具有抗腫瘤活性的3,7,8-多取代吡啶並[4,3-d]嘧啶衍生物及製備的製作方法

2023-12-09 03:02:26 3

專利名稱：：具有抗腫瘤活性的3,7,8-多取代吡啶並[4,3-d]嘧啶衍生物及製備的製作方法
技術領域：
：本發明涉及具有抗腫瘤活性的3，7，8—多取代吡啶並[4,3-d]嘧啶衍生物及其中間體的製備，以及它作為抗腫瘤藥的生物活性。
背景技術：
：吡啶並[4,3-d]嘧啶類化合物是一類廣泛生物活性功能的稠雜環類化合物，尤其是在醫藥研究方面顯示了廣泛的生理和藥理活性，可用於治療各種類型的腫瘤，癌症，白血病，愛滋病及許多神經性疾病，以及用於止痛、消炎、抗過敏等。本申請人在前期工作中研究發明了一種未見文獻報導的新穎的合成吡啶並[4,3-d]嘧啶類化合物的方法，可經由醚脒合成得到具有通式A結構的多功能吡啶並[4，3-d]嘧啶類化合物。研究發現該類化合物不但具有優良的殺菌和除草活性(中國發明專利一類具有殺菌除草活性的多取代吡啶並[4,3-d]嘧啶及製備，ZL200510019576.3;以及中國發明專利具有殺菌活性的2，3，4，7—多取代吡啶並[4,3-d]嘧啶衍生物及製備，申請號200810047941.5)，同時還顯示了顯著的抗腫瘤活性(中國發明專利具有抗腫瘤活性的2，3，4，7，8—多取代吡啶並[4，3-d]嘧啶衍生物，申請號200910060650.4)。formulaseeoriginaldocumentpage5為了更系統地研究該類化合物的抗腫瘤活性，本申請人對此合成方法進行了更為深入的研究，拓展了底物範圍，並對目標化合物的結構進行了修飾和優化，得到了結構多樣而新穎的3，7，8—多取代吡啶並[4，3-d]嘧啶衍生物，並測試其抗腫瘤活性，以期找到具有更高生物活性的化合物。
發明內容本發明的目的在於探索具有新結構並具有抗腫瘤活性的多取代吡啶並[4，3-d]嘧啶衍生物，提供一類具有抗腫瘤活性的新型多取代吡啶並[4,3-d]嘧啶類化合物及其合成方法。本發明的一類多取代吡啶並[4,3-d]嘧啶衍生物的結構通式如I:Y表示甲硫基，甲碸基，d-C3的烷氨基；R表示d-Q的烷基，雜環基為吡啶、噻吩或呔喃的雜環取代d-C2烷基，苯基d-C3烷基或取代苯基Q-C3烷基，苯基或取代苯基；所涉及的苯環上的取代基主要為滷素、d-Cs的烷基或烷氧基，取代基在苯環任一位置上的單取代或多取代，在苯環上的取代基相同或不相同；其中，通式I涵蓋了如下通式1-1、通式1-2和通式1-3所示三類化合物1-11-2O1隱3通式I-1、1-2、I-3中的R和通式I中的含義相同，通式I-1中的Y表示d-C3的烷氨基。本發明人試驗表明具有結構通式I的化合物對人口腔底癌細胞KB、對長春新鹼耐藥的人口腔底癌細胞KBv200、人乳腺癌細胞株MCF-7、對阿黴素耐藥的人乳腺癌細胞株MCF-7/Adr、人鼻咽癌細胞株6-10B、CNE1、CNE2、H0NE1、SUNE1;人肺癌細胞株H460、Calu-3;白血病細胞株HL-60等多種腫瘤細胞具有顯著的抑制作用，可用作抗腫瘤藥劑的有效成分。以通式1-1表示的多取代吡啶並[4,3-d]嘧啶衍生物的製備方法(A法)，是使通式B所表示的化合物與原甲酸三乙酯反應生成吡啶醚脒中間體C，C再與C廣C6的脂肪伯胺、苯基Q-C4烷基伯胺或取代苯基Q-C4垸基伯胺或雜環取代d-C2烷基胺反應，在室溫或加熱條件關環，得到化合物I-1，通式1-1的化合物的合成路線如下BCI-1通式B、C及I-1中的Y表示CrC3的烷氨基；RNH2表示d-C6的垸基，雜環基為吡啶、噻吩或呋喃的雜環取代CrC2烷基，苯基d-C3垸基或取代苯基d-C3烷基。上述反應式中的B化合物與原甲酸三乙酯摩爾比為1:1-6，直接採用原甲酸三乙酯為溶劑，不用催化劑，或者使用催化劑，選用的催化劑有對甲苯磺酸或醋酸酐，在80°C-140°C之間反應10-25小時，得到中間體C，中間體C再與伯胺以摩爾比為1:1-3，有機溶劑為乙腈、二氧六環或二氯甲烷，在2(TC-10(TC反應2-12小時，即可以較好的收率合成得到通式I-1的產物。以通式1-2表示的多取代吡啶並[4,3-d]嘧啶衍生物的製備方法(B法)，是使通式D所表示的化合物經水解反應得到化合物1-2:通式D和1-2中的R與和通式I中的含義相同。以通式1-3表示的多取代吡啶並[4,3-d]嘧啶衍生物的製備方法(C法)，是使通式D所表示的化合物經氧化反應得到化合物1-3，通式D、I-3中的R和通式I中的含義相同。上述D化合物(具體合成見中國發明專利一類具有殺菌除草活性的多取代吡啶並[4,3-d]嘧澱及製備，ZL200510019576.3:以及中國發明專利具有殺菌活性的2，3，4，7—多取代吡啶並[4,3-d]嘧啶衍生物及製備，申請號200810047941.5)在有機溶劑與水的混溶體系，有機溶劑為乙醇或丙酮等，在10°C-8(TC下經鹼性或酸性水解反應0.5-6小時，即可以較好的收率合成得到通式I-2的產物；或者在有機溶劑醋酸或乙腈中，在50'C-IO(TC下經氧化得到I-3的產物，所用的氧化劑有雙氧水，間氯過氧苯甲酸等。具體實施例方式下面通過實例來具體地說明本發明的式I化合物的製備方法，這些實施例僅對本發明進行說明，而不是對本發明進行限制。實施例1化合物113-(4-甲基苄基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3，4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈將15毫摩爾2-甲基-3-乙醯基-5-氰基-6-甲氨基-4-吡啶胺加入到50毫升的反應瓶中，加MeHNT、NT、CH'入45毫摩爾原甲酸三乙酯，加入催化量對甲苯磺酸，在130。C反應12小時，反應完全後減壓蒸出沒有反應的原甲酸三乙酯，殘餘物減壓柱層析得黃色晶體吡啶醚脒，熔點118.2~120.7°C，產率62.0%。'HNMR(CDC13,TMS,600MHz)3(ppm):1.39(t,3H,J=7.2Hz,-OCH2CH3),2.38(s，3H，-CH3),2.41(s,3H，-COCH3),3.08(m,3H，-NHCH3),4.34(q,2H,J=7.2Hz，-OCH2CH3)，5.26(s，1H，NH),7.61(s,1H，N=CH)。再將2毫摩爾2-甲基-3-乙醯基-5-氰基-6-甲氨基吡啶-4-亞胺甲叉基乙基醚、15毫升乙腈加入到50毫升的反應瓶中，加入3毫摩爾對甲苄胺，加熱到4050'C反應2小時，析出固體，抽濾，丙酮與石油醚混合溶劑重結晶，所得純品為白色固體，收率為86.6%，熔點186.9~187.2°C。分子式C19H21N502:元素分析(％),計算值C64.94，H6.02，N19.93;實測值C64.74,H6.08，N19.87;IR(KBr,Wcm.1):3361(N-H);3091，762(=C-H);1637，1592，1517,1455(C=N,C=C);1352(C-H);1266(C陽N);!HNMR(S,CDC13，TMS,400MHz):2.35(s，3H,Ph-CH3),2.42(s,3H，嘧啶-CH3),2.59(s，3H吡啶-CH3),3.04(d,3H,-NHCH3,J=6.6Hz),4.86(s,2H,-CH2-)，6.69(s,1H,-NH),7.12(d,2H,ArH,J=7.8Hz),7.20(d，2H,ArH,J=7.8Hz),7.79(s,1H,嘧啶-H),10.16(s,1H,-OH)。以下化合物按照化合物11的方法製備，其結構鑑定數據如下化合物l3-乙基-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3，4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶-8-腈所得純品為黃色固體，收率50.2%，熔點146.0~147.4°C。分子式C13H17N50元素分析(％)，計算值C60.21，H6.61，N27.01;實測值C60.63,H6.89，N27.17;NMR(CDC13,TMS,600MHz)<5(pptn):1.39(t,3H,-CH7CH2,J=7.2Hz),2.41(s,3H,嘧啶-CH3),2.56(s,3H,吡啶-CH3),3.09(q,3H,-NHCH3,J==4.2Hz)，3.78(q,3H,-CH7CH2,J-7.2Hz)，6.72(s，1H，-NH),7.68(s,1H,嘧啶-H),10.30(s,1H,-OH;IR(KBr)"(cm-1):3355(N-H);3050,755(=C-H);2992,1348(C-H);2200(C三N);1638,1587,1517，1434(C=N，C=C);1259(C-N)。化合物23-丙基-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3,4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶-8-腈MeHNT、NT、CH3所得純品為褐色固體，收率59.2%，熔點89.8~91.8°C。