亞磷醯化方法
2023-05-12 01:04:31 2
專利名稱：亞磷醯化方法
技術領域：
本發明涉及對醇或硫醇進行亞磷醯化(phosphitylation)的方法，尤其涉及對核苷進行亞磷醯化而形成核苷亞磷醯胺的方法。
合成的低聚核苷酸是檢測基因和病毒疾病的重要診斷工具。而且，低聚核苷酸和修飾的低聚核苷酸作為抑制基因表達或蛋白質功能的治療候選物質是很有用的。由於FDA已批准將低聚核苷酸類似物用於治療細胞巨化病毒(CMV)，而且其它幾種低聚核苷酸類似物目前也正在進行臨床試驗，因此大規模合成作為治療候選物質的低聚核苷酸已變得越來越重要。每個臨床試驗中都需要數千克的純化低聚核苷酸類似物。
目前用於製備低聚核苷酸的主要方法是亞磷醯胺法。對於更大量的低聚核苷酸的不斷增長的需求也使亞磷醯胺化合物的需求量相應增加。通常，亞磷醯胺化合物是在活化劑的存在下，將核苷用亞磷醯化試劑進行亞磷醯化作用來製備。最常使用的活化劑為親核活化劑1H-四唑。但是，1H-四唑為爆炸性物質，因此用在大規模合成中可能帶來危險。
為了更容易地製備診斷和治療用途的低聚核苷酸，則需要可促進亞磷醯化作用又不會增加副產物的非爆炸性活化劑。
根據本發明，其提供了在活化劑存在下，用亞磷醯化試劑對醇或硫醇進行亞磷醯化作用的方法，其特徵在於，活化劑具有式1的結構 式1中，p為0或1-4的整數。R在每次出現時為取代基，優選各自獨立為滷素、取代或未取代的脂肪族基團、-NR1R2、-OR3、-OC(O)R3、-C(O)OR3、氰基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環基、-CHO、-COR3、-NHCOR3、取代或未取代的芳烷基、滷代烷基(如，三氟甲基和三氯甲基)，或-SR3。優選，R為滷素、取代或未取代的脂肪族基團、-NR1R2、-OR3、-OC(O)R3、-C(O)OR3或氰基。或者，兩個相鄰R基團與其所連接的碳原子一起形成飽和或不飽和六元環，優選芳環。R1和R2各自獨立為-H、取代或未取代的脂肪族基團、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基；或與其所連接的氮原子一起形成雜環基。R為取代或未取代的脂肪族基團、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基。X為O或S。優選，X為O。特別優選X為O，且p為0。
優選所使用的式1化合物為與有機鹼形成的鹽絡合物。
在許多實施方案中，該醇或硫醇為含有游離羥基或硫醇基團的核苷或低聚核苷酸，而且該醇或硫醇還包括含有天然核苷戊糖和非天然核苷糖，如己糖的核苷和低聚核苷酸。當醇或硫醇為核苷或低聚核苷酸時，其通常為被保護的脫氧核糖核苷、被保護的核糖核苷、被保護的寡脫氧核糖核苷酸、被保護的寡核糖核苷酸，或具有脫氧核糖核苷酸和核糖核苷酸部分的被保護的低聚核苷酸，其中各個部分都包括游離的3』-或5』，優選3』-羥基或硫醇基團，且最優選為3』-羥基基團。
