免疫核糖核酸組合物凍乾粉針的製作方法

2023-05-28 23:55:01 3

免疫核糖核酸組合物凍乾粉針的製作方法
【專利摘要】本發明提供一種免疫核糖核酸組合物凍乾粉針，涉及藥品及藥品製造【技術領域】，包含以下重量份原料成分：免疫核糖核酸100g～500g，殼聚糖納米粒20g～100g，10mmol/L的硫酸鈉1000mL，海藻糖100g～500g，注射用水1000mL。本發明的優點是：（1）此發明為臨床開發的藥物新製劑；（2）靶向製劑，延長藥物吸收的有效時間，降低給藥量；（3）見效快，在特定吸收部位藥物濃度高，提高生物利用度和療效；（4）毒副作用小、使用安全、療效確切、質量可控；(5)劑量準確、使用方便。
【專利說明】免疫核糖核酸組合物凍乾粉針
【技術領域】:
[0001]本發明涉及藥品及藥品製造【技術領域】，尤其涉及一種免疫核糖核酸組合物凍乾粉針。
【背景技術】:
[0002]免疫核糖核酸，又名免疫增強劑，主要用於惡性腫瘤如腎癌、肺癌、消化道癌及神經母細胞瘤和骨肉瘤等的輔助治療，也曾試用於慢性B型肝炎和流行性乙腦，可使部分細胞免疫功能低下的病人恢復正常，除直接可用於臨床藥物外，核糖核酸還是其它許多藥物的前體，經過加工、修飾、改造可直接作用於靶細胞，根據鹼基互補配對原則，能與靶細胞的RNA或DNA雜交。與DNA結合可抑制DNA的複製，達到阻止靶細胞增殖的目的；與mRNA相結合，可阻斷蛋白質的合成，幹擾基因的正常表達，從基因水平上控制腫瘤或病毒的繁殖與擴散，達到治療疾病的目的。
[0003]免疫核糖核酸(Immune RNA，iRNA)是動物體內一種具有轉移免疫性功能的生物大分子，是一種重要的免疫觸發劑或免疫調節劑。1967年Alexander通過用肉瘤免疫綿羊製取的淋巴細胞核糖核酸對大鼠進行實驗，發現核糖核酸能抑制大鼠同一腫瘤的生長，甚至消除，首次證實了免疫核糖核酸能傳遞免疫信息，1982年林單坤等人把從免疫羊肝中提取得到的免疫核糖核酸做成製劑注入體內，發現對腫瘤與癌症有明顯的療效並能提高機體的免疫功能，而且未出現不良的副作用；作為臨床藥物，只要能解決好其在體內的運載及透膜能力，藥物在細胞內的穩定性、親和力等問題，其應用前景十分誘人。
[0004]殼聚糖又稱可溶性甲殼素、甲殼胺，由蟹、蝦等水產加工廢棄物提取精製甲殼素後經過脫乙醯基而製取，是天然多糖中唯一的鹼性多糖，具有許多獨特的物理化學特性和生物功能。殼聚糖無毒、來源豐富、有良好生物相容性及生物可降解性。近年來，隨著新型藥物給藥系統的發展，殼聚糖作為一種新輔料取得了良好的效果，尤其是在藥物控釋、緩釋、靶向智能釋藥中的應用受到廣泛關注。殼聚糖在酸性條件下膨脹形成凝膠，結構中游離氨基結合氫離子成為帶正電荷的多聚物，能成為核酸分子的載體材料，與帶有負電荷的RNA分子形成納米複合物，目前文獻報導的殼聚糖載體藥物粒徑均較大，藥物包封率和含量均較低。

【發明內容】
:
[0005]本發明經過試驗摸索，研製成可以靶向給藥、易於攜帶和運輸、臨床使用方便的免疫核糖核酸組合物的凍幹乳劑，降低臨床給藥劑量，保證了臨床用藥的安全性。
[0006]本發明所述的免疫核糖核酸組合物為凍幹乳劑，包括以下組分:免疫核糖核酸，殼聚糖納米粒、海藻糖，其中海藻糖用於凍幹時保護殼聚糖納米粒，pH調節劑為氫氧化鈉，免疫核糖核酸與殼聚糖的比重為1:0.2~1:0.5。
[0007]一種免疫核糖核酸組合物凍乾粉針，其特徵在於，包含以下重量份原料成分:
[0008]免疫核糖核酸l0g~500g
殼聚糖納米粒20g~100g
10mmol/L 的硫酸鈉1000mL
