17α-二氫馬烯雌酮抗動脈粥樣硬化的用途的製作方法
2023-05-19 19:37:21 2
專利名稱：17α-二氫馬烯雌酮抗動脈粥樣硬化的用途的製作方法
在美國，心血管疾病(CVD)仍然是致殘和死亡的主要原因，儘管幾十年來這方面的治療已取得了很大進展。冠狀動脈疾病是CVD的重要形式，是美國當今死亡的重要原因，每年因此病死亡人數超過55萬人。腦血管疾病在美國列為第三大死亡原因。冠狀動脈與腦血管疾病的病因就是動脈粥樣硬化。雖然動脈粥樣硬化的臨床表現形式各異，但它是每年1百多萬心臟病發作和藥40萬中風者的主要原因。除動脈粥樣硬化發病率高和死亡率高之外，據估計，它還使美國經濟每年在工資、生產率及醫療費用方面損失價值超過800億美元。[Levy，R.，Am.HeartJ.1101116(1985)]。
動脈粥樣硬化是動脈硬化最重要的形式，可涉及主動脈及其所有分支。主動脈在鄰近完全正常的血管壁區域的小段內，可有嚴重散在和融合在一起的粥樣硬化斑。這種粥樣硬化斑(即動脈粥樣硬化斑)經過數年的緩慢發展，最終成為脂質團塊，其大部分是膽固醇和膽固醇酯。這些動脈內的團塊在血管腔內達到足夠大時，就可以阻礙血流，並引起渦流，從而導致粥樣硬化表面破裂，形成缺損和微栓子。由於血流受阻，結果使微栓子定位因而產生急性症狀。
據信，在導致動脈粥樣硬化的一連串過程中，觸發因素就是在頸動脈、冠狀動脈、腦動脈及主動脈內有脂質條紋的形成。這種損害包括膽固醇和膽固醇酯的沉積，而這些東西通常是發現在平滑肌細胞內和內膜層的巨噬細胞內。[Ross，R.，.NewEng.J.Med.295369(1977)]。內皮的脫去或損傷，引起環繞細胞的細胞外基質完整性的暴露和可能的破壞，導致1)血液循環中單核細胞及由其所分化的巨噬細胞的聚集，2)巨噬細胞和平滑肌細胞內的脂質積累[Ross，R.，NewEng.J.Med.314488(1986)]，3)平滑肌表型從靜止的、收縮的狀態，轉變成可移行、增殖的形式[Manderson，J.A.，Arteriosclerosis9289(1989)]，4)可移動的平滑肌細胞從中層最終移動到內膜層損傷之下[Clowes，A.W.Cire.Res.56139(1985)]以及5)接著就是內膜平滑肌層的大量增生，導致動脈腔的阻塞，[Clowes，A.W.，J.CardiovasPharm.14(Suppl6)S12(1989)]。
已經證實，有多種危險因素可使人患動脈粥樣硬化，可以推斷，具有至少一種危險因素的人，患動脈粥樣硬化的危險性大於無危險因素的人;具有多種危險因素的人，患該病的可能性更大。這些危險因素包括高脂血症(高膽固醇血症和/或高甘油三酯血症)、高血糖、糖尿病、高血壓、肥胖症、吸菸、家族性高脂蛋白血症、老年人及男性。近絕經期和絕經後的婦女，是一組特殊的正在步入老年人行列的人群，她們易患冠心病。自本世紀50年代以來，已觀察到絕經前的婦女不易患冠心病。這些觀察使人們想到用動物作了幾組研究，證實了高脂肪食物餵養的動物，服用雌性激素可預防飲食性的冠狀動脈粥樣硬化。[Barrett-Connor.E.，JAMA265(1991)]。據認為，雌激素防止粥樣硬化性冠心病的機理之一，就是通過降低血漿總膽固醇(TPC)，即誘導分解代謝的增加和低密度脂蛋白(LDL)膽固醇經肝臟排到膽管的增加。LDL分解代謝的增加及膽固醇的排洩增加，可能是肝內低密度脂蛋白的受體對雌激素依賴性增加的結果，正如由服用大劑量的17α-炔雌醇的老鼠所證實的那樣。[Chao，Y-S.，J.Biol.Chem.25411360(1979);Kovanen，P.T.