治療自身免疫性疾病的藥物組合物的製作方法

2023-05-12 05:31:21

專利名稱：治療自身免疫性疾病的藥物組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及自身免疫性疾病的治療，具體涉及用氟塞米藥物組合物治療自身免疫性疾病。
背景技術：
自身免疫性疾病是因機體免疫系統對自身成分發生免疫反應而導致的疾病狀態。其基本特徵為可檢測到高效價的自身抗體和/或自身應答性T細胞；自身抗體或應答T細胞作用於自身組織細胞，造成損傷或功能障礙；可複製出相似的動物模型，用患者血清或致敏淋巴細胞可使疾病被動轉移；病情轉歸與自身免疫應答強度密切相關；疾病的反覆發作和慢性遷移性；及有遺傳傾向。
正由於自身免疫性疾病是慢性、反覆發作的，因此需要進行長期治療和監測。目前常採用的是控制自身免疫性疾病引起的炎症及抑制機體免疫應答的藥物，例如採用糖皮質激素、烷化劑、抗代謝劑等免疫抑制劑。這些藥物包括潑尼松、氨甲喋呤、環磷醯胺、硫唑嘌呤、環孢素A等。但是，它們在抑制自身免疫應答引起的炎症反應和組織損傷的同時也抑制免疫系統的抗感染作用並可引起嚴重的不良反應。
1981年，美國科學家Kammerer合成了來氟米特(leflunomide)，1998年被美國FDA批准用於治療類風溼性關節炎。1990年本發明者與他的美國導師Dr.Williams，J.W.在進行來氟米特抑制同種異體移植皮膚、腎臟、心臟、小腸及近系異種心臟移植的排異反應的動物試驗中，對來氟米特的代謝產物氟塞米(flucyamide)進行了代謝動力學、長期毒性等試驗。本發明人在這些研究的基礎上，進一步進行合成工藝、藥效學、實驗治療學和臨床治療等研究，從而完成了本發明。

發明內容
本發明的目的在於提供一種低毒、有效的治療自身免疫性疾病的藥物組合物。
本發明的另一個目的在於提供這種藥物組合物在製備治療自身免疫性疾病的藥物製劑上的應用。
本發明的藥物組合物包含治療有效量的氟塞米衍生物或其可藥用鹽及藥學上可接受的輔料。
氟塞米的化學名稱為N-(對三氟甲苯基)-2-氰基-3-羥基-2-丁烯醯胺，其衍生物具有如下式(I)所示結構 其中，X為H，滷素，C1-5烷基，被OH、NH2、NHR或NRR取代的C1-5烷基，或C1-5烷氧基。
氟塞米衍生物的可藥用鹽包括但不限於例如下述無機酸的鹽鹽酸、硫酸、磷酸、焦磷酸、氫溴酸和硝酸；或者例如下述有機酸的鹽甲酸、檸檬酸、丙二酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、琥珀酸、乙酸、乳酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、2-羥基乙磺酸、水楊酸和硬脂酸。類似地，可藥用的陽離子包括但不限於鈉、鉀、鈣、鋁、鋰和銨。本領域技術人員可以確認很多種無毒的可藥用鹽。
本發明藥物組合物所包含的氟塞米衍生物或其可藥用鹽的治療有效量為每劑量單位1mg-1g(按氟塞米計)。
本發明藥物組合物所包含的藥學上可接受的輔料可以是常規製劑用的藥用載體、賦形劑及其它添加劑。如果需要的話，本發明藥物組合物還可包含其它活性成分。
本發明藥物組合物可以劑量單位製劑口服給藥或非胃腸道給藥。所述非胃腸道給藥包括經皮、皮下、血管內(例如靜脈內)、肌內或鞘內注射或輸注等。
適用口服使用的形式可有片劑、膠囊劑、水或油懸浮液、可分散粉末或顆粒劑、糖漿或酏劑。可按現有技術中任何已知方法製備，這樣的組合物可包含一種或多種選自甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑的試劑，以提供藥學上美觀和適口的製劑。
