肝癌的酶激活化療的製作方法

2023-07-26 11:38:51

專利名稱：肝癌的酶激活化療的製作方法
1.介紹本發明涉及抗癌藥物的篩選方法，該方法是基於由癌細胞過量表達的酶的活性，這些酶能夠將無毒的化學物質或化合物轉化成可特異地殺死這些癌細胞的細胞毒性藥物。本發明特別涉及能夠治療肝癌，尤其是肝細胞癌的抗癌藥物的篩選方法。本發明還涉及通過應用由本發明的篩選方法選擇的藥物來治療、減少癌症，特別是肝癌，尤其是肝細胞癌的方法。除此之外，本發明還涉及治療或減輕肝癌的藥物組合物以及包含這些組合物的試劑盒。
2.背景技術肝癌，尤其是肝細胞癌(HCC)，在香港和中國是主要的導致死亡的癌症之一。在許多其他國家，包括美國和歐洲，它也是重要的健康問題。目前唯一有效的治療方法是通過外科手術將癌組織切除，條件是癌症在早期發現，癌組織比較小，並且它沒有轉移到其他部位。然而，在大多數情況下，肝細胞癌在早期是無症狀的，一旦病人被診斷患有HCC，外科手術為時晚矣。很多化療方案，包括肝動脈內化療(HIA)和傳統化療試劑的化學栓塞法，療效都很有限(Venook，A.P.，2000，Regional strategies for managing hepatocellular carcinoma，Oncology(Huntingt)14347-54)。
醛糖還原酶(AR)是一種尼克醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)依賴性酶。最初，這種酶是由於它存在於腎組織、睪丸以及其他組織中，並且能將葡萄糖還原成山梨糖醇而被鑑定的。這種酶對還原各種芳香醛和脂肪醛很有效，如甘油醛，安息香醛，吡啶醛(Inazu，N.，et al.，1994，J.Biochem.(Tokyo)115991-999)，醛糖還原酶還可能對氧化應激下產生的毒性脂肪醛以及細胞新陳代謝中產生的其他有害醛類的解毒有關(V.Jagt et al.，1992，J.Biol.Chem.，2674 364-4 369；V.Jagt et al.，1995，Biochem.Biophs.Acta 1249117-126)。另一方面，有報導說醛糖還原酶在胃癌細胞系(Ax，et al.，2000，Biochem.Pharmacol.59293-300)和直腸癌細胞系中過量表達(Akashi，et al.，2000，Int.J.Cancer 88873-80)。除此以外，以前的文獻表明約有29％的肝細胞癌過量表達醛糖還原酶，54％過量表達ARL-1，後者是一種類醛糖還原酶蛋白，這種蛋白在胺基酸序列上有71％與醛糖還原酶同源，並有相似的酶活性。(Cao，D.L.Fan，S.T.，and Chung，S.S.M.，1998，Identification andcharacterization of a novel human aldose reductase-like gene.J.Biol.Chem.273a11429-35)。如上所述，醛糖還原酶與ARL-1有廣泛的底物特異性，這兩種酶能還原多種脂肪醛與芳香醛。因此，它們通常被看作能使抗癌藥物解毒的酶類。(Hyndman，et al.，1999，Erazymol.Molec.Biol.Carbonyl Metab 7427434，Weiner et al.ed.，Kluwer Academic/Plenum Pub.New York).而且，有證據表明，這些酶類確實可以讓癌細胞對抗癌藥物更具有抗性(Lee，et al.，2001，Anti-cancer Drugs 12129-132)。然而，這些酶類被用來將非毒性化學物質轉化成細胞毒性藥物以殺死那些過量表達此酶的癌細胞的潛能並沒有廣泛的研究。
