葫蘆素固體脂質納米粒製劑及其製備方法

2023-07-24 05:25:46 2

專利名稱：葫蘆素固體脂質納米粒製劑及其製備方法
技術領域：
本發明涉及醫藥，特別是一種葫蘆素固體脂質納米粒製劑及其製備方法。
二背景技術：
葫蘆素類(cucurbitacins)成分是從植物中提取的一類四環三萜類化合物，基 本碳氫骨架為19-失碳-鄧-甲基-10a-羊毛甾烯-5，至今已發現40餘種，以葫蘆素 B(CucurbitacinB)、 E應用最廣，此外還有葫蘆素A、 D、 I等。該類成分具有抗 腫瘤、抗化學致癌、保肝、提高機體免疫力等多種生物活性，多數存在於葫蘆 科植物中，在十字花科、玄參科、秋海棠科、杜英科等高等植物及一些大型真 菌中也有發現(楊凱,鄭剛.葫蘆素BE的藥理作用研究進展.國際中醫中藥雜誌， 2006， 28 (1) : 27-29)。
目前從葫蘆科植物甜瓜(CucumismdoL.)瓜蒂中提取製得的葫蘆素原料藥 (葫盧素BE)已獲得我國藥品生產許可。甜瓜蒂是一種中藥，從古至今均為治 療黃疸病的有效藥物，又因其能催吐、祛痰而用於痰涎宿食證。20世紀60年代 隨著葫蘆素化學結構的確立，開始有人研究其抗腫瘤作用。70年代初從甜瓜蒂
中分離出葫蘆素B、 E等成分，並進行了抗腫瘤、抗肝炎等藥理研究。已報導的
藥理作用有細胞毒與抗癌作用；抗化學致癌作用；保肝、抗肝炎、抑制肝纖 維增生的作用；提高免疫功能；此外還有促進胃腸運動、增加毛細管通透性以 及避孕作用等。(吉宏.葫蘆素及其藥理學研究.國外醫學中醫中藥分冊，1996， 18(6): 13-14;劉穎菊，劉文清.葫蘆素的藥理與臨床應用.中草藥，1992， 23(11): 605-608.)
以葫盧素BE為原料製備的葫蘆素片是臨床上用於治療慢性遷延性肝炎和 原發性肝癌的製劑之一。在治療慢性肝炎方面，經上海、北京、重慶等地十三 家醫院的臨床研究表明，葫蘆素片的有效率為75.2%，顯效率為44.6%。該藥 能明顯改善慢性肝炎的常見症狀,可降低轉氨酶、降低膽紅質，停藥後不引起轉 氨酶反跳，對蛋白倒置和高球蛋白血症也有明顯的糾正作用，還能提高患者的 非特異性細胞免疫能力，無明顯毒副作用(湖南醫藥工業研究所.甜瓜蒂提取物 洽療慢性肝炎例臨床結果,中草藥，1982， 12(10)26-28.)在治療原發性肝癌方面，對169例原發性肝癌患者的治療表明，該藥在改善患者臨床症狀、緩解肝痛、縮
小瘤體、延長生存期、恢復體力等方面均優於對照化療藥5-氟尿嘧啶。經治療 後半年以上生存率為66.6%， 一年生存率為29%， 二年生存率為29%，三年以上 生存率為4.3%,總有效率為69%，其中顯效率為29。/。。適於各型期肝癌，但II期 療效優於m期，單純型、硬化型優於炎症型(崔興義.治療肝癌新藥一葫蘆素技術 鑑定會在長沙召開.中草藥，1985，15(4):34)。
葫蘆素製劑在治療劑量內對多種癌細胞顯示出較強的殺傷作用，對骨髓造 血細胞和肝腎細胞無明顯影響，還具有保肝、增強機體免疫力等作用。目前， 不斷有其他藥理作用被發現，其臨床應用潛力及經濟價值較高。葫蘆素已上市 劑型主要為片劑。儘管片劑具有使用方便等優點，但是，由於葫蘆素為強脂溶 性成分，在體液中溶出速度較慢，且波動較大，很難保證治療效果的穩定，另 外，普通片劑無法滿足吞咽困難患者或需要快速起效患者的要求。因此，探索 葫蘆素新製劑的研究正在開展，主要包括葫蘆素聚乳酸納米粒、聚乳酸羥基乙 酸納米球、滴丸、脂質體和注射用葫蘆素B自微乳化藥物傳遞系統等，其中以 聚乳酸為載體製備的製劑研究較多見於期刊，如張繼芬等研究了葫盧素-聚乳酸 納米粒的製備及載藥過程，結果發現以沉澱法未能得到高包封率的藥物製劑， 約70 %的葫蘆素逐漸形成新晶核,以微晶形式存在於介質中，最終得到既有納米 粒又有微晶的混懸體系(張繼芬,侯世祥,劉惠蓮,等.