黑果枸杞粉在製備降尿酸或治療痛風產品中的用途的製作方法
2023-05-21 22:39:06 1
本發明涉及黑果枸杞的新用途。
背景技術：
痛風(gout)是長期嘌呤代謝障礙、血尿酸增高引起組織損傷的一組異質性疾病。臨床特點是高尿酸血症(hyperuricemia，hua)、痛風性急性關節炎反覆發作、痛風石沉積、特徵性慢性關節炎和關節畸形，常累及腎臟引起慢性間質性腎炎和腎尿酸結石形成。痛風的生化標誌是高尿酸血症，指細胞外液的尿酸鹽呈超飽和狀態。尿酸鹽(monosodiumuratecrystal，msu)在關節及關節周圍組織以結晶形式沉積從而引起一系列急性炎症反應，即為痛風。一般認為血尿酸≧416μmol/l為高尿酸血症，而約5％-12％的高尿酸血症患者會發展成為痛風，血尿酸水平持續在540μmol/l者有70％-90％的機會得痛風，所以降低血尿酸是我們預防及治療痛風的根本解決方法。
據《中國藥物應用檢測》統計，目前我國高尿酸血症患者人數達1.2億，而由高尿酸血症演變成痛風的發病比例約為1/10。我國痛風發病人數在2015年已達7500萬，且痛風發病率每年還在以7.5％的速度大幅度上升，1/5的痛風病人已喪失生活能力，痛風病人病程超過10年，易引發難以治癒的尿毒症，對病人和家庭帶來了沉重的心理壓力和經濟負擔。高尿酸血症及原發性痛風與肥胖症、高脂血症、高血壓病、糖尿病、冠心病等疾病呈顯著正相關。因此，痛風尤如糖尿病一樣，是危害人類健康的一種嚴重的代謝性疾病。
針對急性期痛風的治療，臨床醫學主要選用非甾體類抗炎藥(nasids)、秋水仙鹼、腎上腺皮質激素和鎮痛藥這四種藥物。然而，這些藥物雖然消炎止痛作用快，但治療費用高，而且大多數藥物毒副作用相當明顯。
如果能找到天然食品用於治療痛風，將可以最大限度的降低毒副作用的產生。
技術實現要素：
基於上述現狀，本發明擬提供黑果枸杞粉在高尿酸方面的醫藥用途。
具體地，本發明提供了黑黑果枸杞粉在製備降尿酸的食品、藥品或保健品中的用途。
本發明所述黑果枸杞粉的粒徑為200～500目。本發明一個具體實施方式中，優選使用的粒徑為300～500目。
中藥材(植物)的細胞直徑通常在10-200μm左右，其超微粉的粒徑一般可粉碎到細胞粒徑為48μm(300目)～25μm(500目)的粉末，有些甚至可溶於水中飲用。200目左右的粉末，粒徑大約是70.9-79.1μm。
進一步地，所述食品、藥品或保健品是預防或/和治療高尿酸血症的食品、藥品或保健品。
進一步地，所述食品、藥品或保健品是預防或/和治療高尿酸所致疾病的食品、藥品或保健品。
更進一步地，所述高尿酸所致疾病為痛風。
進一步地，所述食品、藥品或保健品是抑制黃嘌呤氧化酶的食品、藥品或保健品。
本發明還提供了黑果枸杞粉在製備治療痛風的食品、藥品或保健品中的用途。本發明所述黑果枸杞粉的粒徑為200～500目。本發明一個具體實施方式中，優選使用的粒徑為300～500目。
進一步地，所述食品、藥品或保健品是預防或/和治療急性痛風的食品、藥品或保健品。
其中，所述食品、藥品或保健品是降低血中超敏c反應蛋白、腫瘤壞死因子α、環氧合酶1、前列腺素e中至少一種的含量的食品、藥品或保健品。
其中，實驗中意外地發現，在對炎症因子的影響中，黑果枸杞粉的作用效果幾乎都不如陽性對照藥物吲哚美辛；但是，對白介素-6的降低作用，黑果枸杞粉在中劑量和高劑量下的效果，優於吲哚美辛，黑果枸杞粉在對白介素-6的抑制作用要明顯優於陽性對照藥物。
白細胞介素-6，簡稱白介素6(il-6)，是一種細胞因子，屬於白細胞介素的一種。它是由纖維母細胞、單核/巨噬細胞、t淋巴細胞、b淋巴細胞、上皮細胞、角質細胞、以及多種瘤細胞所產生。il-1、tnf-a,pdgf、病毒感染、雙鏈rna及camp等，均可誘導正常細胞產生白介素6。白介素6能夠刺激參與免疫反應的細胞增殖、分化並提高其功能。目前已經發現，白介素6的異常升高，往往與人體多項疾病有密切關聯，如血小板增多、炎症性疾病、免疫應答異常、骨質疏鬆、慢性關節風溼、高鈣血、多發性骨髓瘤、惡病質、腎炎等，它可以參與炎症反應和發熱反應。因此，基於黑果枸杞粉對白介素-6顯著的抑制作用，本發明還提供了其在製備白介素-6抑制劑中的用途。