可按照本發明的方法進行亞磷醯化的醇和硫醇包括式2的化合物 其中，A代表 或 其中，X1每次出現時獨立為-O-或-S-。優選，X1每次出現時均為-O-。X2每次出現時獨立為-O-、-S-、-CH2或-(CH2)2-。優選，X2每次出現時均為-O-。X3每次出現時獨立為O或S。在更優選的實施方案中，X1和X2每次出現時各自為-O-。R4為醇保護基團或硫醇保護基團。優選，R為對酸不穩定的保護基團。R5每次出現時獨立為-H、-F、-OR6、-NR7R8、-SR9，或取代或未取代的脂肪族基團，例如甲基或烯丙基。R10每次出現時獨立為磷保護基團，其通常為合成低聚核苷酸時使用的的可裂分的磷保護基團，並優選為取代或未取代的脂肪族基團、取代或未取代的芳基或取代或未取代的芳烷基，例如式-CH2CH2CN、-CH2CH2CN、-CH2CH2-Si(CH3)2C6H5、-CH2CH2-S(O)2-CH2CH3、-CH2CH2-C6H4-NO2、-CH2CH2-Si(CH3)2C6H5、-CH2CH2-S(O)2-CH2CH3或-CH2CH2-C6H4-NO2的基團。R6每次出現時獨立為-H、取代或未取代的脂肪族基團(如，甲基、乙基、甲氧基乙基或烯丙基)、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、醇保護基團、特別是鹼-不穩定的保護基團，或甲矽烷基保護基團，或-(CH2)q-NR11R12。R7和R8每次出現時各自獨立為-H、取代或未取代的脂肪族基團，或氨保護基團。或者，R7和R8與其所連接的氮原子一起為雜環基。R9每次出現時獨立為-H、取代或未取代的脂肪族基團，或硫醇保護基團。R11和R12各自獨立為-H、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的脂肪族基團、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的雜芳烷基，或氨基保護基團。或者，R11和R12與其所連接的氮原子一起形成雜環基。q為1-約6的整數。s為0或正整數。優選，s為0、1或2，最優選為0。B各自獨立為-H、天然或非天然核鹼、被保護的核鹼、被保護的天然或非天然核鹼、雜環或被保護的雜環。
核苷鹼包括天然存在的鹼，例如腺嘌呤、鳥嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶，還包括經修飾的鹼，例如7-脫氮鳥嘌呤、7-脫氮-8-氮鳥嘌呤、5-丙炔基胞嘧啶、5-丙炔基尿嘧啶、7-脫氮腺嘌呤、7-脫氮-8-氮腺嘌呤、7--脫氮-6-氧嘌呤、6-氧嘌呤、3-脫氮腺苷、2-氧-5-甲基嘧啶、2-氧-4-甲硫基-5-甲基嘧啶、2-硫代羰基-4-氧-5-甲基嘧啶、4-氧-5-甲基嘧啶、2-氨基嘌呤、5-氟尿嘧啶、2，6-二氨基嘌呤、8-氨基嘌呤、4-三唑-5-甲基胸腺嘧啶、4-三唑-5-甲基尿嘧啶和次黃嘌呤。
被保護的核苷鹼是指其中的反應性鹼官能團被保護起來的核苷鹼。類似地，被保護的雜環是雜環中的反應性取代基被保護起來的雜環。通常，核苷鹼或雜環具有可被氨基保護基團(如醯胺或氨基甲酸酯)保護起來的氨基基團。例如，腺嘌呤和胞嘧啶的氨基基團通常被苯甲醯保護基團所保護，鳥嘌呤中的氨基基團通常被異丁醯基、4-異丙基苯氧乙醯基或叔丁基苯氧乙醯基保護。但是，還可使用其它保護方案，例如甲脒。例如，為了快速解保護，腺嘌呤和鳥嘌呤的氨基基團用苯氧乙醯基進行保護，胞嘧啶的氨基基團用異丁醯基或乙醯基進行保護。除去核鹼或雜環保護基團的反應條件要取決於所用的保護基團。使用醯胺保護基團時，可用鹼溶液處理低聚核苷酸來除去保護基團，該鹼溶液例如為濃縮氫氧化銨溶液、正甲胺溶液或氫氧化銨中的叔丁胺溶液。
