一種菸草小苗期快速鑑定黑脛病抗性的方法
2023-12-02 06:39:01 5
一種菸草小苗期快速鑑定黑脛病抗性的方法
【專利摘要】本發明公開了一種菸草小苗期快速鑑定黑脛病抗性的方法，將待鑑定的菸草品種播種到育苗穴盤中育苗，當苗齡達35～45天後，進行人工接種，對所有供試煙株在穴盤的穴孔中埋入預先培養的黑脛病接種材料0.1～1g，分別在接種後3～10天調查病情分級，計算病情指數。本發明採用小苗不移栽/移植的鑑定方法，不人為創造傷口，更加快捷方便，經過多年的常規田間病圃鑑定與本發明方法的同步驗證，本發明鑑定結果與田間鑑定相當，且年度間差異小，鑑定時間短，工作量小。
【專利說明】一種菸草小苗期快速鑑定黑脛病抗性的方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬於植物抗病性鑑定【技術領域】，具體涉及菸草黑脛病抗性鑑定方法。
【背景技術】
[0002] 菸草黑脛病是菸草生產上最具毀滅性的病害之一，同時也是世界菸草生產中危害 最嚴重的病害之一，該病在我國各產煙省均有不同程度的發生，且危害較為普遍和嚴重。選 用菸草抗黑脛病品種是解決這一病害的重要途徑。
[0003] 目前，現有的菸草品種抗病性鑑定方法主要有田間黑脛病圃鑑定法和苗期鑑定方 法。田間黑脛病圃鑑定法由於受地力、季節，每年的鑑定品種數量受到很大限制，且年份間 鑑定的品種抗性有一定的差異；而現有的苗期鑑定方法都要育苗後移栽到花盆、室內病圃 中或移植到新的盤上，缺點是移栽緩苗後接種，時間長，工作量大。
【發明內容】
[0004] 本發明要解決的技術問題是：針對現有技術中存在的問題，本發明提供了一種小 苗不移栽/移植的鑑定方法，不人為創造傷口，更加快捷方便，經過多年的田間病圃鑑定與 本發明方法的同步對比驗證，本發明鑑定結果與田間鑑定相當，且年度間差異小，鑑定時間 短，工作量少。
[0005] 本發明採用的技術方案：小苗快速鑑定法在溫室中進行，溫度環境25°C。將待鑑 定的各菸草品種播種到54孔育苗穴盤中育苗，每個品種/系1盤，育苗管理措施同常規煙 葉生產。當苗齡達35?45天後（不需剪葉)，進行人工接種。對所有供試煙株在穴盤的穴 孔中埋入預先培養的黑脛病接種材料0. 1?lg。分別在接種後3?10天調查病情分級，計 算病情指數。
[0006] 接種材料的製作：將小米用水煮至6分熟，撈出放到紗布上攤開，浙水10分鐘。裝 入250ml圓形塑料組培瓶中，裝至瓶體的2/3處。用高壓蒸氣滅菌鍋121°C滅菌1小時。冷 卻至室溫後，將分離好的在燕麥培養基上的黑脛病菌絲接種到小米上，在培養箱中28°C下 培養15天，菌絲長滿即可。
[0007] 記載方法執行國家標準"菸草病蟲害分級及調查方法（GB/T 23222-2008)"。病情 指數（D)計算公式： D= Σ (各級病株數X該病級數）X 100/ (調查總株數X最高級數） 病害嚴重度分級標準按國家標準GB/T 23224-2008執行，抗性劃分為6個級別：高抗 或免疫（I):病指為〇 ;抗病（R):抗病（R)衝抗（MR):病指為20. 1?40衝感（MS):病指為 40. 1?60 ;感（S):病指為60. 1?80 ;高感（HS):病指為80. 1?100。
[0008] 本發明達到的有益效果： 本發明採用小苗不移栽/移植的鑑定方法，不人為創造傷口，更加快捷方便。經過多年 的常規田間病圃鑑定與本發明方法的同步驗證，本發明鑑定結果與田間鑑定相當，且年度 間差異小。具體表現如下： (1) 鑑定周期更短，35?45天小苗不剪葉即可用於鑑定，整個鑑定周期僅為45?55 天即可，比現有的其它鑑定方法的鑑定周期更短，說明本發明的方法更高效； (2) 育種方法不同，其它方法均採用漂浮育苗，移栽後鑑定或移植到新盤上再做鑑定。 本方法採用大孔穴盤，有足夠空間在原盤上直接鑑定，盤不在營養液中浸泡，更適合固體接 種病原接種； (3) 病原接種材料的製作不同。常規的菌谷製作是採用帶殼的穀子製作，本方法的採用 脫粒後的小米製作，更方便接種，並有利於發病。
