調經祛斑片的質量控制方法

2023-05-10 05:30:31 1

專利名稱：調經祛斑片的質量控制方法
調經祛斑片的質量控制方法 發明領域
本發明涉及一種中藥製劑的質量控制方法，具體涉及調經祛斑片的質量控制方法。
背景技術：
調經祛斑片為調經祛斑膠囊改劑型而來，處方收載於《中成藥地方標準上升國家標準》 (外科婦科分冊)582頁，標準代號為WS-10710 (ZD-0710) -2002，具有養血調經，祛瘀 消斑的功效，用於營血不足，氣滯血瘀所致的月經過多，黃褐斑。其處方為黃芪80g、菟 絲子40g、墨旱蓮50g、女貞子40g、枸杞子40g、當歸40g、白芍50g、何首烏40g、地黃50g、 熟地黃60g、桃仁30g、柴胡30g、阿膠12g、手參40g、紅花10g;片劑製法為以上十五味 藥材，取女貞子、枸杞子、當歸、白芍、柴胡、阿膠、於參、紅花粉碎成細粉，其餘菟絲子 等七味藥材加水煎煮二次，每次2小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1. 30 1.35(50'C)的稠膏，加入上述細粉，烘乾，加入磷酸氫鈣等輔料適量，混勻，制粒，乾燥， 壓片，包薄膜衣，即得。粉碎，製成顆粒，裝入膠囊，即得。
原調經祛斑膠囊標準中存在女貞子薄層鑑別中供試品色譜分離度差；枸杞子薄層鑑別中 使用了三氯甲烷，毒性較大；方中鑑別的藥味較少；含量測定方法中供試液製備時難以濾過 等問題，需要對質控方法進行全面地優化及補充。調經祛斑片提取工藝與膠囊一致，但製劑 工藝和輔料不同，需制定確實可行的質量控制方法以保證產品質量和臨床療效。

發明內容
本發明目的在於提供一種調經祛斑片的質量控制方法，進而保證產品質量和臨床療效。 本發明解決了現有調經祛斑製劑質量控制方法中存在的不足，女貞子薄層鑑別中更換了
展開劑，改善了薄層分離效果；枸杞子薄層鑑別中使用了低毒性的溶劑替代了毒性較大三氯
甲烷；增加了柴胡及白芍的薄層色譜鑑別；解決了含量測定方法中供試液製備時難以濾過等
問題，使製劑質量得到很好地控制。
調經祛斑片質量控制方法包括以下全部或部分內容薄層鑑別女貞子；薄層鑑別枸杞子；
薄層鑑別當歸；薄層鑑別白芍；薄層鑑別柴胡；測定本品中芍藥苷的含量。
調經祛斑片質量控制方法包括以下步驟中的一^l或多種 (1)薄層鑑別女貞子取本品適量，除去薄膜衣，研細，加乙醇加熱回流，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材適量，同法製成對照藥材溶液。再 取齊墩果酸對照品，加乙醇製成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國 藥典相應附錄)試驗，吸取上述三種溶液，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G 薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸適當比例為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇 溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上， 顯相同顏色的斑點。
(2) 薄層鑑別枸杞子取本品適量，除去薄膜衣，研細，加水加熱煮沸，放冷，濾過， 濾液用乙酸乙酯振搖提取，乙酸乙酯液濃縮至lml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材適 量，同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取上述兩種溶液， 分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸適當比 例為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材 色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
(3) 薄層鑑別當歸取本品適量，除去薄膜衣，研細，加乙醚超聲處理，濾過，濾液揮 幹，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當歸對照藥材適量，同法製成對照藥材 溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取上述兩種溶液，分別點於同一以羧甲基纖 維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)-乙酸乙酯(17:2)為展開劑，展 開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位 置上，顯相同顏色的螢光斑點。
(4) 薄層鑑別白芍取本品適量，除去薄膜衣，研細，加甲醇超聲處理，濾過，濾液蒸乾， 殘渣加正丁醇飽和的水溶解，置分液漏鬥中，用水飽和的正丁醇振搖提取，分取正丁醇液， 蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇製成每lml含 2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取供試品溶液及對 照品溶液，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以三氯甲垸-乙酸乙 酯-甲醇-甲酸適當比例為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點 顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(5) 薄層鑑別柴胡取本品適量，除去薄膜衣，研細，加甲醇適量，超聲處理，濾過， 濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和的水溶解，置分液漏鬥中，用水飽和的正丁醇振搖提取，分取 正丁醇液，用氨試液適量洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇飽和的水適量洗滌，棄去水洗液， 分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取柴胡對照藥材適量， 加甲醇超聲處理，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水飽和的正丁醇使溶解，用氨試液洗滌，棄去氨 洗液，分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取上述兩種溶液，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠 G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水適當比例為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2%對二甲氨 基苯甲醛的40%硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的 位置上，顯相同顏色的斑點；置紫外光燈(365nm)下檢視，顯相同顏色的螢光斑點。
(6)測定本品中芍藥苷的含量 照高效液相色譜法(中國藥典相應附錄)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八院基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為流 動相；檢測波長為230nm。理論板數按芍藥苷計算應不低於2000。
對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇製成每lml含0. lmg的溶液，即得。