片劑包含活性成分和適於片劑生產的無毒可藥用賦形劑。這些賦形劑例如可以是惰性稀釋劑，如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉、纖維素等；造粒劑和崩解劑，如玉米澱粉或藻酸等；粘合劑，如澱粉、明膠或阿拉伯膠等；潤滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉等。片劑可為未包衣的，或者可採用已知技術進行包衣。這種包衣可以是腸溶或延緩包衣，以延遲在腸道中的崩解和吸收，提供在較長的時間內的緩釋作用。
口服製劑可以是硬明膠膠囊，其中，活性成分與惰性固體稀釋劑例如碳酸鈣、磷酸鈣或澱粉混合，或者為軟明膠膠囊，其中，活性成分與水或油介質例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
水懸浮液包含活性成分與適用於製備水懸浮液的賦形劑的混合物。這種賦形劑為懸浮劑，如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍樹膠和阿拉伯樹膠；分散劑或溼潤劑可為天然存在的磷脂，如卵磷脂。水懸浮液也可包含防腐劑、著色劑、矯味劑和甜味劑。
油懸浮液可通過將活性成分懸浮於植物油，如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油中，或者懸浮於礦物油如液體石蠟中而製得。油懸浮液可包含增稠劑，如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。可加入甜味劑和矯味劑以提供適口的口服製劑。這些組合物中可加入抗氧化劑如抗壞血酸進行防腐。
可分散粉末是將活性成分與分散劑或潤溼劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑混合，適於通過添加水而製備適宜的水懸浮液。可分散粉末中還可包含其它賦形劑如甜味劑、矯味劑和著色劑。
糖漿和酏劑可用甜味劑配製，如甘油、丙二醇、山梨醇、葡萄糖或蔗糖。這樣的製劑也可包含防腐劑、矯味劑和著色劑。
本發明的藥物組合物可在無菌介質中經非腸道給藥。根據所採用的賦形劑和濃度，藥物可懸浮或溶解於賦形劑中。非胃腸道給藥的注射劑可分裝在安瓿、一次性注射器或多劑量玻璃或塑料小瓶中，可以是注射液或粉針劑。
本發明的藥物組合物也可以按照製劑學常規方法製成霜劑，供局部應用或經皮吸收發揮全身作用。
本發明的藥物組合物用於治療自身免疫性疾病，包括類風溼性關節炎、系統性紅斑狼瘡、狼瘡性腎炎和腎病綜合症、強直性脊柱炎、銀屑病。
在治療上述疾病過程中，通常採用的劑量為0.03-5mg/kg/天，一次或分數次給藥，以2-6月為一個療程，一般需持續2-4個療程。
但是，可以理解，對於特定的患者而言，具體的劑量水平將取決於多種因素，包括接受治療的患者的體重、性別、年齡、一般健康狀況、膳食、給藥時間、給藥途徑、聯合用藥、所治療的具體疾病及疾病的嚴重程度。
本發明藥物組合物的活性成分氟塞米衍生物是一個相對低毒的新型免疫調節劑，對細胞免疫和體液免疫均有抑制作用。實驗證明，氟塞米衍生物可有效地控制非T細胞依賴性B細胞功能，降低MRL/1pr小鼠自發產生的高水平抗ds DNA抗體，並有效地控制IgG介導的免疫複合物在腎小球中的沉積，明顯減輕腎小球腎炎的病理表現，對實驗性系統性紅斑狼瘡有較明顯的緩解作用，並能緩解並發的淋巴結腫大。在類風溼性關節炎的臨床治療中，氟塞米對患者症狀和體徵的改善明顯優於MTX，有效率和顯效率均明顯高於MTX，而不良反應(尤其是胃腸道反應)明顯低於MTX。在其它自身免疫性疾病的治療上，一些經多種藥物治療仍無效的患者用本發明的藥物組合物治療後產生了滿意的效果。
具體實施例方式
實施例1 氟塞米的合成取來氟米特10g(0.037mol)，加入盛有2％氫氧化鈉溶液240ml的燒瓶中，於23-25℃攪拌1小時。然後向反應液中加水1300ml，濾去不溶物，在無色濾液中加入濃鹽酸26ml，立即得到白色沉澱物，此時濾液pH=1-2。濾取白色固體，水洗(3×40ml)，40℃真空濃縮，得粗品約10g。
