鹽酸二甲雙胍PLGA微球及其製備方法和應用與流程

2023-05-27 12:41:38 1

本發明涉及一種鹽酸二甲雙胍PLGA微球及其製備方法和應用。
背景技術：
：微球製劑作為一種優良的緩控釋製劑，不僅能夠有效延長藥物在體內的半衰期，還能保護藥物，減少降解，能有效提高病人的順應性。隨著材料科學和高分子科學的快速發展，作為載體的高分子聚合物材料也不再局限於傳統的澱粉、殼聚糖、聚乳酸、明膠等。同時，在傳統的高分子聚合物材料上加以化學修飾，增加製劑的靶向性，提高生物利用度。PLGA因其生物相容性好，降解速度可控等優點，是藥物製劑領域的優良輔料。自1986年第一個微球製劑曲普瑞林(triptorelin)PLGA微球上市以來，PLGA微球製劑一直是研究熱門。多年以來，多肽、蛋白類藥物的PLGA微球製劑的製備及應用已趨於成熟，但對於小分子高水溶性的藥物，PLGA微球的製備一直以來難以克服包封率低的缺點。鹽酸二甲雙胍是一種應用於治糖尿病的藥物，目前市場上還未出現鹽酸二甲雙胍PLGA微球。技術實現要素：鑑於以上所述現有技術的缺點，本發明的目的在於提供一種鹽酸二甲雙胍PLGA微球及其製備方法和應用，用於解決現有技術的不足。為實現上述目的及其他相關目的，本發明提供一種鹽酸二甲雙胍PLGA微球，所述鹽酸二甲雙胍PLGA微球的載體包括PLGA。所述PLGA是指聚乳酸-羥基乙酸共聚物。優選地，所述鹽酸二甲雙胍PLGA微球中鹽酸二甲雙胍和PLGA的質量比例範圍是1：(1～1000)。本發明的另一方面提供了一種鹽酸二甲雙胍PLGA微球的製備方法，所述製備方法至少包括以下步驟：(1)製備鹽酸二甲雙胍混懸液：將PLGA、鹽酸二甲雙胍以及有機溶劑混合、攪拌；(2)製備連續相溶液；(3)製備鹽酸二甲雙胍PLGA微球：將步驟(1)中製備的鹽酸二甲雙胍混懸液加入步驟(2)製備的連續相溶液，攪拌，過濾，洗滌去除有機溶劑，即得。所述步驟(3)中連續相溶液加入的量根據加入的鹽酸二甲雙胍混懸液的量而調節。所述步驟(3)中去除有機溶劑，本領域的技術人員可以根據現有技術獲得，也可以採用本發明所述的方法。優選地，所述步驟(1)還包括以下特徵中的任意一種或幾種：(1)所述PLGA的0.5％氯仿溶液(W/V，30℃)特性粘度範圍是0.1dl/g～2.0dl/g；(2)所述PLGA中乳酸和羥基乙酸摩爾比例範圍是10：90～90：10；(3)所述PLGA的濃度範圍是10mg/ml～200mg/ml。優選地，所述步驟(1)中攪拌採用的是高剪切乳化分散機攪拌9000～11000rpm下，攪拌15～30秒。優選地，所述步驟(1)中的有機溶劑選自二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、乙腈或乙酸乙酯中的任意一種或幾種。優選地，所述步驟(1)中的鹽酸二甲雙胍和PLGA的質量比例範圍是1：(1～1000)。優選地，所述步驟(2)中連續相溶液包括有機溶劑，所述有機溶劑選選自中性油脂、低級酮或滷代烴中的任意一種或幾種。所述中性油脂可以選自大豆油，玉米油，蓖麻油，亞麻油等。所述低級酮可以選自甲乙酮，丙酮，環己酮等，所述滷代烴可以選自二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷，1-氯丙烷等。