藥物組合物及相關方法

2023-05-19 19:11:31 2

專利名稱：藥物組合物及相關方法
藥物組合物及相關方法相關串請本申請是2010年I月29日提交的申請號為200880101239. O、發明名稱為「藥物組合物及相關方法」的中國專利申請的分案申請。優先權本申請要求2007年7月30日提交的標題為「藥物組合物」的美國臨時專利申請60/962，706號的優先權，在此將其全文引入本文作為參考。 發明領域本公開涉及用於加速創傷癒合、增加皮膚創傷閉合以及減少皮膚創傷部位感染的組合物和方法。
背景技術：
皮膚是複雜的組織，其構成為不同的層，即表皮、真皮和皮下組織，每一個都擁有不同的細胞特徵和生理重要性(Fuchs和Byrnel994 ；Goldsmith 1991)。表皮是分層的鱗狀上皮組織，其中嚴格區分了進行生長和分化的細胞(Fuchs和Byrne 1994)。在正常的生理階段，增殖被限制到與基底膜相粘附的基底細胞。分化是一個空間過程，其中基底細胞喪失了其與基底膜的粘附，停止DNA合成並進行一系列形態和生物化學改變。最終的成熟步驟是角質層的產生，其形成了皮膚的保護屏障(Tennenbaum等，1991 ；ffysocki 1999)。真皮主要由基質纖維構成並含有各種細胞類型。此外,所有的皮膚附屬部分，即微脈管系統、汗腺和皮脂腺、感覺神經和毛囊均位於真皮中。真皮起到了支持皮膚營養、維持真皮和下述途徑的作用，其中通過該途徑信號從身體的其它部分到達外部層(Green 1977；Wysocki 1999)。皮下組織是皮膚的最深層，其主要由脂肪細胞組成，也被稱為皮下脂肪層。直到最近，還認為這一層具有隔離外部溫度變化的作用並且給皮膚的上層提供機械支持(Nash 等 2004 ；Querleux 等 2002)。在皮膚中，分層表皮的持續更新是由導致產生沒有活力的、角質化的鱗的順序的且高度特化的過程維持的，所述鱗與衍生自分泌的片層體的脂質一起構成了身體的保護性水屏障。正在增殖的基底細胞與表皮特異性的基底膜粘附。角質化細胞的分化過程與和基底膜接觸的細胞的喪失緊密相關；當基底細胞遷移至更外表的棘層時，它們喪失了增殖能力。進一步成熟為顆粒細胞區域，隨後形成硬的角質化的包層，這與細胞內細胞器的自溶以及程序性細胞死亡相關聯，產生成熟的鱗(Adams和Watt 1990 ；Eckert 1989 ;Yuspa等1980)。開放的皮膚創傷通常通過包括6個主要要素的過程癒合(i)發炎；(ii)成纖維細胞增殖；(iii)血管增生；(iv)結締組織合成；(V)上皮形成；以及(Vi)創傷收縮。當這些要素個別地或作為整體不恰當地發揮作用時，創傷癒合即會受損。許多因素可影響創傷癒合，包括營養不良、感染、藥劑(例如，放線菌素和類固醇)、高齡和糖尿病(Keast和Orstedl998 ；Kirsner 和 Eaglstein 1993 ；ffilliams和 Armstrong 1998)。糖尿病(Diabetes mellitus)是糖尿病(Diabetes)的常見形式,其特徵在於受損的胰島素信號傳導、升高的血漿葡萄糖和在若干個特定組織上發生慢性併發症的易感性。在所有糖尿病的慢性併發症中，導致足部潰爛的受損的創傷癒合是研究最少的(Goodson和Hunt 1979 ；Grunfeld 1992)。然而糖尿病患者的皮膚潰瘍花費了大量人力和財力。而且，足部潰爛以及爾後的下肢截斷是最常見的糖尿病患者住院的原因。在糖尿病中，創傷癒合過程受到損壞，以及癒合的創傷的特徵在於創傷強度減小(Shaw和Boulton 1997)。組織修復中的缺陷與幾種因素有關，這些因素包括神經病、血管病和感染(Mousley 2003；Silhil998)。但是，尚不明了其它機制，通過該機制，與反常的胰島素信號傳導相關的糖尿病狀態損壞創傷的癒合並改變皮膚生理。還有一個普遍存在的問題是在身體各個部分中的外科手術之後的創傷癒合受到年齡和諸如糖尿病和肥胖病等的慢性病發展的影響。在外科手術設置中，三分之一的患者由於它們的生理狀態以及在創傷部位的相關感染的發展而延遲創傷癒合(Diegelmann 和 Evans 2004)。皮膚創傷通常在包括馬、狗、貓和家畜的動物中被發現。在動物創傷中，有各種常 見的疾病提示需要創傷管理。因此，獸醫皮膚病學是獸醫醫學中增長最快的學科之一。一般而言，許多這些創傷通過第二期癒合而治癒。這一過程花費很長的時間，尤其是涉及四肢時尤其如此。在動物中，以及在人類中，創傷癒合過程可能因諸如汙染、感染或骨間裂隙的因素而被複雜化，這些因素通常是延長癒合時間或不恰當的創傷閉合的原因(Grunfeldl992 ；Knol 和 Wisselink 1996 ；Yeruham 等，1992 ；Yim 等，2007)。典型地，創傷癒合需要誘導(活化)新表皮和肉芽組織的形成以及減少感染。這些過程在動物中對於各種急性和慢性創傷，諸如手術後創傷、肢端舔的潰瘍和糖尿病潰瘍等的癒合也是必要的。馬遭受由肉芽組織過剩引起的慢性創傷(例如，「贅肉」)，其中成纖維細胞增殖和血管發生均病理學地升高。這一反常的肉芽組織過度生長在上皮組織水平之上，並且物理地阻斷鄰近皮膚的接近，否則該鄰近皮膚可能生長在這一區域之上。成纖維細胞的這一不受控制的生長的機制還是未知的。僅有的可利用的治療涉及手術移除過度無約束的組織、壓力包紮和皮質類固醇。