一種膠原止血纖維的製備方法與流程

2023-05-03 15:00:26 2

本發明涉及一種膠原止血纖維及其製備方法。所製得的膠原止血纖維，具有很強的親水性，能迅速吸收血液或者滲液後，粘附於創面，加壓不易脫落，能促進血小板的粘附形成血栓，進而快速長效止血。

背景技術：

生物醫學材料是近30年來發展起來的一類高技術新材料，其中的可吸收止血材料隨著交通意外、重大災害等事故的增多逐漸引起醫學界的關注。隨著現代科學技術的高速發展，各種止血材料的研究取得了非常快的進展，各種新型生物止血材料不斷出現，性能也越來越優良。目前常用的止血材料有可吸收纖維蛋白膠、殼聚糖、可吸收性明膠海綿、-氰基丙烯酸酯、氧化纖維素和氧化再生纖維素等。止血效果確切、生物相容性好、能控制降解速率的生物醫用止血材料成為人們研究和關注的主要對象。

膠原蛋白是生物體內含量最高的蛋白質，是細胞外基質的主要成份，它具有抗原性低、生物相容性好、可降解等優良性能。膠原蛋白是強烈的血小板聚集激動劑，通常認為，血管受損後暴露出內皮細胞下膠原，血小板粘附到膠原上是止血和血栓形成的關鍵步驟。膠原通過促進血小板粘附聚集和參與內源性凝血途徑發揮止血功能。膠原已成為目前臨床醫學實踐中主流的可吸收止血材料的主要成分。ⅰ型膠原分子長度約300nm，直徑約1.5nm，呈棒狀，由兩條α1鏈，一條α2鏈三條肽鏈以左手螺旋形式組成3螺旋結構。血小板表面的膠原受體通過識別膠原三螺旋結構中特異的胺基酸序列gly-pro-hyp(gpo)，粘附到膠原上從而啟動止血過程，三螺旋結構的保留程度對發揮此類材料的止血作用至關重要。

目前，關於膠原類或膠原複合類止血材料的研究和報導已越來越多。有研究報導(專利號cn1406628a)利用膠原纖維為原料，用醛類交聯將其改性後，真空乾燥粉碎成止血粉劑；年華等(專利號cn103721247a)以三七素、膠原、殼聚糖為原料，交聯改性製成複合材料，冷凍乾燥後粉碎成膠原基複合止血粉。使用醛類交聯劑雖然能提高材料的力學和抗降解性能，但是醛類物質有一定的細胞毒性，又很難徹底清除，在使用過程中會引起機體的細胞毒性和免疫反應。朱楚紅等(專利號102258802a)將膠原與一些具有消炎鎮痛的中藥(大黃中)複合製成新型敷料，具有止血、消炎鎮痛多功能性，但是因其膜片結構，創面粘附性差，且不能很好地應用於不規則的創面。

綜上所述，現有技術存在以下不足：

1、材料交聯改性時使用醛類交聯劑，交聯劑的殘留易引起細胞毒性和免疫反應；

2、材料力學性能不足，粘附性差，會給手術操作造成不必要的麻煩；

3、止血材料止血時間長、止血效果差，有的還具有一定的免疫原性；

4、針對不規則的創面，膜片狀或者海綿狀材料不易貼合，粉狀材料使用過程中易散落。

技術實現要素：

本發明要解決的技術問題是克服現有的止血材料與創面貼合度不高，止血時間長、止血效果差的缺陷，提供一種膠原止血纖維的製備方法。

為了解決上述技術問題，本發明提供了如下的技術方案：

一種膠原止血纖維的製備方法，包括以下步驟：

s1：取整張小牛皮的背部，去除毛髮和脂肪層，切成1～2cm的小段，冷凍後切成細碎的皮片；優選的，在-50℃冷凍後切成厚度為0.1～0.5mm，大小為0.5～2cm的皮片；

