一種簡便篩選或鑑定抗甲咪唑煙酸水稻的方法與流程

2023-05-30 15:03:01

本發明涉及水稻育種領域，具體涉及一種簡便篩選或鑑定抗甲咪唑煙酸水稻的方法。

背景技術：

水稻是全球半數以上人口賴以生存的主要糧食作物，對人類生活和糧食安全具有重要意義。我國種植水稻歷史悠久，地域廣闊，是世界稻米主產國之一。每年種植面積約3500萬hm2，約佔糧食作物播種面積的29％。在我國所有稻作區的稻田，歷來都有大量雜草發生。據統計，全國稻田雜草有200餘種，其中發生普遍、為害嚴重、最常見的雜草約有40種(分布於各稻區為10～20種)。據調查，全國稻田草害在中等以上(2～5級)的面積達1546.7萬hm2，其中嚴重為害(4～5級)面積為380萬hm2，分別佔水稻種植面積的46.8％和11.5％，損失糧食200多億kg。農田雜草與作物爭奪養料、水分、陽光和空間，妨礙田間通風透光，增加局部氣候溫度，有些則是病蟲中間寄主，促進病蟲害發生；寄生性雜草直接從作物體內吸收養分，從而降低作物的產量和品質。此外，有的雜草的種子或花粉含有毒素，能使人畜中毒。近十幾年來，雜草稻成為水稻生產中一種新型草害，是雜交水稻的後代或者親緣關係較遠的水稻雜交後代經過自然和人工選擇所形成，具有早發芽、早分櫱、早抽穗、早成熟、易落粒、米質差、休眠期彈性大、繁衍速度快以及難以拔除等特點。目前，雜草稻已經成為全球性草害，在一些國家，雜草稻造成水稻減產10-15％。在我國，水稻播種面積中雜草稻實際發生面積約佔20％，產量平均損失在10％左右，年損失超過100億元，被稱為水稻殺手。因此，防除雜草稻成為目前水稻生產中亟待解決的問題，對於提高水稻的產量和品質有重要的意義。

對稻田雜草和雜草稻的防除主要有手工拔草、農具除草及化學除草。手工拔草和農具除草耗力多、工效低，不能大面積及時防除。因此，利用除草劑防除田間雜草和雜草稻是一條最有效途徑。乙醯乳酸合成酶(als)是支鏈胺基酸合成途徑中的首要關鍵酶，以其作為靶標的除草劑分為：磺醯脲類、咪唑啉酮類、嘧啶水楊酸類和磺醯胺類。這類除草劑具有高活性、殺草廣譜和選擇性強等特點，是目前防治稻田雜草、再生稻、雜草稻較理想的除草劑。甲咪唑煙酸是一種強內吸性咪唑啉酮類除草劑，不僅能很好地殺死雜草地上部分植株，而且對地下部的根及地下莖也有較強的防除效果。

目前，水稻除草劑的抗性篩選或鑑定主要是依靠田間試驗進行，即在田間對水稻進行播種，一定時期後進行除草劑的噴施。此方法費時費力，而且噴施的濃度及均勻度不易控制，從而影響了結果的準確性。而採用分子標記的方法成本較高，且技術環節多。因此一種快速高效準確的抗除草劑篩選或鑑定方法就顯得尤為重要。

技術實現要素：

為解決上述問題，本發明提供了一種簡便篩選或鑑定抗甲咪唑煙酸水稻的方法，僅用浸種、穴盤播種、數據統計等步驟，即可篩選或鑑定出抗性品種。

為實現上述目的，本發明採取的技術方案為：

一種簡便篩選或鑑定抗甲咪唑煙酸水稻的方法，其特徵在於，包括如下步驟：

s1、選購除草劑百壟通，用水稀釋至甲咪唑煙酸濃度為0.1ml/l，將供試品種幹籽粒裝入吸水性硫酸紙袋或紗網袋，浸入稀釋液，48h後取出；

s2、衝洗後用清水浸種，24h後取出瀝乾水分，均勻播種於平鋪有1cm水稻育苗基質的塑料穴盤中，覆蓋1cm相同基質後澆透水保溼，保持室溫22-30℃，5-7天後進行觀察統計，具體的，調查供試品種的發芽率，即發芽數佔測試種子總數的百分比；抗甲咪唑煙酸的水稻品種，其發芽率不受浸種液的影響，正常情況下應該在85％以上；而不抗甲咪唑煙酸的品種，其種子中的胚芽受浸種液的抑制，發芽率低於10％

其中，所述塑料穴盤的尺寸為30cm×60cm。

本發明具有以下有益效果：

本發明可以簡便快捷高效準確的篩選或鑑定出抗除草劑甲咪唑煙酸的水稻，為抗除草劑甲咪唑煙酸的水稻育種提供很好的技術手段。

具體實施方式

為了使本發明的目的及優點更加清楚明白，以下結合實施例對本發明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，並不用於限定本發明。

實施例

供試品種為2個不抗除草劑的粳稻品種(淮稻5號、淮稻119)和三個抗甲咪唑煙酸新種質(t1、t2、t3)。每個品種挑選飽滿稻種2份，每份100粒，裝入白色硫酸紙袋，用訂書機或回形針封口。一份浸入除草劑甲咪唑煙酸稀釋液，另一份用清水浸種作對照。待播種出芽後統計發芽率(表1)，結果表明，用甲咪唑煙酸稀釋液浸種後，t1、t2、t3三份種質的發芽率在85％以上，與清水浸種(ck)後發芽率沒有差異；淮稻5號和淮稻119兩個品種用甲咪唑煙酸浸種後發芽率分別為2％和0％，其對照發芽率分別達到96％和95％。表明抗除草劑品種未受甲咪唑煙酸影響，而淮稻5號和淮稻119受除草劑浸種液影響巨大，其發芽力被完全抑制。此方法用於篩選和鑑定抗甲咪唑煙酸水稻品種，具有安全快捷準確高效的優點，可以用於抗除草劑品種的選育和種植，具有廣闊的市場前景和應用價值。

表1供試品種用除草劑和清水浸種後的發芽率(％)

以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對於本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以作出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護範圍。