該治療花費延長的時間(5-8個月)並且病損常常復發(De、我和 Theoret 2004 ；Stone 1986)。動物中其它特定的病理包括狗中的肢端舔的皮膚炎和咬的潰瘍。肢端舔的皮膚炎是狗中常見的問題，其是指與狗病損相關的增加的變紅、粗糙、有彈力的組織，其產生自相同區域的反覆舔。儘管在肢端舔的皮膚炎的治療中有許多策略，但是治癒率和效果都還不足並且在許多情況下會發生潰瘍的復發(White 1990 ;Yeruham等1992)。蛋白激酶C (PKC)是磷脂依賴性酶家族，其催化磷酸從ATP共價轉移至蛋白質的絲氨酸和蘇氨酸殘基上，並且其在調節皮膚生理中起著重要的作用。底物蛋白質的磷酸化誘導構象改變，其導致它們功能性質的修飾。到目前為止，發現了 11種同種型參與各種細胞功能和調節增殖、分化、細胞存活和死亡的信號轉導路徑(Nishizuka 1995)。特異性輔因子的需求、組織定位和細胞區室化提示對於每一同種型的不同功能和特定信號傳導級聯的精確調諧。因此，通過由它們在特定生物設定中的表達、定位和磷酸化狀態調節的同種型特異性的PKC信號，特異性的刺激可以導致不同的反應。PKC同種型被各種細胞外信號活化，並且依次修飾細胞蛋白質的活性，所述蛋白質包括受體、酶、細胞骨架蛋白和轉錄因子。因此，PKC家族在細胞信號處理中起著中心作用。絲氨酸/蘇氨酸激酶的蛋白激酶C(PKC)家族的原型首先被Nishizuka及其同事(Kikkawa等，1989)描述，它們首先發現了被作為磷脂醯肌醇的降解產物的二醯基甘油(DAG)活化的PKC (Castagna等，1982)。其它研究揭示了 PKC是促進腫瘤的佛波酯的細胞內受體。所有的PKC家族成員共有一個結構骨架，其可被劃分為兩個主要的結構域處於N端的調節結構域和處於C端的催化結構域。將這些區域分類為保守區(C1-C4)和在同種型之間變化的區(V1-V5) (Nishizuka 1988)，同上。此外，PKC在調節區還展示出與底物識別基序密切相似的假底物結構域，其封閉識別位點並阻止活化(Blumbergl991 ；House和Kemp1987)。基於它們的結構特徵和輔因子需求，可將PKC同種型家族劃分為3個大組。它們包括典型的cPKC(a、β I、β II和￥)、新的1^1(((6、ε、η、Θ )和非典型的aPKCU和ι /λ )同種型(Azzi 等 1992 ；Kikkawa 等 1989 ；Svetek 等 1995)。
對於它們的活化，所有同種型均需要磷脂雙層的成分。典型的cPKC是鈣(Ca2+)依賴性的，並且對於活化還需要DAG或DAG類似物諸如佛波酯。新的nPKC不依賴於Ca2+，但對於最大化活化仍需要DAG或佛波酯(Kazanietz等1993)。非典型的aPKC不依賴於Ca2+，也不需要DAG或佛波酯，但對於活化需要磷脂醯絲氨酸(Chauhan等1990)。此外，底物識別的主要部件是在調控結構域內的假底物區，其控制與細胞信號中PKC同種型的特異性活性有牽連的調控機制，並且與不同祀底物的磷酸化相關聯(Eichholtz等1993 ；Hofmann 1997)。已經在體內在皮膚表皮中和在培養的角質化細胞中鑑定了五種PKC同種型(α、S、ε、η和ζ )。然而，在皮膚的真皮層中檢測到了諸如β和Y的其它PKC同種型。此外，PKC同種型的類型和PKC分布模式在不同的組織中不同，並且可能還作為表現型的函數而變化。重要的是，在體內和體外中，PKC同種型均分布在基底和分化的皮膚角質化細胞中，並且可能在創傷癒合中起著重要的作用。因此，需要調控PKC活性以幫助治療皮膚創傷和其它慢性創傷的改進的組合物和方法。公開概述本公開大體上涉及含有不含鈣及鎂離子的生物活性的皮膚創傷癒合劑和或抗炎劑的藥物組合物，並且還涉及使用該藥物組合物治療皮膚創傷和/或炎症的方法。該藥物組合物優選地適用於局部或本地給藥，尤其是皮下給藥。本公開的一個方面是包含δ -PKC活化劑、a -PKC抑制劑和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體的藥物組合物。本公開的另一方面是包含胰島素、由SEQ ID NO 1中所示胺基酸序列組成的並且在其氨基末端處具有豆蘧醯化的胺基酸殘基的肽以及不含Ca2+和Mg2+陽離子的水性的藥學上可接受的載體的組合物，其中所述的藥學上可接受的載體包含O. 2g/L KC1、0. 2g/L無水KH2PO4、8g/L NaCl 和 I. 15g/L 無水 Na2HPO4。所述藥學上可接受的載體優選地包括適於緩衝該組合物的磷酸鹽或含有磷酸鹽的化合物。特別優選的實施方案包括O. 2L KC1、0. 2g/L無水KH2P04、8g/L NaCl和I. 15g/L無水Na2HP04。此類藥學上可接受的載體也是本發明的一個方面，並且可以通過混合所需要的組分以提供不含有鈣或鎂離子的藥學上可接受的載體而製備該載體。