海藻糖K)g~50g
注射用水1000mU
[0009]一種免疫核糖核酸組合物凍乾粉針的製備方法，其特徵在於，包括如下步驟:
[0010](一)殼聚糖納米粒的製備:
[0011](I)將殼聚糖粉末粉碎後經過100目篩網過篩；
[0012](2)稱取上述過100目篩網的殼聚糖粉末100g，室溫下加入0.lmol/L乙酸溶液40L，磁力攪拌，使殼聚糖完全溶解，得殼聚糖乙酸溶液；
[0013](3 )用 l%Na0H 調節 ρΗ=5.0 ；
[0014](4)攪拌下加入1%三聚磷酸鈉1667g至殼聚糖乙酸溶液中，得膠體溶液，使殼聚糖/三聚磷酸鈉質量比為6: 1，通過陰陽離子的靜電作用交聯成納米粒；
[0015](5)將上述膠體溶液4°C高速離心30min，收集下層沉澱，用純水洗滌3次後，冷卻並置減壓乾燥箱中乾燥得到殼聚糖納米粒，水分低於2%，粒徑< lOOnm，zeta電位約為15mv ；
[0016](二)免疫核糖核酸組合物凍乾粉針的製備:
[0017](I)依照上述處方比例稱取免疫核糖核酸100g~500g，緩慢加入1000mL的50 V~70 °C注射用水，60 V條件下攪拌至溶解並用醋酸調節pH至4~6，然後加入0.05%~
0.15%的活性炭攪拌30min，濾除活性炭，藥液再經0.45 μ m和0.22 μ m微孔濾膜過濾；
[0018](2)將配製的10mmol/L的硫酸鈉溶液1000mL,加入殼聚糖納米粒20g~100g和海藻糖100g~500g,保溫20min,混合兩組溶液,繼續攪拌20min ；
[0019](3)按每瓶2mL裝入5mL西林瓶中，半壓塞後送入冷凍乾燥機中，降溫至-40°C ±2°C，保溫2h~4h，然後抽真空至冷凍乾燥箱壓強低於20Pa，然後緩慢升溫至-25°C ±2°C升華乾燥，保溫6~8h，升溫至25°C~30°C，保溫3h，冷凍乾燥結束，出箱。
[0020]本發明的有益效果為:
[0021]本發明提供一種粒徑極小的殼聚糖納米粒與免疫核糖核酸的組合物凍乾粉針，殼聚糖納米粒是一種粒徑小於IOOnm的微粒，以它作為藥物載體粒子，連接免疫核糖核酸，從而實現癌細胞特異性識別，進行靶向和緩控釋作用。本發明的優點是:(1)此發明為臨床開發的藥物新製劑；(2)靶向製劑，延長藥物吸收的有效時間，降低給藥量；(3)見效快，在特定吸收部位藥物濃度高，提高生物利用度和療效；(4)毒副作用小、使用安全、療效確切、質量可控；(5)劑量準確、使用方便。
【具體實施方式】:
[0022]下面結合實施例對本發明作詳細說明，但本發明的範圍非限於這些實施例的範圍。
[0023]實施例1免疫核糖核酸組合物凍乾粉針的製備(以1000支)[0024]1.處方
[0025]
免疫核糖核酸100g
殼聚糖納米粒20g
硫酸鈉適量
海藻糖100g
注射川水2000mL
[0026]2.製備工藝
[0027](I)依照上述處方比例稱取免疫核糖核酸100g，緩慢加入1000mL的60°C注射用水，邊加入邊攪拌至溶解並用醋酸調節pH至5.5，然後加入0.05%的活性炭攪拌30min，濾除活性炭，藥液再經0.45 μ m和0.22 μ m微孔濾膜過濾；
[0028](2)採用同樣注射用水配製10mmol/L的硫酸鈉溶液1000mL,加入殼聚糖納米粒20g和海藻糖100g,保溫20min,混合兩組溶液,繼續攪拌20min。
[0029](3)按每瓶2mL裝入5mL西林瓶中，半壓塞後送入冷凍乾燥機中，降溫至-40°C ±2°C，保溫3h，然後抽真空至冷凍乾燥箱壓強低於20Pa，然後緩慢升溫至-25°C ±2°C升華乾燥，保溫6h，升溫至25°C~30°C，`保溫3h，冷凍乾燥結束，出箱。