在急性痛風實驗測定足腫脹結果中發現，使用黑果枸杞粉中劑量和高劑量(1～2g/kg)時，在72h時，對急性痛風的治療效果與陽性藥物吲哚美辛作用相當，這一結果出乎發明人的預料。
進一步地，所述黑果枸杞粉每日劑量換算為大鼠使用劑量為1～2g/kg；實驗表明，1g/kg和2g/kg劑量下，其治療效果相近似，因此可以優選1g/kg。
本發明研究發現，使用黑果枸杞粉能夠有效降低血尿酸，治療痛風，為臨床預防或/和治療高尿酸血症或痛風提供了新產品；並且，在治療痛風過程中，在72小時後可以發揮與陽性藥物相當的活性，而在對白介素-6的抑制作用上，黑果枸杞粉甚至超過了陽性藥物，取得了意料不到的良好效果。
本發明採用的原料為食用的天然植物果實，相比已知的痛風藥物，還具有毒副作用低的優勢，患者依從性更好。
基於上述發現，本發明還提供了含有黑果枸杞粉的產品在製備降尿酸或/和治療痛風的食品、藥品或保健品中的用途。
其中，所述所述食品、藥品或保健品是預防或/和治療高尿酸血症的食品、藥品或保健品。
其中，所述食品、藥品或保健品是預防或/和治療黃嘌呤氧化酶異常增高所致疾病的食品、藥品或保健品。
上述「產品」中的活性成分至少包括黑果枸杞粉一種，當然，也可以僅僅只以黑果枸杞粉為活性成分。另外，該產品中還可以包括相關的輔料或輔助性成分。
該產品是通過胃腸道吸收途徑給予的，可以根據實際需求製備不同的製劑類型，如液體形式、固體形式等。基於不同的製劑類型，可以選擇不同的輔料。
附圖說明
圖1足腫脹測定結果，其中，l1＝低劑量組，l2＝中劑量組，l3＝高劑量組，以空白組為參照組做方差分析，p**<0.01為極顯著，p*<0.05為顯著。
圖2小鼠血尿酸測定結果，其中，0.5＝低劑量組，1＝中劑量組，2＝高劑量組，以空白組為參照組做方差分析，p**<0.01為極顯著，p*<0.05為顯著；以模型組為參照組做方差分析，p##<0.01為極顯著，p#<0.05為顯著。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發明作進一步闡述，但本發明並不局限與以下實施例，所述原材料如無特殊說明均能從公開商業途徑獲得。
實驗1對痛風的作用
1.樣品製備
超微果粉:將黑果枸杞乾燥後，超微粉碎，得到300目～500目的粉末。
2.試驗動物
大鼠:sd種,spf級180-200g,雄性,出售單位:湖南斯萊克景達實驗動物有限公司,質量檢測單位:湖南斯萊克景達實驗動物有限公司,出售單位許可證號:scxk(湘)2013-0004,實驗單位許可證編號:syxk(青)2012-0001
3.大鼠急性痛風模型藥理研究實驗方法
動物分組:分組後適應性飼養一周,共分6組,各組10隻,分別為:空白組,模型組,陽性藥物組，試驗樣品的低中高劑量組為3組,總計6組
樣品:將黑果枸杞超微粉用滅菌注射用水配製為30g/100ml,並超聲10min，低中高劑量組分別為0.5g/kg,1g/kg,2g/kg,即分別灌胃0.35ml,0.7ml,1.4ml.測定前，每日均給藥，陽性藥物相同。
急性痛風誘導劑msu:用0.9％nacl配製為40mg/ml,並超聲10min,於大鼠右足腳墊皮內注射0.1ml
陽性藥物:用0.9％nacl將吲哚美辛配製為50mg/100ml,按3mg/kg給藥,灌1.2ml,使用前超聲10min
足腫脹測定:分別由一個人用電子遊標卡尺測定每組大鼠右後足厚度,分別測定0h,4h,24h,48h,72h後的右後足厚度
觀察72h後挖眼珠取血並脫臼處死,處死前12h禁食不禁水,解剖後取肝,脾,腎,右後足
血:取血室溫放置2h後2000r離心5min後取上清液3000r離心5min取血清放入-80℃冰箱備用.
肝,脾,腎,右後足:解剖,取肝,脾,腎,右後足,用生理鹽水快速清洗倆遍後,用紗布吸水,稱重後放入自封袋,放入-80℃冰箱備用.