在一個不相關的研究萘誘導的白內障的項目中，Lee等人發現醛糖還原酶參與了將相對無毒的萘-1，2-二氫化二酚轉化為1，2二羥基萘，後者然後自我氧化生成1，2-萘醌，此萘醌有很強的細胞毒性。(Lee，A.Y.W.and Chung，S.S.M.，1998，Involvement of aldosereductase in naphthalene cataract.Invest.OphthalmoL Vis.Sci.39193-97，在此整篇被引用作為參考)。假設的萘白內障的機制如圖1所示(Lee，A.Y.W.et al.，1998，supra；van Heyningen，R.，1967，The metabolism of naphthalene and its toxic effect on theeye.Biochem.J.102842-852)。
3.發明概述本發明部分地基於發明者對大比率肝細胞癌過量表達醛糖還原酶或相關的ARL-1酶的觀察以及對醛糖還原酶和ARL-1能夠將非毒性的ND轉化成高度細胞毒性的NQ的觀察(見圖1)。因此，萘或者其非毒性衍生物可以作為一種藥物，特異性殺死分別過量表達編碼醛糖還原酶和ARL-1的兩種基因的肝癌細胞。這樣，本發明提供了篩選抗癌藥物的方法，這些藥物是某些癌細胞過量表達的酶的底物，並且可以被酶的活性轉化為細胞毒性藥物；這樣，根據癌細胞過量產生這些酶類的特徵，就可以特異性殺死癌細胞。本發明提供了一種簡單的，有效的，最重要的是靶向特異的抗癌藥物的篩選。也即，本發明提供的抗癌藥物的篩選方法包括將過量表達一種酶的癌細胞在這種酶的抑制劑存在或不存在的條件下與候選藥物接觸；測量一種物質的水平，這一物質的水平與將細胞暴露於藥物所導致的細胞死亡的水平相關；並且比較抑制劑存在或不存在時這一物質的水平；其中抑制劑不存在時這一物質的水平的不同表示該藥物對過量表達該酶的癌細胞具有抗癌活性。在一個特定的實施方案中，本發明提供了篩選抗癌藥物的方法，以治療過量表達醛糖還原酶和/或ARL-1的肝細胞癌。
本發明也提供了治療或減輕癌症的方法，包括對一個需要治療的主體施用治療有效量的藥物，此藥物具有上述本發明的篩選方法確定的抗癌活性。在一個特定的實施方案中，被治療的癌症是過量表達醛糖還原酶和/或ARL-1的肝細胞癌。在另一個特定的實施方案中，治療肝細胞癌的藥物是萘或者它的一種衍生物，如萘-1，2-氧化物和萘1，2-二氫化二酚。
本發明還包括被用來治療或者減輕癌症的藥物組合物，包含治療有效量的具有由本發明的篩選方法確定的具備抗癌活性的藥物。在一種特定的實施方案中，被治療的癌症是過量表達醛糖還原酶和/或ARL-1的肝細胞癌。在另一個特定的實施方案中，具有抗癌活性的藥物是萘或它的衍生物。並且，本發明提供了一種試劑盒，該試劑盒在一個或多個容器中包含本發明的藥物組合物。3.1定義這裡所使用的「具有抗癌活性的藥物」是指一種藥物，其本身對於正常細胞或癌細胞具有很低的毒性，卻可以被癌細胞過量表達的酶轉化為對癌細胞有高毒性的物質，以至於這種藥物能阻止癌細胞的生長和/或選擇性殺死癌細胞，並且對正常細胞無害或具有很低的毒性。
這裡提到的「肝癌」是指肝臟中發現的癌症，可能來源於肝臟(在此稱為「肝細胞癌」或「HCC」)或者產生於其他組織，通過轉移到達肝臟。
這裡提到的「治療有效量」是指一種藥物或其衍生物的劑量能夠減少或減輕個體中癌症的嚴重程度、持續時期和/或症狀。
這裡提到的「藥學上可接受的載體」是指一種惰性輔助物質，它形成這種藥物的賦形劑，並且被聯邦或州政府的管理部門批准，或者列在美國藥典，或其他公認的用於動物尤其是人類的藥典中。
4.