進一步的，脫毛時可以手工脫毛也可以使用na2so4、na2s、cacl2複合脫毛劑脫毛或者使用過氧化氫溶液脫毛；優選的，選用質量比為na2so4:na2s:cacl2＝1～2:40～50:10～20的溶液脫毛或者使用質量分數為5～10％的過氧化氫溶液；

s2：脫脂處理：將皮片浸泡在氯化鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，每5～7h更換一次氯化鈉溶液；再將皮片浸泡在碳酸鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h更換一次碳酸鈉溶液；然後將皮片轉移至脂肪酶解液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h後更換一次脂肪酶酶解液，酶解結束後離心除去水分，再將牛皮纖維放入注射水中緩慢攪拌10～20分鐘，倒出、去除水份，反覆清洗三遍；優選的，氯化鈉溶液的質量濃度為1％～10％，碳酸鈉溶液的質量濃度為1％～5％，脂肪酶的用量為皮片重量的1％～3％，酶解反應的ph為9～13；

s3：乙醇梯度脫水：將脂肪酶處理後的牛皮纖維，浸泡在不同濃度的乙醇溶液中梯度脫水，然後自然乾燥；乙醇梯度脫水時使用濃度為30％～100％乙醇濃度脫水3～8h。

s4：粉碎：將牛皮纖維撕成小塊放入高分子粉碎機內粉碎，取出纖維，用鑷子挑除塊狀硬物；優選的，粉碎的頻率為10～30hz，粉碎時間為5～15s，粉碎次數為1～3次。

s5：篩分：將粉碎後的膠原纖維經篩網篩分，優選的，篩網的大小為26～35目，去除纖維碎末，收集篩網中的膠原纖維；

s6：乾燥交聯：放入真空乾燥交聯箱內，對箱內抽真空至-90kpa以上，並保持1h以上，在一定溫度下，乾燥交聯。優選的，乾燥交聯的溫度為80～110℃，時間為8～24h。

所得的膠原止血纖維，經過輻照滅菌後，成為非水溶性的局部止血劑。電鏡觀察，它是一種長1～5mm，直徑5～20μm的微纖維結構。肉眼觀察是一種帶微黃色、柔軟的短纖維棉花狀物質。

本發明的膠原止血纖維性能符合以下要求：

(1)吸液量不少於自身重量的10倍；

(2)ph值為5.5-7.5；

(3)乾燥失重≤15％；

(4)硫酸鹽灰分≤2.0％

(5)重金屬含量≤10mg/kg

(6)蛋白含量≥80％

(7)羥脯氨酸含量≥總蛋白含量的9％(m/m)

(8)細胞毒性反應不大於1級

與現有技術相比，本發明製備得到的速膠原止血纖維有以下優點和利用價值：

一、本發明製備得到的膠原止血纖維由小牛真皮採集精製而成的高純度膠原纖維製備而成，具有良好的生物相容性和低免疫原性，未使用交聯劑改性，細胞毒性反應不大於1級；

二、本發明製備得到的膠原止血纖維為原組織膠原束狀纖維結構，具有良好的力學強度，不會被水或者酸溶解，也不會溶脹呈凝膠，創面粘附性好，尤其針對不規則創面的止血，成品成短纖維、團狀棉絮樣，使用時不易散落，方便操作；

三、本發明製備得到的膠原止血纖維，具有很強的親水性，吸液量高達16倍，能快速吸收血液或滲液，能封閉創面，促進血小板粘附形成血栓，從而達到快速長效止血的效果。

附圖說明

附圖用來提供對本發明的進一步理解，並且構成說明書的一部分，與本發明的實施例一起用於解釋本發明，並不構成對本發明的限制。在附圖中：

圖1是本發明所得的膠原止血纖維的掃描電鏡(sem)照片。

具體實施方式

以下結合附圖對本發明的優選實施例進行說明，應當理解，此處所描述的優選實施例僅用於說明和解釋本發明，並不用於限定本發明。

實施例1

一種膠原止血纖維的製備方法如下：

s1：取整張小牛皮的背部，用剃毛機將取好的牛皮背部的毛剔除，再用刀片刮去牛皮上的脂肪層和絨毛層，切成1～2cm左右的小段，置於-50℃冷凍，再將冷凍的牛皮片段用切片機切成厚度約0.2mm，大小1cm的皮片；