4試驗結果
4.1足腫脹測定結果
圖1中數據是以10隻大鼠足腫脹的用one-wayanova進行方差分析。由圖可知：0h各組大鼠右後足測定結果無顯著差異，說明各組老鼠右後足厚度基本一致，4h後測定結果顯示模型組右後足厚度顯著增高並且在72內變化不大，說明我們造模成功；4h後陽性藥物右後足便出現足腫脹顯著降低，中劑量組與高劑量組在48h出現足腫脹顯著降低，初步確定中劑量組與高劑量組具有顯著性效果，且由圖所知中高劑量組差異不大。
4.2炎症因子評價抗痛風效果
表1
註：以模型組為參照組做方差分析，p**<0.01為極顯著，p*<0.05為顯著。
上表中數據是以10隻大鼠血清測定的用one-wayanova進行方差分析。由上表結果可知，超敏c反應蛋白的測定結果顯示中高劑量組與模型組比較具有顯著性差異，且中高劑量組差異不大；腫瘤壞死因子a的測定結果顯示低中高劑量組與模型組比較都具有顯著性差異，且成劑量相關性降低，但中高劑量組之間的差值遠遠小於低中劑量之間的差值；白細胞介素-6的測定結果顯示中高劑量組與模型組比較都具有顯著性差異，且中高劑量組差異不大；環氧合酶1的測定結果顯示低中高劑量組與模型組比較都具有顯著性差異，且低中劑量之間的差值遠高於中高劑量之間的差值；前列腺素e的測定結果顯示中高劑量組與模型組比較都具有顯著性差異，且中高劑量組差異不大。綜上所述生化指標測定結果分析可知，最佳劑量組為中劑量組即1g/kg。
實驗2對尿酸的作用
1.樣品製備
2.超微果粉:將黑果枸杞乾燥後，超微粉碎，得到300目～500目的粉末。
3.試驗動物
小鼠:km種,spf級18-22g,雄性,出售單位:湖南斯萊克景達實驗動物有限公司,質量檢測單位:湖南斯萊克景達實驗動物有限公司,出售單位許可證號:scxk(湘)2013-0004,實驗單位許可證編號:syxk(青)2012-0001
3.小鼠高尿酸模型藥理研究實驗方法
動物分組:分組後適應性飼養一周,共分6組,各組10隻,分別為:空白組,模型組,陽性藥物組，試驗樣品的低中高劑量組為3組,總計6組
樣品配置:所有樣品在試驗開始前1h配製，黑果枸杞超微粉用滅菌注射用水配製為10g/100ml,使用前超聲10min,低中高劑量組分別為0.5g/kg,1g/kg,2g/kg即分別灌胃0.125ml,0.25ml,0.5ml。測定前，每日均給藥，陽性藥物相同。
高尿酸造模劑:氧嗪酸鉀,用熱滅菌注射用水配置1.5g/100ml並超聲10min,灌胃前1h按270mg/kg腹腔注射.
陽性藥物:別嘌醇片壓成粉後,用滅菌注射用水配置0.1g/100ml,使用前超聲10min.灌此藥10mg/kg,即0.25ml。
觀察第七天給藥1h後脫臼處死,處死前12h禁食不禁水,挖眼珠取血,解剖後取肝脾腎
血:取血室溫放置2h後2000r離心5min後取上清液3000r離心5min取血清放入-80℃冰箱備用
肝脾腎:解剖,取肝脾腎,用生理鹽水快速清洗兩遍後,用紗布吸水,稱重後放入冷凍管,放入-80℃冰箱備用
4試驗結果
4.1血尿酸測定結果
圖2中數據是以10隻小鼠足腫脹的用one-wayanova進行方差分析。由圖我們可知：以空白組為參照，模型組具有顯著性差異，說明造模成功，陽性藥物組，及各劑量組也具有顯著性差異，說明降低血尿酸效果顯著，以模型組為參照，低劑量組沒有顯著性差異，中高劑量組具有顯著性差異，從而確定中劑量組與高劑量組具有降低血尿酸的效果，且由圖所知中高劑量組差異不大。
4.2肝臟黃嘌呤氧化酶測定結果
表2肝臟黃嘌呤氧化酶測定結果
註：以空白組為參照做方差分析，p##<0.001為極顯著，p#<0.005為顯著；以模型組為參照組做方差分析，p**<0.001為極顯著，p*<0.005為顯著。
由上表我們可知：以空白組為參照，模型組具有顯著性差異，說明造模成功，以模型組為參照，陽性藥物組、低中高劑量組都具有顯著性差異，說明黑果枸杞超微粉對肝臟的黃嘌呤氧化酶具有顯著抑制作用。綜合血尿酸測定結果及肝臟中黃嘌呤氧化酶的測定結果可知，中劑量組為最佳組，即1g/kg的劑量可達到最佳效果。
以上僅是本發明的優選實施方式，應當指出的是，上述優選實施方式不應視為對本發明的限制，本發明的保護範圍應當以權利要求所限定的範圍為準。對於本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明的精神和範圍內，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護範圍。