，J.Biol.Chem.25411367(1979);WindlerE.E.T.，J.Biol.Chem.，25510464(1980)]。已經證明，絕經後接受雌激素替代性治療(ERT)的婦女，患冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的危險性減少了50-70%。[Stampfer.M.L.，N.Engl，J.Med.3131044(1985)]。經雌激素治療的婦女與未治療的更年期婦女相比，CVD的死亡率降低了63%，心肌梗塞的死亡率降低了2.3-2.7倍。
儘管ERT對絕經後婦女的益處是顯著的，已證實使用單純性的ERT(未同時使用孕激素的雌激素治療)與子宮膜內增生之間存在著一種聯繫，因而增加了子宮內膜癌的危險。[Utian，W，H.，Obstet.Gynecol.Surv.32193(1977);ACOGTechnicalBulletin931(1986);Hammond，C.B.，Fertil.Steril.375(1982);Whitehead，M.I.，Am.J.Obstet.Gyncol.142791(1982);Gambrell，R.D.，SouthMed.J.711280(1978);McDonaldT.W.，Am.J.Obstet.Gynecol.127572(1977)]。為了減少或完全消除由於ERT所致的子宮內膜腺癌的危險，而又保持ERT的好處，已證實，在每個雌激素周期最後的10-14天期間，可將孕激素與雌激素同時使用。[Whitehead，M.I.，J.R.Soc.Med.72322(1979);Whitehead，M.I.，Semin.Reprod.Endocrin.141(1983);Barrett-Connor，E.，Annu.Rev.Med.43239(1992)]。
硫酸17α-二氫馬烯雌酮約佔共軛雌激素(conjugated estrogens)Premarin (馬雌激素)重量組成的15%(Premarin是Wyeth-Ayerst的註冊商標)，它通常是作為ERT的處方藥用於絕經後的婦女。已經有一些關於各種雌激素藥性的報告，比較子宮的反應，來測定這些藥物是否對絕經後血管舒縮症、尿中促性腺激素水平、血漿脂質和脂蛋白的代謝及肝臟球蛋白的合成有特殊的影響。有兩項研究顯示，在老鼠的模型中，17α-二氫馬烯雌酮對子宮的重量或陰道細胞的成熟幾乎無刺激性的影響，並且也不抑制絕經後婦女尿中的促性腺激素。雌激素樣活性是最小的。[Howard，等，Arch Int，Med.128229(1971);Stern，Maturitas4333(1982)]。也還沒有一項研究提示17α-二氫馬烯雌酮在減少動脈粥樣硬化方面的應用。
動脈粥樣硬化的治療，一般是通過使用抗血脂藥，降低血壓10-20%，及通過飲食和鍛鍊來提高血液中高密度脂質水平，使後遺症(心絞痛、心肌梗塞、心律失常、心衰、腎功能衰竭、中風、周圍動脈栓塞及有關病態)減輕。這些措施通常只是減慢這種病態的進展速度，而不是改變它的發展方向。
本發明提供治療動脈粥樣硬化的方法，它包括經口服或非腸道使用抗動脈粥樣硬化量的17α-二氫馬烯雌酮，或其藥物前體如C2-C6鏈烷酸酯，或藥學上可接受的其硫酸酯或磷酸酯的鹽。根據本項發明，這些化合物的應用不存在任何雌激素類固醇(estrogenic steroid)。含本發明抗動脈粥樣硬化劑和藥學上可接受的載體的藥用組合物構成本發明的另外一個方面。優選的鏈烷酸酯是乙酸酯和新戊酸酯。優選的金屬鹽是鹼金屬(鈉、鉀、鋰)或鹼土金屬(鈣或鎂)鹽。一烷基胺鹽含有1-6個碳原子，如甲胺、乙胺、丙胺、異丙胺、丁胺、叔丁胺、己胺等。二烷基胺鹽在每個烷基團中含有1-6個碳原子，是由二甲胺、二乙胺、二異丙胺、二(2-甲基戊基)胺、二乙胺等產生的。