分子式C14H19N50元素分析(％)，計算值C61.52,H7.01，N25.62;實測值C61.88,H7.45,N25.92;NMR(CDC13，TMS,600MHz)d、(ppm):1.02(t，3H,-CH2CH2￡K2,J=7.5Hz)，1.78(q,2H,-CH2進CH3，J=7.4Hz),2.41(s，3H,嘧啶-CH3),2.56(s,3H，吡啶-CH3),3.10(d，3H,-NHCH3，J=4.8Hz),3.68(t,2H,-CH，CHCH3,J=7.2Hz)，6.70(s,IH,-NH)，7.65(s，IH,嘧啶-H),10.36(s,IH,-OH);IR(KBr)o(cm1):3332(N陽H);3209,758(=C-H);2967,1353(C-H);1638,1587,1530,1436(C=N,OC);1260(C陽N)。化合物33-丁基-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈所得純品為黃色固體，收率52.6%，熔點86.8~88.5°C。分子式C15H21N5。元素分析(％)，計算值C62.70，H7.37,N24.37;實測值C63.06，H7.66，N23.96;NMR(CDC13,TMS,600MHz)(5(ppm):0.94(t,3H,-CHCH7CH，CH^J=7.5Hz)，1.39~1.46(m,2H,-CHCH，CH2CHV),1.67~1.73(m,2H，-CH，CH2CH，CHA2.41(s，3H,嘧啶陽CH3)，2.56(s,3H,吡啶-CH3),3.12(d,3H,-NHCH3，J=4.8Hz)，3.70(t，2H，-CH2CH，CH7CH3,J=7.5Hz)，6.70(s,1H，-NH),7.65(s,IH,嘧啶-H),10.30(s，IH,-OH)。化合物43-己基-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3，4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈所得純品為白色固體，收率63.3%，熔點125.8~126.rC。分子式C17H25N509formulaseeoriginaldocumentpage10元素分析O)，計算值C64.73,H7.99,N22.20;實測值C65.11，H8.04,N22.44;&NMR(CDC13,TMS，600MHz)<5(ppm):0.90(t，3H，-CH2CH2CH2CH2CH2￡H2,J=6.9Hz),1.32~1.39(m,6H，-CH，CH，CH，CH2CHCHA1.70-1.75(m,2H,-CHCH2CH，CH，CH，CFh),2.41(s，3H，嘧啶-CH3),2.56(s，3H,吡啶-CH3),3.10(d,3H,-NHCH3,J=5.4Hz)，3.69(q,2H,-CH2CH7CH7CH7CH7CH3,J=7.2Hz),6.69(s,1H,-NH),7.65(s,1H,嘧啶-H),10.30(s,1H，-OH);IR(KBr)(cm.1):3329(N-H);2932,2860,1391(C陽H);1634，1596,1520,1468(C=N,OC);1280(C-N);609(=C-H)。化合物53-糠基-4，5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3，4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈所得純品為黃色固體，收率61.7%，熔點155.6~156.9°C。分子式C16H17N502元素分析(％),計算值C61.72,H5.50,N22.49;實測值C61.84,H5.88,N22.81;&NMR(CDC13,TMS,600MHz)5(ppm):2.41(s,3H,嘧啶-CH3),2.57(s，3H,吡啶隱CH3),3.07(d,3H,-NHCH3，J=5.4Hz),4.83(s,2H，-CH2),6.386.42(m,2H,呋喃-H),6.98(s,1H，-NH),7.42(t，1H,呋喃-H,J=0.9Hz),7.76(s,1H，嘧啶-H)，10.19(s,1H,OH);IR(KBr)o(cm"):3363(N-H);3119,749(=C-H);2934，1344(C-H);1641，1586，1517,1433(C=N,C=C);1258(C-N)。formulaseeoriginaldocumentpage10化合物63-節基-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3，4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈所得純品為白色固體，收率43.8%，熔點181.9183.1'C。分子式C18H19N50元素分析(％)，計算值C67.27,H5.96,N21.79;實測值C67.66,H6.30，N21.85;4NMR(CDC13，TMS，600MHz)<5(ppm):2.42(s,3H,嘧啶-CH;j),2.60(s，3H,吡啶-CH3),3.05(d，3H,-NHCH3,J=7.2Hz),4.91(s,2H,-CH2-)，6.69(s，1H，-麗)，7.247.42(m,5H,ArH)，7.80(s，1H，瞎啶-H),10.19(s,1H,-OH);IR(KBr)"(cm"):3332(N-H);3196,731(=C-H);2942,1352(C-H);1637,1591,517,1452(C=N,C=C);1262(C-N)。化合物73-苯丙基-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈所得純品為白色固體，收率51，4%，熔點150.2151.0°C。分子式C2GH23N50元素分析(％)，計算值C68.74,H6.63,N20.04;實測值C68.55,H6.56,N20.25;力NMR(CDC13,TMS,600MHz)<5(ppm):2.08(m，2H，PhCH7CHCH"),2.41(s,3H,嘧啶-CH3),2.56(s,3H,吡啶國CH3)，2.73(t，2H,PhCH2CH，CH，-,J=6.9Hz),3.09(q,3H，-NHCH3,J=2.2Hz),3.66(t,2H,PhCH，CH7CH2-,J=6.9Hz),6.56(s,IH,-NH),7.19~7.58(m,5H,ArH)，7.58(s,IH,嘧啶-H)，10.26(s,IH,-OH);IR(KBr)t;(cm"):3353(N-H);3085,759(=C-H);2944,1348(C陽H);1639,1592,1518,1455(C=N，C=C);1265(C-N)。化合物83-(2-氟苄基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈所得純品為淡黃色固體，收率67.6%,熔點138.0~140.0°C。分子式C18H18FN50元素分析(％)，計算值C63.70，H5.35,N20.64;實測值C63.83,H5.47,N20.52;力NMR(CDC13,TMS,400MHz)(5(ppm):2.42(s,3H，-CH3)，2.59(s,3H,吡啶-CH3),3.06(d,3H,-NHCH3，J=4.2Hz),4.93(s，2H,-CH2-)，6.79(s,IH,-NH),7.15~7.26(m,4H,ArH)，7,83(s,IH,嘧啶-H),10.18(s,IH,-OH);IR(KBr)(cm-1):3431(N-H);2926，1348(C-H);1639,1593,1519,1457(C=N,C=C);1264(C-N);759(=C-H)。化合物93-(4-氟苄基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈formulaseeoriginaldocumentpage12所得純品為白色固體，收率69.P/。，熔點163.3~163.6°C。分子式C18H1SFN50元素分析(％)，計算值C63.70，H5.35，N20.64;實測值C63.64,H5.35，N20.66;NMR(CDC13,TMS,600MHz)3(ppm):2,42(s,3H,嘧啶-CH3)，2.59(s,3H，吡啶-CH3),3.05(d，H，-NHCH3,J=7.2Hz)，4.88(s，2H,-CH2-)，6.64(s,1H,-NH),7.08~7.23(m,4H，ArH),7.78(s，1H,噴啶-H)，10.12(s,1H，隱OH);IR(KBr)(cm-1):3353(N-H);3208,747(=C-H);2941,1352(C-H);1641,1590,1512,1457(C=N,C=C);1267(C國N)。化合物103-(2-氯苄基)-4，5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈formulaseeoriginaldocumentpage12所得純品為白色固體，收率50.0%，熔點240.5241.0。