葫蘆素-聚乳酸納米粒的製備 及載藥過程研究.中國中藥雜誌,2005， 30 (6) : 436-439.)。李超英等的研究表 明，葫蘆素聚乳酸毫微粒膠體溶液的物理化學穩定性差，不宜製成液體型注射劑， 而其凍幹針劑室溫放置3個月穩定性良好，因此在適宜的處方及工藝條件下制 備其凍幹針劑有一定的可行性(李超英，侯世祥，陽長明，等.葫蘆素毫微粒凍幹 針劑的研究.中國中藥雜誌，2001， 26 (5) : 315-317.)。楊凱等製備了葫蘆素 BE聚乳酸納米微粒用於口腔癌頸淋巴結轉移患者，結果表明平均粒徑為85nm 的製劑對其轉移灶具有良好的靶向性，可達到提高轉移灶內藥物濃度和延長藥 物持續時間的目的，同時降低了藥物的毒副作用(楊凱,溫玉明,李龍江,等.頸淋 巴靶向葫盧素BE聚乳酸納米微粒凍幹製劑的研製.華西口腔醫學雜誌,2001,19 (6) :345-349)。王丹蕾等採用溶劑揮發法製備葫蘆素B聚乳酸羥基乙酸納米球，納米球混懸液在冰箱中4 "C保存1個月能基本保持穩定,長期放置則不穩定;納 米球凍幹品室溫放置3個月，其pH值、粒度分布、包封率和載藥量均無明顯 變化(王丹蕾，陳大為，郭濤等，注射用葫蘆素B聚乳酸羥基乙酸納米球的製備. 瀋陽藥科大學學報，2006， 23 (6) 335-339)。李墨等研究了注射用葫蘆素B 自微乳化藥物傳遞系統的處方優化(李墨，趙秀麗，陳大為，等.注射用葫蘆素 B自微乳化藥物傳遞系統的處方優化.瀋陽藥科大學學報，2008， 25(1): 15-19)。
目前已申請並公開的葫蘆素專利有28條，其中製劑專利，包括"葫蘆素環 糊精包合物及其製劑，申請號02153647.3"，"納米葫蘆素製劑藥物及其製備方 法，申請號01103658.3 "，"葫蘆素脂質體組方及其製劑，申請號02144633.4"， " 一種可過濾除菌的葫蘆素乳劑及製備方法，申請號200510046583.2"，"含有 蛋白的葫蘆素納米製劑及製備方法和用途，申請號200610091449.9"，"穩定型 葫蘆素液體組方及其製劑，申請號200710011513.2"，"葫蘆素液體型組方及其制 劑，申請號200410021536.8"等。
目前尚無葫蘆素固體脂質納米粒(SLN)的專利申請，SLN是一種新型的微粒 給藥載體，由於採用與機體生理相容的固體脂質為基本骨架材料，因此對脂溶 性高的藥物包封率高，非常適合作為葫戶素的載體。SLN粒子在室溫下通常呈 固態，既具備聚合物納米粒物理穩定性高、藥物洩漏慢的優勢，又兼具了脂質 體、乳劑的毒性低、能大規模生產的優點，是一種極有發展前景的新型給藥系 統。迄今為止，只有一篇有關該製劑的文獻報導(付彬彬，注射用葫蘆素固體 脂質納米粒的研究。瀋陽瀋陽藥科大學碩士論文，2004)。該論文中記載的具 體處方及製備方法為稱取300mg的卵磷脂和200mg泊洛沙姆188,加熱使溶 於20mL的注射用水中，構成水相。稱取200mg的單硬脂酸甘油酯，加熱到(75 士2)。C使熔，將10mg的葫蘆素分散到攪拌的熔融單硬脂酸甘油酯中，構成油相。 將水相加熱到相同的溫度，注入攪拌中的油相，恆溫攪拌，製成初乳。趁熱將 初乳進行超聲再分散(超聲5s，間歇5s，超聲時間6min，超聲功率設定為400w)， 自然放冷，即得葫蘆素SLN的混懸液。最後需通過0.22微米的微孔濾膜，以達 到除菌的目的。但是，該製劑存在明顯不足，主要在於所制葫盧素固體脂質納 米粒液體製劑的穩定性較差，在室溫下儲存僅2個月即出現粒徑明顯增大、外觀混濁度加大等現象，質量差，沒有推廣應用價值。該製劑以乳化-超聲方法來 製備，但是沒有篩選到合適的輔料及處方，而且表面活性劑的用量較大，是脂 質的2.5倍，另外在製備工藝上的研究不夠深入，如表面活性劑的加入方法等對 其穩定性也有影響。因此，其改進和創新勢在必行。