本公開的另一方面是包含δ -PKC活化劑、a -PKC抑制劑、不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體以及藥物流出支架的藥物組合物。本公開的另一方面是由包括以下步驟的方法製得的藥物組合物提供δ -PKC活化劑、a -PKC抑制劑以及不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體；以及混合所述δ -PKC活化劑、a -PKC抑制劑以及不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體；由此製得藥物組合物。本公開的另一方面是用於增加動物皮膚創傷閉合的方法，其包括以下步驟提供包含δ-PKC活化劑、a-PKC抑制劑和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體的藥物組合物；以及向動物上的皮膚創傷給藥有效量的該藥物組合物；由此增加皮膚創傷的閉
口 ο本公開的另一方面是減少動物皮膚創傷部位上的炎症的方法，其包括以下步驟提供包含S-PKC活化劑、a-PKC抑制劑和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體 的藥物組合物；以及向動物上的皮膚創傷給藥有效量的該藥物組合物；由此減少皮膚創傷部位的炎症。本公開的另一方面是包含胰島素或胰島素類似物和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體的組合物。本發明的另一方面是包含約O. 0001單位/L至O. I單位/L的胰島素和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體的組合物。本發明的另一方面是用於增加動物創傷閉合的方法，其包括以下步驟提供包含δ -PKC活化劑、a -PKC抑制劑和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體的藥物組合物；以及向動物上的創傷給藥有效量的該藥物組合物，其中所述的創傷是選自由糖尿病潰瘍、肢端舔的創傷、贅肉創傷、外科手術創傷、慢性日光性膿腫創傷和骨髓炎創傷組成的組中的至少一種；由此增加皮膚創傷的閉合。本發明的另一方面是包含δ -PKC活化劑、a -PKC抑制劑和含有K+陽離子而不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體的藥物組合物。本發明的另一方面是包含δ -PKC活化劑和含有K+陽離子而不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體的藥物組合物。本發明的另一方面是包含a -PKC抑制劑和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體的藥物組合物。本發明的另一方面是減少動物上的皮膚創傷部位的炎症的方法，其包括以下步驟提供包含a -PKC抑制劑和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體的藥物組合物；以及向動物上的皮膚創傷給藥有效量的該藥物組合物；由此減少皮膚創傷部位的炎症。本發明的其它方面包括應用本發明的諸如本文描述的組合物促進肉芽組織的形成、表皮增殖和皮膚生長。最後，本文公開的組合物可以完全不含Ca2+和Mg2+陽離子，或含有不含這些陽離子的藥學上可接受的載體。附圖簡述圖IA提供了細胞培養皿的照片，其顯示了應用所指示的在不同的製劑中配製的藥物組合物的體外創傷癒合效力。(在Axiovert 25Zeiss顯微鏡下放大50倍)。圖IB以處理24小時後的閉合百分比顯示了創傷閉合。圖2A是顯示了在製劑A中的藥物組合物促進顯著的創傷閉合的圖。圖2B是採用各種製劑處理後的代表性創傷的照片。圖3是顯示了在各種製劑中處理後的創傷部位的炎症負擔的圖。圖4是顯示了採用各種製劑處理後的肉芽組織形成的圖。圖5是顯示了在各種製劑中Myr-假底物PKC α肽抑制PKC α活性的能力的圖。圖6Α是細胞培養皿的放大圖(在Axiovert 25 Zeiss顯微鏡下放大200倍)，其 顯示了在各種製劑中胰島素對創傷閉合及細胞增殖的影響。圖6Β是顯示了以採用各種製劑在胰島素存在或不存在的情況下處理24小時後佔對照的百分比形式表示的體外創傷閉合的圖。圖6C是顯示了根據通過胸腺嘧啶摻入測量的細胞增殖的圖。圖7是顯示了在更換細胞培養基之前或之後胰島素和胰島素+PKCa抑制劑對來自7個月大至2年大的小鼠的角質化細胞增殖的影響的圖。圖8Α提供了顯示採用在各種製劑中的藥物組合物治療慢性足潰瘍及其增加的閉合的照片和圖。圖8Β是顯示了在各種製劑中在第O天和第60天時患者的慢性糖尿病創傷的治療和增加的閉合的照片。圖9提供了顯示在第O天、3個月和6個月時採用藥物組合物治療馬慢性贅肉創傷的照片。

圖10提供了顯示在第0、30和60天時用藥物組合物治療伴隨骨髓炎的慢性日光性膿腫的照片。圖11提供了顯示在第O天、2個月和3. 5個月時採用藥物組合物治療由自損傷引起的未癒合肢端舔的創傷的進展的照片。圖12是表示以商標HUMALOG 而為人所知的人類胰島素類似物賴脯胰島素(rDNA起源)的一級結構的示意圖。圖13是表示以商標NOVOLOG 而為人所知的人類胰島素類似物天冬胰島素(rDNA起源)的一級結構的示意圖。圖14是表示商標；LANTUS 而為人所知的人類胰島素類似物甘精胰島素(rDNA起源)的一級結構的示意圖。圖15是表示也以商標NO VOLIN R而為人所知的人類胰島素類似物HUMULIN R的一級結構的示意圖。圖16是顯示了在用胰島素類似物(單獨在製劑A中提供的)治療後通過表皮和肉芽組織的形成而測量的創傷癒合的百分比並與未治療的對照創傷比較的圖。所研究的胰島素類似物是賴脯胰島素(HumL)、天冬胰島素(Novo)、甘精胰島素(LANTUS )和優泌林㊣ R (HumR)。圖17是顯示了單獨用優泌林 R(HumR)、USP胰島素(Ins USP)和PKC α假底物抑制肽(Pep)或與胰島素類似物以及抑制肽組合治療的、通過肉芽組織的形成測量的促進創傷癒合的圖。
