當歸多糖與阿魏酸鈉組合物作為製備治療肝損傷藥物的應用的製作方法

2023-07-30 08:39:16 1

專利名稱：當歸多糖與阿魏酸鈉組合物作為製備治療肝損傷藥物的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及當歸多糖與阿魏酸鈉組合物作為製備治療肝損傷藥物的應用。
當歸為傘形科植物Angelica Sinesis(Oliv).Diels.的乾燥根。有補血活血、調經止血等功效。當歸素有「十方九歸」之說，可見其在中藥組方中應用的廣泛性。當歸多糖(Angelica SinesisPolysaccharides，ASP)為當歸根部提取的活性組分，發現它不僅具有免疫活性，還表現出其它非免疫方面的藥理學效應。表明對當歸多糖有進一步深入地進行應用開發性研究價值與意義。阿魏酸鈉(Sodium Ferulate，SF)是存在當歸及其他中藥中的活性成分之一，我們曾系統地對阿魏酸鈉進行研究，結果證實它有明顯抗化學性肝損傷作用。與此同時，在危害人類健康的各類肝臟疾病中，以病毒感染等引起免疫性肝損的危害最嚴重，在我國感染人數在1億以上，為此，我們將當歸中的組分--當歸多糖與阿魏酸鈉聯合應用於免疫性的肝損傷。對免疫性肝損模型的研究因與病毒性肝炎較為接近而更具有臨床指導意義。
本發明提供的技術方案是當歸多糖與阿魏酸鈉組合物用於製備治療肝損傷藥物。
本發明將當歸多糖與阿魏酸鈉組合物用於製備治療肝損傷的藥物，即將當歸多糖與阿魏酸鈉組合物作為有效成分用於製備膠囊、片劑、顆粒劑以及注射劑。本發明充分發揮中藥不同組分的協同作用，體現了當歸多糖在免疫方面的作用，並結合阿魏酸鈉對肝損傷的保護效應，兩者組成的組合物所製備的藥物用於製備治療肝損傷療效明顯增強；不僅能治療化學性肝損傷，且對以病毒感染等引起免疫性肝損傷可發揮作用。當歸多糖與阿魏酸鈉組合物的這種新用途不僅充分利用了豐富的植物資源，而且開拓了其藥用價值的新領域，也為多糖類化合物的應用性研究提供了新的思路。因此，具有重要的醫學價值和社會、經濟效益。
實施例2當歸多糖與阿魏酸鈉組合物製備治療肝損傷的藥物將50％(重量百分比)的當歸多糖和50％(重量百分比)的阿魏酸鈉混合加入賦形劑，按常規方法製成膠囊。
實施例3當歸多糖與阿魏酸鈉組合物製備治療肝損傷的藥物將99％(重量百分比)的當歸多糖和1％(重量百分比)的阿魏酸鈉混合按1∶1(v/v)加入注射用水，按常規方法製成針劑。1.當歸多糖與阿魏酸鈉合用對免疫性肝損傷的保護作用1.1生化檢測昆明種雄性小鼠，尾靜脈注射卡介苗與脂多糖製造免疫性肝損傷模型，以免疫抑制劑地塞米松為陽性藥，觀察當歸多糖與阿魏酸鈉的肝保護作用，結果見表1、2。表1當歸多糖和阿魏酸鈉對免疫性肝損傷小鼠血清ALT和GST活性的影響x±s(均數±標準差)劑量 sALT sGST分組 n(mg/kg) (U/L)(μmol/L/min)NS8- 205.4±64.6 23.9±8.8Model 10 - 730.0±373.0*100.5±81.7*SF10 100 458.9±199.7□28.1±26.8□ASP 10 250 397.4±103.6□12.1±4.9□ASP+SF8 250+100 234.2±26.5□17.3±5.2□DEX 9 3 501.2±172.0□24.7±19.8□與NS組比較*P＜0.05；Model組比較□P＜0.05上述結果表明ASP與SF均可使模型的血清ALT、GST降低，特別是兩藥合用分別使ALT、GST下降68％和88％，效應甚至優於陽性對照藥DEX。SF對免疫性肝損所致MDA升高雖無明顯作用，但與ASP合用後使MDA含量降至正常水平以下。ASP與SF合用還使GSH-PX和GSH-RE增高。以上結果說明ASP與SF的抗肝損作用與增加抗氧化酶活性有關，且兩藥合用作用更為顯著。1.2病理組織學各組小鼠肝臟病理切片見模型組肝細胞普遍腫大，有片狀變性壞死，中央小靜脈充血，肝竇內見大量的紅細胞淤積；ASP組、SF組與兩藥合用組的肝損傷都有不同程度減輕，僅見局部細胞腫脹，小面積變性，尤其未見到大量紅細胞淤積於肝竇。表2當歸多糖和阿魏酸鈉對免疫性肝損傷小鼠肝細胞漿MDA和GSH相關酶的影響x±sMDAGSH-Re GSH-Px分組n(nmol/mg) (nmol/min/mg) (nmol/min/mg)NS 9 0.29±0.03 48.2±4.4 35.9±5.2Model 100.53±0.17*43.0±3.6 30.6±7.5SF 100.59±0.35 62.1±5.1□33.8±12.3ASP 100.22±0.16□62.2±11.7□40.7±7.6ASP+SF 8 0.19±0.14□63.5±14.2□45.1±17.8DEX 9 0.75±0.33 47.8±9.0 41.5±18.4與NS組比較*P＜0.05；與NS或Model組或DEX組比較□P＜0.05；n為動物例數，每2～3例合一個高速離心標本2.當歸多糖與阿魏酸鈉合用對氫化潑尼松所致小鼠肝損的保護作用文獻報導，大劑量氫化潑尼松(Pred)在造成免疫功能低下的同時，使肝臟出現膜脂質過氧化損傷。我們觀察了當歸多糖與阿魏酸鈉對氫化潑尼松所致小鼠肝損的保護作用，結果見表3。表3當歸多糖和阿魏酸鈉對氫化潑尼松所致肝損小鼠肝細胞漿MDA、sALT和sGST的影響x±s劑量 sALT sGST MDA分組(mg/kg)(U/L) (μmol/L/min)(nmol/mg)NS- - 130±18 10.0±1.5 0.12±0.03Pred20 465±129**13.5±1.5*0.30±0.03**SF 100 353±152*□8.0±2.5□0.25±0.02*□ASP 250 235±89□10.5±5.1□0.18±0.06□□ASP+SF 250+100 183±45□8.7±4.2□0.15±0.02□□與NS組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與Pred組比較□P＜0.05，□□P＜0.01；n＝5-15.
