一種葵花籽蛋白的超聲提取方法與流程
2023-07-19 04:34:16 5
本發明涉及一種葵花籽蛋白的超聲提取方法，屬於生物技術天然物質提取技術領域。
背景技術：
葵花籽是菊科草本植物向日葵的種子。向日葵又名丈菊、向陽花、葵花。可供食用和油用。葵花籽富含不飽和脂肪酸、多種維生素和微量元素；葵花籽含豐富的脂肪油，其中有多量亞油酸，尚有磷脂，β谷固醇等甾醇；又含蛋白質、糖類和檸檬酸、酒石酸、綠原酸等有機酸及胡蘿蔔素等。
眾多研究報導了葵花籽中含有葵花原花青素、葵花籽油和葵花籽蛋白等多種生物活性物質及其提取分離方法，並有多家工廠進行了葵花原花青素和葵花籽油的批量生產。
但現有報導和應用的提取分離方法都是針對其中某一物質的，即都是以葵花籽為原料，從中提取或是原花青素、或是葵花籽油、或是蛋白質，造成了資源的浪費。
技術實現要素：
本發明的目的是提供一種葵花蛋白的超聲提取方法，解決現有從葵花籽中提取蛋白質時存在的資源浪費、提取率不高等不足。
本發明的技術方案是：一種葵花籽蛋白的提取方法，其工藝步驟為：
(1)提取原花青素：
將葵花籽原料進行處理和清洗，再將葵花籽置於溫度為45-50℃、濃度 為30％的乙醇水溶液浸提10-20小時，過濾得到葵花籽和原花青素提取物溶液，備用；將原花青素提取物溶液經蒸發濃縮、柱層析吸附分離及洗脫，收集洗脫後的原花青素提取物進行乾燥處理後獲得原花青素產品；
(2)提取葵花籽油：
將上述過濾得到的葵花籽經過破碎、軟化、炒坯、壓餅、壓榨工藝處理，得到葵花籽油和壓榨後的葵花籽殘渣，壓榨後的葵花籽殘渣備用，壓榨處理後得到的葵花籽油經過純化精煉處理後獲得葵花籽油產品；
(3)提取葵花籽蛋白：
A、將上述壓榨後的葵花籽殘渣置於pH值為7.8-8.3、溫度為40-42℃的鹼性溶液中浸提8-12小時，料液比為1:8；超聲處理4小時，超聲功率為5W，時間為20min；
B、完成上述浸提過程後，再將該鹼性提取液中加入鹽酸溶液並調節pH值為3.3-3.6，繼續在溫度為40-42℃條件下浸泡6-12小時，同樣浸泡期間每隔1小時充分攪拌一次，靜置沉澱後，棄除底層沉澱物，收集上層浸提液備用；
C、將上述浸提液加入氫氧化鈉溶液調節pH值為4.1-4.2，靜置6-12小時，析出沉澱，採用濾紙抽濾方式進行分離並收集沉澱後，再將該提取液加入氫氧化鈉溶液調節pH值為6.8-6.9，靜置6-12小時，析出沉澱，同樣採用濾紙抽濾方式進行分離並收集沉澱，將兩次收集的沉澱合併後，置於溫度為40-50℃的烘乾箱中乾燥後獲得葵花籽蛋白產品。
本發明的有益效果是：
(1)本發明建立了從同一批葵花籽原料中，先提取原花青素，再提取 葵花籽油，最後再提取蛋白質的工藝技術方法，即先用乙醇溶液浸提法從整粒葵花籽中分離提取葵花原花青素，再將該批葵花籽用壓榨法分離提取葵花籽油，最後將提取了原花青素和葵花籽油的葵花籽殘渣用酸鹼二次溶解沉澱法分離提取葵花籽蛋白。
(2)同目前的其他提取方法比較，本發明充分利用了葵花籽資源，同一批葵花籽原料可以同時獲得三種產品，葵花籽資源利用率高，且在其提取工藝中，前一物質的提取不僅不影響後一物質的提取，還有利於後一物質的提取，簡化了提取步驟，具有節約資源、工藝簡便、減少成本、提高效率、增加效益等諸多優點。
(3)本發明建立了用酸鹼二次溶解沉澱法進行葵花籽蛋白的提取，提取率可達到90％以上，提高了葵花籽蛋白的提取效率。
具體實施方式
實施例1：
一種葵花籽蛋白的提取方法，採用葵花籽為原料，其工藝步驟為：
(1)提取原花青素：
採用葵花渣加工處理器將葵花籽原料進行處理和清洗，再將葵花籽置於溫度為45℃、濃度為30％的乙醇水溶液浸提10小時，過濾得到葵花籽和原花青素提取物溶液，葵花籽備用；
將原花青素提取物溶液經蒸發濃縮、柱層析吸附分離及洗脫，收集洗脫後的原花青素提取物進行乾燥處理後獲得原花青素產品；
(2)提取葵花籽油：
將上述過濾得到的葵花籽經過破碎、軟化、炒坯、壓餅、壓榨工藝處 理，得到葵花籽油和壓榨後的葵花籽殘渣，壓榨後的葵花籽殘渣備用，壓榨處理後得到的葵花籽油經過純化精煉處理後獲得葵花籽油產品；