圖18是顯示了單獨用優泌林 R(HumR)、賴脯胰島素(HumL)和PKC α假底物抑制肽(pep)治療或與胰島素類似物以及抑制肽協同組合治療的嚴重炎症的百分比的圖。圖19A和圖19B顯示了在培養基A和培養基B中培養的原代皮膚角質化蛋白中，在用內臟脂肪素(visfatin)或L-α-磷脂醯肌醇-3，4，5_三磷酸，二棕櫚醯基_，七銨鹽處理後，在7個月大至2年大的小鼠角質化細胞中角蛋白I的表達。發明詳沭本公開的藥物組合物包含藥學上可接受的載體和PKC α抑制劑和/或胰島素，其中所述的藥學上可接受的載體包含在各種溶劑中的不同的無機鹽和有機鹽。示範性的藥學上可接受的載體的製劑組合物可以含有水、鉀、氯化鈉和生理上可耐受的磷酸鹽，並且可如下製備Α)氯化鉀 O. 2g/L(KCl) B)磷酸二氫鉀(無水)O. 2g/L (KH2PO4)C)氯化鈉 8. O (g/L) (NaCl)D)磷酸氫二鈉(無水)I. 15 (g/L) (Na2HPO4)該製劑必須不含有鈣或鎂離子。儘管可以使用任何PKCa抑制劑，但優選地該PKC α抑制劑為豆蘧醯化的相應於 PKC α 的假底物區的妝(Myr*-Phe-Ala-Arg-Lys-Gly-Ala-Leu-Arg-Gln_OH(SEQ ID NO:ICAS[147217-25-2])。該PKCa假底物區對這一特定同種型的底物區具有特別高的親和力。可使用的其它PKC抑制劑的實例包括下列表I中所示的肽表I. PKC抑制劑肽
權利要求
1.組合物，其包含S-PKC活化劑、a-PKC抑制劑和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體。
2.如權利要求I的組合物，其中所述的S-PKC活化劑是選自由胰島素和胰島素類似物組成的組中的至少一種。
3.如權利要求2的組合物，其中所述的 胰島素類似物是選自由賴脯胰島素、天冬胰島素、甘精胰島素、內臟脂肪素和L- α -磷脂醯肌醇-3，4，5-三磷酸，二棕櫚醯基_，七銨鹽組成的組中的至少一種。
4.如權利要求2的組合物，其中所述的胰島素是選自由人胰島素、牛胰島素和豬胰島素組成的組中的至少一種。
5.如權利要求4的組合物，其中所述的胰島素是重組表達的。
6.如權利要求2的組合物，其中所述的α-PKC抑制劑是選自由(S)-2，6_二氨基-N-[(l-(l-氧代十三烷基)-2-哌啶基)甲基]己醯胺二鹽酸鹽水合物；4』-N-苯甲醯基星形孢菌素；雙吲哚基馬來醯亞胺IX，甲磺酸鹽；12-(2_氰基乙基)_6，7，12，13-四氫-13-甲基-5-氧代-5H-吲哚並[2，3-a]吡咯並[3，4_c]咔唑；2-[1-(3_ 二甲基氨基丙基)-IH-吲哚-3-基]-3-(1Η-吲哚-3-基)馬來醯亞胺和阿普卡生組成的組中的至少一種。
7.如權利要求2的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑選自由具有在以下中所示的胺基酸序列的肽組成的組中的至少一種SEQ IDNO 2, SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO 6, SEQ ID N0:7、SEQ ID N0:8、SEQ ID N0:9、SEQ ID NO: 10、SEQ IDNO : 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15、SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO :18、SEQ ID NO :19、SEQ ID NO :20、SEQ ID NO :21、SEQ ID NO :22、SEQ IDNO 23, SEQ ID NO :24、SEQ ID NO :26、SEQ ID NO :27、SEQ ID NO :28、SEQ ID NO :29、SEQID NO 30, SEQ ID NO :31、SEQ ID NO :32、SEQ ID NO :33、SEQ ID NO :34、SEQ ID NO :35、SEQ ID NO36,SEQ ID NO37,SEQ ID NO 38,SEQ ID NO39,SEQ ID NO40,SEQ ID NO:41、SEQ ID NO :42、SEQ ID NO :43、SEQ ID NO :44、SEQ ID NO :45、SEQ ID NO :46、SEQ IDNO 47, SEQ ID NO :48、SEQ ID NO :49、SEQ ID NO :50、SEQ ID NO :51、SEQ ID NO :52、SEQID NO 53, SEQ ID NO :54 和 SEQ ID NO :55。