上述結果表明ASP與SF均可使氫化潑尼松組的血清ALT、GST降低，兩藥合可使ALT、GST分別下降61％和36％。ASP與SF使Pred組MDA升高分別下降17％與40％，兩藥合用後使MDA含量下降達50％。3.藥品與試劑卡介苗(BCG)由衛生部蘭州生物製品所提供；細菌脂多糖(LPS)，血清型SalmonellaTyphimurium，2、4-二硝基氯苯(CDNB)，氧化型穀胱甘肽(GSSG)、還原型穀胱甘肽(GSH)和還原型輔酶□(NADPH)為Sigma公司產品。硫代巴比妥鈉(TBA)、5，5′-二巰-2，2′-二硝基苯甲酸(DTNB)、阿魏酸鈉(Sodium Ferulate，SF)片、地塞米松(DEX)注射液、氫化潑尼松(Pred)均為市售產品，當歸多糖由武漢大學中南醫院製藥廠提供當歸醇沉物，經反覆醇沉，洗滌，低溫60℃乾燥，得到當歸多糖粉末，用生理鹽水溶解，8磅20min高壓滅菌。4.動物及處理4.1當歸多糖與阿魏酸鈉合用對免疫性肝損傷的保護作用選用5周齡的雄性小鼠(昆明種)，體重(12±0.5g)，由湖北省醫科院提供，分成6組，每組5～10隻。每隻小鼠尾iv BCG 1mg，12d後再尾iv LPS 4μg以製造免疫性肝損傷模型。製造模型同時給藥，阿魏酸鈉(SF)組、當歸多糖(ASP)組和當歸多糖+阿魏酸鈉(ASP+SF)組分別ig SF 100mg/kg、sc ASP 250mg/kg及ig SF 100mg/kg+sc ASP 250mg/kg共12d，DEX組在注射LPS 30min前ip DEX 3mg/kg 1次，生理鹽水(NS)為對照。注射LPS後6h小鼠斷頭取血，並摘取肝臟、胸腺和脾臟。2～3個肝臟合為一個標本，在冰NS中剪碎、漂洗後經超速離心105000g×60min(4□)製備細胞漿(S105)。部分小鼠肝臟經10％甲醛固定，石蠟包埋，切片，HE染色，光鏡觀察。4.2當歸多糖與阿魏酸鈉合用對氫化潑尼松所致小鼠肝損的保護作用雄性昆明種小鼠，體重(20±2.0g)，由湖北省醫科院提供，分成5組，阿魏酸鈉(SF)組、當歸多糖(ASP)組和當歸多糖+阿魏酸鈉(ASP+SF)組分別ig SF 100mg/kg、sc ASP 250mg/kg及ig SF 100mg/kg+sc ASP 250mg/kg共10d，上述各組與Pred組均在處死前4天ip Pred 20mg/kg共4d，生理鹽水(NS)為對照。5指標及測定方法改良金氏法測定血清丙氨酸轉氨酶(alanine transaminase，ALT)。按Habing等方法以CDNB為底物測定血清穀胱甘肽S-轉移酶(glutathione S-transferase，GST)活性。TBA比色法測定丙二醛(MDA)。以NADPH為底物，測定穀胱甘肽還原酶(glutathionereductase，GSH-Re)活性。以H2O2為底物，用DTNB顯色法測定穀胱甘肽過氧化物酶(glu-tathione peroxidase，GSH-Px)活性。
權利要求
1.當歸多糖與阿魏酸鈉組合物作為製備治療肝損傷藥物的應用。
2.根據權利要求1所述的用途，其特徵是將當歸多糖與阿魏酸鈉組合物作為有效成分用於製備膠囊、片劑、顆粒劑以及注射劑。
全文摘要
本發明涉及當歸多糖與阿魏酸鈉組合物作為製備治療肝損傷藥物的應用，即將當歸多糖與阿魏酸鈉組合物作為有效成分用於製備膠囊、片劑、顆粒劑以及注射劑。本發明充分發揮中藥不同組分的協同作用，體現了當歸多糖在免疫方面的作用，並結合阿魏酸鈉對肝損傷的保護效應，兩者組成的組合物所製備的藥物用於製備治療肝損傷療效明顯增強；不僅能治療化學性肝損傷，且對以病毒感染等引起免疫性肝損傷可發揮作用。當歸多糖與阿魏酸鈉組合物的這種新用途不僅充分利用了豐富的植物資源，而且開拓了其藥用價值的新領域，也為多糖類化合物的應用性研究提供了新的思路。因此，具有重要的醫學價值和社會、經濟效益。
文檔編號A61P1/16GK1433771SQ0311853
公開日2003年8月6日 申請日期2003年1月27日 優先權日2003年1月27日
發明者彭仁琇, 李穎, 汪暉, 夏雪雁, 吳東方, 樂江, 孔銳 申請人:武漢大學