一種提高粗品肝素鈉溶解效率的方法

2023-08-07 05:57:01 1

一種提高粗品肝素鈉溶解效率的方法
【專利摘要】本發明公開了一種提高粗品肝素鈉溶解效率的方法，這種方法屬於酶工程領域。主要用胃蛋白酶和胰酶溶解粗品肝素鈉，解決了目前肝素鈉生產過程中多種的問題。工藝簡單，易操作，節約成本，提高了肝素鈉的溶解速率和沉澱純度，適合工業化生產。
【專利說明】一種提高粗品肝素鈉溶解效率的方法

【技術領域】
[0001]本法說明涉及提取提純製備原料藥的方法，屬於酶工程領域，具體是一種快速高效溶解粗品肝素鈉的方法。

【背景技術】
[0002]肝素鈉是由豬或牛的腸黏膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的鈉鹽，屬粘多糖類物質，在動物體內多以肝素鈉-蛋白質複合物的形式存在。醫學上，肝素鈉在體內外均有抗凝血作用，可延長凝血時間、凝血酶原時間和凝血酶時間。臨床上具有抗凝血、降血脂、保護內皮細胞、抗血小板積聚和釋放、促纖溶、抑制動脈平滑肌細胞增殖、降低血液粘度和抗炎等作用。
[0003]目前是，國內大所屬廠家採用物理攪拌或者化學物質溶解粗品肝素鈉。物理方法，溶解速度太慢，且溶解的不夠均勻，分子排布雜亂，雜質較多；化學方法，相對來說，速度較快，但是採用化學試劑會破壞分子活性，且容易產生副產物，不以去除。本工藝採用了酶解法，方法溫和，而且速度較快，產生的副產物少且易去除。


【發明內容】

[0004]本發明提供了一種酶解法快遞溶解粗品肝素鈉的方法。
[0005]本發明的技術方案為:一種製備高純度肝素鈉的工藝，其步驟如下:
將粗品肝素鈉溶入飲用水中，攪拌5-8小時，將其全部溶解；
將步驟(I)中溶解液，用鹽酸溶液調PH至7.2—8.2，然後升溫至45—55 °C之間時加入4-14g/億單位胃蛋白酶，再加入4-24g/億單位胰酶，保溫2—4小時；
將步驟(2)中酶解液在30?40分鐘內升溫至80—90°C，靜止15-35分鐘，攪拌，然後等降溫至45—55°C時，用l—3mol/L氫氧化鈉溶液調Ph至9.5-11.5，靜止20—30小時，分層，過濾，留上清液待沉澱，下層沉澱進行離心，離心後留上層離心液；
待步驟(3)中上清液和離心液用弱鹼性離子交換樹脂吸附，用0.3-0.4g/L的氯化鈉洗脫，連續洗脫兩遍。
[0006]取步驟(4)中洗脫液，用2—6mol/L氫氧化鈉溶液調Ph至9.5-11.5，然後加入3—5%雙氧水，氧化10—12小時；
將步驟(5)中溶液用75—80%乙醇沉澱，再加入20—30g/L氯化鈉溶液，靜止沉澱10—12小時，取沉澱物，用75—80%乙醇溶解，靜置24—30小時，棄去上層液，將不鏽鋼砂芯棒放在產品中，用真空泵通抽乾；
將步驟(6)中產品放在真空乾燥箱中，烘乾75—85小時，得產品。
[0007]有益效果:
本發明用酶解法溶解粗品肝素鈉，收率高於80%的高純度肝素鈉。達到中國藥典標準。【具體實施方式】實施例
[0008]將50g粗品肝素鈉溶入飲用水中，攪拌7小時，將其全部溶解；將溶解液用鹽酸溶液調PH至7.2，然後升溫至53°C之間時加入5g/億單位胃蛋白酶，再加入5g/億單位胰酶，保溫3小時；將酶解液在36分鐘內升溫至87°C，靜止20分鐘，攪拌，然後等降溫至53°C時，用2mol/L氫氧化鈉溶液調PH至11.0，靜止26小時，分層，過濾，留上清液待沉澱，下層沉澱放離心機離心，離心後留上層離心液；待上清液和離心液用弱鹼性離子交換樹脂吸附，用0.36g/L的氯化鈉洗脫，連續洗脫兩遍。取洗脫液用4mol/L氫氧化鈉溶液調PH至11.0，然後加入4%雙氧水，氧化11小時；將溶液用75%乙醇沉澱，再加入26g/L氯化鈉溶液，靜止沉澱11小時，取沉澱物，用75%乙醇溶解，靜置27小時，棄去上層液，將不鏽鋼砂芯棒放在產品中，用真空泵通抽乾；將產品放在真空乾燥箱中，烘乾80小時，得產品。得到的產品回收率為83.2%，各項指標均均符合中國藥典要求。
【權利要求】
1.一種提高粗品肝素鈉溶解效率的方法，其特徵在於:用4-14g/億單位胃蛋白酶和4-24g/億單位胰酶溶解粗品肝素鈉。
2.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於其工藝的具體步驟如下: (1)將粗品肝素鈉溶入飲用水中，攪拌5-8小時，將其全部溶解； (2)將步驟(I)中溶解液，用鹽酸溶液調PH至7.2—8.2，然後升溫至45—55 °C之間時加入4-14g/億單位胃蛋白酶，再加入4-24g/億單位胰酶，保溫2—4小時； (3)將步驟(2)中酶解液在30?40分鐘內升溫至80—90°C，靜止15-35分鐘，攪拌，然後等降溫至45—55°C時，用l—3mol/L氫氧化鈉溶液調Ph至9.5-11.5，靜止20—30小時，分層，過濾，留上清液待沉澱，下層沉澱進行離心，離心後留上層離心液； (4)待步驟(3)中上清液和離心液用弱鹼性離子交換樹脂吸附，用0.3-0.4g/L的氯化鈉洗脫，連續洗脫兩遍； (5)取步驟(4)中洗脫液，用2—6mol/L氫氧化鈉溶液調Ph至9.5-11.5，然後加入3—5%雙氧水，氧化10—12小時； (6)將步驟(5)中溶液用75—80%乙醇沉澱，再加入20—30g/L氯化鈉溶液，靜止沉澱10—12小時，取沉澱物，用75—80%乙醇溶解，靜置24—30小時，棄去上層液，將不鏽鋼砂芯棒放在產品中，用真空泵通抽乾； (7)將步驟(6)中產品放在真空乾燥箱中，烘乾75—85小時，得產品。
【文檔編號】C08B37/10GK104448048SQ201410813588
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月24日 優先權日:2014年12月24日
【發明者】劉冠男, 魏偉, 夏襯來 申請人:青島九龍生物醫藥有限公司