s2：脫脂處理：將皮片浸泡在2％氯化鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h後更換一次浸泡液；再將皮片浸泡在1％碳酸鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h後更換一次浸泡液；最後皮片轉移至皮片重量1％的脂肪酶解液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，反應ph為9，5～7h後更換一次脂肪酶酶解液，酶解結束後離心(5000rmp，8min)除去水分，再將牛皮纖維放入注射水中緩慢攪拌10～20分鐘，倒出、去除水份。反覆清洗三遍。

s3：乙醇梯度脫水：將脂肪酶處理後的牛皮纖維，浸泡在30％、60％、100％的乙醇溶液中，梯度脫水，間隔4h換一次乙醇溶液，然後自然乾燥。

s4：粉碎：將牛皮纖維撕成小塊放入高分子粉碎機內，關閉儀器裝置，以10hz

轉頻粉碎5s，粉碎1次。取出纖維，用鑷子挑除塊狀硬物，待乾燥。

s5：篩分：將粉碎後的膠原纖維經26目篩網篩分，去除纖維碎末，收集篩網中的膠原纖維。

s6：乾燥交聯：將粉碎的膠原纖維放入真空乾燥交聯箱內，對箱內抽真空至-90kpa以上，並保持1h以上，設置溫度為80℃，乾燥交聯時間為8h。

實施例2

一種膠原止血纖維的製備方法如下：

s1：取整張小牛皮的背部，用剃毛機將取好的牛皮背部的毛剔除，再用刀片刮去牛皮上的脂肪層和絨毛層，切成1～2cm左右的小段，置於-50℃冷凍，再將冷凍的牛皮片段用切片機切成厚度約0.3mm，大小0.5cm的皮片；

s2：脫脂處理：將皮片浸泡在5％氯化鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h後更換一次浸泡液；再將皮片浸泡在2％碳酸鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h後更換一次浸泡液；最後皮片轉移至皮片重量2％的脂肪酶解液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，反應ph為10，5～7h後更換一次脂肪酶酶解液，酶解結束後離心(5000rmp，8min)除去水分，再將牛皮纖維放入注射水中緩慢攪拌10～20分鐘，倒出、去除水份。反覆清洗三遍。

s3：乙醇梯度脫水：將脂肪酶處理後的牛皮纖維，浸泡在50％、75％、100％的乙醇溶液中，梯度脫水，間隔6h換一次乙醇溶液，然後自然乾燥。

s4：粉碎：將牛皮纖維撕成小塊放入高分子粉碎機內，關閉儀器裝置，以15hz轉頻粉碎8s，粉碎2次。取出纖維，用鑷子挑除塊狀硬物，待乾燥。

s5：篩分：將粉碎後的膠原纖維經30目篩網篩分，去除纖維碎末，收集篩網中的膠原纖維。

s6：乾燥交聯：將粉碎的膠原纖維放入真空乾燥交聯箱內，對箱內抽真空至-90kpa以上，並保持1h以上，設置溫度為90℃，乾燥交聯時間為12h。

實施例3

一種膠原止血纖維的製備方法如下：

s1：取整張小牛皮的背部，用剃毛機將取好的牛皮背部的長毛剔除，再用刀片刮去牛皮上的脂肪層，再用na2so4:na2s:cacl2＝1:50:20配比的脫毛劑脫毛15min，清洗後切成1～2cm左右的小段，置於-50℃冷凍，再將冷凍的牛皮片段用切片機切成厚度約0.4mm，大小2cm的皮片；

s2：脫脂處理：將皮片浸泡在8％氯化鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h後更換一次浸泡液；再將皮片浸泡在3％碳酸鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h後更換一次浸泡液；最後皮片轉移至皮片重量3％的脂肪酶解液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，反應ph為11，5～7h後更換一次脂肪酶酶解液，酶解結束後離心(5000rmp，8min)除去水分，再將牛皮纖維放入注射水中緩慢攪拌10～20分鐘，倒出、去除水份。反覆清洗三遍。