C。分子式C18H18C1N50元素分析(％)，計算值C60.76,H5.10，N19.68;實測值C60.89，H5.33，N20.09;JHNMR(CDC13,TMS,400MHz)3(ppm):2.43(s,3H，嘧啶-CH3)，2.60(s,3H，P比啶-CHb)，3.07(d,3H,-NHCH3，J=4.8Hz)，4.98(s,2H,-CH2-)，6.66(s,1H,隱NH),7.07~7.48(m，4H，ArH),7.77(s,1H，噴啶-H),10.20(s，1H,-OH);IR(KBr)o(cm1):3350(N-H);3136，760(=C-H);2954,1345(C-H);1641,1591，1522，1450(C=N，C=C);1250(C-N)。化合物123-(4-甲氧基苄基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈OH^~~7CH3所得純品為白色固體，收率70.0%，熔點203.5204.rC。分子式C19H21N50元素分析(％)，計算值C68.04，H6.31，N20.88;實測值C67.98，H6.51,N20.91;tHNMR(CDCl3，TMS,600MHz)<5(ppm):2.39(s,3H,嘧啶-CH3)，2.59(s,3H,吡啶-CH3),3.05(d,3H，-NHCH3，J=4.8Hz)，3.80(s，3H，Ph-OCH3),4.84(s,2H,-CH2-)，6.71(s，1H,-NH)，6.92(d，2H,ArH,J=8.4Hz),7.17(d,2H,ArH,J=8.4Hz),7.79(s,1H,嘧啶-H)，10.19(s,1H,-OH);IR(KBr)u(cm"):3360(N-H);3122,746(=C-H);2935,1349(C國H);1638，1591，1514，1456(C=N,C=C);1251(C-N)。化合物133-(4-氟苯乙基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3,4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶-8-腈所得純品為淡黃色固體，收率74.3%，熔點162.0~163.0°C。分子式C19H2FN50元素分析(％)，計算值C64.57，H5.70,N19.82;實測值C64.56，H5.83，N20.10;&NMR(S，CDC13，TMS,600MHz):2.43(s，3H，,-CH3),2.52(s,3H，吡啶-CH3),3.01(t,2H,-CH2CH2-，J=6.9Hz)，3.12(q,3H,-NHCH3,J=4.8Hz),3.93(t，2H，-CH2CH2-，J=6.9Hz)，6.79(s,1H,-NH),7.03(d,2H,ArH,J=8.7Hz),7.10(d,2H,ArH,J=8.7Hz),7.26(s,1H，嘧啶-H)，10.38(s,1H,-OH);IR(KBr)o(cm-1):3331(N-H);3087,797(=C-H);2928,1349(C-H);1636,1590,1510,1471(C=N,C=C);1223(C-N)。化合物143-(4-氯苯乙基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲氨基-3，4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈MeHNT、NT、CH:所得純品為淡黃色固體，收率47.3%，熔點153.8~154.3°C。分子式C19H2qC1N50元素分析(％)，計算值C61.70,H5.45,N18.94;實測值C61.74,H5.58,N19.07;工HNMR(CDC13,TMS，600MHz)<5(ppm):2.41(s,3H,嘧澱-CH3)，2.51(s，3H,批啶-CH3),2.98(t，2H，-CH2CH2-，J=6.9Hz)，3.12(d,3H，-NHCH3,風8Hz)，3.91(t,2H，-CH2CH2-，J=6.9Hz)，6.77(s，1H,-NH),7.06(d,2H,ArH,J=8.4Hz),7.24(s,1H,嘧啶-H),7.29(d,2H,ArH，J=8.4Hz)，10.36(s,1H，-OH);IR(KBr)u(cm"):3358(N-H);3133，752(=C-H);2935,1393(C-H);1640,1591,1517,1454(C=N，C=C);1265(C-N)。實施例2化合物253-(4-甲基苄基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3,4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶-8國腈將15毫摩爾2-甲基-3-乙醯基-5-氰基-6-乙氨基-4-吡啶胺加入到50毫升的反應瓶中，加入90毫摩爾原甲酸三乙酯，在140。C反應10小時，反應完全後減壓蒸出沒有反應的原甲酸三乙酯和溶劑，殘餘物經矽膠柱層析得白色晶體吡啶醚脒，89.390.0°C，收率74%。'HNMR(CDC13,TMS，400MHz)(5(ppm):1.25(t，3H,J=8.0Hz，-NHCH2CH3)，1.39(t,3H:J=8.0Hz,-OCH2CH3),2.36(s,3H,-CH3),2.37(s,3H,-COCH3),3.56(q,2H，J=8.0Hz，-NHCH2CH3)，4.34(q，2H,J=8.0Hz,-OCH2CH3),5.20(s,1H,NH),7.60(s,1H,N=CH)。將2毫摩爾2-甲基-3-乙醯基-5-氰基-6-乙氨基吡啶-4-亞胺甲叉基乙基醚、15毫升二氯甲垸加入到50毫升的反應瓶中，加入4毫摩爾對甲基苄胺，在2(TC攪拌反應12小時，析出白色固體，過濾，乙醇重結晶，所得純品為白色固體，收率為91.4%，熔點182.7~183.0°C。分子式C2QH23N50:元素分析(％)，計算值C68.74，H6.63,N20.04;實測值C68.50,H6.40,N19.81;IR(KBr,WcnT1):3363(N-H);3056,763(=C-H);2966,2869,1382(C-H);1639,1594，1514,1457(C=N，C=C);1258(C-N);&麗R(S,CDC13,TMS,400MHz):1.23(t,3H,-NHCH，C仏,J=7.2Hz),2.35(s,3H,Ph-CH3)2.41(s,3H,嘧啶-CH3),2.59(s,3H，吡啶-CH3),3.54(m,2H，-NHCH2CHO,4.85(s,2H,-CH2-)，6.70(s,1H,-NH),7.12~7.22(m,4H,ArH),7.79(s,1H,嘧啶-H),10.23(s，1H,-OH);13CNMR(<5，DMSO,TMS,150MHz)14.60,20.65,23.15,33.13,35.07,49.31,97.50,119.45，127.03,129.35，132.10，137.16,150.85,151.07，151.23,156.65,156.67，203.83;MS(EI,m/z，％):351(M++24),350(M++122)，349(M+47),245(41)，244(100)，106(18),105(69),77(17)。以下化合物按化合物25類似的方法製備，其結構鑑定數據如下化合物153-乙基-4，5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈所得純品為白色固體，收率81.5%，熔點149.4149.8°C。分子式C14H19N50元素分析(％)，計算值C61.52,H7.01,N25.62;實測值C61.61,H7.19,N25.46;'HNMR(CDC13，TMS,400MHz)<5(ppm):1.28(t,3H,-NHCH^CHj'J=7.2Hz),1.39(t,3H,-CH7CH2,J=7.2Hz),2.39(s，3H,嘧澱-CH3),2.56(s，3H,批啶-CH3),3.56~3.63(m,2H,-NHCH7」CHQ，3.78(q，3H，-CH7CH,J=7.3Hz),6.72(s，1H，-麗),7.68(s,1H,噴啶-H),10.36(s，1H,-OH);IR(KBr)t;(cm.1):3344(N隱H);3198,755(=C-H);2969,2933，1386(C-H);1641，1590，1509，1441(C=N,C=C);1259(C-N);EI國MS(m/z,%):275(M十+29),273(M+88),258(88),243(100),228(31),227(13),202(17),201(27),185(19),171(16),157(24),105(12)，43(20)。