優選地，所述連續相溶液還包括表面活性劑，所述步驟(3)：製備鹽酸二甲雙胍PLGA微球：將步驟(1)中製備的鹽酸二甲雙胍混懸液加入步驟(2)製備的連續相溶液，去除有機溶劑和表面活性劑，即得；優選地，所述表面活性劑為非離子表面活性劑，所述非離子表面活性劑可以選自司盤-20，司盤-40，司盤-60，司盤-80等。更優選地所述非離子表面活性劑和所述步驟(2)中有機溶劑的體積比為0.1～20:100。優選地，所述連續相溶液還包括二甲基矽油，所述步驟(3)：製備鹽酸二甲雙胍PLGA微球：將步驟(1)中製備的鹽酸二甲雙胍混懸液加入步驟(2)製備的連續相溶液，去除有機溶劑和二甲基矽油，即得；更優選地，所述矽油和所述步驟(2)有機溶劑的體積比為75～85:100。本發明的另一方面提供了所述的鹽酸二甲雙胍PLGA微球用於製備治療糖尿病藥物的用途。如上所述，本發明的鹽酸二甲雙胍PLGA微球及其製備方法，具有以下有益效果：克服了常規微球製備方法的缺點，涉及設備裝置簡單常見，輔料單一，藥質比範圍廣，包封率高，重複性好，穩定性高，能夠豐富二甲雙胍的給藥方式。附圖說明圖1：實施例1中研磨細鹽酸二甲雙胍圖2：實施例2中鹽酸二甲雙胍PLGA微球掃描電鏡圖具體實施方式以下通過特定的具體實例說明本發明的實施方式，本領域技術人員可由本說明書所揭露的內容輕易地了解本發明的其他優點與功效。本發明還可以通過另外不同的具體實施方式加以實施或應用，本說明書中的各項細節也可以基於不同觀點與應用，在沒有背離本發明的精神下進行各種修飾或改變。須知，下列實施例中未具體註明的工藝設備或裝置均採用本領域內的常規設備或裝置。當實施例給出數值範圍時，應理解，除非本發明另有說明，每個數值範圍的兩個端點以及兩個端點之間任何一個數值均可選用。此外應理解，本發明中提到的一個或多個方法步驟並不排斥在所述組合步驟前後還可以存在其他方法步驟或在這些明確提到的步驟之間還可以插入其他方法步驟，除非另有說明；還應理解，本發明中提到的一個或多個設備/裝置之間的組合連接關係並不排斥在所述組合設備/裝置前後還可以存在其他設備/裝置或在這些明確提到的兩個設備/裝置之間還可以插入其他設備/裝置，除非另有說明。而且，除非另有說明，各方法步驟的編號僅為鑑別各方法步驟的便利工具，而非為限制各方法步驟的排列次序或限定本發明可實施的範圍，其相對關係的改變或調整，在無實質變更技術內容的情況下，當亦視為本發明可實施的範疇。本發明中，縮寫符號表示如下：縮寫名稱中文全稱PLGA聚乳酸-羥基乙酸共聚物HPLC高效液相色譜儀DMSO二甲基亞實施例11.鹽酸二甲雙胍微球的製備與獲得(1)製備鹽酸二甲雙胍混懸液：稱取50mgPLGA，加入1ml混合溶劑(二氯甲烷與等量的乙腈)溶解，加入研磨細的鹽酸二甲雙胍(如圖1)10mg，使用高剪切乳化分散機11000rpm下劇烈攪拌15s，得鹽酸二甲雙胍混懸液；所述PLGA為0.5％氯仿溶液(W/V，30℃)特性粘度範圍是0.1dl/g，乳酸和羥基乙酸摩爾比例10:90，PLGA的濃度範圍是10mg/ml；(2)製備連續相溶液：取0.05～1g司盤-80，例如0.2g、5g大豆油，混勻，得連續相溶液；(3)製備鹽酸二甲雙胍PLGA微球：將所得鹽酸二甲雙胍混懸液，在高剪切乳化分散機1000rpm劇烈攪拌下加入所得連續相溶液中，轉移入磁力攪拌器中，減壓攪拌，過濾，沉澱用400ml正己烷洗滌，除去表面活性劑和有機溶劑，得鹽酸二甲雙胍PLGA微球。