發明內容
針對上述情況，為克服現有技術缺陷，本發明之目的就是提供一種葫盧素 固體脂質納米粒製劑及其製備方法，可有效解決穩定性差、質量差的問題，其 解決的技術方案是，該製劑由葫蘆素、脂質材料和表面活性劑以重量比計為
0.001-30 : 0.01-99 : 0.01-50 (即:葫盧素:脂質材料:表面活性劑=0.001-30 : 0.01-99 : 0.01-50)，葫蘆素、脂質材料與表面活性劑之和，為納米粒製劑原料總 重量的0.1-40%;其基本製備方法是將脂質材料、表面活性劑和葫戸素避光加熱 熔融並充分混勻，加水相分散至納米級，保持熔融狀態下過濾並冷卻，其基本 步驟為
1) 含藥相的製備在高於脂質熔點l(TC以上的溫度，將脂質材料和表面活 性劑加熱熔融，加入葫蘆素快速混合攪拌均勻，備用，或在高於脂質熔點l(TC 以上的溫度，先將脂質材料加熱熔融，再將表面活性劑與葫蘆素混合後快速與 熔融的脂質材料攪拌混合均勻，備用(有時將表面活性劑加入水相而不加入脂 相，其加入相及加入量由具體處方決定)；
2) 水相的製備將處方中含藥相以外的其它成分加入水或極性較大的溶劑 中混勻成水相；
3) 粒子分散在高於脂質熔點溫度條件下，將水相加入到含藥相中，用磁 力攪拌器、攪拌分散機或玻璃棒等初步混勻，再採用超聲波細胞粉碎機、微射 流、高壓乳勻機、剪切式高速分散機、膠體磨等中的一種或者幾種進行操作將 製劑進一步分散至納米級粒子，或採用超聲法，將含藥相與水相混合後直接分 散至納米級。
4) 過濾分散好的製劑在保溫條件下擠壓通過孔徑為0.1-0.8 Pm的微孔濾膜。
5) 儲存密封后室溫(18-25°C，以下同)條件下避光放置。其中所說的葫蘆素固體脂質納米粒製劑包括以所制的葫盧素固體脂質納米 粒為原料進一步製備具有治療作用的注射劑、合劑、軟膠囊、軟膏、凝膠劑、 栓劑、噴霧劑、滴鼻劑、滴丸等劑型藥物。
葫蘆素、脂質材料與表面活性劑之重量比最好為0.01-10:50-80:20-50，
葫蘆素、脂質材料與表面活性劑之和，為納米粒製劑原料總重量的0.1-10%;
所說的葫蘆素包括有葫蘆素有效部位提取物、葫盧素單體及其混合物、葫
蘆素BE、葫蘆素B、葫戸素E等葫盧素類化合物；
所說的脂質材料含有單、二或三脂肪酸甘油酯、脂肪酸、脂肪醇、蠟類、 膽固醇等脂質中的一種或兩種以上的混合物，如硬脂酸、十八醇、三硬脂酸甘
油酯、棕櫚酸、肉豆蔻酸、單硬脂酸甘油酯、硬脂酸棕櫚酸甘油酯(PrecirolATO 5)、山嵛酸甘油酯(comprito1 888 ATO)、十六酸等，其中，以單、二或三脂肪 酸甘油酯的脂質混合物為脂質最好，其最佳混合重量比例為單硬脂酸甘油酯 硬脂酸棕櫚酸甘油酯/山嵛酸甘油酯=2 4 : 6 8，最好是2 : 8 4 : 6。
所說的表面活性劑包括有可藥用的各種表面活性劑及其混合物，如泊洛沙 姆、卵磷脂、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油(ELP)、苄澤、吐溫、司盤等中的一種 或幾種的混合物，其中以泊洛沙姆類較好，如泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、泊 洛沙姆124、泊洛沙姆237和泊洛沙姆338等。
本發明組方簡單，配伍科學，用量合理，質量好，使用方便，穩定性好， 特別是作為新型的微粒給藥載體，由於採用與機體生理相容的固體脂質為基本 骨架材料，因此對脂溶性高的藥物包封率高，作為葫蘆素的載體根本不用考慮 其他載體如脂質體、乳劑、聚合物納米粒等對其的包封率可能低的問題。SLN 粒子在室溫下通常呈固態，既具備聚合物納米粒物理穩定性高、藥物洩漏慢的 優勢，又兼具了脂質體、乳劑的毒性低、能大規模生產的問題，是葫聲素固體 脂質納米粒製劑上的創新，經濟和社會效益巨大。具體實施例方式