化合物163-丙基-4，5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3，4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶-8-腈所得純品為白色固體，收率62.7%，熔點87.0~88.5'C。分子式C15H21N50元素分析(°/。)，計算值C62.70,H7.37,N24.37;實測值C62.73,H7.22,N24.11;&NMR(CDC13,TMS,400MHz)3(ppm):1.02(t,3H,-CH,CH，C仏,J=7.6Hz),1.29(t,3H,-NHCH7CHi,J=6.8Hz),1.79(q,2H，-CHCH—CH、J=7.3Hz),2.39(s,3H,嘧啶-CH3),2.56(s，E謂，Y、CH.EtHNT、NT、CH3153H,吡啶-CFb)，3.56~3.62(m,2H,-NHCHCH3).3.67(q,2H，-CH2CH7CH3,J=7.2Hz),6.71(s,1H,-NH),7.65(s,1H,嘧咬隱H),10.36(s,1H,-OH);IR(KBr)"(cm"):3433(N國H);3188，753(=C-H);2967,2878,1389(C-H);1641,1591,1512,1441(C=N,C=C);1253(C-N);EI隱MS(m/z,%):287(M+100),271(85),228(21),226(18),212(15),201(32)，184(21),159(17)，43(45)。化合物173-丁基-4,5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈formulaseeoriginaldocumentpage16所得純品為白色固體，收率43.3%，熔點80.0~81.5°C。分子式C16H23N50元素分析(％)，計算值C63.76,H7.69,N23.24;實測值C63.71,H7.43，N22.98;NMR(CDC13,TMS,400MHz)<5(ppm):0.99(t,3H,-CH，CH7CH，CH2,J=8.0Hz),1.29(t，3H,-NHCH，CHQ,1.37~1.45(m,2H,-CH7CHCH2CHQ,1.681.75(m,2H,-CH，CH2CH7CH3),2.39(s,3H,嘧啶-CH3),2.56(s,3H,吡啶-013),3.56~3.62(m,2H，-NHCH2CHQ,3.70(t,2H,-CH2CH7CH7CH3,J=7.4Hz)，6.70(s,1H,-NH),7.64(s,1H,嘧啶-H),10.36(s,1H,-OH);IR(KBr)u(cm.1):3385(N-H);3282,965(=C-H);2973,2868,13卯(C-H);2197(C三N);1624,1581,1505,1445(ON,C=C);1266(C-N);EI-MS(m/z,%):301(M+100),286(91),243(99),230(47),228(17)，226(22),218(13),217(10),216(17),212(28),203(16),202(14),201(22),184(18),175(13),159(15)，157(16)，132(10),43(26)。化合物183-己基-4,5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3,4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶-8-腈formulaseeoriginaldocumentpage16所得純品為白色固體，收率63.8%，熔點126.0~126.5°C。分子式C18H27N50元素分析(％)，計算值C65.62,H8.26N21.26;實測值C65.65，H8.20，N21.47;if!NMR(CDC13,TMS，400MHz)(5(ppm):0.90(t,3H,-CEbCHsCHzCHsCFbCHa,J=7.0Hz)，1.27~1.34(m,9H，-NHCH，CH;and-CH，CH，CH7CH，CH7CH3),1.72(q,2H,-CH，CH2CH7CH7CH7CH;,J=7.4Hz)，2.39(s,3H,嘧啶隱CH3),2.56(s,3H,吡啶-13),3.56~3.62(m,2H,-NHCH2CHQ,3.69(q,2H,-CH2CH7CH7CH7CH7CH3,J=7.4Hz),6.70(s,1H，-NH),7.65(s,1H,嘧啶-H),10.36(s,lH,-OH);IR(KBr)o(cm"):3315(N-H);2961，2863,1387(C-H);1628,1587,1558,1468(C=N,C=C);1273(C-N);EI-MS(m/z,%):329(M+100),314(75),243(97),230(35),229(18)，227(53)，216(16)，213(10),212(15),211(20),203(25),201(20),199(41),184(34),157(27),130(16),105(14),43(62)。化合物193-糠基-4,5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3,4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶-8-腈所得純品為白色固體，收率89.0%，熔點142.5143.0°C。分子式C17H19N502元素分析(°/。)，計算值C62.75,H5.89,N21.52;實測值C62.92,H5.57,N21,18;&NMR(CDC13，TMS,400MHz)3(ppm):1.26(t,3H,-NHCH，C仏,J=7.4Hz),2.39(s,3H，嘧啶-CH3),2.56(s，3H,吡啶-CH3),3.57(m,2H，-NHCMHA4.83(s,2H,-CH2),6.38~6.42(m,2H,呋喃-H),6.99(s，1H,-NH),7.42(d,1H，呋喃-H),7.76(s，1H,嘧啶-H),10.24(s，1H,OH);IR(KBr)u(cm"):3371(N-H);3119,764(=C-H);2965,2931,1351(C國H);1641,1591,1516，1455(C=N,OC);1259(C-N);EI-MS(m/z,%):325(M+84),296(29),81(100),53(56),43(29)。實施例3化合物263-(4-甲氧基苄基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈formulaseeoriginaldocumentpage17乙氨基-4-吡啶胺加入到50毫升的反應瓶中，加入15毫摩爾原甲酸三乙酯，加入催化量醋酸酐，在8(TC反應25小時，反應完全後減壓蒸出沒有反應的原甲酸三乙酯，殘餘物減壓柱層析得白色晶體吡啶醚脒。將1亳摩爾2-甲基-3-乙醯基-5-氰基-6-乙氨基吡啶-4-亞胺甲叉基乙基醚、15毫升無水二氧六環加入到50毫升的反應瓶中，加入1毫摩爾對甲氧基苄胺，加熱到100'C反應6小時，析出固體，過濾，丙酮與石油醚混合溶劑重結晶，所得純品為白色固體，收率為86.5%，熔點194.0-194.6。C。分子式C2。H23N502:元素分析(％)，計算值C65.73，H6.34，N19.16;實測值C65.56,H6.12，N19.00;IR(KBr,Wcm"):3367(N-H);2964，2927，1381(C-H);1640,1592，1514,1458(C=N，C=C);1255(C-N);744(=C-H);工HNMR(S,CDC13,TMS，400MHz):1.23(t，3H,-NHCH7CH;,J=7.2Hz)，2.40(s，3H,噴啶-CH3),2.59(s，3H，吡啶-CH3),3.533.56(m,2H，-NHCH2CH".3.80(s,3H,Ph-OCH3)，4.83(s,2H,-CH2-)，6.72(s,1H,-NH),6.91~7.18(m,4H，ArH)，7.78(s,1H，嘧啶-H),10.23(s，1H,-OH);MS(EI,m/z,%):366(M++14),365(M+14),244(66),122(12)，121(100)。以下化合物按照化合物26的方法製備，其結構鑑定數據如下化合物203-苄基-4，5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3,4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶-8-腈所得純品為白色固體，收率89.6%，熔點140.0~140.8°C。