8.如權利要求2的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑是由SEQ IDNO 25中所示的胺基酸序列組成的肽，其在其氨基末端處具有豆蘧醯化的胺基酸殘基，並且在其羧基末端處被醯胺化。
9.如權利要求2的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑是由SEQ IDNO 1中所示的胺基酸序列組成的肽，其在其氨基末端處具有豆蘧醯化的胺基酸殘基。
10.如權利要求1、2、3、4、5、6、7、8或9的組合物，其中所述的不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體是包含O. 2g/L KC1、0. 2g/L無水KH2P04、8g/L NaCl和I. 15g/L無水Na2HPO4的水性載體。
11.組合物，其包含胰島素、由SEQID NO :1中所示的胺基酸序列組成的並且在其氨基末端處具有豆蘧醯化的胺基酸殘基的肽以及包含O. 2g/L KC1、0. 2g/L無水KH2P04、8g/LNaCl和I. 15g/L無水Na2HPO4的不含Ca2+和Mg2+陽離子的水性藥學上可接受的載體。
12.如權利要求11的組合物，其包含O.0001單位/L至O. I單位/L的胰島素和I μ M至IOOiiM的所述肽。
13.如權利要求12的組合物，其包含0.0001單位/L的胰島素和I y M的所述肽。
14.如組合物，其包含S-PKC活化劑、a-PKC抑制劑、不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體以及藥物流出支架。
15.如權利要求14的組合物，其中所述的藥物流出支架包含多孔固體。
16.如權利要求15的組合物，其中所述的S-PKC活化劑是選自由胰島素和胰島素類似物組成的組中的至少一種。
17.如權利要求16的組合物，其中所述的胰島素類似物是選自由賴脯胰島素、天冬胰島素、甘精胰島素、內臟脂肪素和L- a -磷脂醯肌醇-3，4，5-三磷酸，二棕櫚醯基_，七銨鹽組成的組中的至少一種。
18.如權利要求16的組合物，其中所述的胰島素是選自由人胰島素、牛胰島素和豬胰島素組成的組中的至少一種。
19.如權利要求18的組合物，其中所述的胰島素是重組表達的。
20.如權利要求16的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑是選自由(S)-2，6-二氨基-N-[(l-(l-氧代十三烷基)-2-哌啶基)甲基]己醯胺二鹽酸鹽水合物；4』 -N-苯甲醯基星形孢菌素；雙吲哚基馬來醯亞胺IX，甲磺酸鹽；12-(2_氰基乙基)-6，7，12，13_四氫-13-甲基-5-氧代-5H-吲哚並[2，3-a]吡咯並[3，4_c]咔唑；2-[I-(3-二甲基氨基丙基)-IH-吲哚-3-基]-3_(1H-吲哚-3-基)馬來醯亞胺和阿普卡生組成的組中的至少一種。
21.如權利要求16的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑選自由具有在以下中所示的胺基酸序列的肽組成的組中的至少一種SEQ IDNO 2, SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ IDNO 5, SEQ ID N0:6、SEQ ID N0:7、SEQ ID N0:8、SEQ ID N0:9、SEQ ID NO: 10、SEQ IDNO 11、SEQ ID NO 12, SEQ ID NO :13、SEQ ID NO :14、SEQ ID NO :15、SEQ ID NO :16、SEQ IDNO 17, SEQ ID NO 18, SEQ ID NO 19, SEQ ID NO :20、SEQ ID NO :21、SEQ ID NO :22、SEQID NO 23, SEQ ID NO :24、SEQ ID NO :26、SEQ ID NO :27、SEQ ID NO :28、SEQ ID NO :29、SEQ ID NO 30, SEQ ID NO 3USEQ ID NO 32, SEQ ID NO 33, SEQ ID NO 34, SEQ ID NO:35、SEQ ID NO :36、SEQ ID NO :37、SEQ ID NO :38、SEQ ID NO :39、SEQ ID NO :40、SEQ IDNO :41、SEQ ID NO :42、SEQ ID NO :43、SEQ ID NO :44、SEQ ID NO :45、SEQ ID NO :46、SEQID NO 47, SEQ ID NO :48、SEQ ID NO :49、SEQ ID NO :50、SEQ ID NO :51、SEQ ID NO :52、SEQ ID NO 53, SEQ ID NO :54 和 SEQ ID NO :55。
22.如權利要求16的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑是由SEQIDNO :25中所示的胺基酸序列組成的肽，其在其氨基末端處具有豆蘧醯化的胺基酸殘基，並且在其羧基末端處被醯胺化.