供試品溶液的製備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取適量，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀 乙醇補足減失的重量，搖勻，離心，取上清液，濾過，取續濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。
調經祛斑片的質量控制方法包括以下步驟中的一種或多種
(1) 薄層鑑別女貞子取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加乙醇10 50ml，加熱 回流10 60分鐘，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材0.2 lg，同法製成對照藥材溶液。再取齊墩果酸對照品，加乙醇製成每lml含lmg的溶液，作為 對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取上述三種溶液各2 10ul，分別點 於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 25:5 10:0.2~0.8)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，100。C 12(TC加熱至斑 點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的 斑點。
(2) 薄層鑑別枸杞子取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加水50 200ml,加熱煮 沸10 60分鐘，放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯振搖提取1 3次，每次10 50ml，合併乙酸 乙酯液，濃縮至lml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材0.5 2g，同法製成對照藥材溶 液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取上述兩種溶液各2 10nl，分別點於同一 以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 25:5 10:0.2 0.8) 為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色 譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
(3) 薄層鑑別當歸取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加乙醚20 100ml,超聲處理10 60分鐘，濾過，濾液揮幹，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當歸對照 藥材0.5 2g，同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取上述兩 種溶液各2 10"1，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以石油醚 (60 9(TC)-乙酸乙酯(17:2)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈G65nm)下檢 視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
(4) 薄層鑑別白芍取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加甲醇20 100ml，超聲處理 10 60分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和的水10 50ml分次溶解，置分液漏鬥中， 用水飽和的正丁醇振搖提取1 3次，每次10 50ml，分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml 使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇製成每lml含2mg的溶液，作為對照 品溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液2 10ul，分 別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以三氯甲垸-乙酸乙酯-甲醇-甲酸
(35 45 : 3 7 : 8 12 : 0.1 0.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液， 100'C 120'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同 顏色的斑點。
(5) 薄層鑑別柴胡取本品10 50片，除去薄膜衣，研細，力卩甲醇20 100ml，超聲處 理10 60分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和的水10 50ml分次溶解，置分液漏鬥 中，用水飽和的正丁醇振搖提取1 3次，每次10~50ml，分取正丁醇液，用氨試液10 100ml 洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇飽和的水10 100ml洗滌，棄去水洗液，分取正丁醇液，蒸 幹，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取柴胡對照藥材0.2 2g,加甲醇10 50ml， 超聲處理10 60分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水飽和的正丁醇10 50ml使溶解，用氨試 液10 50ml洗滌，棄去氨洗液，分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為對照藥 材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取上述兩種溶液2 10ul，分別點於同一 以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以三氯甲垸-甲醇-水(25 35 : 8 12 : 0.5 1.5)為展幵劑，展幵，取出，晾乾，噴以2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，加熱至斑點 顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；置紫外光 燈(365nm)下檢視，顯相同顏色的螢光斑點。
(6)測定本品中芍藥苷的含量 照高效液相色譜法(中國藥典相應附錄)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為流 動相；檢測波長為230nm。理論板數按芍藥苷計算應不低於2000。
對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇製成每lml含0. lmg的溶液，即得。
供試品溶液的製備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取適量，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀 乙醇補足減失的重量，搖勻，離心5 30分鐘，取上清液，濾過，取續濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5 20ul，注入液相色譜儀，測定， 即得。
具體實施例方式