分子式C19H21N50元素分析(％)，計算值C68.04，H6.31,N20.88;實測值C67.78,H6.13，N20.63;1HNMR(CDC13,TMS,400MHz)(5(ppm):1.23(t，3H，-NHCH2￡Ha，J=7.0Hz)，2.40(s，3H，噴啶-CH3)，2.60(s,3H,吡啶-CH3),3.53~3.56(m，2H,-NHCH2CHQ.4.90(s,2H,-CH2-)，6.70(s,1H，-NH),7.24~7.43(m,5H,ArH),7.80(s，1H,嘧咬國H),10.20(s,1H,-OH);IR(KBr)u(cm-1):3351(N-H);3087,736(=C-H);2977,2937,1378(C-H);1641,1592,1521,1460(C=N,OC);1249(C-N);EI-MS(m/z，％):337(M++213),336(M++111),335(M+17)，317(24),246(22)，244(77)，243(57),227(21)，214(23),202(29)，91(100),卯(26)。化合物213-苯乙基-4:5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈所得純品為白色固體，收率91.7%，熔點124.3-125.(TC。分子式C21H25N50元素分析(％)，計算值C69.40,H6.93，N19.27;實測值C69.22，H6.71，N18.94;&NMR(CDC13,TMS,400MHz)3(ppm):1.27(t,3H,-NHCH，CH;,J=7.0Hz),2.08(m，2H,-CH,CH，CH"),2.39(s,3H，嘧啶-CH3),2.56(s,3H,吡啶誦CH3)，2.73(t,2H,-CH，CH，CH，-,J=7.4Hz),3.58(m,2H,-NHCH2CH3),3.66(t，2H,-CHCH7CH7-'J=7.6Hz),6.59(s,1H,-NH),7.19~7.33(m,5H，ArH),7.57(s,1H，嘧啶-H),10.35(s,1H，國OH);IR(KBr)w(cm-1):3323(N-H);3053，760(=C-H);2971，2927,1383(C-H);1629,1591,1509,1451(C=N,C=C);1264(C國N);EI-MS(m/z,%):363(M十100),348(58),245(38),243(32),91(52),43(11)。化合物223-(3-氟苄基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈、N"、CH3所得純品為白色固體，收率91.4%，熔點125.4128.4°C。分子式C19H2QFN50元素分析(％)，計算值C64.57,H5.70,N19.82;實測值C64.59,H5.76，N19.60;力NMR(CDC13,TMS,400MHz)5(ppm):1.23(t,3H，-NHCH7CH、J=7.2Hz),2.41(s，3H,嘧啶-CH3),2.60(s，3H,吡啶-CH3),3.54~3.57(m,2H,-NHCH2CHO,4.89(s,2H,-CH2-)，6.65(s,1H,-NH)，6.93~7.39(m，4H,ArH),7.79(s，1H,嘧啶-H),10.18(s,1H，-OH);IR(KBr)t>(cm-1):3359(N-H);3053，760(=C-H);2963，1382(C-H);1639,1591,1511,1454(C=N，C=C);1257(C-N);EI-MS(m/z,%):355(M++25),354M++116),353(M+15),246(11)，245(100),244(73),243(67)。formulaseeoriginaldocumentpage203-(4-氟苄基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈所得純品為白色固體，收率45.7%，熔點139.5~140.5°C。分子式C19H2QFN50元素分析(％)，計算值C64.57,H5.70,N19.82;實測值C64.71，H5.67,N19.85;NMR(CDC13，TMS,400MHz)5(ppm):1.23(t,3H，-NHCH,C仏,J=7.2Hz),2.40(s,3H,嘧啶-CH3)，2.59(s,3H,吡啶-013),3.533.56(m,2H,-NHCH^CHA4.87(s,2H,-CHr),6.65(s,1H，-NH),7.08~7.24(m,4H,ArH),7.78(s,1H,嘧啶-H)，10.18(s，1H,-OH);IR(KBr)o(cm-1):3363(N-H);3127,748(=C-H);2967,1383(C-H);1642,1591，1513，1459(C=N，C=C);1264(C-N);EI-MS(m/z,%):353(M+24),351(13)，336(22),245(73),244(44)，243(16)，203(18)，150(17),110(81),109(100),107(27)。化合物243-(2-氯苄基)-4，5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈所得純品為白色固體，收率89.2%，熔點190.5191.0'C。分子式C19H2qC1N50元素分析(％)，計算值C61.70,H5.45,N18.94;實測值C61.51,H5.68，N18.73，HNMR(CDC13,TMS,400MHz)d(ppm):1.24(t,3H,-NHCH，CH、J=7.2Hz),2.41(s,3H,嘧啶-CH3),2.60(s，3H,吡啶-CH3),3.55(m,2H,-NHCH7CKh),4.98(s,2H，-CH2-)，6.67(s,1H，-NH)，7.07-7.40(m,4H,ArH)，7.76(s，1H,嘧啶-H),10.21(s,1H，-OH);IR(KBr)t)(cm"):3356(N-H);3063，760(=C-H);2975,2940，1375(C-H);1641,1591,1517,1448(C=N，C=C);1250(C隱N);EI-MS(m/z,%):369(M+7)，329(19),312(17),245(31)，244(100),243(75)，209(28),208(22)。EtHN"NT、CH.20化合物273-(4-氟苯乙基)-4，5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈EtHN"、N'、CH'所得純品為白色固體，收率89.2%，熔點162.8~163.2°C。分子式C20H22FN5O元素分析(°/。)，計算值C65.38,H6.04,N19.06;實測值C65.47,H6.16,N18.95;&NMR(CDC13,TMS,400MHz)S(ppm):1.30(t，3H,-NHCH7CH;J=7.2Hz),2.39(s，3H,嘧啶-CH;O，2.50(s，3H,吡啶-CH3),2.99(t,2H，-CH2CH2-，J=6.6Hz),3.573.62(m，2H,-NHCH2CHA3.90(t,2H，-CH2CH2-，J=6.8Hz)，6.79(s，1H,-NH),6.99~7.U(m，4H,ArH),7.22(s，1H,嘧啶-H),10.38(s,1H,-OH);IR(KBr)o(cm-1):3362(N-H);3128,749(=C-H);2968,1382(C-H);1641,1592,1511,1454(C=N,C=C);1222(C-N);EI-MS(m/z,%):368(M++19),367(M+43)，352(21),245(23)，244(100),123(23),103(20)。化合物283-(4-氯苯乙基)-4，5-二甲基-4-羥基-7-乙氨基-3，4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶-8-腈所得純品為白色固體，收率71.1%，熔點164.0164.6°C。分子式C2GH22C1N50元素分析O)，計算值C62.58，H5.78，N18.24;實測值C62.68,H5.52,N18.14;NMR(CDCI3，TMS，400MHz)5(ppm):1.30(t，3H，-NHCH7CHi,J=7.2Hz)，2.39(s,3H,嘧啶-CH3),2.51(s,3H，吡啶-CH3),2.99(t，2H,-CH2CH2-，J:7.2Hz),3.59~3.64(m,2H，-NH￡|^CH3),3.91(t，2H，-CH2CH2-，J=7.0Hz)，6.78(s,1H,-NH),7.05~7.30(m,4H,ArH),7.24(s,1H,嘧啶-H),10.38(s，IH,-OH);IR(KBr)i;(cm"):3362(N-H);3116，749(=C-H);2961，1383(C-H);2219(C三N);1641,1592,1512，1453(C=N，C=C);1263(C-N);EI-MS(m/z，％):386(M++33)，385(M++211)，384(M++18),383(M+34),368(21),245(30):EtHN"、N、CH.21244(100),230(16)，227(16),216(12),212(17.84),139(22)，103(26)。採用上述類似的方法，可以製備通式I-1其他的化合物。