伏立諾他在製備治療自身免疫及炎症性疾病藥物方面的應用的製作方法

2023-04-26 08:57:11 2

專利名稱：伏立諾他在製備治療自身免疫及炎症性疾病藥物方面的應用的製作方法
技術領域：
本發明屬於藥物化學應用技術領域,涉及藥物伏立諾他(Vorinostat)在製備作為治療多發性硬化及其動物模型實驗性自身免疫腦脊髓炎藥物方面的應用。
背景技術：
多發性硬化(Multiple Sclerosis，MS)是以中樞神經系統白質脫髓鞘病變為特點，好發於青壯年，發病年齡多在20 40歲，可引起各種症狀，包括感覺改變、視覺障礙、肌肉無力、憂鬱、協調與講話困難、嚴重的疲勞、認知障礙、平衡障礙、體熱和疼痛等，嚴重的可以導致活動性障礙和殘疾。多發性硬化症的病因不清，多被認為是自身免疫性疾病。迄今尚無肯定有效的治癒辦法。 實驗性自身免疫性腦脊髓炎(Experimental AutoimmuneEncephalomyelitis, EAE)是由同種型、同種異型、異種異型致腦炎抗原如髓鞘脂蛋白(PLP)、髓鞘鹼性蛋白(MBP)、髓鞘少突膠質細胞糖蛋白(MOG)和髓鞘相關糖蛋白(MAG)誘導的、實驗敏感動物產生的、由細胞免疫反應介導的、以中樞神經系統白質脫髓鞘為特徵的遲發性變態反應性自身免疫疾病。根據致敏原的組成、致敏的方法和動物的遺傳背景的不同，可誘導出超急性、急性、慢性臨床和病理特點的EAE。其中慢性復發性EAE的病程呈遷延復發者，其病理特徵和MS相似，均表現為炎性細胞浸潤和中樞神經系統白質脫髓鞘改變，與MS極相似，是MS的理想模型。可誘導出慢性復發性EAE作為多發性硬化的動物模型。雖然其病理發生還沒有被完全了解，但是普遍認為自身免疫性腦脊髓炎是由輔助型T細胞(THl和TH17)介導的自身免疫性炎症引起的中樞神經系統炎症疾病。越來越多的研究表明，TH17細胞反應的異常與多發性硬化及實驗性自身免疫腦脊髓炎有關，並在自身免疫性疾病和感染性疾病中發揮重要的調節作用。因此，對伏立諾他調節EAE發生過程中對機體的保護作用及其作用靶點，將有助於為人類多發性硬化症的治療提供新思路。伏立諾他中文別名N-羥基-N』 -苯基辛二醯胺，是一種組蛋白去乙醯化酶抑制劑(HDACIs)。核小體的組蛋白乙醯化水平可影響某些轉錄因子接近其所在部位的基因序列，影響特定基因的轉錄。組蛋白的乙醯化水平由相互拮抗的組蛋白乙醯化酶(HATs)和組蛋白去乙醯化酶(HDACs)調節。組蛋白去乙醯化酶抑制劑(HDACIs)則通過抑制HADs而改變染色質結構，在轉錄水平進行基因表達調控。組蛋白去乙醯化酶抑制劑(suberoylanilidehydroxamic acid, SAHA)已被批准用於臨床治療皮膚T細胞淋巴瘤，有多種HDACIs處於臨床試驗階段。除了明確的抗腫瘤活性，HDACIs還顯示出免疫調節活性。本發明體外實驗表明HDACIs可抑制T淋巴細胞的活化、增殖及分泌細胞因子；利用自身免疫性疾病動物模型進行的研究也證實了其免疫抑制活性。但是伏立諾他對炎症反應的輔助性T細胞THl和TH17亞群介導的EAE的調節作用及對多發性硬化的治療作用尚無報導
發明內容
本發明的目的是公開了伏立諾他在製備治療自身免疫性和神經系統炎症性疾病藥物方面的應用。其中自身免性疾病指的是多發性硬化症(圖1-11)、自身免疫性視網膜炎(圖8-11)、視神經脊髓炎(圖8-11)、橋本氏甲狀腺炎(圖8-11)、自身免疫性溶血性貧血(圖8-11)、自身免疫性血小板減少症(圖8-11)、重症肌無力(圖8-11)、原發性膽汁性肝硬變(圖8-11)、侵襲性慢性肝炎(圖8-11)、慢性腎小球炎(圖8-11)、肌炎(圖8-11)、系統性硬化症(圖8-11)(哪個圖或實驗代表可以治療這些疾病？)。神經系統炎症性疾病指的是多發性硬化症(圖1-11)、視神經脊髓炎(圖8-11)和急性播散性腦脊髓炎(圖6-11)。