本發明的質量控制方法是經過大量的篩選得到的最佳方案，下面的實驗例用於進一步說 明本發明的技術方案和技術效果。
實驗例1 :為女貞子及其特徵成分齊墩果酸的薄層色譜鑑別
本發明優選了展開劑。還考察了以下展開系統①環己垸-丙酮-乙酸乙酯(5:2:l)②環己烷 -丙酮-乙酸乙酯-甲醇(5:2:l:0.5)③甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20:4:0.5),試驗結果表明展開系統①② 無法將供試品和藥材各成分分離，而展開系統③亦可達到分離效果。
按實施例1女貞子薄層鑑別方法以調經祛斑片試驗，結果供試品色譜中，在與對照藥材 色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同的紫紅色斑點。本方法薄層色譜分離效果好，斑點 清晰、圓整，比移值適中，重現性和專屬性好，陰性對照無幹擾。 實驗例2:為枸杞子的薄層色譜鑑別
曾對以下提取純化方法進行了對比試驗①取本品16片，除去薄膜衣，研細，加水50ml， 加熱煮沸15分鐘，放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯15ml振搖提取，提取液濃縮至lml，作為供 試品溶液。(原質量標準的提取方法)②取本品16片，除去薄膜衣，研細，加水50ml，加熱 煮沸15分鐘，放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次15ml，提取液濃縮至lml， 作為供試品溶液。③取本品16片，除去薄膜衣，研細，加水100ml，加熱煮沸15分鐘，放冷， 濾過，濾液用乙酸乙酯15ml振搖提取，提取液濃縮至lml，作為供試品溶液。 取本品16 片，除去薄膜衣，研細，加乙酸乙酯20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液濃縮至lml，作為 供試品溶液。⑤取本品16片，除去薄膜衣，研細，加乙醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過， 濾液蒸乾，殘渣加水溶解，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次15ml，提取液濃縮至lml，作為 供試品溶液。試驗結果表明提取純化方法①和②樣品很難濾過，用乙酸乙酯提取時特別容易 乳化，斑點很弱。提取純化方法③斑點較弱。提取純化方法④和⑤雜質斑點較多。
本發明優選了展開劑。對展開系統做了對比①乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸(3:2:l)②乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸(3:2:0.3)③石油醚(60 90°C)-乙酸乙酯(17:3)。試驗結果表明展開系統①、②比移值較大，展開系統③比移值較小。按實施例1枸杞子薄層鑑別方法以調經祛斑片試驗，結果供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的藍色螢光斑點。本方法薄層色譜分離效果好，斑點清晰、圓整，比移值適中，重現性和專屬性好，陰性對照無幹擾。實驗例3:為當歸的薄層色譜鑑別考察了展開系統石油醚(60 9(TC)-乙酸乙酯(17:3)，結果比移值太大。按實施例1當歸薄層鑑別方法以調經祛斑片試驗，結果供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的藍色螢光主斑點。本方法薄層色譜分離效果好，斑點清晰、圓整，比移值適中，重現性和專屬性好，陰性對照無幹擾。 實驗例4:為白芍特徵成分芍藥苷的薄層色譜特徵鑑別對以下提取純化方法進行了對比試驗①取本品5片，除去薄膜衣，研細，加乙醇30ml， 加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。②取本品20 片，除去薄膜衣，研細，加甲醇40ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水2ml使 溶解，加於DIOI型大孔吸附樹脂柱(內徑1.0cm,柱髙15cm)，用水洗脫至洗脫液無色，棄 去水洗液，再用40%乙醇50ml洗脫，收集40%乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解， 作為供試品溶液。(D取本品10片，除去薄膜衣，研細，加甲醇30ml，超聲處理20分鐘，濾 過，濾液蒸乾，殘渣加水20m使溶解，置分液漏鬥中，用乙醚振搖提取2次，每次2(tol，棄 去乙醚液，水溶液用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合併正丁醇液，用正丁醇飽 和的水洗滌2次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液蒸乾，殘渣加甲醇lml使溶解，加中性氧 化鋁lg (100 200目)，拌勻，蒸乾，加於中性氧化鋁柱(100 200目，3g，內徑1.0cm幹 法裝柱)上，用80%甲醇30ml洗脫，收集洗脫液，蒸千，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試 品溶液。結果方法①②供試品色譜中，雜質較多，斑點不夠清晰；方法③供試品色譜中，斑 點清晰圓整，但提取步驟多，不便操作，故不採用。按實施例1白芍薄層鑑別方法以調經祛斑片試驗，結果供試品色譜中，在與對照品色譜 相應的位置上，顯相同的藍紫色斑點。本方法薄層色譜分離效果好，斑點清晰圓整，重現性和 專屬性好，陰性無幹擾。 實驗例5:為柴胡的薄層色譜特徵鑑別對以下提取純化方法進行了對比試驗①取本品30片，除去薄膜衣，研細，加甲醇50ml， 超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和的水30ml分次溶解，置分液漏鬥中， 用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合併正丁醇液，分取10ml正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。②取本品20片，除去薄膜衣，研細，加甲醇40ml， 超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水5ml使溶解，濾過，濾液加於D101型大孔吸 附樹脂柱(內徑1.0cm,柱高18cm)上，用水30mi洗脫，棄去水洗液，再用乙醇30ml洗脫， 收集乙醇洗脫液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；③取本品10片，除去薄 膜衣，研細，加甲醇30ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水20ml使溶解，置 分液漏鬥中，用乙醚振搖提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，水溶液用水飽和的正丁醇振搖 提取2次，每次20ml，合併正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次20ml，棄去水液， 正丁醇液蒸乾，殘渣加甲醇lml使溶解，加中性氧化鋁lg U00 200目)，拌勻，蒸乾，加 於中性氧化鋁柱Q00 200目，3g，內徑1.0cm幹法裝柱)上，用80°/。甲醇30ml洗脫，收集 洗脫液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；④取本品15片，除去薄膜衣，研 細，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸千，殘渣加2%氫氧化鈉溶液20ml使溶解， 放冷，用正丁醇20ml振搖提取，分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品 溶液；⑤取本品20片，除去薄膜衣，研細，加甲醇40ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸 幹，殘渣加水2tnl使溶解，加於DIOI型大孔吸附樹脂柱(內徑I.0cm，柱高15cm)，用水洗 脫至洗脫液無色，棄去水洗液，再用40%乙醇5(kl洗脫，棄去4W。