用無水乙醇/乙酸乙酯(1∶8)180ml將粗品重結晶。析出的結晶於40℃真空乾燥，得針狀結晶產品8g(熔點230-231.5℃)。用薄層層析(以CH2Cl2/HOAc=3/1為展開劑)和1H-NMR進行產品純度檢測。
實施例2 膠囊劑的製備配方(1000個膠囊)氟塞米 1g-1000g澱粉 2.5g-2500g將氟塞米原料磨成細粉，過100目篩；將澱粉乾燥，過120目篩；採用等量遞加法混合原輔料，過120目篩2-3次，使充分混合；送檢合格後充填膠囊。
實施例3 片劑的製備配方(1000片)氟塞米 1g-1000g乳糖 5.0g-5000g澱粉 1.5g-1500g滑石粉0.1g-200g5％澱粉漿適量低取代羥丙基纖維素0.1g-1000gOPADRY-OY-GM7305 適量WHITE將氟塞米原料磨成細粉，過100目篩；將輔料乳糖、澱粉、L-HPC過100目；採用等量遞加法混合原輔料，過80目篩3-4次，使充分混合；在混合物中加入澱粉漿制軟材，過24目制溼顆粒，於55-60℃通風烘乾箱中乾燥；將乾燥顆粒經20目整粒後加入滑石粉，用直徑6.0mm的淺凹衝壓片，製成片芯。
將OPADRY-OY-GM7305 WHITE溶於25％乙醇水溶液中，攪拌45分鐘，在片床溫度為38-45℃、噴氣壓力為3-4kg的條件下將片芯包衣。包衣完畢(經檢測，片芯增重3％左右)後繼續保溫10分鐘，吹涼。
實施例4 注射劑的製備配方(1000ml)氟塞米1g-1000g氯化鈉0.1g-900g氫氧化鈉 0.01g-200g注射用水 加至1000ml將氯化鈉先溶解於80ml注射用水；加入氟塞米，使其充分溶解；加入0.1N氫氧化鈉調節pH至7左右，再加足量水、攪拌，使最終體積為1000ml。將所得溶液分裝於中性玻璃容器中，用流通蒸汽100℃滅菌30分鐘。
實驗例1 氟塞米對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞功能的影響採用雄性ICR小鼠50隻(體重19～21克)，隨機分為5組，即對照組、環磷醯胺組(120mg/kg)、氟塞米三個劑量組(2、9、45mg/kg)，每組10隻。各組小鼠灌胃給藥5天，每鼠0.5ml，每天一次，對照組給同容量的1％羧甲基纖維素鈉溶液。於給藥第三天，每鼠再腹腔注射0.25％澱粉液0.5ml，第五天給藥後4小時，每鼠腹腔注射5％雞紅細胞懸液0.5ml(無菌操作自雞翼靜脈採血，加5倍量阿氏液，4℃冰箱保存，使用前用無菌生理鹽水離心洗滌三次，配成5％雞紅細胞生理鹽水懸液)。30分鐘後，頸惟脫臼處死，腹腔注射Hank氏液2.5ml，輕輕揉按小鼠腹部，使Hank氏液充分涮洗腹腔巨噬細胞。
然後，吸取腹腔洗液，滴於二張載玻片上，放入墊有溼紗布的盒內，於37℃孵育30分鐘，孵畢，於生理鹽水中漂洗，除去未貼片的細胞。晾乾，甲醇固定，吉姆薩斯染劑(Giemsa Wright)染色，蒸餾水漂洗，晾乾，用油鏡計數100個巨噬細胞，計算百分率和吞噬指數，結果見表1。
表1 氟塞米對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響組別 鼠數 吞噬百分率(M±SD) 吞噬指數(M±SD)對照組 1056.1±6.04 1.18±0.20環磷醯胺120mg/kg/d×5dp.o. 1034.9±6.97 0.75±0.25*氟塞米2mg/kg/g/d×5dp.o. 1050.8±8.09 1.08±0.23氟塞米9mg/kg/d×5dp.o. 1043.5±10.35*0.87±0.19*氟塞米45mg/kg/d×5dp.o. 1032.0±5.25Δ**0.64±0.14Δ**與對照組比較，*P＜0.001**P＜0.01；與環磷醯胺比較，ΔP＞0.05。
如表1所示，氟塞米能明顯抑制小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬功能，中、高劑量組與對照組相比有顯著性差異。
