一種杉木試管苗生根誘導方法
2023-12-05 03:24:31
專利名稱：一種杉木試管苗生根誘導方法
技術領域：
本發明涉及無性繁殖技術，尤其是涉及一種杉木試管苗生根誘導方法。
背景技術：
衫ifXCunninghamia為杉科常綠喬木,在我國有一千多年的栽培史，在林業發展中發揮著重要作用，堪稱中國南方「木中之王」。杉木作為我國南方的主要造林樹種，栽培面積大，用途廣泛，備受廣大群眾的親睞，因此，大力發展杉木育苗技術，滿足市場對優質苗木的需求是目前面臨的重要問題之一。組織培養技術是一種快速無性繁殖技術，採用組織培養手段繁育杉木苗木，是加速杉木良種推廣使用的重要手段，是促進我國杉木快速發展的有效途徑。生根誘導是杉木組織培養過程中的關鍵環節，據報導，一些學者採用瓶外生根的方法解決杉木組培苗生根問題，取得了一定的成效。中國專利CN102217539A的一種杉木無性系離體生根培養方法。具體操作如下:
(I)選取杉木優良無性系原株的樹幹的基部萌條為組織培養材料，接入繼代增殖培養基進行繼代增殖培養，誘導分化出不定芽，然後將不定芽轉入MS培養基上進行伸長培養:其中繼代增殖培養基配方為3/4 MS + 6BA 0.3 mg/L +蔗糖3 %; (2)步驟(I)的不定芽伸長到2-3 cm時，轉入誘導生根培養基培養，得生根試管苗:誘導生根培養基以1/2 MS或1/4 MS為基本培養基，在其中添加植物生長調節劑和2 %蔗糖；植物生長調節劑為IBA 0.05-0.4mg/L,NAA 0.05-0.4 mg/L,IAA 0.1-1.0 mg/L、或IBA 0.05-0.4 mg/L和NM 0.05-0.4 mg/L混合；(3)移栽生根試管苗，選用黃土、泥炭土 3: I比例混合後用作移栽基質。該方法雖然能在一定程度上提高了杉木苗的生根率，但是仍不能解決杉木苗生根不整齊、根系不粗壯的問題。中國專利CN101 480166提供一種杉木組織培養生根方法，切取杉木增殖繼代小苗，接種於杉木生根培養基進行組織培養生根。杉木生根培養基由改良MS培養基、ABT1#0.4-0.8 mg/L、IBA 0.1-0.5 mg/L和根太陽稀釋液2-6 mg/L組成。採用該方法進行杉木生根培養後，能縮短杉木的生根時間,提高杉木的生根率,但仍舊不能解決杉木苗生根不統一，根係數量少以及根系不粗壯的問題。
發明內容
本發明的目的在於改進現有的生根誘導技術，提供一種能提高杉木試管苗的生根率，根係數量以及根系萌發整齊度，提供更多優質帶根試管苗供生產應用的杉木試管苗生根誘導方法。本發明的技術方案如下:
一種杉木試管苗生根誘導方法，選取增殖繼代小苗，先進行預生根培養，然後再進行生根培養，置於適宜環境中培養，獲得帶根試管苗，具體操作步驟如下:
(I)預生根培養:切取1-2 Cm的增殖繼代小苗，切取小苗時保留一小團愈傷組織，接種於預生根培養基中培養；(2)生根培養:待步驟(I)中增殖繼代小苗經過15-25天預生根培養後，將小苗轉接入生根培養基中培養。以上所述的預生根培養基以1/2MS-MS為基本培養基，還包括NAA 0.02-0.08 mg/L、蔗糖2.5 %和瓊脂0.7 %。以上所述的生根培養基由改良1/2 MS為基本培養基、還包括IBA 0.10-0.25 mg/L 和 IAA 0.05-0.08 mg/L、蔗糖 2.5 % 和瓊脂 0.7 %。以上所述的改良1/2 MS基本培養基中NH4NO3含量為660 mg/L, FeSO4.7H20含量為 27.8-32.4 mg/L ο以上所述的培養條件為溫度23±2 °C、光照強度2200-2400 LX，光照時間為13 h、溼度 40-45 %。本發明的優點及積極效果如下:
1.本杉木試管苗生根誘導方法，在生根誘導前採用低濃度NAA對小苗進行預生根培養，然後再進行生根培養，可使試管苗髮根統一，髮根速度快，根系粗壯且數量較多。2.本杉木試管苗生根誘導方法，增殖繼代小苗經過15-25天時間預生根培養後轉入生根培養，即可達到預生根培養效果，又避免了小苗在預生根培養階段長出根系而使後期生根培養髮根不整齊。3.本杉木試管苗生根誘導方法，調整生根誘導培養基FeSO4.7H20含量，可有效促進試管苗根系的萌發和增加根 係數量。4.本杉木試管苗生根誘導方法，生根培養基蔗糖濃度為2.5%，瓊脂濃度為0.7%，培養基滲透壓較低，有利於根系生長。5.本杉木試管苗生根誘導方法，切取小苗時保留一小團愈傷組織，有利於根系的萌發。6.本杉木試管苗生根誘導方法，預生根培養和生根培養均在較強光照強度下進行，有利於根系萌發。
圖1為杉木試管苗生根效果圖。圖2為杉木試管苗根系生長情況效果圖。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明作進一步說明。實施例1:
一種杉木試管苗生根誘導方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時保留一小團愈傷組織，將小苗接種於以1/2MS為基本培養基，還包括NAA 0.02mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂
0.7%的預生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400LX，光照時間為13h、溼度40-45%的環境中培養。經過15天預生根培養後，將小苗轉接入由NH4NO3含量為660 mg/L,FeSO4.7Η20含量為27.8 mg/L的改良1/2 MS基本培養基，還包括IBA 0.10 mg/L、IAA 0.05 mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%組成的生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400LX，光照時間為13h、溼度40-45%的環境中培養。試管苗的生根率為88.9%，平均根數/條為4.98，不定根形成能力為4.42。實施例2:
一種杉木試管苗生根誘導方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時保留一小團愈傷組織，將小苗接種於以1/2MS為基本培養基，還包括NAA 0.06mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂
0.7%的預生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400LX，光照時間為13h、溼度40-45%的環境中培養。經過20天預生根培養後，將小苗轉接入由NH4NO3含量為660 mg/L，FeSO4.7Η20含量為27.8 mg/L的改良1/2 MS基本培養基，還包括IBA 0.15 mg/L、IAA 0.05 mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%瓊脂組成的生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400LX，光照時間為13h、溼度 40-45%的環境中培養。試管苗的生根率為90.1%，平均根數/條為
5.02，不定根形成能力為4.52。實施例3:
一種杉木試管苗生根誘導方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時保留一小團愈傷組織，將小團愈傷組織接種於以1/2MS為基本培養基，還包括NAA 0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%的預生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400LX，光照時間為13h、溼度40-45%的環境中培養。經過20天預生根培養後，將小苗轉接入由NH4NO3含量為660 mg/L，FeSO4.7Η20含量為30.9 mg/L的改良1/2 MS基本培養基，還包括IBA 0.20 mg/L、IAA 0.06 mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%組成的生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400 LX,光照時間為13h、溼度40-45%的環境中培養。試管苗的生根率為93.1%，平均根數/條為5.89，不定根形成能力為5.48。實施例4:
一種杉木試管苗生根誘導方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時保留一小團愈傷組織，將小團愈傷組織接種於以1/2MS為基本培養基，還包括NAA 0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%的預生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400 LX,光照時間為13h、溼度40-45%的環境中培養。經過25天預生根培養後，將小苗轉接入由NH4NO3含量為660 mg/L, FeSO4.7H20含量為32.4 mg/L的改良1/2 MS基本培養基，還包括IBA 0.25mg/L、IAA 0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%組成的生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400 LX,光照時間為13h、溼度40-45%的環境中培養。試管苗的生根率為93.6%，平均根數/條為5.76，不定根形成能力為5.39。實施例5:
一種杉木試管苗生根誘導方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時保留一小團愈傷組織，將小團愈傷組織接種於以3/4MS為基本培養基，還包括NAA 0.06mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%的預生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400 LX,光照時間為13 h、溼度40-45%的環境中培養。經過15天預生根培養後，將小苗轉接入由NH4NO3含量為660 mg/L,FeSO4.7Η20含量為27.8 mg/L的改良1/2 MS的基本培養基，還包括IBA 0.20mg/L、IAA 0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%組成的生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400 LX,光照時間為13 h、溼度40-45%的環境中培養。試管苗的生根率為93.3%，平均根數/條為5.45，不定根形成能力為5.08。實施例6:
一種杉木試管苗生根誘導方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時保留一小團愈傷組織，將小團愈傷組織接種於以MS為基本培養基，還包括NAA 0.06mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%的預生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400 LX，光照時間為13h、溼度40-45%的環境中培養。經過20天預生根培養後，將小苗轉接入由NH4NO3含量為660 mg/L, FeSO4.7H20含量為30.9 mg/L的改良1/2 MS基本培養基，還包括IBA 0.15mg/L、IAA 0.08mg/L、蔗糖
2.5%和瓊脂0.7%組成的生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400 LX,光照時間為13 h、溼度40-45%的環境中培養。試管苗的生根率為96.7%，平均根數/條為6.17，不定根形成能力為5.96。實施例7:
一種杉木試管苗生根誘導方法，切取1-2 cm的增殖繼代小苗，切取小苗時保留一小團愈傷組織，將小團愈傷組織接種於以MS為基本培養基，還包括NAA 0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%的預生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400 LX，光照時間為13h、溼度40%-45%的環境中培養。經過25天 預 生根培養後，將小苗轉接入由NH4NO3含量為660 mg/L, FeSO4.7H20含量為32.4mg/L的改良1/2 MS基本培養基，還包括ΙΒΑ0.25 mg/L、IAA 0.10 mg/L、蔗糖
2.5%和瓊脂0.7%組成的生根培養基中。置於溫度23±2°C、光照強度2200-2400 LX,光照時間為13 h、溼度40-45%的環境中培養。試管苗的生根率為96.7%，平均根數/條為5.68，不定根形成能力為5.49。
權利要求
1.一種杉木試管苗生根誘導方法，其特徵在於:選取增殖繼代小苗，先進行預生根培養，然後再進行生根培養，置於適宜環境中培養，獲得帶根試管苗，具體操作步驟如下: (1)預生根培養:切取1-2Cm的增殖繼代小苗，切取小苗時保留一小團愈傷組織，接種於預生根培養基中培養； (2)生根培養:待步驟(I)中增殖繼代小苗經過15-25天預生根培養後，將小苗轉接入生根培養基中培養。
2.根據權利要求1所述的一種杉木試管苗生根誘導方法，其特徵在於:所述的預生根培養基以1/2MS-MS為基本培養基，還包括NAA 0.02-0.08 mg/L、蔗糖2.5 %和瓊脂0.7 %。
3.根據權利要求1所述的一種杉木試管苗生根誘導方法，其特徵在於:所述的生根培養基由改良1/2 MS為基本培養基、還包括IBA 0.10-0.25 mg/L和IAA 0.05-0.08 mg/L、蔗糖2.5 %和瓊脂0.7 %的混合物。
4.根據權利要求3所述的一種杉木試管苗生根誘導方法，其特徵在於:所述的改良1/2MS 基本培養基中 NH4N03 含量為 660 mg/L, FeS04.7H20 含量為 27.8-32.4 mg/L。
5.根據權利要求1所述的一種杉木試管苗生根誘導方法，其特徵在於:所述的培養條件為溫度23±2 °C、光照強 度2200-2400 LX，光照時間為13 h、溼度40_45%。
全文摘要
本發明公開了一種杉木試管苗生根誘導方法，先切取1-2cm的增殖繼代小苗，接種於預生根培養基中培養，預生根培養基以1/2MS-MS為基本培養基，還包括NAA0.02-0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%。經過15-25天預生根培養後，再進行生根培養，生根培養基以改良1/2MS為基本培養基、還包括IBA0.10-0.25mg/L和IAA0.05-0.08mg/L、蔗糖2.5%和瓊脂0.7%，然後置於適宜環境中培養，獲得帶根試管苗。採用該方法進行杉木生根培養後，能提高杉木試管苗的生根率，根係數量以及根系萌發整齊度，提供更多優質帶根試管苗供生產應用，具有較好的經濟效益和社會效益。
文檔編號A01H4/00GK103229723SQ20131019519
公開日2013年8月7日 申請日期2013年5月23日 優先權日2013年5月23日
發明者黃開勇, 郝海坤, 陳琴, 藍肖, 唐慶蘭, 戴俊, 張照遠 申請人:廣西壯族自治區林業科學研究院