乙醇洗脫液，繼用70%乙醇 70ml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣加水飽和的正丁醇20ml使溶解，用氨試液10ml洗滌， 棄去氨試液，分取正丁醇液，蒸千，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。結果方法①② ③供試品色譜中，背景較深，陰性有雜質斑點幹擾，試用多種展開系統，分離效果均不好； 方法④特徵斑點不夠清晰；方法⑤供試品色譜中，斑點清晰圓整，效果較好，但提取步驟煩 瑣，故不採用。按實施例1柴胡薄層鑑別方法以調經祛斑片試驗，結果，日光下檢視，供試品色譜中， 在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的紅色斑點；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品 色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的黃色螢光斑點。本方法薄層色譜分離效果 好，斑點清晰、圓整，重現性和專屬性好，陰性對照無千擾。實驗例6:芍藥苷含量測定研究 1對照品及樣品溶液的製備對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品10.05mg，置10ml量瓶中，加稀乙醇溶解並 稀釋至刻度，搖勻，精密量取lml置10ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，搖勻，即得(每lml含 芍藥苷100.5ug)。供試品溶液的製備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取約1.5g，精密稱定，置 具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率260W,頻率50Hz)30分鐘，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，離心10分鐘(3000轉/分鐘)， 取上清液，濾過，取續濾液，即得。陰性樣品溶液的製備陰性樣品溶液是按處方比例稱取除白芍外的藥味，按製法製成白 芍陰性製劑，再取此陰性製劑按上述"供試品溶液的製備"方法製備不含白芍的陰性樣品溶 液。試驗中考察了超聲處理的時間(IO分、20分、30分、40分)，結果表明超聲處理30分 鍾即可提取完全。超聲提取後的溶液難以濾過，經離心後易濾，降低了操作難度，縮短了試驗周期。 2色譜條件與系統適用性試驗儀器日本島津LC-10Avp高效液相色譜儀；檢測器日本島津SPD-10Atvp紫外檢測器； 色譜柱十八烷基矽垸鍵合矽膠色譜柱(島津VP-ODS柱，4.6X150mm)，保護柱YWG C18 10 X4.6咖；威瑪龍色譜工作站；流動相甲醇_水(25:75)為流動相；流速1. Oml/min,柱 溫室溫。檢測波長為230nm。分別吸取芍藥苷對照品溶液、供試品溶液及不含白芍的陰性樣品溶液各lOwl，注入液 相色譜儀，測定。此條件下芍藥苷與其它組分達到基線分離，分離度R>1.5。理論板數按芍 藥苷峰計算大於2000，芍藥苷保留時間約為16分鐘。陰性樣品溶液色譜在相應位置無吸收峰，可見陰性無幹擾。 3波長選擇精密稱取芍藥苷對照品10.05mg，置10ml量瓶中，加稀乙醇溶解並稀釋至刻度，搖勻， 精密量取0.2ml置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用紫外分光光度儀掃描，結果芍藥苷 在229nm處有最大吸收，參考藥典及原劑型標準選擇230nm為測定波長。 4對照品純度檢查精密稱取芍藥苷對照品10. 05mg，置10ml量瓶中，加稀乙醇溶解並稀釋至刻度，搖勻， 按上述色譜條件，進樣10yl，測定，用峰面積歸一化法計算，含量為99.27%，符合含量測定要 求，計算時按100%計算。5方法學驗證精密度試驗計算得芍藥苷峰面積平均值為1181505，相對標準偏差為0.24%，表明精 密度較好；線性關係考察以峰面積積分值A對芍藥苷進樣量C(Ug)進行回歸分析，得回歸 方程A =1. 16X106C+1. 14X104, r=0.9999。線性範圍為0. 201 4, 02 u g，並且直線通過原 點，可用單點外標法進行測定和計算；穩定性試驗計算得日內峰面積平均值為956424，相對 標準偏差為0.89%，三日間峰面積平均值為953734,相對標準偏差為1.13%，表明供試品 溶液在72h內穩定；重複性試驗計算得芍藥苷的含量為1.084 mg/片，相對標準偏差為1. 44%，表明方法重複性較好；加樣回收率試驗計算得平均回收率為99.81%，相對標準偏差為 1.74%，表明方法回收率較好。以上方法學驗證表明，該方法準確，專屬性、重複性好，符合含量測定要求。具體實施例如下實施例1調經祛斑片質量控制方法(1)取本品16片，除去薄膜衣，研細，加乙醇20ml，加熱回流30分鐘，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材0.5g，同法製成對照藥材溶液。再取齊墩果酸對照品，加乙醇製成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各5ul，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20:7:0.5)為展開齊lJ，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，在ll(TC加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(2) 取本品16片，除去薄膜衣，研細，加水100ml，加熱煮沸15分鐘，放冷，濾過，濾 液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次15ml，合併乙酸乙酯液，濃縮至lml，作為供試品溶液。 另取枸杞子對照藥材lg，同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附 錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G 薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20:7:0.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm) 下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。(3) 取本品16片，除去薄膜衣，研細，加乙醚40ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮 幹，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當歸對照藥材lg，同法製成對照藥材溶 液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點 於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以石油醚(60 90。C)-乙酸乙酯(17 : 2)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照 藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。