s3：乙醇梯度脫水：將脂肪酶處理後的牛皮纖維，浸泡在40％、80％、100％的乙醇溶液中，梯度脫水，間隔8h換一次乙醇溶液，然後自然乾燥。

s4：粉碎：將牛皮纖維撕成小塊放入高分子粉碎機內，關閉儀器裝置，以18hz轉頻粉碎10s，粉碎2次。取出纖維，用鑷子挑除塊狀硬物，待乾燥。

s5：篩分：將粉碎後的膠原纖維經35目篩網篩分，去除纖維碎末，收集篩網中的膠原纖維。

s6：乾燥交聯：將粉碎的膠原纖維放入真空乾燥交聯箱內，對箱內抽真空至-90kpa以上，並保持1h以上，設置溫度為100℃，乾燥交聯時間為16h。

實施例4

一種膠原止血纖維的製備方法如下：

s1：取整張小牛皮的背部，用剃毛機將取好的牛皮背部的長毛剔除，再用刀片刮去牛皮上的脂肪層，再用na2so4:na2s:cacl2＝2:40:10配比的脫毛劑脫毛15min，清洗後切成1～2cm左右的小段，置於-50℃冷凍，再將冷凍的牛皮片段用切片機切成厚度約0.1mm，大小2cm的皮片；

s2：脫脂處理：將皮片浸泡在10％氯化鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h後更換一次浸泡液；再將皮片浸泡在3％碳酸鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h後更換一次浸泡液；最後皮片轉移至皮片重量2％的脂肪酶解液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，反應ph為12，5～7h後更換一次脂肪酶酶解液，酶解結束後離心(5000rmp，8min)除去水分，再將牛皮纖維放入注射水中緩慢攪拌10～20分鐘，倒出、去除水份。反覆清洗三遍。

s3：乙醇梯度脫水：將脂肪酶處理後的牛皮纖維，浸泡在30％、70％、100％的乙醇溶液中，梯度脫水，間隔10h換一次乙醇溶液，然後自然乾燥。

s4：粉碎：將牛皮纖維撕成小塊放入高分子粉碎機內，關閉儀器裝置，以20hz轉頻粉碎8s，粉碎3次。取出纖維，用鑷子挑除塊狀硬物，待乾燥。

s5：篩分：將粉碎後的膠原纖維經32目篩網篩分，去除纖維碎末，收集篩網中的膠原纖維。

s6：乾燥交聯：將粉碎的膠原纖維放入真空乾燥交聯箱內，對箱內抽真空至-90kpa以上，並保持1h以上，設置溫度為105℃，乾燥交聯時間為24h。

實施例5

一種膠原止血纖維的製備方法如下：

s1：取整張小牛皮的背部，用剃毛機將取好的牛皮背部的長毛剔除，再用刀片刮去牛皮上的脂肪層，再用5％過氧化氫脫毛3-4h，清洗後切成1～2cm左右的小段，置於-50℃冷凍，再將冷凍的牛皮片段用切片機切成厚度約0.2mm，大小1cm的皮片；

s2：脫脂處理：將皮片浸泡在8％氯化鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h後更換一次浸泡液；再將皮片浸泡在2％碳酸鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h後更換一次浸泡液；最後皮片轉移至皮片重量1％的脂肪酶解液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，反應ph為13，5～7h後更換一次脂肪酶酶解液，酶解結束後離心(5000rmp，8min)除去水分，再將牛皮纖維放入注射水中緩慢攪拌10～20分鐘，倒出、去除水份。反覆清洗三遍。