2.粒徑測定儀器：FEICOMPANYSirion200SEM方法：取乾燥粉末掃描電鏡拍照。3.包封率測定(1)具體測定方法如下：色譜柱：AgilentZorbaxSB-C18，5μm，4.6×150mm流動相：10mM十二烷基硫酸鈉和10mM磷酸二氫鈉：甲醇：異丙醇(40：50：10)流速：1ml/min柱溫：25℃檢測波長：236nm進樣體積：5μl(2)標準曲線製備樣品溶劑的製備：將DMSO與超純水按1：1.5混合，即得。鹽酸二甲雙胍系列梯度溶液的製備：稱取一定量的無定型態鹽酸二甲雙胍，加樣品溶劑溶解並製成濃度為0.001、0.005、0.01、0.02、0.04和0.05mg/mL的溶液。分別取鹽酸二甲雙胍系列對照品溶液進樣分析，以峰面積對濃度作圖，製作標準曲線。(3)微球製劑包封率測定取PLGA微球適量，精密稱定，加適量DMSO溶解，以1.5倍體積超純水稀釋，沉澱PLGA，13,000rpm離心5分鐘，取上清液，0.22μm有機濾膜過濾，按(1)項下高效液相方法進樣分析。(4)結果分析樣品名稱粒徑(μm)包封率(％)132.5482.2228.7580.1336.2285.3由上述分析可知，本發明製備的的粒徑32.50μm，包封率82.5％。該製劑呈規則的圓球形，粒徑分布較均一，包封效果好，重複性高，有進一步放大試驗的潛力。實施例21.鹽酸二甲雙胍微球的製備與獲得(1)製備鹽酸二甲雙胍混懸液：稱取10mgPLGA，加入1ml二氯甲烷溶解，加入研磨細的鹽酸二甲雙胍10mg，使用高剪切乳化分散機10000rpm下劇烈攪拌20s，得鹽酸二甲雙胍混懸液；所述PLGA為0.5％氯仿溶液(W/V，30℃)特性粘度範圍是2.0dl/g，乳酸和羥基乙酸摩爾比例90:10，PLGA的濃度範圍是200mg/ml；(2)製備連續相溶液：取0.75～1.25ml二氯甲烷,例如1ml、5g二甲基矽油，混勻，得連續相溶液；(3)製備鹽酸二甲雙胍PLGA微球：將所得鹽酸二甲雙胍混懸液，在高剪切乳化分散機10000rpm劇烈攪拌下加入所得連續相溶液中，倒入500ml石油醚，攪拌槳4℃攪拌10min，過濾，沉澱用1000ml石油醚洗滌，除去有機溶劑和二甲基矽油，得鹽酸二甲雙胍PLGA微球。2.粒徑測定儀器：FEICOMPANYSirion200SEM方法：取乾燥粉末掃描電鏡拍照。3.包封率測定(1)具體測定方法如下：色譜柱：AgilentZorbaxSB-C18，5μm，4.6×150mm流動相：10mM十二烷基硫酸鈉和10mM磷酸二氫鈉：甲醇：異丙醇(40：50：10)流速：1ml/min柱溫：25℃檢測波長：236nm進樣體積：5μl(2)標準曲線製備樣品溶劑的製備：將DMSO與超純水按1：1.5混合，即得。鹽酸二甲雙胍系列梯度溶液的製備：稱取一定量的無定型態鹽酸二甲雙胍，加樣品溶劑溶解並製成濃度為0.001、0.005、0.01、0.02、0.04和0.05mg/mL的溶液。分別取鹽酸二甲雙胍系列對照品溶液進樣分析，以峰面積對濃度作圖，製作標準曲線。