[0009] (4)黑脛病接種材料所用的小米經過水煮、浙幹、消毒、填裝在矩形槽體並進行均 勻分塊，這樣在使用時直接按塊拿取，這樣可以進一步提高試驗速率、提高試驗規範化程 度。
【具體實施方式】
[0010] 實施例1 1、材料與方法 1. 1、試驗材料 貴州省菸草品種/系10份烤菸材料，對照品種革新3號、金星6007、小黃金1025。
[0011] 1.2、試驗方法 1. 2. 1、常規病圃鑑定法 田間病圃鑑定在貴州省菸草科學研究院烤菸品種試驗黑脛病鑑定圃中進行。試驗設4 個重複，每重複1行，栽煙10株。採用漂浮育苗法，育苗方法同常規生產。剪葉兩次，培育 成壯苗後，於5月上旬移栽，密度1X0. 6m2,畝施純氮6公斤。其它栽培管理措施同大田生 產。設革新3號為抗病對照、金星6007為中抗對照，小黃金1025為感病對照。田間鑑定於 移栽後20天，對所有供試煙株進行人工接種，在煙株根部埋入預先培養的黑脛病接種材料 3g。分別在接種後20天、40天、60天調查病情分級，取三次調查平均值計算病情指數。
[0012] 1.2. 2、本發明方法 小苗快速鑑定法在溫室中進行，溫度環境25°C。將待鑑定的各菸草品種播種到54孔育 苗穴盤中育苗，每個品種/系1盤。育苗管理措施同常規菸葉生產。當苗齡達40天後(不 需剪葉)，進行人工接種。對所有供試煙株在穴盤的穴孔中埋入預先培養的黑脛病接種材料 0. 5g。分別在接種後3天、7天、10天調查病情分級，取三次調查平均值計算病情指數。
[0013] 1. 2. 3、接種材料的製作 將小米用水煮至6分熟，撈出放到紗布上攤開，浙水10分鐘。裝入250ml圓形塑料組 培瓶中，裝至瓶體的2/3處。用高壓蒸氣滅菌鍋121°C滅菌1小時。冷卻至室溫後，將滅菌 後的小米均勻填裝在矩形槽體內，按重量〇. 1?lg均勻矩形槽體內的小米切成小塊，將分 離好的在燕麥培養基上的黑脛病菌絲接種到小米上，在培養箱中28°C下培養15天，菌絲長 滿即可，使用時按塊取用即可。
[0014] L 2. 4調查方法及抗性劃分 記載方法執行國家標準"菸草病蟲害分級及調查方法（GB/T 23222-2008)"。
[0015] 病情指數（D)計算公式： D= Σ (各級病株數X該病級數）X 100/ (調查總株數X最高級數） 抗性劃分按國家標準GB/T 23224-2008執行，分為6個級別： 表1 :國家標準抗性劃分表
【權利要求】
1. 一種菸草小苗期快速鑑定黑脛病抗性的方法，其特徵在於：將待鑑定的菸草品種播 種到育苗穴盤中育苗，當苗齡達35?45天後，進行人工接種，對所有供試煙株在穴盤的穴 孔中埋入預先培養的黑脛病接種材料0. 1?lg，分別在接種後3?10天調查病情分級，計 算病情指數。
2. 根據權利要求1所述的一種菸草小苗期快速鑑定黑脛病抗性的方法，其特徵在於： 當苗齡達35?45天後，不需移栽、剪葉，直接人工接種。
3. 根據權利要求1所述的一種菸草小苗期快速鑑定黑脛病抗性的方法，其特徵在於： 預先培養的黑脛病接種材料的製作方法為將小米用水煮至6分熟，撈出放到紗布上攤開， 浙水10分鐘，裝入250ml圓形塑料組培瓶中，裝至瓶體的2/3處，用高壓蒸氣滅菌鍋121°C 滅菌1小時，冷卻至室溫後，將分離好的在燕麥培養基上的黑脛病菌絲接種到小米上，在培 養箱中28°C下培養15天，菌絲長滿即可得黑脛病接種材料。
4. 根據權利要求3所述的一種菸草小苗期快速鑑定黑脛病抗性的方法，其特徵在於： 在小米上接種黑脛病菌絲前，將滅菌後的小米均勻填裝在矩形槽體內，按重量〇. 1?lg均 勻矩形槽體內的小米切成小塊，黑脛病菌絲均勻接種在塊狀的小米材料上。
【文檔編號】A01G7/00GK104152533SQ201410386031
【公開日】2014年11月19日 申請日期:2014年8月7日 優先權日:2014年8月7日
【發明者】王仁剛, 林世鋒, 王軼, 曾吉凡 申請人:貴州省菸草科學研究院