氨、羥基和硫醇保護基團對本領域熟練技術人員來說是已知的。氨保護基團的例子參見Greene等，Protective Groups in OrganicSynthesis(1991)，John Wiley Sons，Inc.，309-405頁，該文獻所教導的全部內容引入本文作為參考。優選，將氨保護為醯胺或氨基甲酸酯。羥基保護基團的例子參見同上，10-142頁，其全部教導引入本文作為參考。可使用的保護基團的例子包括甲矽烷基，特別是三烷基，例如三(C1-4烷基)甲矽烷基。優選的甲矽烷基保護基團為叔丁基二甲基甲矽烷基。優選的羥基保護基團為叔丁基二甲基甲矽烷基。硫醇保護基團的例子參見同上，277-308頁，其全部教導引入本文作為參考。
酸不穩定的保護基團是指通過使該基團與Bronsted或Lewis酸接觸可將其除去的保護基團。酸不穩定的保護基團對本領域熟練技術人員來說是已知的。常用的酸不穩定保護基團的例子包括取代或未取代的三苯甲基(同上，60-62頁)、取代或未取代的四氫吡喃基團(同上，31-34頁)、取代或未取代的四氫呋喃基團(同上，36-37頁)或pixyl基團(同上，65頁)。通常用給電子取代基，例如烷氧基基團取代三苯甲基基團。優選的酸不穩定保護基團為取代或未取代的三苯甲基，例如4，4』-二甲氧基三苯甲基(下文中為「DMT」)。
鹼不穩定的保護基團是指通過使該基團與Bronsted或Lewis鹼接觸可將其除去的保護基團。鹼不穩定的保護基團對本領域熟練技術人員來說是已知的。常用的鹼不穩定保護基團的例子包括羰基化合物，例如乙醯基、苯甲醯基和新戊醯基。
應當認識到，如果式2表達為給定醇的天然核苷構型(D-異構體)，則本發明同樣還可用於相應的合成或非天然醇構型(L-異構體)，以及上述兩種構型的混合物中。
可用於本發明方法中的亞磷醯化試劑通常具有下述化學通式
R13-X6-PX4X5其中，R13表示磷保護基團，通常為合成低聚核苷酸中所用的可裂解的磷保護基團，例如取代或未取代的脂肪族基團或芳烷基，例如甲基、-CH2CH2-Si(CH3)2C6H5、-CH2CH2-S(O)2-CH2CH3、-CH2CH2-C6H4-NO2，並優選為式-CH2CH2CN的基團；取代或未取代的芳香族基團，例如苯基或取代的苯基，例如4-氯苯基、2-氯苯基、2-硝基苯基或4-硝基苯基；X6代表O或S，並優選O；X4和X5可相同或不同，代表離去基團，例如滷素，通常為溴或氯，或-NR14R15，其中R14和R15各自獨立代表烷基，優選C1-6烷基基團，或R14和R15與其所連接的N一起形成5-7元環。通常X4和X5中的至少一個基團為式-NR14R15的基團。最優選，X4和X5相同，並且尤其優選X4和X5都為-N[CH(CH3)2]2基團。特別優選X6為0且R15為-CH2CH2CN。
本發明的方法尤其適用於製備亞磷醯胺，尤其是核苷和低聚核苷酸亞磷醯胺。