表l中所列的為本發明合成的通式I-1部分化合物。表中省略的符號的含義Me-甲基Et-乙基Ph-苯基furfuryl—糠基Y,、(VT\CH:I隱l表1已合成的部分化合物tableseeoriginaldocumentpage22實施例4化合物293-正己基-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲硫基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-甲醯胺將lmmol的3-正己基-5-甲基-4-亞甲基-7-甲硫基-8-氰基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶溶於ImL乙醇中，加入0.5mmol的氫氧化鈉的2mL水溶液，80。C下回流攪拌反應6小時。反應畢，抽濾，水洗(2mLO得粗品，再用丙酮-水重結晶得產品白色固體，收率69.7%，熔點7L473.0。C。分子式C17H26N402S元素分析(％)，計算值C58.26,H7.48,N15.99;實測值C58.08，H7.70,N15.54;'HNMR(CDC13,TMS,600MHz)5(ppm):0.89(t,3H,-CH，CH7CH7CH，CH,CH2.J=6.9Hz),1.311.37(tn,6H，-CH7CH7CH7CH7CH7CHQ,1.78(m,2H,-CH2￡J^CH2CH2CH2CH3),2.46(s,3H，嘧啶-CH3),2.58(s，3H,-SCH3),2.67(s,3H,卩比啶-CH3),3.卯(m,2H，-￡ii2CH2CH2CH2CH2CH3)，7.76(s,1H，嘧啶隱H),8.60(s，1H,-OH);IR(KBr)(cm-1):3338(N-H);2927,2856,1390(C-H);1689(C=0)，1621,1548，1527,1412(C=N,C=C);1218(C-N),1107(C-O);809(=C-H)。以下化合物參照化合物29的方法製備，結構鑑定數據如下化合物303-(2-氟苄基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲硫基-3,4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶-8-甲醯胺所得純品為白色固體，收率92.9%，熔點168.7~169.4°C。分子式C18H19FN402S元素分析(％)，計算值C57.74,H5.11,N14.96;實測值C57.81,H4.97,N15.32;力NMR(CDC13，TMS,600MHz)3(ppm):2.45(s，3H,啼啶墨CH3),2.57(s,3H,-SCH3),2.68(s，3H,吡啶-CH3),5.19(s，2H，-CHr),7.07-7.51(m,4H,ArH)，7.94(s,1H,嘧啶-H),8.71(s，1H，-OH);IR(KBr)D(cm"):3343(N-H);3071,809(=C-H);3005,2926,1386(C誦H);1696(C=0)，1623，1554,1492，1443(C=N,OC);1219(C-N);1108(C-O)。化合物313-(4-甲氧基節基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲硫基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-甲醯胺所得純品為白色固體，收率70.7%，熔點139.4~140.1°C。分子式C19H22N403S元素分析(％)，計算值C59.05,H5.74,N14.50;實測值C59.25,H5.69,N14.37;hKCSZ、N"、CH:H3CSformulaseeoriginaldocumentpage231HNMR(CDC13,TMS，600MHz)3(ppm):2.45(s,3H，嘧啶-CH3),2.56(s,3H,-SCH3),2.69(s，3H,吡啶-CH3),3.79(s，3H,Ph-OCH3)，5.09(s,2H,6.88(d,2H,ArH，J=7.2Hz)，7.29(d,2H，ArH,J=7.2Hz),7.82(s,1H，嘧啶-H),8.70(s,1H,-OH);IR(KBr)(cm.1):3347(N-H);3003,776(=C-H);2930，2835,1389(C-H);16%(C=0),1641,1596,1515,1455(C=N，C=C);1253(C-N);1113(C-O)。實施例5化合物323-(4-氟苄基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲硫基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-甲醯胺將lmmol的3-對氟苄基-5-甲基-4-亞甲基-7-甲硫基-8-氰基-3，4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶溶於lmL丙酮中，加入lmmol的氫氧化鈉的2mL水溶液，室溫攪拌反應0.5小時。反應畢，抽濾，水洗(2mLx2)得粗品，再用丙酮-水重結晶得產品白色固體，收率77.5%，熔點147.6~148.9°C。分子式C18H19FN402S元素分析(％)，計算值.-C57.74,H5.11，N14.96;實測值C57.92，H5.56，N14.89;NMR(CDC13,TMS,600MHz)3(ppm):2.47(s,3H,嘧啶-CH3),2.58(s,3H,-SCH3),2.68(s,3H，吡啶-CH3),5.13(s,2H,-CH-),7.05(t，2H，ArH,J=12.9Hz),7.33(s,2H,ArH),7.85(s,1H，嘧啶-H)，8.70(s,1H，-OH);IR(KBr)D(cm"):3332(N-H);3076,808(=C-H);1386(C-H);1694(C=0),1624，1600,1549，1510(C=N,C=C);1215(C-N);1124(C-O);EI-MS(m/z，％)356(M-H20100),341(54)，323(31)，299(29),247(88),109(43)。以下化合物參照化合物32的方法製備，結構鑑定數據如下化合物333-(4-氟苯乙基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲硫基-3,4-二氫吡啶並[4，3-￡1]嘧啶-8-甲醯胺H3CSZ、NT、CH:H3CS"、N"、CH:所得純品為白色固體，收率63.3%，熔點96.598.(TC。分子式C19H21FN402S元素分析(％)，計算值C58.75,H5.45,N14.42;實測值C58.44，H5.77，N14.72;&醒R(CDC13，TMS,600MHz)J(ppm):2.50(s，3H，嘧啶-CH3),2.65(s，3H，-SCH3)，2.71(s，3H，吡啶-CH3),3.02(t，2H，-CHCH"),3.93(t，2H,-CH，CH，-),7.007.27(m，4H,ArH),7.37(s，1H，噴啶-H),8.58(s，1H,-OH);IR(KBr)u(cm—1):3399(N-H);2933,2863，1409(C-H);1700(C-O),1567，1536,1510(C=N,C=C);12%(C-N);1216(C-0);824(=C-H);EI-MS(m/z,%)370(M-H2O68),355(26),261(100)，248(60)，233(26),215(51)。化合物343-(3-甲氧基苯乙基)-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲硫基-3,4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶-8-甲醯胺所得純品為白色固體，收率73.7%,熔點131.4~131.8°C。分子式C2QH24N403S元素分析(％)，計算值C59.98，H6.04,N13.99;實測值C60.09,H5.68，N14.26;&NMR(CDC13，TMS,600MHz)<5(ppm):2.46(s，3H，嘧噴-CH3),2.52(s,3H，-SCH3),2.72(s,3H,吡啶國CH3),3.08(t,2H，-CH2CH,-.J=6.6Hz),3.75(s，3H，Ph-OCH3),6.707.22(m,4H,ArH)，7.37(s，1H,嘧咬-H),8.69(s,1H，-OH);IR(KBr)w(citf1):3332(N-H);2942,2837,1350(C-H);1705(OO)，1621,1554,1443(C=N,C=C);1155(C-N);1049(C-O);881,781(=C-H)。採用上述類似的方法，可以製備通式I-2其他的化合物。表2中所列的為本發明合成的通式I-2部分化合物。