(4) 取本品30片，除去薄膜衣，研細，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸乾， 殘渣加正丁醇飽和的水30ml分次溶解，置分液漏鬥中，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每 次20ml，合併正丁醇液，分取10ml正丁醇液，餘液留用，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解， 作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇製成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。 照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液3 ul、對照品溶液5 ul， 分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40 :5: io : 0.2)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(5)取鑑別(5)項下留用的正丁醇液，用氨試液30ml洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇 飽和的水30ml洗滌，棄去水洗液，分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試 品溶液。另取柴胡對照藥材0.5g，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣 加水飽和的正丁醇20ml使溶解，用氨試液10ml洗滌，棄去氨洗液，分取正丁醇液，蒸乾， 殘渣加乙醇lml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B) 試驗，吸取上述兩種溶液各5 8ul，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層 板上，以三氯甲烷-甲醇-水(30: 10: 1)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2%對二甲氨基 苯甲醛的40%硫酸溶液，105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應 的位置上，顯相同顏色的斑點；置紫外光燈G65nm)下檢視，顯相同顏色的螢光斑點。 (6)測定本品中的芍藥苷的含量照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為 流動相；檢測波長為230run。理論板數按芍藥苷計算應不低於2000。對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇製成每ltnl含0. lmg的溶液， 即得。供試品溶液的製備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取約1.5g，精密稱定，置 具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率260W,頻率50Hz) 30分鐘，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，離心10分鐘(3000轉/分鐘)， 取上清液，濾過，取續濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10 Ul，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每片含白芍以芍藥苷(C23H280 )計，不得少於0.60mg。 實施例2調經祛斑片質量控制方法(1)薄層鑑別女貞子取本品30片，除去薄膜衣，研細，加乙醇50ml，加熱回流60分鐘，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材lg，同法製成對照藥材溶液。再取齊墩果酸對照品，加乙醇製成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各2nl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(25:5:0.8)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，12(TC加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(2) 薄層鑑別枸杞子取本品30片，除去薄膜衣，研細，加水200ral，加熱煮沸60分鐘， 放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯振搖提取3次，每次50ml，合併乙酸乙酯液，濃縮至lml，作 為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材2g，同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典 2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各2 u 1,分別點於同一以羧甲基纖維素鈉 為黏合劑的矽膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(25:5:0.8)為展開劑，展開，取出，晾乾， 置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的 螢光斑點。(3) 薄層鑑別當歸取本品30片，除去薄膜衣，研細，加乙醚100ml，超聲處理60分 鍾，濾過，濾液揮幹，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當歸對照藥材2g，同 法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種 溶液各2ul，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)-乙酸乙酯(17:2)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供 試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。(4) 薄層鑑別白芍取本品30片，除去薄膜衣，研細，加甲醇100ml，超聲處理60分鐘， 濾過，濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和的水50ml分次溶解，置分液漏鬥中，用水飽和的正丁醇 振搖提取3次，每次50ml，分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。 另取芍藥苷對照品，加乙醇製成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國 藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液2ul，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(45:3: 12 : o.i)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，120"C加熱至斑點顯色清晰。