23.如權利要求16的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑是由SEQID NO 1中所示的胺基酸序列組成的肽，其在其氨基末端處具有豆蘧醯化的胺基酸殘基。
24.如權利要求23的組合物，其包含0.0001單位/L至0. I單位/L的胰島素和I y M至IOOii M的所述肽。
25.如權利要求23的組合物，其包含0.0001單位/L的胰島素和I y M的所述肽。
26.如權利要求14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25的組合物，其中所述的藥物流出支架是海綿。
27.如權利要求26的組合物，其包含不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體，該藥學上可接受的載體包含O. 2g/L KCl、0. 2g/L無水KH2P04、8g/L NaCl和I. 15g/L無水Na2HPO4。
28.如由包括以下步驟的方法製得的藥物組合物 a)提供δ-PKC活化劑、a -PKC抑制劑以及不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體；以及 b)混合所述δ-PKC活化劑、a -PKC抑制劑以及不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體； 由此製得藥物組合物。
29.如權利要求28的組合物，其中所述的δ-PKC活化劑是選自由胰島素和胰島素類似物組成的組中的至少一種。
30.如權利要求29的藥物組合物，其中所述的胰島素類似物是選自由賴脯胰島素、天冬胰島素、甘精胰島素、內臟脂肪素和L- α -磷脂醯肌醇-3，4，5-三磷酸，二棕櫚醯基_，七銨鹽組成的組中的至少一種。
31.如權利要求29的藥物組合物，其中所述的胰島素是選自由人胰島素、牛胰島素和豬胰島素組成的組中的至少一種。
32.如權利要求31的藥物組合物，其中所述的胰島素是重組表達的。
33.如權利要求29的藥物組合物，其中所述的α-PKC抑制劑是選自由(S)_2，6_二氨基-N-[(I-(I-氧代十三烷基)-2-哌啶基)甲基]己醯胺二鹽酸鹽水合物；4』-N-苯甲醯基星形孢菌素；雙吲哚基馬來醯亞胺IX，甲磺酸鹽；12-(2_氰基乙基)_6，7，12，13-四氫-13-甲基-5-氧代-5H-吲哚並[2，3-a]吡咯並[3，4_c]咔唑；2-[I-(3-二甲基氨基丙基)-IH-吲哚-3-基]-3-(1Η-吲哚-3-基)馬來醯亞胺和阿普卡生組成的組中的至少一種。
34.如權利要求29的藥物組合物，其中所述的a-PKC抑制劑選自由具有在以下中所示的胺基酸序列的肽組成的組中的至少一種SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQID NO :5、SEQ IDNO :6、SEQ ID NO :7、SEQ ID NO :8、SEQ ID NO :9、SEQ ID NO :10、SEQ IDNO1U SEQ ID NO12,SEQ ID NO13,SEQ ID NO14,SEQ ID NO :15、SEQ ID NO16,SEQID NO 17, SEQ ID NO :18、SEQ ID NO :19、SEQ ID NO :20、SEQ ID NO :21、SEQ ID NO :22、SEQ ID NO23,SEQ ID NO24,SEQ ID NO 26,SEQ ID NO27,SEQ ID NO28,SEQ ID NO:29、SEQ ID NO :30、SEQ ID NO :31、SEQ ID NO :32、SEQ ID NO :33、SEQ ID NO :34、SEQ IDNO 35, SEQ ID NO :36、SEQ ID NO :37、SEQ ID NO :38、SEQ ID NO :39、SEQ ID NO :40、SEQID NO :41、SEQ ID NO :42、SEQ ID NO :43、SEQ ID NO :44、SEQ ID NO :45、SEQ ID NO :46、SEQ ID NO 47, SEQ ID NO 48, SEQ ID NO 49, SEQ ID NO 50, SEQ ID NO 5USEQ ID NO:52、SEQ ID NO 53, SEQ ID NO :54 和 SEQ ID NO :55。
35.如權利要求29的藥物組合物，其中所述的a-PKC抑制劑是由SEQID NO :25中所示的胺基酸序列組成的肽，其在其氨基末端處具有豆蘧醯化的胺基酸殘基，並且在其羧基末端處被醯胺化.