表中省略的符號的含義Ph-苯基H3CSZ、N"、CH:H3CS'、hT、CH3I-225表2已合成的部分化合物tableseeoriginaldocumentpage263-正己基-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲碸基-8-氰基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶formulaseeoriginaldocumentpage26將lmmol的3-正己基-5-甲基-4-亞甲基-7-甲硫基-3,4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶-8-腈，10mL乙腈和催化量的鎢酸鈉加入50mL的三頸燒瓶中，升溫到5(TC開始滴加0.68g(6mmmo1)30%雙氧水。滴加完畢，回流反應至原料點消失。加水令固體完全析出，抽濾得到粗品再用丙酮-石油醚重結晶得純品黃色固體，收率57.8%，熔點198.0~199.0°C。分子式C17H24N403S元素分析(％)，計算值C56.02，H6.64,N15.37;實測值C55.62,H6.24,N15.83;力NMR(DMSO,TMS,600MHz)5(ppm):0.86(t，3H，-CHCH，CH7CH，CH7CH2,J=6.6Hz)，1.28(s,6H,-CH，CH7CH2CH2CH7CH3),1.69(t，2H,-CH7CH2CH7CHCH7CH3,J=6.6Hz),3.03(s,3H,吡啶-CH3),3.51(s,3H，-S02CH3)，3.98(t,2H,-CH2CHCH7CH7CH7CH3,J=7.5Hz),8.87(s,1H,嘧啶國H);IR(KBr)u(cm-1):3426(O-H);3008,761(=C-H);2923，2856,1377(C-H);2242(C三N);1597,1548，1450(C=N,C=C);1332(0=S=0)，1149(C-O);EI-MS(m/z，％):203(3),355(26),88(20),43(100)。以下化合物參照化合物35的方法製備，結構鑑定數據如下化合物363-鄰氟苄基-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲碸基-8-氰基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶26H3C—S-N、CH3所得純品為黃色固體，收率21.6%，熔點263.0264.5'C。分子式C18H17FN403S元素分析(％)，計算值C55.66，H4.41,N14.42;實測值C55.97,H4.19，N14.58;4NMR(DMSO，TMS,600MHz)<5(ppm):2.98(s，3H,吡啶-CH3)，3.49(s,3H,-S02CH3)，5.27(s，2H,7.16~7.39(m,4H,ArH)，9.03(s,1H,嘧啶-H);IR(KBr)u(cm-1):3424(O-H);3010,756(=C-H);2927,1387(C-H);2232(ON);1601,1578,1453(C=N,C=C);1313(0=S=0)，1144(C-O);EI-MS(m/z,%):109(17),58(100),42(78)。化合物373-對甲氧基苄基-4，5-二甲基鬥羥基-7-甲碸基-8-氰基-3,4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶所得純品為白色固體，收率48.9%，熔點178.5~180.(TC。分子式C19H2QN404S元素分析(％)，計算值C56.99,H5.03,N13.99;實測值C6.68,H5.21,N13.64;，HNMR(DMSO,TMS,600MHz)5(ppm):2.71(s,3H,吡啶陽CH3),3.40(s,3H，-S02CH3),3.70(t，2H,-CHr).3.75(s，3H,Ph-OCH3)，6.94(d，2H，ArH，J=7.8Hz)，7.38(d，2H,ArH，J=7.8Hz),7.68(s,1H，峰咬-H),7.75(s,1H,-OH);IR(KBr)o(cm4):3396(O-H);2930,2838,1398(C-H);2229(C三N);1610,1543,1518，1443(C=N,C=C);1312(0=S=0),1256(C-N);1138(C-O);758(=C-H);EI-MS(m/z，％):279(10),136(63),121(100)，106(28),77(32),62(48)。實施例7化合物383-對氟苄基-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲碸基-8-氰基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶H3C—S''N、CH3將lmmol的3-對氟節基-5-甲基-4-亞甲基-7-甲硫基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-8-腈，10mL醋酸和催化量的鎢酸鈉加入50mL的三頸燒瓶中，再加入0.68g(6mmmo1)30%雙氧水。滴加完畢，IO(TC反應至原料點消失。加水令固體完全析出，抽濾得到粗品再用丙酮-石油醚重結晶得純品黃色固體，收率43.2%，熔點150.3~151.8'C。分子式C18H17FN403S元素分析(％)，計算值C55.66,H4.41,N14.42;實測值C55.74,H4.70,N14.10;&NMR(DMSO，TMS,600MHz)5(ppm):2.71(s，3H,吡腔-CH3),3.42(s,3H，-S02CH3),3.69(t,2H,-CHr),7.207.50(m,4H,ArH),7.67(s,1H，嘧啶-H),7.82(s，1H，-OH);IR(KBr)w(cm.1):3426(O墨H);3004，757(=C-H);2922，1399(C-H);2226(C三N);1609,1578,1517,1442(C=N,C=C);1314(0=S=0),1233(C-N);1138(C-O);EI-MS(m/z,%):218(14)，178(63)，176(100),160(57),121(43)，109(57)，75(21),43(60)。以下化合物參照化合物38的方法製備，結構鑑定數據如下化合物393-對氟苯乙基-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲碸基-8-氰基-3,4-二氫吡啶並[4，3-d]嘧啶所得純品為黃色固體，收率60.5%，熔點150.3~151.8°C。分子式C19H19FN403S元素分析(％)，計算值C56.70,H4.76,N13.92;實測值C56.46,H4.41,N14.35;，HNMR(DMSO,TMS,600MHz)<5(ppm):3.02(t,2H,-CH，CH2-.J=7.5Hz)，3.06(s，3H，P比啶-CH3)，3.51(s,3H,-S02CH3),4.23(t，2H,-CH，CH2-,J=7.2Hz)，7.127.30(m，4H,ArH)，8.65(s，1H,嘧P定-H);IR(KBr)(cm-1):3425(O-H);3042,756(=C-H);2934，1379(C-H);2239(C三N);1601,1550,1510，1451(C=N,C=C);1308(0=S=0),1220(C-N);1148(C-O);EI-MS(m/z,%):122(26),109(41),96(48),77(13),46(100),44(86)。H3C—N、CH3化合物403-間甲氧基苯乙基-4,5-二甲基-4-羥基-7-甲碸基-8-氰基-3,4-二氫吡啶並[4,3-d]嘧啶所得純品為黃色固體，收率23.2%，熔點226.0227.0°C。分子式C2QH22N404S元素分析(％)，計算值C57.96,H5.35,N13.52;實測值C57.55,H5.16,N13.73;&NMR(DMSO,TMS,600MHz)3(ppm):2.98(t，2H,-CH,CHr.J=7.5Hz),3.05(s,3H,吡啶-CH3),3.50(s,3H，-S02CH3),3.72(s,3H,Ph-OCH3),4.23(t,2H,-CH2CH-,JK7.5Hz),6.78~7.22(m,4H,ArH),8.63(s,1H，嘧啶隱H);IR(KBr)"(cm4):3424(O-H);3035,753(=C-H);2928,1385(C-H);2229(C=N);1596,1550，1456(C=N,C=C);1307(0=S=0),1274(C-N);1153(C-O)。採用上述類似的方法，可以製備通式I-3其他的化合物。表3中所列的為本發明合成的通式I-3部分化合物。表中省略的符號的含義Ph-苯基—II01-3表3已合成的部分化合物tableseeoriginaldocumentpage29實施例8抗腫瘤活性試驗供試靶標口腔底癌細胞KB;抗癌藥物常春新鹼誘導下產生耐藥性的口腔底癌細胞KBv200;人乳腺癌細胞MCF-7;在抗腫瘤藥物阿黴素誘導下產生耐藥性的人乳腺癌細胞株MCF-7/Adr;人鼻咽癌細胞CNE1。