從西藏紅豆杉提取紫杉醇的方法
2023-12-08 18:03:21 2
專利名稱：：從西藏紅豆杉提取紫杉醇的方法
技術領域：
：本發明涉及一種從西藏紅豆杉葉或枝葉中提取紫杉醇的方法，特別是一種從西藏紅豆杉葉或枝葉中提取紫杉醇粗產品的方法。紫杉醇是目前世界上發現的最有效的抗癌物質之一。國外人工合成紫杉醇的價格是從天然提取的數百倍，目前國內外主要是從紅豆杉屬植物中提取及組織培養來獲得紫杉醇。在天然提取的方法中，關鍵是提取分離方法，但由於紫杉醇在植物中化學性質不穩定，在植物中含量低，因此較中草藥成分的提取分離難度大。據報導，我國主要有紅豆杉屬紅豆杉4個種一個變種，它們是西藏紅豆杉(TasuswallichiannZucc)，雲南紅豆杉(T、yumaneusischengetL.k.Fu)紅豆杉(T.chinensis(Pilger)(ehd)，東北紅豆杉(T.cuspidataSiehetzucc)和南方紅豆杉(美麗紅豆杉)(T.cbinensisvarmairer(Lemeeetlevl)chengetL.K.Fu)。上述種屬珍貴植物，為了不破壞成樹，保護資源，一般都是從葉或枝葉中提取，但枝葉中紫杉醇含量比樹皮低。已有的從紅豆杉莖葉中提取紫杉醇的方法是粉碎，溶劑浸提，浸出液濃縮得深綠色膏狀物，溶劑提取，矽膠柱層析後得粗產品。再經重結晶純化和柱層析分離獲紫杉醇。上述方法中，在柱層分離時，至少要1-2個柱分離用梯度洗脫，梯度洗脫所用溶劑量較大，而樣品被分離成分含量越低，分離也麻煩，在柱分離的每個流分均要用薄層層析監測成分後，待合併再分離。因此，有必要提高過柱前被分離成分含量，減少過柱次數，提高過柱質量。另外，用已有的提取方法所獲得的紫杉醇總量較低。本發明目的是提供一種從西藏紅豆杉提取紫杉醇粗產品的方法，該方法工藝簡單，操作方便，粗產品的得率高。為達到上述目的，本發明採用以下技術方案，提取紫杉醇粗產品的方法包括原料粉粹，滲浸，減壓濃縮，提取，所述的減壓濃縮得到的深綠色浸膏經水稀釋後以石灰水調PH值到7.5-8.0，沉澱過濾後，濾液以溶劑提取，減壓濃縮乾燥得到含紫杉醇幹膏。上述稀釋用水的量與浸膏量比為0.5-1.5∶1，最好控制在1∶1(體積比)，所述的提取用溶劑可以是混合多氯代烷、氯仿。以下結合流程框圖和實施例對本發明作詳細說明圖1本發明流程框1中，以紅豆杉的莖皮或葉為原料，原料經粉碎1得粗粉，粗粉經滲浸2，滲浸採用混合溶劑，可採用95％乙醇與氯仿的混合液，滲浸液經減壓濃縮3得到深綠色浸膏，加水稀釋後加石灰水調PH值到7.5-8.0，經沉澱過濾4，並洗滌沉澱至無色，以氯仿提取5，經減壓濃縮、乾燥6，得到含紫杉醇幹膏。實施例1取西藏紅豆杉幹葉5kg，粉碎，用95％乙醇與氯仿(85∶15)滲浸，滲浸液重量為樣品重量的5倍，減壓濃縮得深綠色濃滲液，加水約1倍量(體積/體積)，加石灰水調PH值到7.5-8.0，待沉澱後，過濾，洗滌沉澱至無色，氯仿提取，減壓濃縮、乾燥，得100g淺黃綠色幹膏，HPLC(高效液相色譜儀)測定含紫杉醇1.6％。含10-去乙醯巴卡丁III28％。實施例2取西藏紅豆杉莖皮，採用實施例1的方法，製得紫杉醇幹膏。HPLC測定紫杉醇含量3.3％。實施例1與實施例2提取紫杉醇結果比較見表1表1本發明優點用簡單的沉澱除雜質方法事先除去大部分雜質，提高過柱前被分離成分的含量，減少過柱次數，也不受過柱分離量的限制。經試驗此步沉澱可除去約80％的雜質，而紫杉醇及相關成分如巴卡丁III(baccatinIII)、10-去乙醯巴卡丁III(10-deacetlybaccatinIII)等不受影響，本工藝簡單方便，而且紫杉醇粗品中的紫杉醇含量較其他方法高，例如可達1.6％(以幹葉原料)，莖皮原料其紫杉醇含量3.3％。權利要求1.一種從西藏紅豆杉提取紫杉醇的方法，它包括原料粉碎、滲浸、減壓濃縮提取，其特徵在於由減壓濃縮得到的深綠色浸膏經水稀釋後以石灰水調PH值至7.5-8.0，沉澱、過濾，濾液以溶劑提取，減壓濃縮乾燥得到含紫杉醇幹膏。2.根據權利要求1所述的從西藏紅豆杉提取紫杉醇的方法，其特徵在於所述深綠色浸膏以水稀釋時，加水量∶浸膏量＝0.5-1.5∶1(體積比)。3.根據權利要求1所述的從西藏紅豆杉提取紫杉醇的方法，其特徵在於以水稀釋時，加水量∶浸膏量＝1∶1。4.根據權利要求1所述的從西藏紅豆杉提取紫杉醇的方法，其特徵在於所述濾液的提取溶劑為氯仿。全文摘要一種從西藏紅豆杉提取紫杉醇的方法,特別是提取紫杉醇粗產品的方法,它包括:原料粉碎、滲浸、減壓濃縮、提取,其中,經減壓濃縮得到的深綠色浸膏經水稀釋後,以石灰水調pH值7.5—8.0,沉澱過濾,濾液以溶劑提取,減壓濃縮乾燥得到含紫杉醇幹膏(粗品)。本方法以簡單沉澱去除雜質80%,而紫杉醇及相關成分不受影響,提高過柱前被分離成分的含量和過柱質量,減少過柱次數,粗產品中紫杉醇含量高。文檔編號C07D305/00GK1182740SQ96120678公開日1998年5月27日申請日期1996年11月19日優先權日1996年11月19日發明者土登申請人:西藏自治區衛生廳