圖1顯示了假設的生物轉化機制，涉及醛糖還原酶(AR)，它將無毒的萘轉化為高細胞毒性的1，2-萘醌。
圖2顯示了HepG2細胞中AR基因在高滲培養基中的不同時間的表達。2.37kb的條帶顯示的是非正常加工的AR mRNA；1.35kb的條帶顯示的是功能性的AR mRNA。GADPH是一個不因高滲誘導的基因，用來表明每一道加載的mRNA的相對的量。道C顯示的是等滲對照。
圖3顯示的是萘1，2-二氫化二酚對在等滲(I)或高滲(H)培養基中，存在和不存在醛糖還原酶抑制劑(ARI)AL1576(AlconLaboratories，Fort Worth，TX)的條件下培養的HepG2細胞的毒性圖。LDH在培養基中的釋放是在加入ND後5小時測定的。數據用均值±S.D.(n＝3)來表達，使用單向ANOVA來進行統計分析(*顯示p＜0.001)。
5.發明詳述5.1篩選實驗已知，不同的癌細胞相對與正常細胞有不同的基因表達水平。當癌細胞中某種酶類的表達增加的時候，通過使用本發明的篩選方法，可以有效利用這些酶的催化活性，以具有強選擇性的方式將無毒化合物轉化為高度細胞毒性的化合物。
目前的用於篩選可能的抗癌藥物的方法不僅可以避免使用對正常細胞有高度毒性的化療試劑，還可以選擇出有效的抗癌試劑，這些試劑可以由於癌細胞中某種酶的過量表達而特異於癌細胞。
應用本發明的篩選方法，萘和它的某些衍生物被發現對於癌細胞具有很強的抗癌活性，比如過量表達醛糖還原酶和ARL-1的肝細胞癌(見7.2.2；和圖3)。圖1顯示了生物轉化機制，涉及醛糖還原酶，它將無毒的萘轉化為高細胞毒性的1，2-萘醌(NQ)。
在圖3中，ND轉化為NQ的毒性作用是與HepG2細胞所表達的醛糖還原酶量增加有關的；被培養在不影響HepG2細胞醛糖還原酶表達的含有500μM ND等滲培養基中的HepG2細胞(對照細胞)沒有毒性作用的表現，而培養在能夠增加醛糖還原酶表達的、含有相同量ND的高滲培養基中的細胞釋放的LDH超過對照細胞的十倍。並且，醛糖還原酶抑制劑的存在保護了HepG2細胞免受ND毒性作用。
因此，本發明提供了一種抗癌藥物的篩選方法，包含將過量表達一種酶的癌細胞在這種酶的抑制劑存在或不存在的條件下與候選藥物接觸；測量某一物質的水平，這一物質的水平與將細胞暴露於藥物所導致的細胞死亡的水平相關；並且比較抑制劑存在或不存在時這一物質的水平；其中抑制劑不存在時這一物質的水平的不同表示該藥物對過量表達該酶的癌細胞具有抗癌活性。
在一個特定的實施方案中，癌症是肝癌，包括由其他器官轉移的和產生於肝的，優選是過量表達醛糖還原酶和/或ARL-1的肝細胞癌。抑制劑可以是醛糖還原酶和/或ARL-1的拮抗劑，包括AL1576(2，7-二氟代螺芴-9，5′-咪唑烷基-2′4′-二酮；AlconLaboratories，FortWorth，TX)，Eparestat(E-3-羧甲基-5-[(2E-甲基)-3-苯基亞丙烯基]-繞丹寧；Ono Pharmaceutical Co.Ltd.，Japan)，索比尼爾(S-6-氟代螺苯並二氫吡喃-4，5′咪唑烷基-2′，4′-二酮；Pfizer Inc.，New York)，Zopolrestat(3，4-二氫-4-氧代-3-{[5(三氟甲基)-2-苯並噻唑基]甲基}-1-2，3-二氮雜萘乙酸；Pfizer)，託瑞司他(N[5-(三氟甲基)-6-甲氧基-1-萘基]-N-甲基甘氨酸；Wyeth-Ayest Laboratories)和Fidarestat((+)-(2S，4S)-6-氟-2′5′二氧代螺苯並二氫吡喃-4，4』-咪唑烷基-2-羧基醯胺；Sanwa，Japan)。
候選藥物的細胞毒性能夠用現有技術中不同的方法測定，包括，但不限於，LDH-釋放實驗和Cr51-釋放實驗。