本發明典型的治療效果是伏立諾他在製備治療自身免疫腦脊髓炎藥物方面的應用；其中伏立諾他在治療多發性硬化的動物模型實驗性自身免疫腦脊髓炎的有效劑量優選為100 mg/Kg體重/天。折算成人按照50-60Kg體重的使用劑量為5_6g/天。本發明運用治療多發性硬化的動物模型實驗性自身免疫腦脊髓炎進行了大量的藥理實驗，實驗結果表明伏立諾他可以降低小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎的發病率、臨床評分平均分、臨床評分最高分和臨床評分總分；可以減輕脊髓炎性細胞浸潤和脊髓脫髓鞘；並且可以減輕脾臟中IFN- y分泌相關Thl細胞和IL-17A分泌相關Thl7細胞佔⑶4陽性T 細胞的百分數。實驗性自身免疫腦脊髓炎是多發性硬化症、視神經脊髓炎和急性播散性腦脊髓炎密切相關的實驗動物模型，因此，本發明有望在臨床上成為治療多發性硬化症、視神經脊髓炎和急性播散性腦脊髓炎等疾病的藥物。本發明公開的伏立諾他(Vorinostat)在製備作為治療多發性硬化及其動物模型實驗性自身免疫腦脊髓炎藥物方面的應用，通常是以藥物組合物的形式服用的，可口服或非口服給藥，或者以和藥學上可接受的載體、賦形劑及其它添加劑形成的化合物(如片劑、緩釋製劑、膠囊劑、注射劑、溶液劑)安全的口服或非口服給藥。當口服給藥時，組合物可配製成片劑、糖衣劑或膠囊。為製備口服藥物組合物可採用乳糖或澱粉做載體，明膠，羧甲基纖維素鈉，甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等是合適的結合劑或成顆劑。作為崩解劑可選用澱粉或微晶纖維素，常以滑石粉，膠體矽膠，硬脂酸甘油酯，硬脂酸鈣或鎂等作為合適的抗粘合劑和潤滑劑。例如，可通過壓制溼顆粒來製備片劑。活性成分與載體以及選擇性的與一份崩解添加劑組成混合物，該混合物與粘合劑的含水溶液，醇性或含水醇性溶液在合適的設備中進行顆粒化，乾燥顆粒隨後加入其它的崩解劑，潤滑劑和抗粘劑將此混合物壓片。本發明的系列化合物可以注射劑形式給藥，雖然劑量依治療對象、給藥方式、症狀及其它因素而改變。實際服用的伏立諾他(Vorinostat)化合物的劑量應該由醫生根據有關的情況來決定，這些情況包括被治療者的身體狀態，選者的給藥途徑、年齡、體重、患者對藥物的個體反應，患者症狀的嚴重程度等等。


圖I為伏立諾他(vorinostat)化學結構式 圖2為口服伏立諾他(vorinostat, 100mg/kg)降低小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎的發病率圖；說明伏立諾他可以降低多發性硬化症、視神經脊髓炎和急性播散性腦脊髓炎的發病率；
圖3為口服伏立諾他(vorinostat, 100mg/kg)降低小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎的臨床評分平均分圖；說明伏立諾他可以治療多發性硬化症、視神經脊髓炎和急性播散性腦脊髓炎；圖4為口服伏立諾他(vorinostat, 100mg/kg)降低小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎的臨床評分最高分圖；說明伏立諾他可以減輕多發性硬化症、視神經脊髓炎和急性播散性腦脊髓炎的發病程度；
圖5為口服伏立諾他(vorinostat，100mg/kg)降低小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎的臨床評分總分圖；說明伏立諾他可以治療多發性硬化症、視神經脊髓炎和急性播散性腦脊髓炎；
圖6為口服伏立諾他(vorinostat, 100mg/kg)減輕小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎的脊髓炎性細胞浸潤圖(H&E染色);說明伏立諾他抑制中樞神經系統炎性細胞的浸潤，可以治療中樞神經系統自身免疫炎症性疾病多發性硬化、神神經脊髓炎和急性播散性腦脊髓炎；