(3)提取葵花籽蛋白：
A、將上述壓榨後的葵花籽殘渣經105℃恆溫乾燥後，用凱氏定氮法測定蛋白質含量為11.8％，取乾燥後的葵花籽殘渣200g，將其置於pH值為7.8、溫度為40℃、溶液體積為2L的氫氧化鈉溶液中浸提12小時；超聲處理4小時，超聲功率為5W，時間為20min；
B、完成上述浸提過程後，再將該氫氧化鈉提取液中加入鹽酸溶液並調節pH值為3.3，繼續在溫度為40℃條件下浸泡10小時，同樣浸泡期間每隔1小時充分攪拌一次，靜置沉澱後，棄除底層沉澱物，收集上層浸提液備用；
C、將上述浸提液加入氫氧化鈉溶液調節pH值為4.1，靜置10小時，析出沉澱，採用濾紙抽濾方式進行分離並收集沉澱後，再將該提取液加入氫氧化鈉溶液調節pH值為6.8，靜置10小時，析出沉澱，同樣採用濾紙抽濾方式進行分離並收集沉澱，將兩次收集的沉澱合併後，置於溫度為45℃的烘乾箱中乾燥後獲得葵花籽蛋白產品。
實施例2：
一種葵花籽蛋白的提取方法，採用葵花籽為原料，其工藝步驟為：
(1)提取原花青素：
採用葵花渣加工處理器將葵花籽原料進行處理和清洗，再將葵花籽置於溫度為48℃、濃度為30％的乙醇水溶液浸提15小時，過濾得到葵花籽和原花青素提取物溶液，葵花籽備用；
將原花青素提取物溶液經蒸發濃縮、柱層析吸附分離及洗脫，收集洗脫後的原花青素提取物進行乾燥處理後獲得原花青素產品；
(2)提取葵花籽油：
將上述過濾得到的葵花籽經過破碎、軟化、炒坯、壓餅、壓榨工藝處理，得到葵花籽油和壓榨後的葵花籽殘渣，壓榨後的葵花籽殘渣備用，壓榨處理後得到的葵花籽油經過純化精煉處理後獲得葵花籽油產品；
(3)提取葵花籽蛋白：
A、將上述壓榨後的葵花籽殘渣經105℃恆溫乾燥後，取乾燥後的葵花籽殘渣500g，將其置於pH值為8.0、溫度為41℃、溶液體積為5L的氫氧化鈉溶液中浸提8小時；超聲處理4小時，超聲功率為5W，時間為20min；
B、完成上述浸提過程後，再將該氫氧化鈉提取液中加入鹽酸溶液並調節pH值為3.5，繼續在溫度為41℃條件下浸泡8小時，同樣浸泡期間每隔1小時充分攪拌一次，靜置沉澱後，棄除底層沉澱物，收集上層浸提液備用；
C、將上述浸提液加入氫氧化鈉溶液調節pH值為4.1，靜置10小時，析出沉澱，採用濾紙抽濾方式進行分離並收集沉澱後，再將該提取液加入氫氧化鈉溶液調節pH值為6.8，靜置10小時，析出沉澱，同樣採用濾紙抽濾方式進行分離並收集沉澱，將兩次收集的沉澱合併後，置於溫度為45℃的烘乾箱中乾燥後獲得葵花籽蛋白產品。
實施例3：
一種葵花籽蛋白的提取方法，採用葵花籽為原料，其工藝步驟為：
(1)提取原花青素：
採用葵花渣加工處理器將葵花籽原料進行處理和清洗，再將葵花籽置 於溫度為50℃、濃度為30％的乙醇水溶液浸提20小時，過濾得到葵花籽和原花青素提取物溶液，葵花籽備用；
將原花青素提取物溶液經蒸發濃縮、柱層析吸附分離及洗脫，收集洗脫後的原花青素提取物進行乾燥處理後獲得原花青素產品；
(2)提取葵花籽油：
將上述過濾得到的葵花籽經過破碎、軟化、炒坯、壓餅、壓榨工藝處理，得到葵花籽油和壓榨後的葵花籽殘渣，壓榨後的葵花籽殘渣備用，壓榨處理後得到的葵花籽油經過純化精煉處理後獲得葵花籽油產品；
(3)提取葵花籽蛋白：
A、將上述壓榨後的葵花籽殘渣經105℃恆溫乾燥後，取乾燥後的葵花籽殘渣1kg，將其置於pH值為8.3、溫度為42℃、溶液體積為10L的鹼性溶液中浸提10小時；超聲處理4小時，超聲功率為5W，時間為20min；
B、完成上述浸提過程後，再將該鹼性提取液中加入鹽酸溶液並調節pH值為3.6，繼續在溫度為42℃條件下浸泡12小時，同樣浸泡期間每隔1小時充分攪拌一次，靜置沉澱後，棄除底層沉澱物，收集上層浸提液備用；
C、將上述浸提液加入氫氧化鈉溶液調節pH值為4.2，靜置12小時，析出沉澱，採用濾紙抽濾方式進行分離並收集沉澱後，再將該提取液加入氫氧化鈉溶液調節pH值為6.9，靜置12小時，析出沉澱，同樣採用濾紙抽濾方式進行分離並收集沉澱，將兩次收集的沉澱合併後，置於溫度為45℃的烘乾箱中乾燥後獲得葵花籽蛋白產品。