通過使用不同的癌細胞培養物，這些細胞能夠過量表達具有廣泛底物的特定的酶，本發明的篩選方法能夠應用於其他非肝癌類癌症的藥物的開發。5.2用篩選方法選擇的藥物的治療用途由於肝病病因潛在的多變性，比如B型肝炎，C型肝炎，肝硬化，等等，治療肝細胞癌(HCC)往往是很困難的。而且手術和/或各種化學治療的治療效果受到腫瘤生長和足夠肝保留之間的平衡的很大的影響(A.Venook，2000，Regional strategies for managing hepatocellularcarcinoma，Oncology 14(3)347-354，在這裡全部引用作為參考)。由於對於正常細胞的普遍毒性，全身化療通常是不合適的。因此局部肝臟藥物遞送成為治療HCC的一個優選方法。局部治療的例子有肝動脈內化療(HIA)，化學栓塞，和內部放射治療。但是一般化療藥物的毒性，比如氟尿苷和絲裂黴素以及放射治療的毒性仍然使肝保留不足的患者要冒肝衰竭的危險，即使是局部治療也是如此。
本發明的方法選擇的抗癌藥物對某些特殊的癌細胞更有針對性，因此與傳統化療試劑相比更加安全和有效，特別是在局部治療中。比如，藥物可能用一個植入的泵直接注入患HCC的個體的肝動脈內(HIA方法)。這種方法可能會有特殊的效果，因為據報導肝腫瘤80％的血液來源於肝動脈，而正常肝組織大部分的血液是由門靜脈提供的(Venook，2000，supra；Breedis et al.，1954，The blood supply ofneoplasms in the liver.Am.J Pathol.30969-985)。或者，本發明的藥物可與其它的化療藥物在HIA化學治療法中一起使用，比如氟尿苷，甲醯四氫葉酸，阿黴素，順鉑(FLAP)，5-氟尿嘧啶(PIAF)和絲裂黴素。
化學栓塞法是本發明的另外一種可以用於局部遞送藥物的方法。這種方法將血管阻塞和HIA化療結合起來。在這種方法中，對肝動脈的阻塞導致腫瘤動脈血液供應的阻斷，因而造成腫瘤缺血而不會影響肝的其它部分。而且，同時在動脈內給藥會提高藥物在受影響區域內的分布和保留時間(Venook，2000，supra)。作為栓塞材料有明膠海棉(Venook，et al.，1990，Chemoembolization forhepatocellular carcinoma.J.Clin.Onco l.8(6)1108-1114)，膠原蛋白(Daniels et al.，1988，Collagen chemoembolizationPharmacokinetics and tissue tolerance of cisplatin in liver andkidney.Cancer Res.482446-2450)，聚乙烯醇(Ajani et al.，1988，Islet cell tumors metastatic to the liverEffectivepalliation by sequential hepatic artery embolization.Ann.Intern.Med.108340-344)，微球體(Ho et al.，1997，Tumour-to-normal uptake ratio of 90-Y microspheres in hepatic cancerassessed with 99Tcm macroaggregated albumin.Br.J.Radiol.70823-828).
本發明的藥物同樣可以與碘化罌粟油(Lipiodol)一起使用。碘化罌粟油是一種用於淋巴造影的造影材料。這是罌粟種子油中脂肪酸的乙酯，含有38重量％的碘(Venook，2000，supra)。當它在經肝動脈內施用時會集中在肝腫瘤病灶上，因此它可以提高藥物的遞送。因此本發明的藥物可以溶解在碘化罌粟油中，用HIA法施用或者伴隨使用化學栓塞法。
進一步，用本發明的篩選法選出來的藥物可以全身施用，如採用口服(比如片劑和膠囊劑)或者腸胃外給藥(比如靜脈，肌肉內，皮下注射)，因為它們的全身毒性降低了。
這些治療特別適用於對於全身毒性高度敏感的病人和/或者有多發腫瘤從而排除手術治療可能性的病人。此外，這些治療可以用於等待接受器官移植的病人，以便阻止腫瘤的生長或癌細胞向身體其他部分的擴散。