圖7為口服伏立諾他(vorinostat, 100mg/kg)減輕小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎的脊髓脫髓鞘(Luxol fast blue染色)；說明伏立諾他可以治療以中樞神經系統白質脫髓鞘病變為特點的疾病多發性硬化、視神經脊髓炎和急性播散性腦脊髓炎； 圖8為口服伏立諾他(vorinostat，100mg/kg)降低小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎的脾臟中IFN- y分泌相關Thl細胞佔CD4+T細胞的百分數(流式細胞儀數據典型代表圖);說明伏立諾他可以治療以輔助性T細胞THl和TH17亞群介導為特點的疾病；
圖9為口服伏立諾他(vorinostat，100mg/kg)降低小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎的脾臟中IFN-Y分泌相關Thl細胞佔CD4+T細胞的百分數(流式細胞儀數據柱狀圖);說明伏立諾他可以治療以輔助性T細胞THl和TH17亞群介導為特點的疾病；
圖10為口服伏立諾他(vorinostat, 100mg/kg)降低小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎的脾臟中IL-17A分泌相關Thl7細胞佔CD4+T細胞的百分數(流式細胞儀數據典型代表圖)；說明伏立諾他可以治療以輔助性T細胞THl和TH17亞群介導為特點的疾病；
圖11為口服伏立諾他(vorinostat, 100mg/kg)降低小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎的脾臟中IL-17A分泌相關Thl7細胞佔CD4+T細胞的百分數(流式細胞儀數據的柱狀圖)；說明伏立諾他可以治療以輔助性T細胞THl和TH17亞群介導為特點的疾病；
(n=8,圖表示為平均值±標準差，*p〈0. 05, ** p〈0. 01, *林p〈0. 001, t檢驗)。
具體實施例方式 下面結合實施例說明本發明，這裡所述實施例的方案，不限制本發明，本領域的專業人員按照本發明的精神可以對其進行改進和變化，所述的這些改進和變化都應視為在本發明的範圍內，本發明的範圍和實質由權利要求來限定，其中伏立諾他(vorinostat)有市售,其它所用的試劑，除特別標註外均有市售。實施例I
I. I實驗性自身免疫腦脊髓炎(EAE)小鼠模型的構建原理本實驗選用髓鞘少突膠質細胞糖蛋白(mog35_55)mevgwyrspfsrvvhlyrngk作為抗原免疫C57BL/6小鼠，建立M0G35_55-EAE (實驗性自身免疫腦脊髓炎)小鼠模型。實驗室常用致敏原多為腦或脊髓組織勻漿、髓鞘鹼性蛋白成分或其多肽片段等，免疫對象多為嚙齒類動物來構建EAE模型，不同的致敏原可產生發病症狀不同的EAE模型，可根據其要建立的EAE模型的類型選擇不同的致敏原，以及不同的被免疫對象。本實驗中用到的髓鞘少突膠質細胞糖蛋白雖然在髓鞘蛋白中含量很少，只佔髓鞘蛋白成分的0. 01%-0. 05%，但由於MOG存在於髓鞘膜和少突膠質細胞的最外層，具有高度免疫原性，且在構建EAE過程中發現，MOG是即能引起脫 髓鞘抗體反應又能引起T細胞反應的中樞神經系統髓鞘蛋白成分。因此，用髓鞘少突膠質細胞糖蛋白去免疫小鼠可以建立發病機理以及臨床症狀跟多發性硬化症(MS)極其相似的EAE模型。現在，許多證據證明MOG和抗MOG抗體在MS的發病過程中起很重要的作用，本實驗參考近年國內外相關方法，建立MOG誘導的穩定的慢性的EAE理想模型。