優選的亞磷醯化試劑的例子包括O-β-氰基乙基-N，N，N』，N』-四異丙基亞磷醯二胺(O-β-cyanoethy1-N，N，N』，N』-tetraisopropylphosphorodiamidite)，(通常稱作「tetraphos」)、O-β-氰基乙基-N，N，N』，N』-四甲基亞磷醯二胺、O-β-氰基乙基-N，N，N』，N』-四乙基亞磷醯二胺、雙(N，N-二異丙基氨基)-2-甲基三氟乙醯基氨基乙氧基膦、雙(N，N-二異丙基氨基)-2-二苯甲基甲矽烷基乙氧基膦和O-β-氰基乙基-雙(N-嗎啉代)亞磷醯二胺。
本發明的方法通常在0℃-約50℃的溫度下進行，優選在環境溫度，例如約15℃-約30℃下進行。
有利的是使用基本無水的反應條件。
本發明的許多實施方案是在惰性氣氛，例如氮氣或氬氣下進行。
根據本發明的方法可有利地用於製備核苷亞磷醯胺。因此，本發明的優選方面包括製備下式化合物的方法 其包括使下式化合物
其中，R4如上述定義，並優選為二甲氧基三苯甲基，R5如上述定義；與下式化合物NCCH2CH2O-P(N(R16)2)其中，R16代表C1-6烷基，優選為異丙基；在活化劑存在下進行反應，其中活化劑包括下式化合物 及有機鹼。
在許多實施方案中，活化劑按照與醇的化學計量摩爾比或小於化學計量摩爾比的量使用，活化劑與醇的摩爾比為約0.4∶1-1∶1，尤其優選為約0.5∶1-0.75∶1。
通常，亞磷醯化試劑按照與醇的化學計量摩爾比或過量使用，亞磷醯化試劑與醇的摩爾比為約1∶1-3∶1，尤其優選為約1∶1-1.5∶1。
在有機鹼存在下，本發明中所用的活化劑具有良好的溶解性，尤其是在亞磷醯化反應常用的有機溶劑中。活化劑和有機鹼的濃度可達到活化劑在所用溶劑中的溶解度。在優選實施方案中，活化劑和有機鹼的存在濃度為約0.01M-約2M，例如約0.05M-約0.5M。通常活化劑和有機鹼的存在濃度可高達0.25M，例如約0.1M-約0.25M。在更優選的實施方案中，活化劑和有機鹼的摩爾濃度相同。在某些實施方案中，有機溶劑為氯碳化合物，例如二氯甲烷。在優選的實施方案中，有機溶劑包括乙腈。另一個優選實施方案中，有機溶劑包括有機醯胺，例如二甲基甲醯胺、1-甲基-2-吡咯烷酮或1，3-二甲基-2-咪唑啉酮。
有機鹼是指pH為7時趨向於接受質子的有機化合物。優選的有機鹼為仲胺、叔胺或氮雜環化合物，每種化合物均可被一個或多個取代基取代或未取代。非質子有機鹼是指接受質子之前其化學結構中不具有氫鍵合質子的有機鹼。優選將非質子有機鹼，例如叔胺和非質子氮雜環化合物與本文中描述的式1化合物結合使用，以改善亞磷醯化反應。
本文中描述的氮雜環化合物包括芳環上具有一個或多個氮原子的雜芳基，和非芳環體系上具有至少一個氮原子的雜脂環族基。優選，氮雜芳基化合物具有5-或6-元芳環，且芳環上具有1-3個氮原子。優選氮雜脂環基化合物為5-或6-元環，通常在環上包括一個或兩個氮原子。優選的氮雜環化合物為有機鹼。有機鹼氮雜環化合物的例子包括嘧啶、1-烷基吡唑，特別是1-(C1-4烷基)吡唑、1-芳基吡唑、1-苄基吡唑、吡嗪、N-烷基嘌呤，特別是N-(C1-4烷基)嘌呤、N-芳基嘌呤、N-苄基嘌呤、N-烷基吡咯，特別是N-(C1-4烷基)吡咯、N-芳基吡咯、N-苄基吡咯、吡啶、N-烷基咪唑，特別是N-(C1-4烷基)咪唑、N-芳基咪唑，特別是N-苯基咪唑、N-苄基咪唑、喹啉、異喹啉、喹喔啉、喹唑啉、N-烷基吲哚，特別是N-(C1-4烷基)吲哚、N-芳基吲哚，N-苄基吲哚、N-烷基苯並咪唑，特別是N-(C1-4烷基)苯並咪唑、N-芳基苯並咪唑、N-苄基苯並咪唑、三嗪、噻唑、1-烷基-7-吖吲哚，特別是1-(C1-4烷基)-7-吖吲哚、1-芳基-7-吖吲哚、1-苄基-7-吖吲哚、吡咯烷、嗎啉、哌啶和哌嗪。特別優選的氮雜環化合物為吡啶類，例如吡啶和3-甲基吡啶，和N-(C1-4烷基)咪唑，例如N-甲基咪唑。