本發明的藥物的適用劑量可由各種類型癌症的多種動物模型實驗來決定，比如一種鼠肝細胞瘤模型，它使用N-亞硝基-N-甲脲(Diwan，B.A.et al.，1985，N-Nitroso-N-methylureainitiation in multipletissues for organ-specific tumor promotion in rats byphenobarbital.J.Natl.Cancer Inst.751099-1105)或者2-乙醯基氨基芴(Hadjiolov，N.et al.，1995，Early initiating andpromoting effects in 2-AAF-induced rat liver carcinogenesisanimmunohistochemical study.Cancer lett.9839-46)。已經知道，類似於人類的HCC，鼠肝細胞瘤同樣過量表達醛糖還原酶(Takahashi，M.et al.，1995，Elevation of aldose reductase geneexpression in rat primary hepatoma and hepatoma cell linesimplication in detoxification of cytotoxic aldehydes.Int.J.Cancer 62(6)749-54)和醛糖還原酶樣蛋白ARL-1(Zeindl-Eberhart，E.et al.，1997，Futher characterization of a rathepatoma-derived aldose-reductase-like protein--organdistribution and modulation in vitro.Eur.J.Biochem.247792-800)。而且，人類HCC的樣品可以被直接植入裸鼠，在後者體內它們會發展成為肝癌(Sun，F.X.et al.，1996，Metastatic modelsof human liver cancer in nude mice orthotopically constructedby using histologically intact patient specimens.J.CancerRes.Clin.Oncol.122(7)397-402)。裸鼠模型具有可以測試真正的人類HCC的優點。
在兔白內障模型中，約1g/kg體重的萘造成白內障以及視網膜的退化(van Heyningen，R.et al.，1967，The metabolism ofnaphthalene and its toxic effect on the eye.Biochem.J.102842-852)。因此，這最有可能是人類口服萘的毒性水平。更高水平的藥物可以用化學栓塞的方法施用，藥物被直接遞送到受癌症侵襲的肝葉。
6.實施例已知那些沒有從根本上改變本發明的實施方案的基本活性的改進同樣包括在本發明的範圍內。因此，下面的例子是打算描述而不是限制本發明。6.1材料和方法6.1.1化學品1，4-萘醌(NQ)購自Aldrich Chemical Co.(Milwaukee，Wu)；萘-1，2-二氫化二酚(ND)來自BioMol Research Laboratories(Plymouth，PA)；萘和甜菜鹼來自Sigma(St.Louis，MO)；醛糖還原酶抑制劑(ARI)AL1567是由Alcon Laboratories(FortWorth，TX)贈送。MEM培養基，含4.5g/L蔗糖、胎牛血清、青黴素、鏈黴素、非必需胺基酸和丙酮酸鈉的Dulbecco′s改良伊格爾氏培養基來自Life Technologies(Gaithersburg，MD)。細胞毒性檢測試劑盒(LDH)來自於Roche Molecular Biochemicals(Mannheim，Germany)。6.1.2細胞培養HepG2細胞，一種人類肝細胞系，購自ATCC(Rockville，MD).基本(等滲的)培養基是添加了10％胎牛血清、100U/ml青黴素、100μg/ml鏈黴素、0.1mM MEM非基本胺基酸和1mM丙酮酸鈉的MEM培養基。培養基添加NaCl至100mM使之成為高滲，滲透壓為大約500mosmol/kg(用滲透壓計測量)。ND溶解在20％的乙醇中而製成50mM儲備液。NQ溶解在100％的乙醇中而製成50mM儲備液。AL1576溶解在20mM的NaOH中製成20mM的儲備液。