36.如權利要求29的藥物組合物，其中所述的a-PKC抑制劑是由SEQID NO :1中所示的胺基酸序列組成的肽，其在其氨基末端處具有豆蘧醯化的胺基酸殘基。
37.如權利要求36的藥物組合物，其包含0.0001單位/L至0. I單位/L的胰島素和Iii M至IOOii M的所述肽。
38.如權利要求36的藥物組合物，其包含0.0001單位/L的胰島素和I y M的所述肽。
39.如權利要求28、29、30、31、32、33、34、35、36、37或38的藥物組合物，其中所述的不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體是包含0. 2g/L KC1、0. 2g/L無水KH2P04、8g/LNaCl和I. 15g/L無水Na2HPO4的水性載體。
40.組合物，其包含胰島素或胰島素類似物和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體。
41.如權利要求40的組合物，其中所述的胰島素類似物是選自由賴脯胰島素、天冬胰島素、甘精胰島素、內臟脂肪素和L- a -磷脂醯肌醇-3，4，5-三磷酸，二棕櫚醯基_，七銨鹽組成的組中的至少一種。
42.如權利要求40的組合物，其中所述的胰島素是選自由人胰島素、牛胰島素和豬胰島素組成的組中的至少一種。
43.如權利要求42的組合物，其中所述的胰島素是重組表達的。
44.如權利要求40的組合物，其包含0.0001單位/L至0. I單位/L的胰島素或胰島素類似物。
45.如權利要求40的組合物，其包含0.0001單位/L的胰島素或胰島素類似物。
46.如權利要求40-45中任一項的組合物，其中所述的不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體是包含0. 2g/L KC1、0. 2g/L無水KH2P04、8g/L NaCl和I. 15g/L無水Na2HPO4的水性載體。
47.組合物，其包含0.0001單位/L至0. I單位/L的胰島素和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體。
48.如權利要求47的組合物，其中所述的胰島素是選自由人胰島素、牛胰島素和豬胰島素組成的組中的至少一種。
49.如權利要求48的組合物，其中所述的胰島素是重組表達的。
50.如權利要求47、48或49的組合物，其中所述的不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體是包含 0. 2g/L KCl、0. 2g/L 無水 KH2P04、8g/L NaCl 和 I. 15g/L 無水 Na2HPO4 的水性載體。
51.組合物，其包含S-PKC活化劑、a -PKC抑制劑和含有K+陽離子而不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體。
52.如權利要求51的組合物，其中所述的S-PKC活化劑是選自由胰島素和胰島素類似物組成的組中的至少一種。
53.如權利要求52的組合物，其中所述的胰島素類似物是選自由賴脯胰島素、天冬胰島素、甘精胰島素、內臟脂肪素和L- a -磷脂醯肌醇-3，4，5-三磷酸，二棕櫚醯基_，七銨鹽組成的組中的至少一種。
54.如權利要求52的組合物，其中所述的胰島素是選自由人胰島素、牛胰島素和豬胰島素組成的組中的至少一種。
55.如權利要求54的組合物，其中所述的胰島素是重組表達的。
56.如權利要求52的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑是選自由(S)_2，6_二氨基-N-[(l-(l-氧代十三烷基)-2-哌啶基)甲基]己醯胺二鹽酸鹽水合物；4』 -N-苯甲醯基星形孢菌素；雙吲哚基馬來醯亞胺IX，甲磺酸鹽；12-(2_氰基乙基)_6，7，12，13-四氫-13-甲基-5-氧代-5H-吲哚並[2，3-a]吡咯並[3，4_c]咔唑；2-[I-(3-二甲基氨基丙基)-IH-吲哚-3-基]-3-(1Η-吲哚-3-基)馬來醯亞胺和阿普卡生組成的組中的至少一種。
57.如權利要求52的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑選自由具有以下中所示的胺基酸序列的肽組成的組中的至少一種SEQ IDNO 2, SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID NO:5, SEQ ID NO 6, SEQ ID N0:7、SEQ ID N0:8、SEQ ID N0:9、SEQ ID NO 10, SEQ IDNO :11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15、SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO :18、SEQ ID NO :19、SEQ ID NO :20、SEQ ID NO :21、SEQ ID NO :22、SEQ IDNO 23, SEQ ID NO :24、SEQ ID NO :26、SEQ ID NO :27、SEQ ID NO :28、SEQ ID NO :29、SEQID NO 30, SEQ ID NO :31、SEQ ID NO :32、SEQ ID NO :33、SEQ ID NO :34、SEQ ID NO :35、SEQ ID NO36,SEQ ID NO37,SEQ ID NO 38,SEQ ID NO39,SEQ ID NO40,SEQ ID NO:41、SEQ ID NO :42、SEQ ID NO :43、SEQ ID NO :44、SEQ ID NO :45、SEQ ID NO :46、SEQ IDNO 47, SEQ ID NO :48、SEQ ID NO :49、SEQ ID NO :50、SEQ ID NO :51、SEQ ID NO :52、SEQID NO 53, SEQ ID NO :54 和 SEQ ID NO :55。
58.如權利要求52的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑是由SEQID NO 25中所示的胺基酸序列組成的肽，其在其氨基末端處具有豆蘧醯化的胺基酸殘基，並且在其羧基末端處被醯胺化.