此種類固醇以與劑量相關的方式，可明顯地減少動脈表面區域的缺損和動脈膽固醇的含量，並伴有血漿總膽固醇的少量減少。沒有觀察到與17α-二氫馬烯雌酮的聯合應用可以減少血漿甘油三酯。因此，這種類固醇可使參與動脈粥樣硬化的脂肪物質沉積驚人地減少，而對血漿脂質只有溫和的作用。
由於水溶性的關係，最佳化合物是17α-二氫馬烯雌酮硫酸酯的鹼金屬鹽、包括鈉鹽、鉀鹽和鋰鹽，根據本發明方法，當它們單獨或與其它藥物聯合應用治療動脈粥樣硬化時，這些鹽容易被吸收;所述其它藥物為通常用於治療動脈粥樣硬化的藥物，如抗血脂藥、抗心律失常藥、β-阻滯劑等。使用本發明抗動脈粥樣硬化的化合物，擺脫了在天然來源的混合的雌激素酯中所發現的物質中的雌激素類固醇，如馬雌激素中的結合酯。因此，這些化合物可以單獨用於需要它們的病人，或可與藥學上可接受的載體配合使用。任何合適的、本領域公知的載體都可以用來製備這種藥用組合物。在這種組合物中，載體可以是固體、液體或固體與液體的混合物。固體組合物包括粉劑、片劑和膠囊劑。固體載體可以是一種或多種物質，它們也可以充當矯味劑、潤滑劑、增溶劑、助懸劑、粘合劑或片劑崩解劑。粉劑中，載體是很細小的、與細碎的活性成分混合的固體。片劑中，活性成分與具有所需的粘合特性的載體，按適當比例混合，並按所需的形狀和大小壓制。合適的固態載體是碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、糖、乳糖、果膠、糊精、澱粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羥甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點的蠟、可可脂等。也可以用膠囊物質與應用在本發明方法的類固醇合用。組合物一詞是指包括活性物質以及與之混合的膠囊物質如含有或不含有其它載體的製劑。也可以用扁囊劑來提供本發明抗動脈粥樣硬化的藥物。
無菌液體組合物包括溶液、懸浮液、乳濁液、糖漿和酏劑。類固醇可以被溶解或懸浮在藥學上可以接受的載體之中，所述載體包括如無菌水、無菌有機溶劑或兩者的混合物。優選的液體載體是適合於非胃腸道注射的載體。生理鹽水與或不與適當的有機溶劑如丙二醇或聚乙二醇合用，均可直接溶解足夠的類固醇。如果需要的話，可將類固醇在澱粉水溶液或羧甲基纖維素鈉水溶液中或在合適的油如花生油中製成細小的類固醇的分散體。是無菌溶液或懸浮液的液體藥用組合物體可以通過肌內、腹膜內或皮下注射來使用。在很多情況下，可以用液體組合物的形式來替代優選的固體口服的使用方法。
將類固醇製成單位劑量形式是優選的。在這種情況下，按照醫生的指導可容易地將組合物進一步分成更小的劑量。例如，單位劑量可以製成小袋的粉劑、小瓶或安瓿，最好是膠囊或片劑。根據病人的具體需要，活性類固醇在組合物的這些單位劑量形式中的含量可以從約0.1毫克至大約2克或更多。每日活性類固醇的劑量取決於使用方法、病人的體重、年齡和性別、病情的嚴重程度及通過血液分析及病人的恢復率來追蹤對治療的反應。通過最初用最小劑量如0.5毫克治療的方法，血液類固醇水平和病人症狀緩解分析可以用來確定是否有大劑量治療指徵。