細胞首先在等滲培養基中培養至70％滿板。在培養基中添加NaCl使之成為高滲，孵育72小時。然後細胞以8×104細胞/孔的密度鋪於24-孔培養板上，在高滲培養基中孵育24小時。等滲條件下的對照細胞除了不加NaCl之外是在相同的條件處理。按指示添加ND和醛糖還原酶抑制劑AL1576。6.1.3LDH測定細胞毒性由釋放到培養基中的LDH(乳酸脫氫酶)的比例來測量。LDH的活性由細胞毒性檢測試劑盒測定。被染色產物的光密度在492和690nm用SpectraMax 340微量滴定板讀數器(Molecular Devices)測定。通過取出培養基中的樣品來測定釋放到培養基中的LDH量。用最終濃度1％的Triton X-100溶解細胞，通過提取細胞裂解物的樣品測量總LDH。6.2結果6.2.1HepG2細胞中醛糖還原酶的誘導為了模擬在細胞培養的肝癌中的過量表達，將HepG2細胞在含有100mM NaCl的高滲培養基中培養。與等滲培養基相比，高滲培養基誘導的HepG2細胞醛糖還原酶的表達約高出15倍(Nadkarni，V.，Gabbay，K.H.，Bohren，K.M.，and SheikhHamad，D.，1999，Osmoticresponse element enhancer activity.JBiol Chem.27420185-90，在此全文引作參考)。如在圖2中顯示的，在上面描述的細胞培養條件下，高滲培養基的確誘導了醛糖還原酶的過量表達。6.2.2ND的細胞毒性萘不能溶於水。即使它首先被溶解於乙醇或者DMSO中，當把它加入培養基中時它迅速沉澱。因此，萘的代謝產物ND(見圖1)，不同於萘，可用於測量由於HepG2細胞過量產生醛糖還原酶而被活化的藥物的細胞毒性。
在圖3中顯示，3,500μM的ND對於在等滲培養基中培養的HepG2細胞沒有毒性。但是，同等濃度的ND在高滲培養基中與在等滲培養基中相比對於HepG2細胞的毒性更大，這是由用ND孵育5小時後釋放到培養基中的LDH更多所顯示的。高滲培養基中培養的HepG2細胞對ND的敏感性增高，其原因在於過量表達AR。以下事實支持了這一論點AL1576，一種醛糖還原酶抑制物(ARI)，可以保護這些細胞免受ND的毒性。當濃度為50μM時，ND對於高滲或者等滲培養基中培養的HepG2細胞都沒有毒性。6.3結論細胞培養證實了這一觀點，即可以利用在肝癌中過量表達的酶的活性，將非毒性化學物質轉化為細胞毒性藥物。ND被用於顯示醛糖還原酶可以將相對無毒性化學物質轉化為強細胞毒性藥物。HepG2細胞在高滲培養基中與等滲培養基中相比，對ND的敏感性提高10倍。醛糖還原酶抑制劑可以保護高滲的HepG2細胞免受ND的毒性，這一事實顯示對這一化學物質敏感性的提高是過量表達醛糖還原酶的結果，後者使ND轉化為高毒性的NQ。基於相同理念的這些方法在設計和/或篩選新藥上具有很大用途，這些藥物用於治療HCC以及其他種類的癌症，這些癌症過量表達特殊的酶，後者能將非細胞毒性化合物轉化為高細胞毒性的化合物。
ND是一個治療HCC的潛在的候選藥物。雖然ND是萘的代謝產物(萘在動物模型中可造成白內障)，但可以測定ND的適當劑量，從而特異性地殺死HCC，而不會造成白內障或者破壞其他組織。此外，ND可以作為化學栓塞治療的一部分。
雖然，由於溶解度的問題，沒有在以上提到的細胞培養系統中對萘進行測試，萘可能仍然是一個更好的治療HCC的候選藥物，因為由它到ND的轉化只發生在肝中。這可以在動物模型中進行測試，在這些模型中可口服萘，並以油作為溶劑。
在此全文引入在這個申請中所引用的多種出版物的公開內容作為參考，目的是為了更全面地描述與這個發明相關的技術。
本領域技術人員將可通過常規試驗認識到或確定本發明的特定實施方式的許多等同物。這些等同物也應該被下面的權利要求所包括。
權利要求