供試 品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(5) 薄層鑑別柴胡取本品50片，除去薄膜衣，研細，加甲醇100ml，超聲處理60分鐘， 濾過，濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和的水50ml分次溶解，置分液漏鬥中，用水飽和的正丁醇 振搖提取3次，每次50ml，分取正丁醇液，用氨試液100ml洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇 飽和的水100ml洗滌，棄去水洗液，分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供 試品溶液。另取柴胡對照藥材2g，加甲醇50ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣 加水飽和的正丁醇50ml使溶解，用氨試液50ml洗滌，棄去氨洗液，分取正丁醇液，蒸乾， 殘渣加乙醇lml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B) 試驗，吸取上述兩種溶液2iil，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上， 以三氯甲垸-甲醇-水(35 : 8 : 1.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上， 顯相同顏色的斑點；置紫外光燈G65nm)下檢視，顯相同顏色的螢光斑點。(6)測定本品中芍藥苷的含量 照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為流 動相；檢測波長為230nm。理論板數按芍藥苷計算應不低於2000。對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇製成每lml含0. lmg的溶液， 即得。供試品溶液的製備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取適量，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀 乙醇補足減失的重量，搖勻，離心30分鐘，取上清液，濾過，取續濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20ul，注入液相色譜儀，測定即得。 實施例3調經祛斑片質量控制方法(1)薄層鑑別女貞子取本品5片，除去薄膜衣，研細，加乙醇10ml，加熱回流10分 鍾，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材0，2g，同法製成對 照藥材溶液。再取齊墩果酸對照品，加乙醇製成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照 薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各lOlU，分別點於 同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15: 10:0.2)為展開 劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，IOO'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中， 在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(2) 薄層鑑別枸杞子取本品5片，除去薄膜衣，研細，加水50ml，加熱煮沸10分鐘， 放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯10ml振搖提取，乙酸乙酯液濃縮至lml，作為供試品溶液。另 取枸杞子對照藥材0.5，同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄 VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各10 ul，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G 薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15: 10:0.2)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm) 下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。(3) 薄層鑑別當歸取本品5片，除去薄膜衣，研細，加乙醚20ml，超聲處理10分鐘， 濾過，濾液揮幹，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當歸對照藥材0.5g，同法 製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶 液各10w，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以石油醚(60 90 °C)-乙酸乙酯(17:2)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。(4) 薄層鑑別白芍取本品5片，除去薄膜衣，研細，加甲醇20ml，超聲處理10分鐘， 濾過，濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和的水10ml分次溶解，置分液漏鬥中，用水飽和的正丁醇 10ml振搖提取，分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥 苷對照品，加乙醇製成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005 年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液lOul,分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠g薄層板上，以三氯甲垸-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(35:7:8: 0.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，IOO'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜 中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(5) 薄層鑑別柴胡取本品10片，除去薄膜衣，研細，加甲醇20ml，超聲處理10分鐘， 濾過，濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和的水10ml分次溶解，置分液漏鬥中，用水飽和的正丁醇 10ml振搖提取，分取正丁醇液，用氨試液10ml洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇飽和的水10ml 洗滌，棄去水洗液，分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取 柴胡對照藥材0.2g，加甲醇10ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水飽和的正 丁醇10ml使溶解，用氨試液10ml洗滌，棄去氨洗液，分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml 使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上 述兩種溶液10ul，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以三氯甲烷 -甲醇-水(25: 12:0.