試驗方法MTT體外細胞毒試驗方法取對數生長期的人癌細胞製成2xl(^個細胞/mL的細胞懸液，按0.19mL/孔接種到96孔板，於37。C、5%(302培養24小時後，按O.OlmL/孔加入不同濃度的樣品溶液，另設生理鹽水對照孔，每濃度設4個平行孔，加藥後再培養72小時，培養結束前3小時按O.OlmL/孔加入濃度為10mg/mL的3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽(MTT)，培養結束時吸出培養液，每孔加O.lmL的二甲基亞碸(DMSO),於測量波長540nm參比波長655nm下測量OD值。按下式計算細胞生長抑制率(IR)，以簡化概率單位法計算半數抑制濃度(IC5G)。IR°/。=(l-平均OD值加艦/平均OD值對照組)xi00%。測定結果見表4。表4部分式I-1化合物的抗腫瘤活性數據(IC5。值)化合物KBKBv200MCF-7MCF-7/Ad1>50>50>50>502>50>50>50>503>50>50>50>504>50>50>50>505>50>50>50>506>50>50>50>507〉50>50>50>508>50>50>50>509>50>50>50>5010>50>50>50>50113.022.7550.046.5124.634.2839.817.613>50>50>50>5014>50>50>50>5015>50>50>50>5016>50>50>50>5018>50>50>50>5019>50>50>50>5020>5048.9>50>5023>50>50>50>5024>50>50>50>5025>50>50>50>50264.264.085.753.5127>50>50>50>5028>5032.728.222.5實施例9抗腫瘤活性試驗供試靶標人鼻咽癌細胞6-10B、CNE1、H0NE1、SUNE1;人肺癌細胞H460、Calu-3;白血病細胞HL-60。試驗方法MTT體外細胞毒試驗方法。測定結果見表5。表5部分式I-1化合物的抗腫瘤活性數據(iCs。值)化合物6-10BCNE1H0NE1SUNE1H460Calu-3HL-60113,620.944.603.324.1027.0NT123.190.733.142.823.0435.40.322569.23.5328.415.971.032.0NT264.061.165.553.646.8836.30.37實施例IO抗腫瘤活性試驗供試耙標口腔底癌細胞KB;人鼻咽癌細胞CNE1、CNE2。試驗方法MTT體外細胞毒試驗方法。測定結果見表6。表中長春新鹼和氟脲嘧啶作為陽性對照藥。表6部分式I-2、I-3化合物的抗腫瘤活性數據(iCs。值)化合物.IC50(uM)KBCNE1CNE230>50--310.1240.0640.0573229.320.2-3327.348.5-3417.614.7-365.459.9037>50—38>50-395.649.60406.2314.2Vincristin0.0063--Fluorouracil12.5--注Vincristin—長春新鹼；Fluorouracil—氟脲嘧啶。實施例11化合物12對小鼠肝癌(Hep-S)移植瘤的生長抑制作用在取腹水型小鼠移植性肝癌腹水，用生理鹽水按1:3稀釋，接種於小鼠腋窩皮下0.2mL/只，接種次日隨機分2組，即生理鹽水對照組和化合物12給藥組，每組9隻動物。接種次日起化合物12給藥組按每公斤體重IOO呢的劑量每天腹腔注射給藥2次，連續給藥4天停藥1天，共給藥8次，生理鹽水對照組相應按每公斤體重10mL的劑量腹腔注射生理鹽水。末次給藥後第2日處死動物，剝離瘤塊並稱瘤重，按以下公式計算腫瘤生長抑制率(IR%)。IR%=[(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對照組平均瘤重]x100。/。結果顯示化合物12對小鼠肝癌移植瘤的生長抑制率為52.3%，化合物12給藥組瘤重與對照組比較有非常顯著差異(P〈0.01)，表明化合物12具有抑制腫瘤生長作用。權利要求1、一類3，7，8-多取代吡啶並[4，3-d]嘧啶衍生物，其特徵是具有通式I所表示的結構式式I中，X表示CN，CONH2；Y表示甲硫基，甲碸基，C1-C3的烷氨基；R表示C1-C6的烷基，雜環基為吡啶、噻吩或呋喃的雜環取代C1-C2烷基，苯基C1-C3烷基或取代苯基C1-C3烷基，苯基或取代苯基；所涉及的苯環上的取代基為滷素、C1-C3的烷基或烷氧基，取代基在苯環任一位置上的單取代或多取代，在苯環上的取代基相同或不相同；其中，通式I涵蓋了如下通式I-1、通式I-2和通式I-3所示的三類化合物通式I-1、I-2、I-3中的R和通式I中的含義相同；通式I-1中的Y表示C1-C3的烷氨基。2.以通式I-1表示的多取代吡啶並[4,3-d]嘧啶衍生物的製備方法(A法)，其特徵是使通式B所表示的化合物與原甲酸三乙酯反應生成吡啶醚脒中間體C，C再與d-C6的脂肪伯胺、苯基d-C4垸基伯胺或取代苯基d-C4垸基伯胺或雜環取代d-C2烷基胺反應，在室溫或加熱條件關環，得到化合物I-1:BCI-1通式B、C及I-1中的Y表示d-C3的烷氨基；RNH2表示d-Q的烷基，雜環基為吡啶、噻吩或呋喃的雜環取代Ci-C2烷基，苯基d-C3烷基或取代苯基d-C3烷基。3.以通式1-2表示的多取代吡啶並[4,3-d]嘧啶衍生物的製備方法(B法)，其特徵是使通式D所表示的化合物經水解反應得到化合物I-2:通式D和1-2中的R與權利要求1中的定義相同。4.以通式1-3表示的多取代吡啶並[4，3-d]嘧啶衍生物的製備方法(C法)，其特徵是使通式D所表示的化合物經氧化反應得到化合物I-3，通式D和1-3中的R與權利要求1中的定義相同。formulaseeoriginaldocumentpage35、權利要求1所述的以通式I表示的化合物的應用，其特徵是作為抗腫瘤藥物的有效成份。6、權利要求1所述的以通式I表示的化合物的應用，其特徵是作為對於人口腔底癌細胞株KB具有細胞毒活性的抗腫瘤藥物的有效成份。7、權利要求1所述的以通式1-1表示的化合物的應用，其特徵是作為對於對長春新鹼耐藥的人口腔底癌細胞KBv200具有細胞毒活性的抗腫瘤藥物的有效成份。8、權利要求1所述的以通式1-1表示的化合物的應用，其特徵是作為對於人乳腺癌細胞株MCF-7具有細胞毒活性的抗腫瘤藥物的有效成份。9、權利要求1所述的以通式1-1表示的化合物的應用，其特徵是作為對於對阿黴素耐藥的人乳腺癌細胞株MCF-7/Adr具有細胞毒活性的抗腫瘤藥物的有效成份。10、權利要求1所述的以通式I表示的化合物的應用，其特徵是作為對於人鼻咽癌細胞CNE1具有細胞毒活性的抗腫瘤藥物的有效成份。11、權利要求1所述的以通式I表示的化合物的應用，其特徵是作為對於人H3CSZ、N"、CH3D、NT、CH:I隱2.OH'CH..OHCH3鼻咽癌細胞CNE2具有細胞毒活性的抗腫瘤藥物的有效成份。12、權利要求1所述的以通式I-1表示的化合物的應用，其特徵是作為對於人鼻咽癌細胞6-10B具有細胞毒活性的抗腫瘤藥物的有效成份。13、權利要求1所述的以通式1-1表示的化合物的應用，其特徵是作為對於人鼻咽癌細胞H0NE1具有細胞毒活性的抗腫瘤藥物的有效成份。14、權利要求1所述的以通式I-1表示的化合物的應用，其特徵是作為對於人鼻咽癌細胞SUNE1具有細胞毒活性的抗腫瘤藥物的有效成份。15、權利要求1所述的以通式1-1表示的化合物的應用，其特徵是作為對於人肺癌細胞H460具有細胞毒活性的抗腫瘤藥物的有效成份。16、權利要求1所述的以通式I-1表示的化合物的應用，其特徵是作為對於人肺癌細胞Calu-3具有細胞毒活性的抗腫瘤藥物的有效成份。17、權利要求1所述的以通式1-1表示的化合物的應用，其特徵是作為對於人白血病細胞HL-60具有細胞毒活性的抗腫瘤藥物的有效成份。全文摘要通式為I的具有抗腫瘤活性的3，7，8-多取代吡啶並[4，3-d]嘧啶衍生物，式中X表示CN，CONH2；Y表示甲硫基，甲碸基，C1-C3的烷氨基；R表示C1-C6的烷基，雜環基為吡啶、噻吩或呋喃的雜環取代C1-C2烷基，苯基C1-C3烷基或取代苯基C1-C3烷基，苯基或取代苯基；所涉及的苯環上的取代基主要為滷素、C1-C3的烷基或烷氧基，取代基在苯環任一位置上的單取代或多取代，在苯環上的取代基相同或不相同。該化合物對人口腔底癌細胞KB、對長春新鹼耐藥的人口腔底癌細胞KBv200、人乳腺癌細胞株MCF-7、對阿黴素耐藥的人乳腺癌細胞株MCF-7/Adr、人鼻咽癌細胞株6-10B、CNE1、CNE2、HONE1、SUNE1；人肺癌細胞株H460、Calu-3；人白血病細胞株HL-60等多種腫瘤細胞具有顯著的抑制作用，可用作抗腫瘤藥劑的有效成分。文檔編號C07D471/04GK101619063SQ200910062289公開日2010年1月6日申請日期2009年6月2日優先權日2009年6月2日發明者梁永鉅,符立梧,莫文妍,賀紅武申請人:華中師範大學;中山大學腫瘤防治中心