實驗例2 氟塞米對小鼠細胞免疫功能的影響採用ICR小鼠40隻(雌、雄各半、體重23±1g)，隨機分為4組氟塞米二個劑量組(9、45mg/kg)，環磷酸胺組(120mg/kg)和溶媒對照組。各腹腔注射0.2ml藥液，每天一次，連續5天後處死小鼠，按常規3HTdR摻入法定量測定T淋巴細胞轉化程度。
T淋巴細胞與植物凝素(PHA)一起體外培養時，可轉化成淋巴母細胞，並出現旺盛的分裂現象。細胞內蛋白質和核酸合成增加，以反映DNA合成速率的3H-胸腺嘧啶核坩(3HTdR)摻入值為指標，可定量表示淋巴細胞轉化程度，從而反映T淋巴細胞的免疫功能。
表2 氟塞米對小鼠3H-TdR摻入法淋巴細胞轉化試驗結果的影響組別 鼠數3H-TdR摻入量(CPM±SD)對照組 10 292.9±193.0環磷醯胺120mg/kg/d×5di.p. 10 140.7±108.9*氟塞米9mg/kg/d×5dp.o. 10 139.1±121.8*氟塞米45mg/kg/d×5dp.o.10 127.8±99.5*與對照組比較，*P＜0.01。
從表2結果可見，腹腔注射氟塞米的小鼠3HTdR摻入值明顯低於對照組(P＜0.05)，表明氟塞米對小鼠淋巴細胞轉化功能有明顯的抑制作用，即抑制小鼠T細胞的免疫功能。
實驗例3 氟塞米對巨噬細胞產生白細胞介素1(IL-1)試驗氟塞米分五個劑量組，以脂多糖(LPS)和環磷醯胺作為對照組，用1640培養液在無菌條件下配製成不同濃度同等容量的溶液備用。
在無菌操作室內取健康純系小鼠70隻(體重18～20g)，隨機分成以上七個試驗組，每組10隻，脫臼處死，用75％乙醇浸泡片刻，仰臥固定，剪開腹部表皮，注射5ml Hank氏液，挪動腹部，回收腹腔液，離心(500rpm，3分鐘)棄去上清液，沉澱物加1640培養液至3ml，混勻後離心(2000rpm，10分鐘)，計數巨噬細胞，用10％小牛血清(FCS)細胞保存液(PRMI)1640培養液稀釋至2×106/ml細胞數。加入24孔培養板中(1ml孔)，置37℃、5％ CO2培養小時，棄去非粘附細胞，在獲得的巨噬細胞單層中加入不同濃度的受試物，每孔終容積為1ml，置37℃、5％ CO2培養48小時，收集上清夜(4000rpm，8分鐘)過濾，20℃保存。
在無菌操作室內另取純系小鼠10隻，眼球放血致死，75％乙醇浸泡片刻，仰臥固定，取出胸腺，剝盡周圍組織，用撕碎法撕碎胸腺至10ml刻度離心管中，離心(500rpm，5分鐘)棄去上清液，沉澱物(胸腺細胞)加少量1640培養液混勻，勻漿中加1640培養液至70ml，加210μl刀豆素A(ConA)溶液，充分混勻。另取不同濃度的藥液分別加至96孔培養板中，每孔100μl，然後加入con-A胸腺細胞懸液100μl(con-A終濃度3μg/ml，胸腺細胞終濃度1.87×108/ml)，置37℃、5％ CO2培養箱培養48小時。培養結束前6小時，每孔加入3H-TdR 20μl(0.2μ Ci/孔)。收集細胞於49型纖維濾紙上，用LKB自動液體閃爍計數器測定放射活性(cpm)。結果以三份復管的cpm均值±SD表示，根據IL-1活性記錄樣品在不同濃度時刺激小鼠胸腺細胞增殖而摻入3H-TdR的量(cpm±SD)進行統計學處理，評價氟塞米抑制巨噬細胞產生IL-1的作用。結果見表3。表3 IL-1試驗氟塞米刺激小鼠胸腺細胞增殖摻入3H-TdR量(cpm)組別 樣本數 cpm±SD氟塞米20μg/ml 10 66.9±52.0**氟塞米15μg/ml 10 39.72±13.71**氟塞米10μg/ml 10 415.41±497.90*氟塞米5μg/ml 10 678.65±293.14*氟塞米1μg/ml 10 1263.55±564.32脂多糖(Lps)1μg/ml 10 1101.98±257.0環磷醯胺(cy)10μg/ml 10 1199.3±193.3與Lps組比較，*P＜0.01；**P＜0.001。