(3)微球製劑包封率測定取2.1項下製備微球適量，精密稱定，加適量DMSO溶解，以1.5倍體積超純水稀釋，沉澱PLGA，13,000rpm離心5分鐘，取上清液，0.22μm有機濾膜過濾，按2.3.1項下高效液相方法進樣分析。(4)結果分析樣品名稱粒徑(μm)包封率(％)174.3496.5259.8291.3383.2393.9由上述分析可知，本發明製備的的粒徑72.46μm，包封率93.9％，該製劑呈規則的圓球形，粒徑分布較均一，包封效果好，重複性高，有進一步放大試驗的潛力。實施例31.鹽酸二甲雙胍微球的製備與獲得(1)製備鹽酸二甲雙胍混懸液：稱取200mgPLGA，加入1ml丙酮溶解，加入研磨細的鹽酸二甲雙胍0.2mg，使用高剪切乳化分散機9000rpm下劇烈攪拌30s，得鹽酸二甲雙胍混懸液；(2)製備連續相溶液：取1ml丙酮、5g二甲基矽油，混勻，得連續相溶液；所述PLGA為0.5％氯仿溶液(W/V，30℃)特性粘度範圍是1.0dl/g，乳酸和羥基乙酸摩爾比例50:50，PLGA的濃度範圍是100mg/ml；(3)製備鹽酸二甲雙胍PLGA微球：將所得鹽酸二甲雙胍混懸液，在高剪切乳化分散機1000rpm劇烈攪拌下加入所得連續相溶液中，倒入500ml石油醚，攪拌槳4℃攪拌10min，過濾，沉澱用1000ml石油醚洗滌，除去有機溶劑和二甲基矽油，得鹽酸二甲雙胍PLGA微球。2.粒徑測定儀器：FEICOMPANYSirion200SEM方法：取乾燥粉末掃描電鏡拍照。3.包封率測定(1)具體測定方法如下：色譜柱：AgilentZorbaxSB-C18，5μm，4.6×150mm流動相：10mM十二烷基硫酸鈉和10mM磷酸二氫鈉：甲醇：異丙醇(40：50：10)流速：1ml/min柱溫：25℃檢測波長：236nm進樣體積：5μl(2)標準曲線製備樣品溶劑的製備：將DMSO與超純水按1：1.5混合，即得。鹽酸二甲雙胍系列梯度溶液的製備：稱取一定量的無定型態鹽酸二甲雙胍，加樣品溶劑溶解並製成濃度為0.001、0.005、0.01、0.02、0.04和0.05mg/mL的溶液。分別取鹽酸二甲雙胍系列對照品溶液進樣分析，以峰面積對濃度作圖，製作標準曲線。(3)微球製劑包封率測定取2.1項下製備微球適量，精密稱定，加適量DMSO溶解，以1.5倍體積超純水稀釋，沉澱PLGA，13,000rpm離心5分鐘，取上清液，0.22μm有機濾膜過濾，按2.3.1項下高效液相方法進樣分析。(4)結果分析樣品名稱粒徑(μm)包封率(％)168.9293.6274.6589.7354.3696.4由上述分析可知，本發明製備的的粒徑65.98μm，包封率93.2％，該製劑呈規則的圓球形，粒徑分布較均一，包封效果好，重複性高，有進一步放大試驗的潛力。以上的實施例是為了說明本發明公開的實施方案，並不能理解為對本發明的限制。此外，本文所列出的各種修改以及發明中方法、組合物的變化，在不脫離本發明的範圍和精神的前提下對本領域內的技術人員來說是顯而易見的。雖然已結合本發明的多種具體優選實施例對本發明進行了具體的描述，但應當理解，本發明不應僅限於這些具體實施例。事實上，各種如上所述的對本領域內的技術人員來說顯而易見的修改來獲取發明都應包括在本發明的範圍內。當前第1頁1&nbsp2&nbsp3&nbsp