生產膏桐種苗的方法。
背景技術：
膏桐Jatropha curcas L.又名麻瘋樹、小桐子。分布於熱帶、亞熱帶地區。我國有栽培或半野生。灌木或小喬木，高2-5m，多分枝。速生。喜肥沃土壤，酸性土或鈣質土均宜生長。耐0℃左右的低溫及輕霜。抗風力強。我國南海諸島有分布。臺、閩、粵、瓊、桂、滇、黔、川等地栽培或半野生。多栽培作圍籬及供觀賞。種仁含油脂約50％，可作潤滑油、制皂等用，並可催吐下瀉，但有毒，忌食。
實生苗3年生開始結實，可連年結果，正常結實期6-20年。結實間隔期不明顯。花單性，雌雄同株。二歧聚傘花序腋生。雌花頂生於花序中央或二歧分叉處。雄花萼片和花瓣各5，花瓣長於花萼。雄蕊10，2輪，內輪花絲合生，花盤腺體5。雌花花瓣短於花萼。子房上位，3室，每室1胚珠。花柱3，箭形，基部合生，頂端2裂。果實長2.5-4cm，徑2-3cm，每果內有種子3粒，間有2粒，種子黑褐色至黑色，扁橢圓形，長1.6-2cm，寬1-1.3cm，有肉質胚乳，胚伸直，子葉寬扁，長橢圓形。
現在栽培或半野生的膏桐繁殖方法只有種子繁殖和扦插繁殖，繁殖周期長，成本高。植物組織培養，就是分離植物體的一部分組織，如根、莖段、葉、花、幼胚等，在無菌試管中，配合一定的營養、激素、溫度、光照等條件，使其生成完整植株。由於其條件可以嚴格控制，生長迅速，1個月左右即為一個周期，因此組織培養被稱為快速繁殖，膏桐若能應用組織培養進行快速繁殖，將在膏桐種苗生產上有重要應用價值，但至今沒有膏桐應用組織培養進行快速繁殖的報導和使用。
發明內容
本發明的目的在於提供通過組織培養大規模生產膏桐種苗的方法，為膏桐的人工繁殖、脫毒苗生產、培育優良品種開闢高效的途徑。
本發明方法包括以下步驟1、取膏桐莖尖，經消毒滅菌後，接種於加有20％～40％重量的玉米澱粉的如下培養基MS+6-BA 0.5～1.5mg/L+NAA 0.2～2mg/L+糖20～40g/L，用3～5％瓊脂固化，進行光照培養，PH值5.8-6、培養室溫度26±2℃、光照強度1000-2000LX，光照時間每天10～14小時，培養20～28天，形成愈傷組織。
2、將愈傷組織切割後轉到同樣培養基上進行繼代增殖培養，生成膏桐組培芽。
3、將多周期大量增殖的膏桐組培芽接入如下生根培養基培養以獲得組織培養苗IBA0.3～0.6mg/L+MS，經10～20天生根。
4、將組織培養苗出瓶栽培，出瓶栽培後的組織培養苗先保溫保溼15-20天，保持溫度不低於攝氏17度。可用塑料膜大棚或覆蓋距地面20-40cm的塑料膜進行苗上保溼。本發明方法生成的膏桐組織培養苗可直接移栽至苗圃地，不需要在苗床上進行練苗。
本發明的有益效果解決了膏桐應用組織培養進行快速繁殖的問題，周期短、成本低，完全能滿足膏桐大面積栽培的需要，為膏桐的人工繁殖、脫毒苗生產、培育優良品種提供了一種高效的途徑，在膏桐的開發利用中，具有較好的應用前景。
具體實施例方式
見如下實施例取膏桐莖尖，用潔淨水清洗乾淨後，在流水下衝洗10min，然後轉到潔淨工作檯上，吸乾水分，先用70％酒精滅菌30s，再轉入0.1％的HgCl 2溶液中滅菌6min，無菌蒸餾水衝洗5次，莖尖接種於加有30％重量的玉米澱粉的如下培養基MS+6-BA0.5mg/L+NAA 2mg/L+蔗糖30g/L，用4％的瓊脂固化，光照培養，pH調為6，溫度25±1℃，光照強度1500LX，光照時間每天12小時。外植體接種後一周左右即可見明顯膨大，形成直徑約1cm左右的愈傷組織。將愈傷組織切割後轉到同樣培養基上進行繼代增殖培養。用多周期大量增殖的膏桐組培芽生產種苗，生根用培養基為IBA0.3mg/L+MS，經14天生根。當根長0.5cm左右，葉生長到3-5片時，將生根種苗直接移栽至苗圃地，先保溫保溼15天。保持溫度不低於攝氏17度，用塑料膜大棚進行苗上保溼。隨後苗木生長良好。
以上實施例僅對發明做進一步的說明，而本發明的範圍不受所舉實施例的局限。
權利要求
1.一種通過組織培養大規模生產膏桐種苗的方法，其特徵在於包括以下步驟(1)、取膏桐莖尖，經消毒滅菌後，接種於加有20％～40％重量的玉米澱粉的如下培養基MS+6-BA 0.5～1.5mg/L+NAA 0.2～2mg/L+糖20～40g/L，用3～5％瓊脂固化，進行光照培養，PH值5.8-6、培養室溫度26±2℃、光照強度1000-2000LX，光照時間每天10～14小時，培養20～28天，形成愈傷組織。(2)、將愈傷組織切割後轉到同樣培養基上進行繼代增殖培養，生成膏桐組培芽。(3)、將多周期大量增殖的膏桐組培芽接入如下生根培養基培養以獲得組織培養苗IBA0.3～0.6mg/L+MS，經10～20天生根。(4)、將組織培養苗出瓶栽培，出瓶栽培後的組織培養苗先保溫保溼15-20天，保持溫度不低於攝氏17度。
全文摘要
通過組織培養大規模生產膏桐種苗的方法，包括以下步驟1.莖尖接種於加有20％～40％重量的玉米澱粉的如下培養基MS+6－BA0.5～1.5mg/L+NAA 0.2～2mg/L+糖20～40g/L，用3～5％瓊脂固化，進行光照培養，pH值5.8－6、培養室溫度26±2℃、光照強度1000－2000LX，光照時間每天10～14小時，培養20～28天，形成愈傷組織。2.將愈傷組織切割後轉到同樣培養基上進行繼代增殖培養，生成膏桐組培芽。3.將多周期大量增殖的膏桐組培芽接入如下生根培養基培養以獲得組織培養苗IBA0.3～0.6mg/L+MS，經10～20天生根。4.將組織培養苗出瓶栽培。本發明解決了膏桐應用組織培養進行快速繁殖的問題，周期短、成本低，完全能滿足膏桐大面積栽培的需要，為膏桐的人工繁殖、脫毒苗生產、培育優良品種提供了一種高效的途徑。
文檔編號A01H3/00GK1799340SQ200510048718
公開日2006年7月12日 申請日期2005年12月22日 優先權日2005年12月22日
發明者許繼宏 申請人:雲南大學