叔胺是指一種具有氮原子的有機鹼，且其中的氮原子鍵合於三個碳原子上，往往鍵合於三個芳基上，通常為苯基，和/或烷基，通常鍵合於三個烷基上，該烷基包括，例如三烷基胺，例如三甲胺、三乙胺和二異丙基乙基胺。此外，叔胺還可為氮雜環基團，且其中的氮原子為非質子性。氮雜環基團類的叔胺為優選的。氮雜環叔胺的例子為N-烷基吡咯烷、N-芳基吡咯烷、N-烷基吡咯、N-芳基吡咯、N-烷基嗎啉、N-芳基嗎啉、N-烷基哌啶、N-芳基哌啶、N，N-二烷基哌嗪、N，N-二芳基哌嗪、N-烷基-N-芳基哌嗪、奎寧環、1，5-二氮雜二環[4.3.0]壬-5-烯和1，8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯。叔胺還可為氮雜芳基化合物或氮雜雜脂環基化合物。
仲胺是指氮鍵合到單個氫和兩個碳原子上的有機鹼。通常，氮原子鍵合到兩個烷基或芳基上，或形成氮雜環基團的一部分。仲胺化合物的例子包括二乙胺和二異丙基胺。
特別優選的有機鹼包括吡啶、3-甲基吡啶和N-甲基咪唑。
脂肪族基團、芳基、芳烷基、雜芳基、氮雜芳基和雜脂環族基的適當取代基包括芳基、滷代芳基、烷基、滷代烷基(如，三氟甲基和三氯甲基)、脂肪族醚、芳香族醚、苄基、取代的苄基、滷素，尤其是氯和氟、氰基、硝基、-S-(脂肪族或取代的脂肪族基團)，和-S-(芳香族或取代的芳香族基團)。
本文中所用的脂肪族基團包括直鏈或支鏈的、完全飽和或含有一個或多個非共軛雙鍵的C1-C18烴，或完全飽和或含有一個或多個非共軛雙鍵的環狀C3-C18烴。烷基基團為完全飽和的直鏈或支鏈C1-C8烴或C3-C8環狀烴。脂肪族基團優選為烷基。
芳基基團包括碳環芳環體系(如，苯基)，和稠合於一個或多個碳環芳烴的碳環芳環體系(如，萘基和蒽基)，或稠合於一個或多個非芳環的芳環體系(如，1，2，3，4-四氫萘基)。
本文中所用的雜環基團包括雜芳基和雜脂環族基。本文中所用的雜芳基包括芳環上具有一個或多個選自硫、氮或氧的雜原子的芳環體系。優選，雜芳基為具有1-4個雜原子的5或6元環體系。本文中所用的脂肪族雜環基為非芳環體系，其優選具有5-6個原子並包括至少一個選自氮、氧和硫的雜原子。雜環基團的例子包括嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、硫代嗎啉基、吡咯烷基、噻唑烷基、四氫thienyl、吖丁啶基、四氫呋喃基、二氧己環基和二氧雜烷基(dioxepanyl)、噻吩基、吡啶基、噻二唑基、噁二唑基、吲哚基、呋喃、吡咯、咪唑、吡唑、三唑、嘧啶、吡嗪、噻唑、異噁唑、異噻唑、四唑、噁二唑、苯並噻吩、苯並咪唑、吲哚、四氫吲哚、吖吲哚、吲唑、喹啉、咪唑並吡啶、嘌呤、吡咯並[2，3-d]嘧啶和吡唑並[3，4-d]嘧啶。
本文中所用的芳烷基基團是指通過烷基進行連接的芳香族取代基。優選的芳烷基包括苄基。
本文中所用的雜芳烷基基團是指通過烷基進行連接的雜芳基取代基。