s3：乙醇梯度脫水：將脂肪酶處理後的牛皮纖維，浸泡在50％、75％、100％的乙醇溶液中，梯度脫水，間隔12h換一次乙醇溶液，然後自然乾燥。

s4：粉碎：將牛皮纖維撕成小塊放入高分子粉碎機內，關閉儀器裝置，以15hz轉頻粉碎10s，粉碎2次。取出纖維，用鑷子挑除塊狀硬物，待乾燥。

s5：篩分：將粉碎後的膠原纖維經28目篩網篩分，去除纖維碎末，收集篩網中的膠原纖維。

s6：乾燥交聯：將粉碎的膠原纖維放入真空乾燥交聯箱內，對箱內抽真空至-90kpa以上，並保持1h以上，設置溫度為85℃，乾燥交聯時間為18h。

實施例6

一種膠原止血纖維的製備方法如下：

s1：取整張小牛皮的背部，用剃毛機將取好的牛皮背部的長毛剔除，再用刀片刮去牛皮上的脂肪層，再用10％過氧化氫脫毛3-4h，清洗後切成1～2cm左右的小段，置於-50℃冷凍，再將冷凍的牛皮片段用切片機切成厚度約0.1mm，大小1cm的皮片；

s2：脫脂處理：將皮片浸泡在10％氯化鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h後更換一次浸泡液；再將皮片浸泡在3％碳酸鈉溶液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，5～7h後更換一次浸泡液；最後皮片轉移至皮片重量2％的脂肪酶解液中，置於磁力攪拌器上緩慢攪拌24h，反應ph為9.5，5～7h後更換一次脂肪酶酶解液，酶解結束後離心(5000rmp，8min)除去水分，再將牛皮纖維放入注射水中緩慢攪拌10～20分鐘，倒出、去除水份。反覆清洗三遍。

s3：乙醇梯度脫水：將脂肪酶處理後的牛皮纖維，浸泡在50％、75％、100％的乙醇溶液中，梯度脫水，間隔6h換一次乙醇溶液，然後自然乾燥。

s4：粉碎：將牛皮纖維撕成小塊放入高分子粉碎機內，關閉儀器裝置，以20hz轉頻粉碎8s，粉碎2次。取出纖維，用鑷子挑除塊狀硬物，待乾燥。

s5：篩分：將粉碎後的膠原纖維經26目篩網篩分，去除纖維碎末，收集篩網中的膠原纖維。

s6：乾燥交聯：將粉碎的膠原纖維放入真空乾燥交聯箱內，對箱內抽真空至-90kpa以上，並保持1h以上，設置溫度為100℃，乾燥交聯時間為12h。

經上述方法製得的膠原止血纖維的主要參數性能如下表：

動物體內止血效能測定與比較：

實驗動物及組成：清潔級sd大鼠，由蘇州大學實驗動物中心提供(實驗動物生產許可證號：scxk(蘇)2012-0005)。普通級家兔由蘇州大學實驗動物中心提供(實驗動物生產許可證號：scxk(蘇)2012-0062)。雌雄各半，雌性無孕，所有動物在正式開始實驗前，均適應性預養一周。

選用家兔24隻，雌雄各半。其中12隻(試驗組(隨機用本發明實施例1-6的膠原止血纖維)、對照組(進口艾微停微纖維止血膠原粉)，每組各6隻)進行動物臟器(肝、脾)活體止血實驗。12隻(試驗組、對照組(進口艾微停微纖維止血膠原粉)，每組各6隻)進行動物肌肉創面活體止血實驗。

選用sd大鼠24隻，雌雄各半。其中12隻(試驗組、對照組(進口艾微停微纖維止血膠原粉)，每組各6隻)進行動物臟器(肝、脾)活體止血實驗。12隻(試驗組、對照組(進口艾微停微纖維止血膠原粉)，每組各6隻)進行大腦止血實驗。

出血模型製作及指標觀察：(1)大鼠大腦表面、內臟(肝臟、脾臟)出血模型：取健康sd大鼠24隻，雌雄各半，隨機分配到試驗組、艾微停組，每組6隻動物。術前大鼠禁食24h，自來水飼養。用10％水合氯醛300mg/kg經右側腹腔注射。sd大鼠麻醉後，仰臥位常規消毒，分別製取一創面(腦組織：長寬深約為5mmx3mmx2mm；臟器：長8mm，寬2mm，深5mm)、鋪無菌粘貼手術巾，逐層切開皮膚，分離腹膜，充分暴露臟器(肝臟、脾臟)，在每一臟器表面製取1個出血創面(長8mm，寬2mm，深5mm)，立即予滅菌紗布或止血材料覆蓋創面，並用精確稱量重量的藥棉壓迫，吸附所滲出的血液，壓迫30s後，每5s觀察一次，以不再滲血的時間為止血時間，並計算出血量(吸血後藥棉重量減去藥棉原重)。如傷口上粘有藥棉時，可用剪刀剪下，不可為清除藥棉而重新導致出血。止血後，分離頸外靜脈，以含枸櫞酸抗凝劑的真空採血管通過靜脈採血針採集1.0ml血液，用於測定肝素抗凝前的凝血指標。隨後通過靜脈採血針按肝素125單位/公斤體重劑量經頸外靜脈注入肝素，使實驗動物肝素化，10min後重複進行上述操作，觀察止血效果，記錄止血時間及出血量。止血後，同法經真空管採血1.0ml血液，用於測定肝素抗凝後的凝血指標。

