難培養植物組織的培養方法

2023-06-19 21:01:01 4

專利名稱：難培養植物組織的培養方法
技術領域：
本發明是一種植物組織培養的方法，特別適用於難培養植物組織的培養。
在植物組織培養中，有一些植物特別難以培養，如直幹蘭桉和柑桔樹組織的試管誘導芽在多種培養基中都難以生根，室外扦插也不易成功。秈稻花葯的培養不易形成愈傷組織，形成愈傷組織後也不易分化成綠苗，大多為白化苗。目前，人們都是在取材後再對材料進行處理，大量的研究工作都是在培養基的改良上，(如中國專利申請號88107265.6日本專利申請號JP2163018)經國際聯機檢索，還未見有在取材前就對植物組織基因進行活化處理的記載。
本發明的目的在於先將植物組織基因進行活化處理，使其達到容易培養成完整的綠色植株，從而達到加速優良植物品種的快速繁殖，加快育種進程的目的;在培養基中用ABT1號和ABT3號生根粉代替植物激素，以便使達到降低成本，易於增殖芽，使芽容易生根的目的。
本發明是先將植物組織基因進行活化，再進行培養，具體步驟是對一年生種子植物，先將種子在ABT4號增長靈溶液中浸泡，然後將種子衝洗乾淨，再按常規方法發芽播種，在植株生長期間噴灑施寶，然後取材並將所取材料接種於用ABT1號和ABT3號生根粉代替植物激素的培養基中進行培養，對多年生植物，先對供體植物噴灑噴施寶，然後取材，再將所取材料在ABT4號溶液中浸泡，取出後用清水衝洗，再將材料接種於培養基中進行培養。
本發明與現有技術相比，對於種子植物用本發明進行活化處理後再培養的(如秈稻)，花葯50%以上形成愈傷組織，所形成的愈傷組織可全部分化為綠苗、而未活化處理的花葯，只有1%形成愈傷組織，愈傷組織基本上分化為白化苗;對於多年生植物，經活化處理後，使難以發芽生根的植物容易成苗，用ABT1號和ABT3號生根粉代替培養基中的植物激素，可使成本降低，易於增殖芽，使芽容易生根。
本發明的實施例1將ABT4號增產靈按說明書配製成溶液，將秈稻種子放入溶液中，以液體淹沒種子為宜，經24小時浸泡後，取出種子用清水洗淨，再按常規水稻種子發芽方法使其發芽，然後播種，在植株生長過程中，將噴施寶按說明書配製成液體，間隔20天左右噴一次植株，再按水稻花葯培養的常規方法取穗，低溫處理後將花葯接種於N6培養基中，誘導愈傷組織，經上述方法處理的花葯50%以上可形成愈傷組織，再將形成的愈傷組織轉入MS分化培養基中，(該培養基中用ABT1號和ABT3號生根粉代替植物激素)12天後，愈傷組織全為綠苗。
本發明的實施例2選三年以上柑桔樹，在植株嫩芽發出前一個月用噴施寶(按說明書配製)液體噴灑植株，嫩枝發出後，剪嫩枝放入ABT4號增長靈(按說明書配製)液體浸泡24小時，然後用清水洗淨，再按常規方法切割接種，20天後，帶芽切段直接形成增殖芽，不帶芽切段形成愈傷組織，增殖芽在原培養基上長高，愈傷組織在原培養基上出芽，將2釐米左右的芽切下置於生根培養基(1/2MS+NAA0.5MG/L)中，均能生根，形成完整的苗。
本發明的實施例3取直幹蘭桉嫩莖，按常規方法切割接種在(MS+BA2MG/L+NAA0.2MG/L)培養基中，20天左右形成愈傷組織，將此愈傷組織轉到(LS+ABT1號0.3MG/L+ABT3號0.3MG/L)培養基上，15天左右形成芽，再將2釐米高的芽切割下，置於(1/2MS+NAA0.5mg/L)培養基中生根，20天左右根生出，獲得完整的植株。
權利要求
1.一種難培養植物組織的培養方法，其特徵在於先將植物組織基因進行活化，再進行培養，具體作法是對一年生種子植物，先將種子在ABT4號增長靈溶液中浸泡，再按常規方法發芽播種，在植株生長期間噴灑噴施室，然後取材，並將所取材料接種於培養基中培養；對多年生長植物，先對供體植物噴灑噴施寶，然後取材，將所取材料枝條在ABT4號增長靈溶液中浸泡，再將材料接種於培養基中培養。
2.根據權力要求1所述的植物組織培養方法，其特徵在於所述的培養基中用ABT1號和ABT3號生根粉代植物激素。
全文摘要
本發明公開了一種植物組織培養方法，首先是將植物組織基因進行活化處理，然後再接種於培養基中培養，經本方法處理後的種子植物(如水稻)花葯形成愈傷組織可達50％以上，愈傷組織分化為綠苗率達100％，對於難生根植物(如直幹蘭桉和柑桔)經處理後在培養基中生根率可達到100％，本方法適用範圍廣泛，特別適用於難培養植物的組織培養。
文檔編號C12N5/04GK1052696SQ9011037
公開日1991年7月3日 申請日期1990年12月31日 優先權日1990年12月31日
發明者餘素芹 申請人:貴州省農業科學院水稻研究所