在利用MOG免疫小鼠時，應製備抗原佐劑乳化物，國內的乳化劑一般都選擇福氏佐劑，抗原佐劑是非特異性免疫增強劑，加入佐劑可以改變抗原的物理性狀，並延長抗原在體內停留的時間，也可刺激抗原提呈細胞及淋巴細胞，從而增強免疫應答的效果，它還能引起遲髮型血腦屏障通透性增加和自身免疫反應，CFA (福氏佐劑)是當今作用最強的佐劑，它是由人型結核桿菌製備的，提高結核桿菌的濃度，可提高EAE的發生率和復發率，但也容易引起注射部位壞死，現在國內也有利用卡介苗來代替人型結核桿菌來製備福氏佐劑的。本實驗採用人型結核桿菌製備福氏佐劑。免疫動物兩天後可注射白日咳毒素，注入白日咳毒素的目的是為了增加血管壁的通透性和血管表面粘附分子的變得，有利於致敏的T細胞透過血腦屏障，攻擊神經髓鞘，造成腦脊髓組織的免疫損傷。在免疫動物之後，再加用白日咳毒素後，小鼠的潛伏期縮短，臨床表現更加嚴重，最嚴重時頻臨死亡或者死亡，加和不加白日咳毒素的小鼠的EAE的潛伏期以及臨床症狀相差很大，加了百日咳毒素可成功的誘導急性EAE模型。I. 2 EAE小鼠模型的構建方法 I. 21實驗動物及來源
雌性野生型C57BL/6無病原體(SPF級)小鼠30隻，6_8周齡，體重18_20g，購自於北京維通利華實驗動物技術有限公司，飼養於天津醫科大學實驗動物中心，小鼠的飼養環境為室溫20-25°C，相對溼度為40%-60%。I. 22抗原佐劑乳化物的製備
100 Ii gM0G35_55 多妝和 500 u g 滅活的分支桿菌(Mycobacterium tuberculosis,結核桿菌，購自Difco公司)與100 ill生理鹽水和100 ill Freund’s佐劑(購自SIGMA公司)完全混合，乳化。I. 23實驗分組
為研究伏立諾他在小鼠EAE動物模型中的藥物作用，小鼠隨機分四組，每組8隻小鼠，分別為兩個生理鹽水對照組和兩個100 mg/kg/天伏立諾他給藥組。一個對照組和一個伏立諾他給藥組每天檢查記錄小鼠EAE發病情況和臨床神經功能分級至免疫誘導後30天；另一個對照組和一個伏立諾他給藥組在小鼠EAE發病高峰期即免疫誘導後第15天處死，取脊髓和脾臟。I. 23實驗方法和步驟
I. 231小鼠後背皮下分2個點注射乳化劑(100 u I/點)。I. 232同時在當天尾靜脈注射200ng的百日咳毒素。I. 233免疫48小時後每隻小鼠再次尾靜脈注射200ng百日咳毒素(pertussistoxin,購自 List Biological Laboratories)。I. 234伏立諾他給藥組從免疫誘導後第7天開始每天用伏立諾他灌胃給藥，劑量為 100 mg/kg/ 天。1.235 7-14天後小鼠開始發生EAE。每天檢查記錄小鼠EAE發病情況和臨床神經功能分級。
I. 24 EAE小鼠模型臨床評分標準
小鼠經MOG免疫後，隔日採用盲法由兩名觀察者，採用國際通用的5分評分制對小鼠進行臨床評分，每天檢查並記錄疾病的臨床神經功能分級，直至MOG免疫後30天。小鼠EAE動物模型神經功能評 分具體標準如下0分，無明顯異常，沒有明顯的臨床症狀；0. 5分，部分尾巴無力鬆弛；1分，完全尾巴癱瘓可見輕度笨拙；2分，後肢無力，行動遲緩，輕度共濟失調；2. 5分，一條後肢癱瘓；3分，雙側後肢癱瘓，被動翻身後不能恢復，但給予刺激後可挪動；3. 5分，雙側後肢癱瘓，前肢無力；4分，雙側後肢癱瘓伴前肢癱瘓；5分，瀕死狀態或死亡。1.3 EAE小鼠模型發病高峰期處理 I. 31取脊髓組織作石蠟切片
I. 311脊髓固定
在免疫誘導後第十五天取脊髓組織，將組織置於包埋盒中，4%中性多聚甲醛固定，30min以上或過夜。I. 312組織脫水
流水衝洗脊髓組織中的甲醛30min — 75%酒精30min — 85%酒精30min — 95%酒精
IIh — 95%酒精II 2h — 95%酒精III過夜或2h —無水酒精I 30min —無水酒精II 30min —無水酒精III 30min