59.如權利要求52的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑是由SEQID NO 1中所示的胺基酸序列組成的肽，其在其氨基末端處具有豆蘧醯化的胺基酸殘基。
60.組合物，其包含δ-PKC活化劑和含有K+陽離子而不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體。
61.如權利要求60的組合物，其中所述的δ-PKC活化劑是選自由胰島素和胰島素類似物組成的組中的至少一種。
62.如權利要求61的組合物，其中所述的胰島素類似物是選自由賴脯胰島素、天冬胰島素、甘精胰島素、內臟脂肪素和L- α -磷脂醯肌醇-3，4，5-三磷酸，二棕櫚醯基_，七銨鹽組成的組中的至少一種。
63.如權利要求61的組合物，其中所述的胰島素是選自由人胰島素、牛胰島素和豬胰島素組成的組中的至少一種。
64.如權利要求63的組合物，其中所述的胰島素是重組表達的。
65.組合物，其包含a-PKC抑制劑和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體。
66.如權利要求65的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑是選自由(S)_2，6_二氨基-N-[(I-(I-氧代十三烷基)-2-哌啶基)甲基]己醯胺二鹽酸鹽水合物；4』-N-苯甲醯星形孢菌素；雙吲哚基馬來醯亞胺IX，甲磺酸鹽；12-(2-氰基乙基)-6，7，12，13-四氫-13-甲基-5-氧代-5H-吲哚並[2，3-a]吡咯並[3，4_c]咔唑；2-[I-(3-二甲基氨基丙基)-IH-吲哚-3-基]-3-(1Η-吲哚-3-基)馬來醯亞胺和阿普卡生組成的組中的至少一種。
67.如權利要求65的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑選自由具有在以下中所示的胺基酸序列的肽組成的組中的至少一種SEQ IDNO 2, SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ IDNO 5, SEQ ID N0:6、SEQ ID N0:7、SEQ ID N0:8、SEQ ID N0:9、SEQ ID NO: 10、SEQ IDNO .11、SEQ ID NO 12, SEQ ID NO :13、SEQ ID NO :14、SEQ ID NO :15、SEQ ID NO :16、SEQ IDNO17,SEQ ID NO18,SEQ ID NO :19、SEQ ID NO :20、SEQ ID NO2U SEQ ID NO :22、SEQID NO 23, SEQ ID NO :24、SEQ ID NO :26、SEQ ID NO :27、SEQ ID NO :28、SEQ ID NO :29、SEQ ID NO 30, SEQ ID NO 3USEQ ID NO 32, SEQ ID NO 33, SEQ ID NO 34, SEQ ID NO:.35、SEQ ID NO :36、SEQ ID NO :37、SEQ ID NO :38、SEQ ID NO :39、SEQ ID NO :40、SEQ IDNO :41、SEQ ID NO :42、SEQ ID NO :43、SEQ ID NO :44、SEQ ID NO :45、SEQ ID NO :46、SEQID NO 47, SEQ ID NO :48、SEQ ID NO :49、SEQ ID NO :50、SEQ ID NO :51、SEQ ID NO :52、SEQ ID NO 53, SEQ ID NO :54 和 SEQ ID NO :55。
68.如權利要求65的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑是由SEQID NO 25中所示的胺基酸序列組成的肽，其在其氨基末端處具有豆蘧醯化的胺基酸殘基，並且在其羧基末端處被醯胺化.
69.如權利要求65的組合物，其中所述的a-PKC抑制劑是由SEQIDNO :1中所示的胺基酸序列組成的肽，其在其氨基末端處具有豆蘧醯化的胺基酸殘基。
70.如權利要求69的組合物，其中所述的藥物組合物包含Iy M至100 ii M的所述肽。
71.如權利要求70的組合物，其中所述的藥物組合物包含IU M的所述肽。
72.如權利要求65-71中任一項的組合物，其中所述的不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體是包含0. 2g/L KC1、0. 2g/L無水KH2P04、8g/L NaCl和I. 15g/L無水Na2HPO4的水性載體。
全文摘要
本公開涉及用於加速創傷癒合、增加皮膚創傷閉合以及減少皮膚創傷部位感染的組合物和方法。具體而言，本發明涉及包含δ-PKC活化劑、α-PKC抑制劑和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體的組合物。本發明還涉及包含胰島素或胰島素類似物和不含Ca2+和Mg2+陽離子的藥學上可接受的載體的組合物。
文檔編號A61K45/06GK102755649SQ20121021981
公開日2012年10月31日 申請日期2008年7月30日 優先權日2007年7月30日
發明者E·布雷納, I·索羅莫尼克, L·布賴曼-維克斯曼, O·萊維-哈查姆, T·滕寧鮑姆 申請人:希爾洛有限公司