通過下面實施例對本發明進行非限制性的說明。
實施例1按照下列步驟製備糖精的N-甲基咪唑鹽。將糖精懸浮在乙腈中，並向懸浮液中滴加相對於糖精為1.1當量的N-甲基咪唑。減壓濃縮反應混合物以形成結晶鹽，用醚或己烷洗滌該結晶鹽以除去痕量的N-甲基咪唑和乙腈。
實施例2使用O-β-氰基乙基-N，N，N』，N』-四異丙基亞磷醯胺，和作為活化劑的糖精N-甲基咪唑鹽來對一系列核苷進行亞磷醯化作用。
一般方法向適當尺寸的燒瓶中加入核苷(1.5mmol)，並與20mL吡啶一起共沸蒸餾兩次(旋轉蒸發器)以乾燥固體。用Ar吹掃燒瓶並向燒瓶中加入15mL乙腈。室溫下攪拌混合物直至獲得澄清溶液。向混合物中加入O-β-氰基乙基-N，N，N』，N』-四異丙基亞磷醯胺(Tetraphos)，之後加入糖精的N-甲基咪唑鹽。室溫下攪拌混合物，同時用HPLC監測反應直至結束。反應結束時，用30mL乙酸乙酯稀釋混合物，並用2×25mL的碳酸氫鈉飽和水溶液和25mL氯化鈉飽和水溶液洗滌有機混合物。分離有機層並用MgSO4乾燥。過濾懸浮液，並使用旋轉蒸發器除去溶劑。剩餘物經真空乾燥得到泡沫狀物。
表1amidite合成結果
a％amidite＝粗產物中的％amiditeb產率＝粗產物產率實施例2
向500mL圓底燒瓶中加入5』-DMT-N-Bz-2』-去氧腺苷(18.00g，27.37mmol)，並通過加入和蒸發(旋轉蒸發器)2×200mL的甲苯來共沸乾燥固體。剩餘物真空乾燥16h。在氬氣氛下將剩餘物溶解在乙腈(180mL)中，並加入O-β-氰基乙基-N，N，N』，N』-四異丙基亞磷醯二胺(9.90g，32.84mmol)。攪拌混合物5分鐘並加入固體糖精N-甲基咪唑鹽(3.63g，13.69mmol)。室溫下攪拌混合物，同時用HPLC監測反應的進行。18h後，未觀察到進一步反應。向反應混合物中加入乙酸乙酯(200mL)，並用碳酸氫鈉飽和水溶液(2×150mL)和氯化鈉飽和水溶液(150mL)洗滌有機溶液。分離有機層並用MgSO4乾燥。過濾懸浮液，並使用旋轉蒸發器除去溶劑。剩餘物經真空乾燥16h得到白色泡沫狀物。
粗產率23.70gHPLC92.5％使用矽膠(230g)柱對粗產物(23.70g)進行色譜分離。用30％乙酸乙酯/含0.5％三乙胺的己烷裝載色譜柱。用2倍柱體積的30％乙酸乙酯/己烷洗滌色譜柱。將粗產物裝載在色譜柱上，並用2倍柱體積的30％乙酸乙酯/己烷、2倍柱體積的40％乙酸乙酯/己烷、2倍柱體積的50％乙酸乙酯/己烷和最後的3倍柱體積的70％乙酸乙酯/己烷洗脫色譜柱。當TLC(8∶3的乙酸乙酯∶己烷)檢測出產物時收集餾分。將含有所希望的產物的餾分合併起來，並使用旋轉蒸發器除去餾分中的溶劑。真空乾燥剩餘物16h得到白色泡沫狀物。
產率17.55g(75％)HPLC97.5％31P NMR99.3％
權利要求
1.一種在活化劑存在下，用亞磷醯化試劑對醇或硫醇進行亞磷醯化的方法，其特徵在於，活化劑具有式1的結構 其中，p為0或1-4的整數，R在每次出現時為取代基，X7為O或S。
2.根據權利要求1的方法，其中X7為O，且p為0。
3.根據權利要求1或2的方法，其中使用式1化合物與有機鹼形成的鹽絡合物。
4.根據權利要求3的方法，其中有機鹼選自吡啶、3-甲基吡啶和N-甲基咪唑。