從表3可見，氟塞米5、10、15、20μg/ml劑量組對巨噬細胞產生IL-1有明顯的抑制作用，且呈劑量依賴性關係。
實驗例4 氟塞米對人體外周淋巴細胞單向混合反應的抑制作用人體外周白細胞分離取正常人血40ml放入50m試管中，由底部加入Ficoll-Hypague(Pharmacia，Piscataway，NJ)10ml，於1600rpm離心20分鐘，吸取淋巴細胞層，用PBS洗滌三次後，將分離的淋巴細胞混懸於含有10％滅活小牛血清(FBS，GLBCO)及100μg/ml青/鏈黴素的RPMI 1644(GIBCO，Grand Lsand，NY)中備用。
T淋巴細胞分離在進行混合淋巴細胞反應試驗前，將白細胞混懸於含10％滅活人血清(Diognoctic Inc Meguan，WI)的RPMI1644中。以尼龍羊毛柱(nylonwool column)及抗白細胞11b抗體(Anti-Leu Ab，Becton Dickinson Mountain View，CA)，加補體(Pel-Free，Brown Derr，WL)分別去除巨噬細胞、B-細胞、中性殺傷細胞、單核細胞，得到的混懸液中95％為CD3陽性T細胞，其餘為B細胞。
混合淋巴細胞反應(MLR)將分離的T細胞每孔2×105與等量的加碼射線(3000拉德)照射過的同種異體淋巴細胞混合培養，並加入不同劑量氟塞米及環孢素。氟塞米的濃度分別為100μM、75μM、50μM及25μM，環孢黴素濃度為90nM，以細胞保存液配製。此實驗用U型底96孔板進行，每劑量組試驗重複5次(孔)。培養6天後，於每孔中加入1μCi的3H標記胸腺嘧啶，檢測放射活性。
計算公式％抑制＝[(試驗標本放射活性—背景放射活性)/(對照標本放射活性—背景放射活性)]×100％。
結果見表4。
表4 氟塞米抑制單向混合淋巴細胞反應藥物及濃度 (％)抑制率平均值±SD1 2 3 4 5氟塞米100μM95.85 97.48 86.77 71.27 99.64 90.20±11.6675μM 91.08 77.49 83.69 74.89 93.90 84.21±8.2750μM 54.31 55.08 70.78 58.16 94.15 66.50±16.0225μM-17.69 -23.82 -18.29 31.66 86.00 11.57±47.29CsA90nM 105.28 104.03 73.53 96.41 47.51 85.35±24.70其中，背景為100％抑制，無任何藥物抑制率0％。當氟塞米濃度為100M、75μM、50μM、25μM時，單向淋巴細胞反應抑制率分別為90.20±11.66，84.21±8.27，66.50±16.20，11.57±47.29，藍染色證實淋巴細胞無破壞，故以上濃度對淋巴細胞無毒性作用。
實驗例5 氟塞米對MRL小鼠自發系統紅斑狼瘡的抑制作用採用10～20周齡雌性MRL/lpr小鼠(由美國Jackson實驗室提供)，體重25～30g，每組8隻。給藥組含量大於99％的氟塞米細顆粒粉末混懸於1％羧甲基纖維素，劑量為20、35、65mg/kg；及環孢素A 50mg/kg。對照組等體積1％羧甲基纖維素。各組動物每天經胃管灌服一次。63天後採血，分離出血清0.3ml。
用酶聯反應法檢測血清中的抗雙鏈DNA(ds DNA)抗體、酶聯反應法平板以10μg/ml多聚左旋穀氨酸為陰性對照，於小牛胸腺ds DNA 10μg/ml於4℃培養20小時。檢測血清自1∶1000稀釋度開始，雙倍稀釋置入酶聯反應法平板內培養，結合的抗體以聯有辣根過氧化酶的抗小鼠IgG或IgM經酶聯反應法檢測儀檢測，結果見表5A、表5B。
表5A 氟塞米(p.o.)對MRL/lpr小鼠ds DNA IgM水平的影響

*與對照組比較，有顯著差異。
表5B 氟塞米(p.o.)對MRL/lpr小鼠ds DNA IgG水平的影響

*與對照組比較，有顯著差異。
