木果楝檸檬苦素a作為椰心葉甲毒殺劑的應用的製作方法

2023-05-11 20:55:41 1

專利名稱：木果楝檸檬苦素a作為椰心葉甲毒殺劑的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及下述通式(I)表示的檸檬苦素化合物-木果楝檸檬苦素A的新應用， 具體涉及木果楝檸檬苦素A作為椰心葉甲毒殺劑的應用，尤其是作為椰心葉甲5齡幼蟲的 毒殺劑。
背景技術：
下述通式(I)表示的檸檬苦素化合物-木果楝檸檬苦素A(Xyl0lim0n0id Α)於 2007年首次報導從漿果楝分離出來(見文獻L. S. Gan，X.N.Wang，Y. Wu et al. J. Nat. Prod. ,70(8) : 1344-1347(2007))。其通式如下 通式(I)通式(I)表示的化合物-木果楝檸檬苦素Α，該化合物外觀呈白色粉末，分子式為 C32H42O8，其化學名為6-去氧，3-0-2S-甲基丁醯基-桃花心木內酯[英文名6-Deoxy，3-0-2 S-methylbutyryl-swietenolide]，中文名為木果楝檸檬苦素A。到目前為止，未發現上述通式(I)表示的化合物-木果楝檸檬苦素A對椰心葉甲 Brontispa longissima(Gestro)具有毒殺作用的 艮道。椰心葉甲Brontispa Iongissima(Gestro)是一種重大危險性的外來毀滅性害蟲。 在國家林業局最新公布的19種林業檢疫性有害生物名單中名列第三位，是我國1992年新 增的禁止入境的二類檢疫性有害生物。目前椰心葉甲在我國海南省、廣東省、臺灣省和香港 地區危害嚴重，並且有蔓延的趨勢。該害蟲嚴重為害椰子、檳榔、大王棕等棕櫚科植物，對我 國亞熱帶甚至溫帶地區種植的棕櫚科園林植物的生長和繁殖構成了嚴重威脅。目前國內的 化學防治方法主要是採用高效氯氰菊酯、呲蟲啉、辛硫磷等人工合成的化學農藥。這類農藥 雖毒力強、見效快，但長期、大量使用易導致農藥殘留、農藥抗性、環境汙染和慢性毒性等諸 多問題。因此，研發高效低毒、無公害、選擇性強的生物農藥已成為當今農藥發展的新趨勢 和必然需求。上述通式(I)表示的化合物是由植物新陳代謝產生，屬於生物農藥，開發作為椰心葉甲的毒殺劑可以很好的克服上述人工合成的化學農藥作為椰心葉甲的毒殺劑而存在 的種種問題。

發明內容
本發明的目的是提供木果楝檸檬苦素A作為椰心葉甲毒殺劑的新應用。
本發明通過幼蟲活體模型實驗證實木果楝檸檬苦素A對椰心葉甲的5齡幼蟲具有
很強的毒殺作用，因此可以作為椰心葉甲的毒殺劑，從而實現了本發明的目的。本發明的中的木果楝檸檬苦素A可以通過現有技術中的方法分離得到，如根據參 考文獻 L.S.Gan，X. N. Wang, Y. Wu et al. J. Nat. Prod. ,70(8) 1344-1347 (2007)公開的分 離方法分離獲得。本發明人利用現代色譜技術從印度的木果楝屬紅樹植物Xylocarpus moluccensis中分離出檸檬苦素化合物木果楝檸檬苦素A(Xylolimonoid A)，其分離方法 是以木果楝屬紅樹植物Xylocarpus moluccensis的種子為原料，粉碎後用乙醇提取，減壓 濃縮後得乙醇提取物，乙醇提取物加水混懸後，用乙酸乙酯萃取，減壓濃縮得到的乙酸乙酯 萃取物。