I. 313組織透明(低溫)二甲苯I 15 min—二甲苯II 10 min—二甲苯III 10 minI. 314組織浸蠟(60°C ):石(熔)蠟I 90 min —石(熔)蠟II 60 min —打開包埋盒，取出組織，放入預熱的模具(包含溶蠟)中，包埋盒置頂一繼續添加石(熔)蠟，直至包埋盒底部浸沒於石(熔)蠟中。I. 315冷卻取出模具，置於4°C冰箱過夜，充分冷卻後，常溫貯藏備用 I. 316石蠟切片
脊髓切片厚度為10um，將蠟片放入45°C溫水中，使其自然展開。持防脫玻片撈取蠟片，然後60°C烘片彡4h。I. 32脊髓組織石蠟切片染色
I. 321石臘切片脫臘石臘切片一二甲苯I 10 min—二甲苯II 10 min—二甲苯III 10
min
I. 322石蠟切片水化100%酒精2min — 95%酒精2min — 85%酒精2min — 75%酒精2min —蒸懼水衝洗Imin
I. 323石蠟切片HE染色蘇木精10 min —自來水漂洗I 3s —鹽酸酒精迅速分化(I滴濃鹽酸加入70%乙醇IOOml中)I 3s — 0. 1%氨水/PBS (7. 4 8. 0)返藍30s Imin —自來水衝洗2-5min —蒸餾水漂洗I 3s - 0. 5%伊紅染色Imin —蒸餾水漂洗I 3s — 75%酒精10 30s — 85%酒精10 30s — 95%酒精30s Imin —無水酒精2 3min —透明封藏二甲苯I 3_5min — 二甲苯II 3-5 min — ( 二甲苯溼潤)滴樹膠一加蓋玻片。I. 324石蠟切片Luxol fast blue染色石蠟切片脫蠟一脫水至95%酒精一置於Luxol固藍溶液中，在60°C溫度下，孵育過夜(16-24 h)—取出切片，於95%乙醇溶液中浸洗，洗去過多染液一取出切片，於去離子水中浸洗一切片於0. 05%碳酸鋰溶液中快速浸洗3-10s —立即取出切片，置於70%乙醇溶液中分化，直到灰質和白質能夠清晰辨別一取出切片，於去離子水中衝洗一切片於0. 05%碳酸鋰溶液中輕輕浸洗數次，然後置於70%乙醇溶液中浸洗數次，直到白質顏色轉變成藍綠色，灰質幾無顏色時，停止分化一切片去離子水中衝洗完全95%酒精30s Imin —無水酒精2 3min —透明封藏二甲苯I 3_5min — 二甲苯
II3-5 min — (二甲苯溼潤)滴樹膠一加蓋玻片。I. 33取脾臟做細胞內染色 I. 331細胞準備
1.3311麻醉小鼠，無菌分離脾臟。
I. 3312用注射器活栓輕輕研磨脾臟完全破碎，加入I. 8ml無菌超純水，迅速混勻後加入200 u I無菌的IOxPBS迅速混勻。I. 3313細胞懸液用40 iim篩網過濾。I. 3314並加2_3ml無血清RPMI1640培養基衝洗篩網兩次。I. 3315 1500rpm/minx5min離心收集細胞，棄上清，重懸細胞。I. 3316用6mlRPMI1640完全培養基重懸細胞。I. 3317調整細胞密度為5xl06/ml I. 332刺激細胞因子分泌
I. 3321 每孔加入濃度為 Brefeldin A(BFA) I u 1/ml，100ng/ml 佛波醇酯(PMA)和終濃度I U g/ml I丐離子黴素(Ionomycin) , 37°C, 5% CO2刺激5小時。I. 333收集細胞進行細胞因子染色