給藥63天後，將動物與麻醉下處死，取所有直視下可發現的淋巴結，以電子秤秤重。未治療組及環孢素治療組均可見大量腫大淋巴結，分布於背部、頸部及腹腔內。淋巴結總重量比較見表5C。
表5C 氟塞米(p.o.)抑制MRL/lpr小鼠淋巴結增生作用

*與對照組比較p＜0.05。
病理檢查結果氟塞米35及65mg/kg劑量對MRL/lpr小鼠治療9周後明顯減少受累腎小球的數量，明顯逆轉受累腎小球的炎症損害。IgG免疫複合物腎小球中的沉積明顯減輕，而環孢素50mg/kg及氟塞米20mg/kg未能明顯減緩腎小球炎症損害及IgG沉積。在各組中IgM沉積無明顯變化。
氟塞米35mg/kg/天對MRL/lpr小鼠自身免疫性腎疾病的作用、組織學及免疫組織化學A)未治療組顯示增生性腎小球腎炎(腎小球增大、有大量淋巴細胞、中性白細胞浸潤)，並有大量IgG沉積於受累腎小球；B)CsA(50mg/kg/天)治療並未明顯減輕腎炎病變；C)氟塞米治療組明顯減少受累腎小球數量、明顯逆轉受累腎小球損害，在絕大多數治療鼠中腎小球組織學正常。
本實驗例結果表明，氟塞米可有效地控制非T細胞依賴性B細胞功能，降低MRL/lpr小鼠自發產生的高水平抗ds DNA抗體，並有效地控制IgG介導的免疫複合物在腎小球中的沉積，明顯減輕腎小球腎炎的病理表現，從而對實驗性系統性紅斑狼瘡有較明顯的緩解作用，並能緩解並發的淋巴結腫大。
治療例1 本發明的藥物組合物對類風溼性關節炎(RA)的療效及其安全性年齡18-65歲的活動性RA患者190例(排除重要臟器疾病者、孕婦及哺乳期婦女、對受試藥過敏或過敏體質者、試驗前接受過金製劑治療者)，採用隨機對照盲法試驗。試驗組123例(男性14例，女性109例)，平均年齡47±11歲，平均病程69±77個月；對照組67例(男性16例，女性51例)，平均年齡50±13均病程39±50個月。
試驗組服用氟塞米20mg片劑2片，每天一次；MTX空白藥6片，1次/周。對照組服氟塞米空白藥2片，1次/日；MTX6片，1次/周。試驗開始後同時服用非甾體類藥諾德倫(0.4，1次/日)，4～6周後停用。試驗前曾服用其它慢作用藥的患者必須有一個月的清洗期。
治療前及服藥後6周、12周對RA各項指標進行評估，求得平均改善百分率。平均改善率＜30％為無效；≥30％為有效；≥50％為顯效。結果見表6。
表6 兩組患者臨床及實驗室指標治療前後的變化(X±SD)氟塞米組 MTX組項目治療前 6周 12周 治療前6周 12周休息痛7.1±2.0-3.0±2.1 -4.5±2.3 7.4±1.7 -2.4±1.5*-3.8±2.0*晨僵(分鐘)157±256-99±193 -119±208 110±65-46±44*-74±68*握力(kPa) 10.3±6.34.6±4.6 7.6±6.9 10.5±6.7 3.6±3.4*6.6±5.4*關節壓痛數15.3±6.3 -5.3±4.0 -8.8±5.3 13.9±5.2 -3.7±2.9*-6.7±4.8*關節壓痛指數 24.8±14.3 -12.9±9.6-17.7±12.521.9±12.0 -8.1±5.2*-12.1±8.2*關節腫脹數10.9±5.6 -5.4±5.6 -7.1±5.9 9.7±4.1 -3.0±2.5*-4.6±3.2*關節腫脹指數 14.7±9.2 -8.1±8.6 -10.2±8.8 13.2±6.6 -3.9±3.7*-5.8±4.5*生活能力1.6±0.5-0.7±0.4 -1.1±0.5 1.5±0.4 -0.4±0.3*-0.7±0.4*病人評價7.4±1.9-2.9±1.8 -4.4±2.2 7.4±1.7 -2.3±1.6*-3.8±2.1*醫生評價7.2±1.9-2.9±1.8 -4.3±2.2 7.2±1.7 -2.3±1.6*-3.6±2.2*血沉(mm/h)47.6±22.0-20.9±17.448.1±24.1 -20.7±20.3CRP(μg/ml) 30.7±32.8-23.2±28.926.5±24.4 -17.8±22.5RF-半定量2.0±0.6 -0.6±0.4 1.8±0.6 -0.3±0.3*注治療前為各項指標的基礎值，其它時間點為變化值(治療後值—治療前值)，RF半定量用其倒數的對數值；兩樣本均數比較*P＜0.05。