[0030]實施例2免疫核糖核酸組合物凍乾粉針的製備(以1000支)
[0031]1.處方
[0032]
免疫核糖核酸300g
殼聚糖納米粒60g
硫酸鈉適量
海藻糖300g
注射川水200mL
[0033]2.製備工藝
[0034](I)依照上述處方比例稱取免疫核糖核酸300g，緩慢加入1000mL的60°C注射用水，邊加入邊攪拌至溶解並用醋酸調節pH至5.5，然後加入0.05%的活性炭攪拌30min，濾除活性炭，藥液再經0.45 μ m和0.22 μ m微孔濾膜過濾；
[0035](2)採用同樣注射用水配製10mmol/L的硫酸鈉溶液1000mL,加入殼聚糖納米粒60g和海藻糖300g,保溫20min,混合兩組溶液,繼續攪拌20min。
[0036](3)按每瓶2mL裝入5mL西林瓶中，半壓塞後送入冷凍乾燥機中，降溫至-40°C ±2°C，保溫3h，然後抽真空至冷凍乾燥箱壓強低於20Pa，然後緩慢升溫至-25°C ±2°C升華乾燥，保溫7h，升溫至25°C~30°C，保溫3h，冷凍乾燥結束，出箱
[0037]實施例3免疫核糖核酸組合物凍乾粉針的製備(以1000支)
[0038]1.處方
[0039]
【權利要求】
1.一種免疫核糖核酸組合物凍乾粉針，其特徵在於，包含以下重量份原料成分:免疫核糖核酸100g~500g殼聚糖納米粒20g~100g.10mmol/L 的硫酸鈉1000mL海藻糖100g~500g注射川水lOOOmL.
2.—種權利要求1所述免疫核糖核酸組合物凍乾粉針的製備方法，其特徵在於，包括如下步驟: (一)殼聚糖納米粒的製備: (1)將殼聚糖粉末粉碎後經過100目篩網過篩； (2)稱取上述過100目篩網的殼聚糖粉末100g，室溫下加入0.lmol/L乙酸溶液40L，磁力攪拌，使殼聚糖完全溶解，得殼聚糖乙酸溶液；
(3)用l%NaOH 調節 pH=5.0 ； (4)攪拌下加入1%三聚磷酸鈉1667g至殼聚糖乙酸溶液中，得膠體溶液，使殼聚糖/三聚磷酸鈉質量比為6:1， 通過陰陽離子的靜電作用交聯成納米粒； (5)將上述膠體溶液4°C高速離心30min，收集下層沉澱，用純水洗滌3次後，冷卻並置減壓乾燥箱中乾燥得到殼聚糖納米粒，水分低於2%,粒徑< lOOnm, zeta電位約為15mv ； (二)免疫核糖核酸組合物凍乾粉針的製備: (1)依照上述處方比例稱取免疫核糖核酸100g~500g，緩慢加入1000mL的50°C~70°C注射用水，60°C條件下攪拌至溶解並用醋酸調節pH至4~6，然後加入0.05%~0.15%的活性炭攪拌30min，濾除活性炭，藥液再經0.45 μ m和0.22 μ m微孔濾膜過濾； (2)將配製的10mmol/L的硫酸鈉溶液1000mL,加入殼聚糖納米粒20g~100g和海藻糖100g~500g,保溫20min,混合兩組溶液,繼續攪拌20min ； (3)按每瓶2mL裝入5mL西林瓶中，半壓塞後送入冷凍乾燥機中，降溫至_40°C±2°C，保溫2h~4h，然後抽真空至冷凍乾燥箱壓強低於20Pa，然後緩慢升溫至-25V ±2°C升華乾燥，保溫6~8h，升溫至25°C~30°C，保溫3h，冷凍乾燥結束，出箱。
【文檔編號】A61K9/19GK103536553SQ201310481656
【公開日】2014年1月29日 申請日期:2013年10月15日 優先權日:2013年10月15日
【發明者】汪六一, 汪金燦, 郝結兵 申請人:海南衛康製藥(潛山)有限公司