該萃取物經正相矽膠柱層析，以氯仿-甲醇為洗脫劑從體積比100 1-5 1梯 度洗脫，收集氯仿_甲醇體積比為100 1洗脫的餾分，然後經反向矽膠柱層析洗脫，以乙 腈-水為洗脫劑從體積比50 50-100 0梯度洗脫，收集乙腈-水體積比為65 35洗 脫的餾分，最後通過高效液相色譜製備，用體積比為53 47的乙腈-水為洗脫劑洗脫，分 離純化而得到化合物木果楝檸檬苦素A(XylolimonoidA。本發明採用浸葉法測定木果楝檸檬苦素A對椰心葉甲5齡幼蟲的毒殺活性，結果 表明該化合物對椰心葉甲5齡幼蟲具有很強的毒殺作用。在供試濃度為50mg/L時，椰心 葉甲5齡幼蟲的致死率為100%，在該濃度下，同等實驗條件下，其殺蟲效果稍優於對照藥 劑_魚藤酮，遠遠優於對照藥劑_川楝素，毒殺結果見表1。表1化合物木果楝檸檬苦素A(Xyl0lim0n0id Α)對椰心葉甲5齡幼蟲的毒力 上述實驗結果表明木果楝檸檬苦素A可以用作椰心葉甲的毒殺劑，其對椰心葉甲 5齡幼蟲具有很好的毒殺效果。
具體實施例方式以下實施例是對本發明的進一步說明，而不是對本發明的限制。木果楝檸檬苦素A(Xyl0lim0n0id Α)的製備以7. Okg印度木果楝屬植物Xylocarpus moluccensis的種子為原料，粉碎後用15kg 95% (體積分數)的乙醇室溫提取5次，減壓濃縮後得乙醇提取物1087g。乙醇提 取物加水混懸後，用乙酸乙酯萃取8次，減壓濃縮得到的乙酸乙酯萃取物320g。該萃取物 經正相矽膠(100-200目)柱層析，以氯仿-甲醇洗脫系統從體積比100 1-5 1梯度 洗脫，收集氯仿-甲醇體積比為100 1洗脫的餾分，該餾分濃縮後，然後經反向矽膠(0 75 μ m)柱層析洗脫，用乙腈_水洗脫系統從體積比50 50-100 0梯度洗脫，收集乙 腈-水體積比為65 35洗脫的餾分，該餾分最後通過高效液相色譜製備(Waters 600，色 譜柱 YMC 250X 10mm, i.d.，5ym，RP-C18，流速 3ml/min，保留時間 RT = 18. 5min)，用體積 比為53 47的乙腈-水為洗脫劑洗脫，分離純化而得到白色化合物，該化合物經結構鑑定 為木果楝檸檬苦素A(Xyl0IimonoidA)。結構鑑定由高分辨質譜(HRTOF-MS)可知此化合物的[Μ+Na] +為577. 2795，確定其分子式為C32H4208。該化合物最大紫外吸收波長位於210. Onm。其核磁共振波譜(1H NMRj13C NMR)數 據與文獻[L. S. Gan, X. N. Wang, Y. Wu et al. J. Nat. Prod.，70 (8) 1344-1347 (2007)]報導 的數據對照一致，故此化合物確定為6-去氧，3-0-2S-甲基丁醯基-桃花心木內酯，英文名 6-Deoxy，3-0-2S-methylbutyryl-swietenolide，中文名為木果楝檸檬苦素 A。其1H NMR 與 13C NMR數據見表2。表2. 1H, 13C 匪R data of Xylolimonoid A. (500MHz for 1H and 125MHz for 13C NMR, Chloroform-d) 對比例1 :供試椰心葉甲幼蟲模型供試幼蟲系從海南儋州椰子樹上採回，在室內飼養繁殖多代。試驗時挑取個體大 小、顏色一致的5齡幼蟲供試。