特利加壓素的製備方法
2023-05-28 19:26:46
專利名稱：特利加壓素的製備方法
技術領域：
本發明屬於多肽藥物製備方法技術領域，特別涉及特利加壓素的製備方法。
背景技術：
特利加壓素具有以下的結構
權利要求
1.特利加壓素的製備方法，包括固相多肽合成法製備特利加壓素線性肽樹脂、特利加壓素線性肽樹脂酸解得到特利加壓素線性肽粗品、特利加壓素線性肽粗品氧化後得到特利加壓素粗品、特利加壓素粗品純化得到特利加壓素純品，其中固相多肽合成法製備特利加壓素線性肽樹脂的方法為氨基樹脂通過固相偶聯合成法依次接入下列序列中對應片段的 Fmoc-保護胺基酸，製備特利加壓素線性肽樹脂；R1-X-Cys (R2) -Tyr (tBu) -Phe-Gln (R3) -Asn (R3) -Cys (R2) -Pro-Lys (Boc) -Gly-樹脂其中，X 片段為 Gly-Gly-Gly, R1 為 R4 或 H，& 為 Trt 或 Acm，R3 為 Trt 或 H，R4 為 Fmoc 或 Boc ；接入X片段時僅用1次固相偶聯合成反應，接入X時對應的Fmoc-保護胺基酸為 Fmoc-Gly-Gly-Gly-OHo
2.根據權利要求1所述的特利加壓素的製備方法，其特徵在於所述氨基樹脂取代值為 0. 2 1. 2mmol/g 樹脂。
3.根據權利要求1或2所述的特利加壓素的製備方法，其特徵在於所述氨基樹脂選自Rink Amide AM樹脂、Rink Amide樹脂、Rink MBHA樹脂和Sieber樹脂中的一種。
4.根據權利要求1或2所述的特利加壓素的製備方法，其特徵在於所述Fmoc-保護胺基酸種類分別為鞏-X-OH、Fmoc-Cys (R2) -OH、Fmoc-Asn (R3) -OH、Fmoc-Gln (R3) -0H、 Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH>Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH ；其中，X 為 Gly-Gly-Gly，R2 為 Trt 或 Acm，R3 為 Trt 或 H，R4 為 Fmoc 或 Boc。
5.根據權利要求4所述的特利加壓素的製備方法，其特徵在於=Fmoc-保護胺基酸用量為所投料樹脂總摩爾數的1. 2 6倍。
6.根據權利要求1或2所述的特利加壓素的製備方法，其特徵在於固相偶聯合成法具體為前一步反應得到的Fmoc-保護胺基酸-樹脂脫去保護Fmoc後再與下一個保護胺基酸偶聯反應；脫去Fmoc保護的試劑為哌啶/N，N-二甲基甲醯胺溶液，哌啶體積比為10 30%。
7.根據權利要求6所述的特利加壓素的製備方法，其特徵在於固相偶聯合成法需添加縮合試劑和活化試劑，縮合試劑選自N，N-二異丙基碳二亞胺、N，N-二環己基碳二亞胺， 六氟磷酸苯並三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷、2- (7-氮雜-IH-苯並三氮唑-1-基)-1，1， 3，3-四甲基脲六氟磷酸酯、苯並三氮唑-N，N，N' ,N'-四甲基脲六氟磷酸鹽或O-苯並三氮唑-N，N，N' ,N'-四甲基脲四氟硼酸酯；活化試劑選自1-羥基苯並三唑、N-羥基-7-氮雜苯並三氮唑。
8.根據權利要求6所述的特利加壓素的製備方法，其特徵在於縮合試劑的摩爾用量為氨基樹脂中氨基總摩爾數的1. 2 6倍；活化試劑用量為氨基樹脂中氨基總摩爾數的 1. 2 6倍。
9.根據權利要求1 8任一項所述的特利加壓素的製備方法，其特徵在於特利加壓素線性肽樹脂經酸解同時脫去樹脂及側鏈保護基得到特利加壓素線性肽粗品H-X-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-LyS-Gly-NH2其中，X 為 Gly-Gly-Gly。酸解劑為三氟醋酸、1，2-乙二硫醇和水混合溶劑，混合溶劑的配比為三氟醋酸的體積比為80 95%，1，2-乙二硫醇的體積比為1 10%，餘量為水；酸解劑用量為每克肽樹脂4 15ml酸解劑。
10.根據權利要求1 8任一項所述的特利加壓素的製備方法，其特徵在於特利加壓素線性肽粗品氧化後得到特利加壓素粗品時，特利加壓素線性肽先用醋酸溶解，過濾後用氧化劑氧化環化，氧化劑為碘、H2O2或DMSO中的至少一種。
全文摘要
本發明屬於多肽藥物製備方法技術領域，特別涉及特利加壓素的製備方法。本發明方法使用了保護胺基酸片段Gly-Gly-Gly為原料，避免了雜質的產生。本發明特方法包括固相多肽法制特利加壓素線性肽樹脂、酸解得到特利加壓素線性肽粗品、氧化後得到特利加壓素粗品、純化得特利加壓素純品，其中固相多肽法為氨基樹脂通過固相偶聯合成法依次接入下列序列中對應片段的Fmoc-保護胺基酸，製備特利加壓素線性肽樹脂;R1-X-Cys(R2)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(R3)-Asn(R3)-Cys(R2)-Pro-Lys(Boc)-Gly-樹脂其中，X片段為Gly-Gly-Gly，R1為R4或H，R2為Trt或Acm，R3為Trt或H，R4為Fmoc或Boc；接入X片段時僅用1次固相偶聯合成反應。本發明使用了新原料，提高了產品收率，使生產周期大大縮短。
文檔編號C07K7/16GK102408471SQ20111017115
公開日2012年4月11日 申請日期2011年6月23日 優先權日2011年6月23日
發明者文永均, 王曉莉, 郭德文 申請人:成都聖諾科技發展有限公司