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫 酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏 色的斑點；置紫外光燈G65mn)下檢視，顯相同顏色的螢光斑點。(6)測定本品中芍藥苷的含量 照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。色譜條件與系統適用性試驗用十八垸基矽院鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為流 動相；檢測波長為230nm。理論板數按芍藥苷計算應不低於2000。對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇製成每lml含0. lmg的溶液， 即得。供試品溶液的製備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取適量，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀 乙醇補足減失的重量，搖勻，離心5分鐘，取上清液，濾過，取續濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5yl，注入液相色譜儀，測定，即得。
權利要求
1.一種調經祛斑片的質量控制方法，其特徵在於，該方法包括以下全部或部分內容薄層鑑別女貞子；薄層鑑別枸杞子；薄層鑑別當歸；薄層鑑別白芍；薄層鑑別柴胡；測定本品中芍藥苷的含量。
2. 如權利要求1所述的質量控制方法，其特徵在於，包括以下步驟中的一個或多個(l)薄層鑑別女貞子取本品適量，除去薄膜衣，研細，加乙醇加熱回流，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材適量，同法製成對照藥材溶液。再 取齊墩果酸對照品，加乙醇製成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法C中國 藥典相應附錄)試驗，吸取上述三種溶液，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G 薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸適當比例為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇 溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上， 顯相同顏色的斑點。(2) 薄層鑑別枸杞子取本品適量，除去薄膜衣，研細，加水加熱煮沸，放冷，濾過， 濾液用乙酸乙酯振搖提取，乙酸乙酯液濃縮至lml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材適 量，同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取上述兩種溶液， 分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸適當比 例為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材 色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。(3) 薄層鑑別當歸取本品適量，除去薄膜衣，研細，加乙醚超聲處理，濾過，濾液揮 幹，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當歸對照藥材適量，同法製成對照藥材 溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取上述兩種溶液，分別點於同一以羧甲基纖 維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以石油醚(60 9(TC)-乙酸乙酯(17:2)為展開劑，展 開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位 置上，顯相同顏色的螢光斑點。(4) 薄層鑑別白芍取本品適量，除去薄膜衣，研細，加甲醇超聲處理，濾過，濾液蒸乾， 殘渣加正丁醇飽和的水溶解，置分液漏鬥中，用水飽和的正丁醇振搖提取，分取正丁醇液， 蒸千，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇製成每lml含 2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取供試品溶液及對 照品溶液，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙 酯-甲醇-甲酸適當比例為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點 顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(5) 薄層鑑別柴胡取本品適量，除去薄膜衣，研細，加甲醇適量，超聲處理，濾過，濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和的水溶解，置分液漏鬥中，用水飽和的正丁醇振搖提取，分取 正丁醇液，用氨試液適量洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇飽和的水適量洗滌，棄去水洗液， 分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取柴胡對照藥材適量， 加甲醇超聲處理，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水飽和的正丁醇使溶解，用氨試液洗滌，棄去氨 洗液，分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中 國藥典相應附錄)試驗，吸取上述兩種溶液，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠 G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水適當比例為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2%對二甲氨 基苯甲醛的40%硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的 位置上，顯相同顏色的斑點；置紫外光燈(365nm)下檢視，顯相同顏色的螢光斑點。(6)測定本品中芍藥苷的含量.-照高效液相色譜法(中國藥典相應附錄)測定。色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為流 動相；檢測波長為230nm。理論板數按芍藥苷計算應不低於2000。對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇製成每lml含0. lmg的溶液， 即得。供試品溶液的製備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取適量，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀 乙醇補足減失的重量，搖勻，離心，取上清液，濾過，取續濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。