毒殺活性試驗試驗採用浸葉法，將椰子樹Cocos nuciferaLinnaeus的樹葉放入50mg/L的魚 藤酮_丙酮溶液中浸漬3秒後取出，放吸水紙上晾乾，再將晾乾的浸藥葉片放入培養皿中， 然後將大小一致的椰心葉甲5齡幼蟲放入裝有浸藥葉片的培養皿中，培養皿底鋪有濾紙保 溼。將處理好的培養皿置於培養箱(T :25士 1°C，RH = 70 80% )中。以丙酮作空白對照，試驗重複3次，每次10頭幼蟲。定時檢查試蟲死亡情況，以毛筆輕觸蟲體，以完全不動者視 為死亡。分別於給藥後12小時、24小時、48小時和72小時時統計死蟲數，計算死亡率。其 結果見於表1。對比例2:供試椰心葉甲幼蟲模型供試幼蟲系從海南儋州椰子樹上採回，在室內飼養繁殖多代。試驗時挑取個體大 小、顏色一致的5齡幼蟲供試。毒殺活性試驗 試驗採用浸葉法，將椰子樹Cocos nucifera Linnaeus的樹葉放入50mg/L的川 楝素_丙酮溶液中浸漬3秒後取出，放吸水紙上晾乾，再將晾乾的浸藥葉片放入培養皿中， 然後將大小一致的椰心葉甲5齡幼蟲放入裝有浸藥葉片的培養皿中，培養皿底鋪有濾紙保 溼。將處理好的培養皿置於培養箱(T :25士 1°C，RH = 70 80% )中。以丙酮作空白對照， 試驗重複3次，每次10頭幼蟲。定時檢查試蟲死亡情況，以毛筆輕觸蟲體，以完全不動者視 為死亡。分別於給藥後12小時、24小時、48小時和72小時時統計死蟲數，計算死亡率。其 結果見於表1。實施例1 供試椰心葉甲幼蟲模型供試幼蟲系從海南儋州椰子樹上採回，在室內飼養繁殖多代。試驗時挑取個體大 小、顏色一致的5齡幼蟲供試。毒殺活性試驗試驗採用浸葉法，將椰子樹Cocos nucifera Linnaeus的樹葉放入50mg/L的木果 楝檸檬苦素A-丙酮溶液中浸漬3秒後取出，放吸水紙上晾乾，再將晾乾的浸藥葉片放入培 養皿中，然後將大小一致的椰心葉甲5齡幼蟲放入裝有浸藥葉片的培養皿中，培養皿底鋪 有濾紙保溼。將處理好的培養皿置於培養箱(T :25士 1°C，RH = 70 80% )中。以丙酮作 空白對照，試驗重複3次，每次10頭幼蟲。定時檢查試蟲死亡情況，以毛筆輕觸蟲體，以完 全不動者視為死亡。分別於給藥後12小時、24小時、48小時和72小時時統計死蟲數，計算 死亡率。其結果見於表1。
權利要求
下述通式(I)表示的化合物作為椰心葉甲毒殺劑的應用通式(I)。FSA00000151270400011.tif
2.根據權利要求1所述的通式(I)表示的化合物作為椰心葉甲毒殺劑的應用，其特徵 在於所述的椰心葉甲為椰心葉甲的5齡幼蟲。
全文摘要
本發明公開了一種木果楝檸檬苦素A作為椰心葉甲毒殺劑的應用，其結構如通式(I)所示。本發明採用浸葉法測定木果楝檸檬苦素A對椰心葉甲5齡幼蟲的毒殺活性，結果表明該化合物對椰心葉甲5齡幼蟲具有很強的毒殺作用。在供試濃度為50mg/L時，椰心葉甲5齡幼蟲的致死率為100％，在該濃度下，同等實驗條件下，其殺蟲效果稍優於對照藥劑-魚藤酮，遠遠優於對照藥劑-川楝素。由此可以表明木果楝檸檬苦素A可以用作椰心葉甲的毒殺劑，其對椰心葉甲5齡幼蟲具有很好的毒殺效果。通式(I)
文檔編號A01N43/16GK101849542SQ20101019405
公開日2010年10月6日 申請日期2010年6月3日 優先權日2010年6月3日
發明者吳軍, 李敏一 申請人:中國科學院南海海洋研究所