用本發明中所用的類固醇治療男性的動脈粥樣硬化是有利的，由下述事實表明17α-二氫馬烯雌酮硫酸酯鹽的雌性激素作用，較其它在商品化的雌激素混合物如馬雌激素中所有的天然存在的雌激素要小得多。
17α-二氫馬烯雌酮可以從自然界獲取，如從懷孕的母馬尿中，也可以從市場上買到。含有鈣或鎂陽離子的鹼土金屬鹽是用適當的鹼，通過硫酸酯的鹼金屬鹽的直接的金屬轉移，或在合適的循環過程中，通過與陽離子交換樹脂的交換來生產的，所述陽離交換樹脂包括如弱酸性的Amberlite交換劑DP-1、IRC-50、IRC-76、CG-50或IRP-64。若有必要，用弱酸如醋酸化硫酸酯的鹼金屬，然後用醇如正丁醇提取，並且化學計量的氫氧化鈣或氫氧化鎂、氫氧化銨或所需的胺中和，可以得到其它鹽。至於胺鹽，-烷基胺鹽可直接由胺如甲胺、乙胺、丙胺、異丙胺、丁胺、叔丁胺、己胺等來製備。二烷基胺鹽由二甲胺、二乙胺、二異丙胺、二(2-甲基戊基)胺、二己胺等來製備。磷酸酯鹽的製備也採用類似方式，這些製備方法在甾類化學中是熟知的，它們是在甾類化學家的熟練技術範疇內。
確認17α-二氫馬烯雌酮的抗動脈粥樣硬化的性質，是通過檢測其硫酸酯鈉鹽應用在膽固醇餵養的SEA鵪鶉的情況來完成的，此種鵪鶉是日本鵪鶉的亞種，為標準的研究主動脈粥樣硬化進展的實驗動物。根據本方法，用成年、雄性SEA鵪鶉，出生約6個月時分開籠養，隨便飲食、飲水。向試驗組和對照組的鵪鶉提供的現成的幹飼料含有膽固醇和豬油。[Day，Artery17.49(1989)]。將17α-二氫馬烯雌酮(75和15毫克)溶解在蒸餾水裡，並與含有膽固醇的幹飼料1.0kg相混合。類固醇的實際消耗量按二種飼料混合水平，它們分別是濃度為75mg/kg的，為5mg/kg/日;濃度為15mg/kg的，為1mg/kg/日。定期作血液分析，來測定血清總膽固醇濃度、血清高密度脂蛋白和血清甘油三酯的濃度。最後，殺死這些動物，直接檢查動脈粥樣硬化損害覆蓋的動脈表面，以測定損害覆蓋的面積。同時也測定動脈的膽固醇濃度。
這項研究結果證實17α-二氫馬烯雌酮硫酸酯的鈉鹽，以5mg/kg/日劑量水平，在8周後可使血清總膽固醇輕度降低(對照組膽固醇＝2044±634mg/dl，試驗組＝1469±1246mg/dl，P＜0.05);按1mg/kg/日餵養劑量，4周後血清高密度脂蛋白膽固醇輕度降低(對照組＝311±93mg/dl;試驗組＝250±67mg/dl;P＜0.05)，並在8周後按5mg/kg/日劑量水平(對照組＝301±69mg/dl;試驗組＝255±65mg/dl;P＜0.05)，而且在第四周時(不是第八周)，5mg/kg/日劑量組的血清甘油三酯水平輕度降低(對照組＝476±197mg/dl，試驗組＝362±110mg/dl，P＜0.05)。觀察到了按5mg/kg/日餵養的動物，其動脈表面的動脈粥樣硬化損害顯著地減少(對照組＝總面積的62±38%;試驗組＝總面積的29±34%;P＜0.01)。動脈粥樣硬化的第二個量度，動脈膽固醇濃度，在以5mg/kg/日餵養的試驗動物組中也顯著地降低了(對照組＝30.00±12.91mg/g;試驗組＝16.23±11.27mg/g;P＜0.01)。
17α-二氫馬烯雌酮的抗動脈粥樣硬化特性，也通過檢測其硫酸酯鈉鹽對膽固醇餵養的、去卵巢紐西蘭雌性白兔的作用而得到證實。根據此項程序，成年去卵巢雌兔分開籠養，隨便飲水24周。最初，這些動物按35g/kg兔重/日配給食物。對照組頭8周僅消耗25g/kg/日，這樣，所有的組在剩下的16周裡，限制在25g/kg/日。餵養試驗組和對照組的現成的幹飼料含有0.2%的膽固醇和5%的玉米油。將膽固醇和17α-二氫馬烯雌酮(145mg/公斤食物)溶解在液態玉米油裡並加至食物中，使35g的食物中含有5mg藥物。由於對照組的實際消耗量僅是25g/kg/日，所以限制飲食，且最後16周的實際藥物消耗量為3.58mg/kg/日。進行定期血液分析，以測定血清總膽固醇濃度、血清高密度脂蛋白和血清甘油三酯濃度。在治療到24周時，殺死動物，直接檢查動脈粥樣硬化損害覆蓋的動脈表面，以測定損害覆蓋的面積，同時也測定動脈膽固醇濃度。