5.根據前述任一權利要求的方法，其中醇或硫醇為包括游離羥基或硫醇基團的核苷或低聚核苷酸。
6.根據權利要求5的方法，其中對包括游離3』-羥基基團的核苷進行亞磷醯化作用。
7.根據前述任一權利要求的方法，其中亞磷醯化試劑具有下列化學通式R13-X6-PX4X5其中，R13表示磷保護基團，X6代表O或S，X4和X5可相同或不同，代表離去基團。
8.根據權利要求7的方法，其中R13表示取代或未取代的脂肪族基團或芳烷基，或取代或未取代的芳香族基團，X6為O且X4和X5各自獨立代表-NR14R15，其中R14和R15各自獨立代表C1-6烷基基團，或R14和R15與其所連接的N一起形成5-7元環。
9.根據權利要求8的方法，其中亞磷醯化試劑選自O-β-氰基乙基-N，N，N』，N』-四異丙基亞磷醯二胺、O-β-氰基乙基-N，N，N』，N』-四甲基亞磷醯二胺、O-β-氰基乙基-N，N，N』，N』-四乙基亞磷醯二胺、雙(N，N-二異丙基氨基)-2-甲基三氟乙醯基氨基乙氧基膦、雙(N，N-二異丙基氨基)-2-二苯甲基甲矽烷基乙氧基膦和O-β-氰基乙基-雙(N-嗎啉代)亞磷醯二胺。
10.一種製備下式化合物的方法 其包括使下式化合物 與下式化合物NCCH2CH2O-P(N(R16)2)2在活化劑存在下進行反應，其中活化劑包括下式化合物 及有機鹼，其中，R4為醇保護基團，R5為-H、-F、-OR6、-NR7R8、-SR9，或取代或未取代的脂肪族基團，例如甲基或烯丙基，R6每次出現時獨立為-H、取代或未取代的脂肪族基團、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芳烷基、醇保護基團、或-(CH2)q-NR11R12，R7和R8各自獨立為-H、取代或未取代的脂肪族基團，或氨保護基團，或者R7和R8與其所連接的氮原子一起為雜環基，R9為-H、取代或未取代的脂肪族基團，或硫醇保護基團，R11和R12各自獨立為-H、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的脂肪族基團、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的雜芳烷基，或氨基保護基團，或者R11和R12與其所連接的氮原子一起形成雜環基，q為1-約6的整數，B為-H、天然或非天然核鹼、被保護的核鹼、被保護的天然或非天然核鹼、雜環或被保護的雜環，R16代表C1-6烷基，優選異丙基。
11.根據權利要求10的方法，其中有機鹼選自吡啶、3-甲基吡啶和N-甲基咪唑。
12.根據權利要求10或11的方法，其中R5為H、OMe或OCH2CH2OMe。
13.根據權利要求10或11的方法，其中R4為酸不穩定的保護基團，且R5為OR6，其中R6為鹼不穩定的保護基團或甲矽烷基保護基團。
全文摘要
提供了一種在活化劑存在下用亞磷醯化試劑對醇或硫醇進行亞磷醯化作用的方法。活化劑具有式(I)結構其中p為0或1－4的整數，R在每次出現時為取代基。優選X
文檔編號C07H19/16GK1705675SQ200380101403
公開日2005年12月7日 申請日期2003年10月8日 優先權日2002年10月15日
發明者N·D·辛哈 申請人:艾夫西亞生物科技公司