1.一種篩選抗癌藥物的方法，包括將過量表達一種酶的癌細胞在這種酶的抑制劑存在或不存在的條件下與候選藥物接觸；測量一種物質的水平，這一物質的水平與將細胞暴露於藥物所導致的細胞死亡的水平相關；並且比較抑制劑存在或不存在時這一物質的水平；其中抑制劑不存在時這一物質的水平的不同表示該藥物對過量表達該酶的癌細胞具有抗癌活性。
2.根據權利要求1的方法，其中癌細胞是肝癌。
3.根據權利要求2的方法，其中癌細胞是肝細胞癌細胞。
4.根據權利要求2或3的方法，其中酶是醛糖還原酶或ARL-1或是這兩者。
5.根據權利要求4的方法，其中抑制劑是AL1567。
6.根據權利要求1、2或3的方法，其中所要測量的物質是LDH。
7.一種治療或減輕癌症的方法，包括向需要治療的個體施用治療有效量的藥物，該藥物具有由權利要求1的方法所測定的抗癌活性。
8.根據權利要求7的方法，其中癌是肝癌。
9.根據權利要求8的方法，其中癌是肝細胞癌。
10.根據權利要求7、8或9的方法，其中藥物是經口服給藥的。
11.根據權利要求7、8或9的方法，其中藥物是腸胃外給藥的。
12.根據權利要求11的方法，其中藥物是靜脈內、皮下或肌肉內給藥的。
13.根據權利要求8或9的方法，其中藥物是經肝動脈內給藥的。
14.根據權利要求8或9的方法，其中藥物是經化學栓塞給藥的。
15.一種治療或減輕肝癌的方法，包含向需要治療的個體施用治療有效量的萘或其衍生物。
16.根據權利要求15的方法，其中肝癌是肝細胞癌。
17.根據權利要求15或16的方法，其中萘或其衍生物是經口服給藥的。
18.根據權利要求17的方法，其中萘衍生物是萘-1，2-二氫化二酚。
19.根據權利要求15或16的方法，其中萘或其衍生物是腸胃外給藥的。
20.根據權利要求19的方法，其中萘或其衍生物是靜脈內、皮下或肌肉內給藥的。
21.根據權利要求19的方法，其中萘衍生物是萘一1，2-二氫化二酚。
22.根據權利要求15或16的方法，其中萘或其衍生物是經肝動脈內給藥的。
23.根據權利要求15或16的方法，其中萘或其衍生物是經化學栓塞給藥的。
24.一種治療或減輕癌症的藥物組合物，包含治療有效量的藥物，以及一種藥學上可接受的載體，該藥物具有由權利要求1的方法所測定的抗癌活性。
25.根據權利要求24的藥物組合物，其中癌是肝癌。
26.根據權利要求25的藥物組合物，其中肝癌是肝細胞癌。
27.一種治療或減輕肝癌的藥物組合物，包含治療有效量的萘或其衍生物，以及一種藥學上可接受的載體。
28.根據權利要求27的藥物組合物，其中肝癌是肝細胞癌。
29.根據權利要求27或28的藥物組合物，其中萘衍生物是萘-1，2-二氫化二酚。
30.根據權利要求24、25、26、27或28的藥物組合物，其中組合物是用於口服的固體形式。
31.根據權利要求30的藥物組合物，其中用於口服的固體形式是片劑。
32.根據權利要求30的藥物組合物，其中用於口服的固體形式是膠囊。
33.根據權利要求24、25、26、27或28的藥物組合物，其中組合物是液體形式。
34.根據權利要求24、25、26、27或28的藥物組合物，其中載體是碘化罌粟油。
35.根據權利要求29的藥物組合物，其中載體是碘化罌粟油。
36.一種試劑盒，該試劑盒在一個或多個容器中包含權利要求24、25、26、27或28的藥物組合物以及試劑盒的使用說明書。
37.一種試劑盒，該試劑盒在一個或多個容器中包含權利要求29的藥物組合物以及試劑盒的使用說明書。
全文摘要
本發明提供了篩選抗癌藥物的方法，該方法是基於由癌細胞過量表達的酶的活性，這些酶能夠將無毒的化合物轉化成可特異地殺死這些癌細胞的細胞毒性藥物。本發明特別提供了能夠治療肝癌，尤其是肝細胞癌的抗癌藥物的篩選方法。本發明還提供了通過對個體施用由本發明的篩選方法選擇的藥物來治療癌症，特別是肝癌，尤其是肝細胞癌的方法。在一種特定實施方案中，對個體施用萘或其衍生物。本發明還提供了用於治療或減輕肝癌的藥物組合物以及包含這些組合物的試劑盒。
文檔編號A61K31/00GK1458978SQ01815671
公開日2003年11月26日 申請日期2001年7月12日 優先權日2000年7月14日
發明者鍾森文 申請人:香港大學