3.如權利要求1所述的質量控制方法，其特徵在於，包括以下步驟中的一個或多個(1)薄層鑑別女貞子取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加乙醇10 50ml，加熱回流10 60分鐘，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材0.2 lg，同法製成對照藥材溶液。再取齊墩果酸對照品，加乙醇製成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取上述三種溶液各2 10nl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 25:5 10:0,2 0.8)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，10(TC 12(TC加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(2)薄層鑑別枸杞子取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加水50 200ml,加熱煮 沸10 60分鐘，放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯振搖提取1 3次，每次10 50ml，合併乙酸 乙酯液，濃縮至lml,作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材0.5 2g,同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取上述兩種溶液各2 10yl,分別點於同一 以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 25:5 10:0.2 0.8) 為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色 譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。(3) 薄層鑑別當歸取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加乙醚20 100ml，超聲處 理10 60分鐘，濾過，濾液揮幹，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當歸對照 藥材0.5 2g，同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取上述兩 種溶液各2 10ul，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)-乙酸乙酯(17:2)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢 視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。(4) 薄層鑑別白芍取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加甲醇20 100ml，超聲處理 10~60分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和的水10 50ml分次溶解，置分液漏鬥中， 用水飽和的正丁醇振搖提取1 3次，每次10 50ml，分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml 使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇製成每lml含2mg的溶液，作為對照 品溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液2 10ul，分 別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(35 45 : 3 7 : 8 12 : 0.1 0.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液， 100'C 120'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同 顏色的斑點。(5) 薄層鑑別柴胡取本品10 50片，除去薄膜衣，研細，加甲醇20 100ml，超聲處 理10 60分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加正丁醇飽和的水10 50ml分次溶解，置分液漏鬥 中，用水飽和的正丁醇振搖提取1 3次，每次10 50ml，分取正丁醇液，用氨試液10 100ml 洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇飽和的水10 100ml洗滌，棄去水洗液，分取正丁醇液，蒸 幹，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取柴胡對照藥材0.2 2g，加甲醇10 50ml， 超聲處理10 60分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水飽和的正丁醇10 50ml使溶解，用氨試 液10 50ml洗滌，棄去氨洗液，分取正丁醇液，蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為對照藥 材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應附錄)試驗，吸取上述兩種溶液2 10"1，分別點於同一 以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(25 35 : 8 12 : 0.5 1.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2°/。對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，加熱至斑點 顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；置紫外光 燈(365nm)下檢視，顯相同顏色的螢光斑點。(6)測定本品中芍藥苷的含量 照高效液相色譜法(中國藥典相應附錄)測定。色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為流 動相；檢測波長為230mn。理論板數按芍藥苷計算應不低於2000。對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇製成每lml含0. lmg的溶液， 即得。供試品溶液的製備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取適量，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀 乙醇補足減失的重量，搖勻，離心5 30分鐘，取上清液，濾過，取續濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5 20ul，注入液相色譜儀，測定， 即得。
全文摘要
本發明公開了一種中藥製劑調經祛斑片的質量控制方法，所述質量控制方法包括以下步驟採用薄層色譜法鑑別女貞子、枸杞子、當歸、白芍及柴胡，採用高效液相色譜法測定製劑中芍藥苷的含量。該質量控制方法確實可行，可保證產品質量和臨床療效。
文檔編號A61P15/00GK101574477SQ200910114069
公開日2009年11月11日 申請日期2009年5月18日 優先權日2009年5月18日
發明者偉 吳, 唐弟光, 梁山丹, 梁月釗, 莫少紅, 蒙華英, 阮碧芳, 陳曉軍 申請人:唐弟光