I. 3331 1500rpm/min離心收集細胞,棄上清。I. 3332充分重懸細胞後加入螢光標記表面抗體⑶4，4°C避光反應30分鐘。I. 3333 每管加入 staining buffer (SB) 1ml, 1500rpm/min 洗兩次，棄上清。I. 3334 每管加入 BD cytofix/prem 試劑 250 U 1，4°C避光反應 30 分鐘 1.3335 每管加入 BD cytoprem/wash 試劑，1800rpm/min 洗一次,棄上清。I. 3336每管加入封閉液25 ill (其中包括20 ill 10%BSA和5 大鼠血清)，4°C避光反應30分鐘。I. 3337加入螢光標記的細胞因子抗體IFN-Y和IL-17A (及同型對照)，4°C避光反應30分鐘。I. 3338 每管加入 BD cytoprem/wash 試劑，1800rpm/min 洗一次，棄上清。I. 3339 每管加入 SB lml, 1800rpm/min 洗一次，棄上清，細胞用 2%PFA 200 yl 重懸。I. 334上流式細胞儀檢測 I. 4實驗結果
實驗性自身免疫腦脊髓炎是人多發性硬化症的典型動物模型，本發明每天每公斤體重灌胃IOOmg的伏立諾他可以顯著降低小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎的發病率(圖2)，抑制小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎發病的臨床評分平均分(圖3)、臨床評分最高分(圖4)和臨床評分總分(圖5);減輕脊髓炎性細胞浸潤(圖6)和脊髓脫髓鞘(圖7);並且可以減輕小鼠脾臟中IFN- y分泌相關Thl細胞(圖8、圖9)和IL-17A分泌相關Thl7細胞佔CD4+T細胞的百分數(圖10、圖11)。
伏立諾他對小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎具有明顯的治療作用。綜合上述結果，說明伏立諾他可以抑制中樞神經系統中炎性細胞的浸潤，可以治療自身免疫性炎症性疾病多發性硬化症。實施例2
伏立諾他原料50g與280g澱粉混合均勻，用澱粉漿(取澱粉220g用水製成澱粉漿)制顆粒，過篩，乾燥，裝膠囊。實施例3
伏立諾他原料80g與澱粉340g混合均勻，用澱粉漿(取澱粉210g用水製成澱粉漿)制顆粒，過篩，乾燥，加6%。硬脂酸鎂，混勻，壓製成片，包薄膜衣即得。實施例4
伏立諾他原料100g、澱粉400g和纖維素適量過篩，並充分混合，將適量聚乙烯吡咯烷酮溶液與上述的粉混合，過篩，製得溼顆粒於60°C乾燥，將羧甲基澱粉鈉鹽，6%。硬脂酸鎂和滑石粉預先過篩，然後加入到上述的顆粒中壓片。
權利要求
1.伏立諾他在製備治療自身免疫性和神經系統炎症性疾病藥物方面的應用。
2.權利要求I所述的應用，其中自身免疫性疾病指的是多發性硬化症、自身免疫性視網膜炎、視神經脊髓炎、橋本氏甲狀腺炎、自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性血小板減少症、重症肌無力、原發性膽汁性肝硬變、侵襲性慢性肝炎、慢性腎小球炎、肌炎、系統性硬化症。
3.權利要求I所述的應用，其中神經系統炎症性疾病指的是多發性硬化症、視神經脊髓炎和急性播散性腦脊髓炎。
4.權利要求3所述的應用，其中所述的多發性硬化症指的是中樞神經系統白質脫髓鞘病變為特點的疾病。
5.伏立諾他在製備治療自身免疫腦脊髓炎藥物方面的應用；其用量為5-6g。
全文摘要
本發明公開了伏立諾他(Vorinostat)在製備治療自身免疫性疾病藥物方面的應用。本發明的實驗結果表明伏立諾他可以降低小鼠實驗性自身免疫腦脊髓炎的發病率、臨床評分平均分、臨床評分最高分和臨床評分總分；可以減輕脊髓炎性細胞浸潤和脊髓脫髓鞘；並且可以減輕脾臟中IFN-γ分泌相關Th1細胞和IL-17A分泌相關Th17細胞佔CD4陽性T細胞的百分數。因此，本發明涉及製備抑制動物模型實驗性自身免疫腦脊髓炎藥物，有望在臨床上成為治療多發性硬化症、視神經脊髓炎和急性播散性腦脊髓炎等相關疾病的藥物。
文檔編號A61P1/16GK102793693SQ20121033272
公開日2012年11月28日 申請日期2012年9月7日 優先權日2012年9月7日
發明者張榮信, 葛禛禛, 薛振毅, 張凱 申請人:天津醫科大學