(2)家兔肌肉、內臟(肝臟、脾臟)出血模型：取健康家兔24隻，雌雄各半，隨機分配到試驗組、艾微停組，每組6隻動物。用3％戊巴比妥鈉30mg/kg體重耳緣靜脈麻醉，備皮後，仰臥位常規消毒，鋪無菌粘貼手術巾，在家兔背部左右兩側切除3個2cmx2cm大小全皮膚層，暴露肌肉層，用手術刀片在肌肉層劃「#」製造滲血、出血創面，分別在肝臟表面製取3個，在脾臟表面製取1個相同的出血創面(長8mm，寬2mm，深5mm)，分別在出血創面平鋪滅菌紗布或止血材料，並用精確稱量重量的藥棉壓迫，吸附所滲出的血液。約30s左右揭開棉球觀察出血情況，以後每隔5s觀察1次，以不再滲血的時間為止血時間，並計算出血量(吸血後藥棉重量減去藥棉原重)。如傷口上粘有藥棉時，可用剪刀剪下，不可為清除藥棉而重新導致出血。止血後，分離頸外靜脈，以含枸櫞酸抗凝劑的真空採血管通過靜脈採血針採集1.0ml血液，用於測定肝素抗凝前的凝血指標。隨後用，通過靜脈採血針按肝素125單位/公斤體重經耳緣靜脈注入肝素，使實驗動物肝素化，10min後重複進行上述操作，觀察止血效果，記錄止血時間及出血量。止血後，同法經真空管採血1.0ml血液，用於測定肝素抗凝後的凝血指標。

本發明實施例1-6的膠原止血纖維和進口同類產品艾微停在sd大鼠體內止血效能比較：

表1：膠原止血纖維與艾微停在sd大鼠體內止血效能比較——止血時間(s)

表2：膠原止血纖維與艾微停在sd大鼠體內止血效能比較——出血量(mg)

表1和表2的結果表明，在sd大鼠大腦、肝臟、脾臟中，本發明的可膠原止血纖維的止血時間和出血量與進口同類產品艾微停無統計學差異，說明膠原止血纖維與進口同類產品艾微停在sd大鼠體內止血效能基本一致。

本發明實施例1-6的膠原止血纖維和進口同類產品艾微停在家兔體內止血效能比較：

表3：膠原止血纖維與艾微停在家兔體內止血效能比較——止血時間(s)

表4：膠原止血纖維與艾微停在家兔體內止血效能比較——出血量(mg)

表3和表4的結果表明，在家兔肌肉、肝臟、脾臟出血模型中，本發明的膠原止血纖維的止血時間和出血量與進口同類產品艾微停無統計學差異，說明本發明的膠原止血纖維與進口同類產品艾微停在家兔體內止血作用基本一致。

結論

綜上所述，通過與進口同類產品艾微停比較的結果表明，sd大鼠及家兔體內不同器官出血模型的體內實驗結果證實，本發明的膠原止血纖維的止血效果與進口的同類產品艾微停微纖維止血膠原(粉)基本一致。

最後應說明的是：以上所述僅為本發明的優選實施例而已，並不用於限制本發明，儘管參照前述實施例對本發明進行了詳細的說明，對於本領域的技術人員來說，其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分技術特徵進行等同替換。凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護範圍之內。