從表6可見，氟塞米組和MTX於治療6周後均能明顯改善患者的臨床症狀和實驗室指標，提高患者的關節功能，但對X射線改變無影響。除握力、血沉、CRP外，氟塞米組對主要療效指標的改善明顯優於MTX，其12周有效率和顯效率分別為95.9％和80.5％，而MTX組12周有效率和顯效率分別為85.1％和62.7％。兩組臨床療效比較差異有顯著性(P＜0.05＝，見表7。
表7 兩組患者用藥12周時療效比較＜30％30％～50％≥50％有效率組別 例數例數(％) 例數(％) 例數(％) (％)氟塞米組 123 5(4.1) 19(15.4) 99(80.5) (95.9)MTX組 67 10(14.9) 15(22.4) 42(62.7) (85.1)*注兩組療效比較*P＜0.05。
治療過程中，氟塞米組20例患者發生不良反應，發生率為16.3％，主要表現為厭食、噁心/嘔吐、皮疹、脫髮，偶有一過性ALT升高和白細胞降低，其中重度1例(皮疹)，中度1例(ALT升高)，輕度18例。MTX組27例患者發生不良反應，發生率為40.3％，其中重度1例，中度2例，輕度24例，顯著高於氟塞米組(P＜0.01)。所有不良反應均在療程內或療程結束後恢復，70％在出現後6周內恢復。
典型病例1徐女士，女，47歲。患者87年開始四肢大小關節腫痛，以雙腕、雙膝關節腫痛尤為明顯，雙腕半強直，雙膝關節功能明顯障礙，癱瘓臥床三年，生活不能自理。治療前血沉(ESR)92mm/h，類風溼因子(RF)1∶160，C-反應蛋白(CRP)12.1μg/ml。患者曾服用多種藥物，如強的松、MTX、雷公藤及多種非甾體藥物，其中服用雷公藤後於38歲絕經，並伴嚴重脫髮。
患者於98年8月開始服用氟塞米片劑(20mg/日)。服用第二周出現皮疹，經抗過敏治療和劑量減半，一周後皮疹消退。重新恢復原劑量。治療第6周可坐著移動，小關節腫痛緩解，第12周可站立並扶行2～3米。12周複查ESR11mm/h，RF(-)，CRP1.91μg/ml。用藥一年，患者生活可以自理。患者可以上下樓梯，行走自如。其間多次複查各項生化指標均正常。現病人已服藥近3年，可步行2華裡路。
典型病例2劉先生，54歲，江西南昌人。1999年春節期間患RA，在江西省各家醫院行中、西醫治療，服用過大量強的松、「痛痺丸」、螞蟻藥之類的中、西藥，效果均不理想。患者在2000年2月至5月期間幾乎癱瘓在床，生活不能自理。2000年7月在上海仁濟醫院鮑春德教授處求治，多藥無效。2000年12月起，在鮑教授指導下改服氟塞米，服用第2個月就出現效果。經過近1年的氟塞米治療，患者的病情明顯改善，不僅生活可以自理，平時還騎白行車上下班，甚至可以遠距離出差(廣州、深圳)。用藥期間，無明顯不良反應。
典型病例3丁女士，49歲，上海莘莊人，RA病程3年餘，癱瘓在床，無法行走，不能自己穿衣服、系紐扣、吃飯，靠丈夫服侍。其丈夫每天中午回家為她準備午飯，工作受影響。2001年8月下旬起服用氟塞米。1個月後起效，手足關節腫痛明顯好轉，肘部類風溼結節消失，血沉降到正常範圍內，肝功能、血常規正常。目前用藥4月餘，已可以行走，生活能夠自理，可以自己穿衣、燒飯，丈夫恢復正常工作。
治療例2 本發明的藥物組合物對銀屑病型關節炎的治療典型病例1.宋女士，60歲，遼寧大連人，銀屑病型關節炎。銀屑病20餘年，2000年起出現四肢關節損害，關節腫脹、疼痛，活動不利，X線攝片示雙側腕關節骨質損害，血沉(ESR)46mm/小時。曾用多藥甲氨蝶呤(MTX)等治療，無顯效，關節腫痛無好轉，血沉持續高於正常。自2001年8月16日起服用本發明的藥物組合物。2周後，血沉(ESR)降至30mm/小時，關節腫脹、疼痛、活動不利好轉。用藥40天時，複查X線片顯示腕關節骨質損害消失(經放射科、風溼免疫科聯合會診證實)。用藥過程中，無明顯不良反應，隨訪肝功能、血常規均正常。目前患者一般情況良好，已停用止痛藥，無活動障礙。