本研究結果證實，17α-二氫馬烯雌酮硫酸酯的鈉鹽在24周內對血漿膽固醇無顯著地影響。兩組之間，血漿總膽固醇變化在833-993的範圍內，無顯著性差異。藥物治療對高密度脂蛋白膽固醇水平也無影響，同樣，對甘油三酯的影響也一樣。藥物治療組的LDL膽固醇輕度升高，從550±203升到780±136mg/dl(P＜0.05)。儘管脂蛋白方面有點兒消極的變化(血漿LDL膽固醇升高)，但胸主動脈和腹主動脈的粥樣硬化損害卻發生顯著地減少。在胸主動脈，硫酸17α-二氫馬烯雌酮使損害的動脈表面面積減少，從對照組的26.3±27.0%減到6.10±5.65%(P＜0.05)，減少了77%;膽固醇酯含量從7.00±6.08mg/克淨重組織減少到2.08±2.39mg/g(P＜0.05)，減少了70%。在腹主動脈，硫酸17α-二氫馬烯雌酮使損害的動脈表面面積減少，從對照組的17.94±16.70%減少到5.14±3.47%(P＜0.05)，減少了71%;膽固醇酯含量從3.82±3.05mg/克淨重組織減少到1.30±0.65mg/g(P＜0.05)，減少了66%。
這些數字表明，17α-二氫馬烯雌酮本身和它的3-鏈烷酸酯以及它的硫酸酯或磷酸酯的鹼金屬鹽、鹼土金屬鹽、銨鹽、烷基胺鹽和二烷基胺鹽的形式，對直接減少伴隨動脈粥樣硬化發展的動脈損害，是非常有效的藥物。因此，本發明提供了緩解可能是該病情最嚴重症狀的直接方法，而不明顯改變血液其它化學成分。
權利要求
1.動脈粥樣硬化的治療方法，它包括在無天然存在的雌激素類固醇存在下，給需要抗動脈粥樣硬化治療的病人使用有效量的17α-二氫馬烯雌酮、其C2-C6鏈烷酸酯或藥學上可接受的、它的硫酸酯或磷酸酯鹽。
2.權利要求1的方法，其中所述藥學上可接受的鹽是鈉鹽。
3.權利要求1的方法，其中所述藥學上可接受的鹽是鉀鹽。
4.權利要求1的方法，其中所述藥學上可接受的鹽是鋰鹽。
5.權利要求1的方法，其中所述藥學上可接受的鹽是鈣鹽。
6.權利要求1的方法，其中所述藥學上可接受的鹽是鎂鹽。
7.權利要求1的方法，其中所述藥學上可接受的鹽是銨鹽。
8.權利要求1的方法，其中所述藥學上可接受的鹽是二烷基胺鹽。
9.參與動脈粥樣硬化進展的動脈損傷的去除方法，它包括給患動脈粥樣硬化的病人口服或經非胃腸道途徑使用含有抗動脈粥樣硬化量的17α-二氫馬烯雌酮的鹼金屬鹽的藥用組合物。
10.一種藥用組合物，它含有抗動脈粥樣硬化量的17α-二氫馬烯雌酮、其C2-C6鏈烷酸酯或硫酸酯或磷酸酯的藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的載體，不含天然存在的雌激素類固醇。
全文摘要
治療動脈粥樣硬化的方法，是通過在無天然存在的雌激素類固醇存在的條件下，給需要抗動脈粥樣硬化治療的病人使用有效量的17α-二氫馬烯雌酮、其C
文檔編號A61K31/56GK1096443SQ94100239
公開日1994年12月21日 申請日期1994年1月4日 優先權日1993年1月5日
發明者S·J·阿德爾曼, K·E·施坦納 申請人:美國家用產品公司