典型病例2.秦先生，男，41歲，江蘇南京人，銀屑病型關節炎。2001年9月起病，四肢小關節腫脹、疼痛，活動障礙，影響工作。自2001年10月起服用本發明的藥物組合物，3周起效，關節腫脹、疼痛好轉，活動輕鬆。服藥3個月時，關節腫痛基本消失，活動無障礙，恢復正常工作。用藥6周時，出現大便次數增多的副作用，每天3～5次，性質無改變，未處理，遂繼續用藥，2周後，大便次數恢復正常。用藥過程中無其他不良反應。
治療例3 本發明的藥物組合物對強直性脊柱炎的治療典型病例1.王先生，男，25歲，遼寧瀋陽人，強直性脊柱炎。2001年8月起病，骶髂關節疼痛，彎腰活動障礙，經X線攝片確診為強直性脊柱炎。確診後經柳氮磺胺吡啶、強的松等治療4個月，無明顯療效。2002年1月起服用本發明的藥物組合物，6周起效，骶髂關節腫痛減輕，彎腰活動輕鬆。用藥3個月時，腫痛基本消失，活動無障礙。不良反應表現為大便次數增多，每日3～4次，性質無改變，於用藥4周時出現，未處理，2周後大便次數恢復正常。用藥期間無其他不良反應。
典型病例2.王先生，男，49歲，湖北武漢人，強直性脊柱炎。1970年1月起病，未正規治療。2001年起病情加重，雙側骶髂、膝關節腫脹、疼痛明顯，彎腰、走路等活動明顯障礙，影響正常工作和日常生活。2001年8月起服用本發明的藥物組合物，2周起效，關節腫脹、疼痛好轉、活動輕鬆。用藥6個月時關節腫脹、疼痛基本消失，彎腰、走路等活動無障礙，恢復正常生活和工作。不良反應為皮膚瘙癢，在用藥5周時出現，加用抗過敏藥對症處理2周後消失。用藥期間無其他不良反應。
權利要求
1.治療自身免疫性疾病的藥物組合物，包含治療有效量的式(I)所示氟塞米衍生物 其中，X為H，滷素，C1-5烷基，被OH、NH2、NHR或NRR取代的C1-5烷基，或C1-5烷氧基，或其可藥用鹽及藥學上可接受的輔料。
2.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述治療有效量為每劑量單位1mg-1g。
3.如權利要求1所述的藥物組合物，所述藥物組合物為膠囊劑，每個膠囊包含氟塞米 1mg-1g澱粉 2.5mg-2.5g
4.如權利要求1所述的藥物組合物，所述藥物組合物為片劑，每片包含氟塞米 1mg-1g乳糖5mg-5g澱粉 1.5mg-1.5g滑石粉0.1mg-0.2g5％澱粉漿適量低取代羥丙基纖維素 0.1mg-1gOPADRY-OY-GM7305適量WHITE
5.如權利要求1所述的藥物組合物，所述藥物組合物為注射劑，每劑量單位包含氟塞米 1mg-1g氯化鈉0.1mg-0.9g氫氧化鈉適量注射用水加至1ml
6.權利要求1所述藥物組合物在製備治療自身免疫性疾病的藥物製劑上的應用。
7.如權利要求6所述的應用，其中所述自身免疫性疾病包括類風溼性關節炎、系統性紅斑狼瘡、狼瘡性腎炎和腎病綜合症、強直性脊柱炎、銀屑病。
全文摘要
治療自身免疫性疾病的藥物組合物,包含治療有效量的式(I)所示氟塞米衍生物，其中,X為H,滷素,C1－5烷基,被OH、NH2、NHR或NRR取代的C1－5烷基,或C1－5烷氧基,或其可藥用鹽及藥學上可接受的輔料。本發明的藥物組合物是一種新型免疫調節劑,對細胞免疫和體液免疫均有抑制作用。在治療自身免疫性疾病,包括類風溼性關節炎、系統性紅斑狼瘡、狼瘡性腎炎和腎病綜合症、強直性脊柱炎、銀屑病等疾病的臨床實踐中證明療效顯著,毒性較低。
文檔編號A61P37/02GK1387845SQ0211159
公開日2003年1月1日 申請日期2002年4月30日 優先權日2002年4月30日
發明者肖飛 申請人:上海欣凱醫藥發展有限公司