以下結合實施例對本發明的具體實施方式
作詳細說明。
其中實施例中涉及的原料葫蘆素BE (天津藥物研究院藥業有限公司)；單
硬脂酸甘油酯(長沙化學試劑廠，化學純)；硬脂酸棕櫚酸甘油酯(PrecirolATO5， GATTEFOSSE，法國)；十六酸(天津市光復精細化學研究所)；硬脂酸(天津 市凱通化學試劑有限公司)；泊洛沙姆188 (LutrolF68， BASF,德國)；泊洛沙 姆407(Lutro1 F127， BASF，德國)；山嵛酸甘油酯(Compritol 888 ATO，GATTEFOSSE 法國)；聚氧乙烯醚(35)蓖麻油(Cremophor ELP，德國BASF);大豆卵磷脂 (SPC，上海太偉藥業有限公司)，吐溫80 (北京市海澱會友精細化工廠)。
機械JY92-2D超聲波細胞粉碎機(寧波新芝生物科技股份有限公司)；超 級恆溫器(上海試驗儀器廠)；T18型高速分散機(ULTRA TURRAX IKA ); M-110L 型高壓微射流納米分散儀(美國MFIC公司)Nano-ZS90雷射粒度分析儀(英國馬 爾文公司)；Z323K高速冷凍離心機(德國Hermle公司)。
實施例1
本發明在實施中是由葫蘆素BE 0.003g、硬脂酸棕櫚酸甘油酯0.35g、單 硬脂酸甘油脂0.15g、泊洛沙姆188 0.25g、超純水10ml製成，其中，精密稱取 各成分，將硬脂酸棕櫚酸甘油酯、單硬脂酸甘油酯及泊洛沙姆188在9(TC溫度 下加熱熔融後，加入葫蘆素BE，用玻璃棒快速攪拌混勻，置冰箱冷凍層使之凝 固，再將凝固的混合物轉移至具保溫套管的超聲管中，超聲溫度為75°C,加10ml 超純水，用超聲波細胞粉碎機在超聲功率400W的條件超聲18次，每次超聲10S (10秒)、間隔10S (即每次之間停10秒，再進行下一次超聲)，之後保溫(75 °C)吸取超聲之後的分散液，趁熱過0.22pm微孔濾膜，濾液在室溫下冷卻並充 氮氣熔封，即得葫蘆素固體脂質納米粒製劑，室溫(18-25°C，以下同)條件下 避光放置。
實施例2
本發明還可由葫蘆素B0.008g、硬脂酸棕櫚酸甘油酯0.5g、單硬脂酸甘油 酯0.2g、泊洛沙姆407 0.3g、卵磷脂O.lg、乙醇2mL、超純水8ml製成，其
中，精密稱取各成分，將硬脂酸棕櫚酸甘油酯、單硬脂酸甘油酯及泊洛沙姆407 在9(TC溫度下加熱熔融後，加入葫蘆素B，用玻璃棒快速攪拌混勻，置冰箱冷 凍層使之凝固，再將凝固的混合物轉移至具保溫套管的超聲管中，超聲溫度為 7CTC，加2mL乙醇和8ml超純水，用超聲波細胞粉碎機在超聲功率400W的條 件超聲36次，每次超聲5S、間隔5S，之後保溫(70°C)吸取超聲之後的分散液，趁熱過0.22pm微孔濾膜，濾液在室溫下冷卻並充氮氣熔封，即得葫蘆素固 體脂質納米粒製劑，室溫條件下避光放置。 實施例3
本發明也可由葫蘆素E0.05g、山嵛酸甘油酯0.3g、單硬脂酸甘油酯0.2g、 泊洛沙姆188 0.2g、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油0.3g、超純水20ml製成，其中， 精密稱取各成分，將山嵛酸甘油酯、單硬脂酸甘油酯及泊洛沙姆188在95。C溫 度下加熱熔融後，加入葫蘆素E，用玻璃棒快速攪拌混勻，置冰箱冷凍層使之凝 固，再將凝固的混合物轉移至具保溫套管的超聲管中，超聲溫度為8(TC，加20ml 超純水，用超聲波細胞粉碎機在超聲功率600W的條件超聲18次，每次超聲IOS、 間隔10S，之後保溫(8(TC)吸取超聲之後的分散液，過0.22pm微孔濾膜，濾 液在室溫下冷卻並充氮氣熔封，即得葫蘆素固體脂質納米粒製劑，室溫條件下 避光放置。
實施例4
本發明由葫蘆素BE 0.005g、山嵛酸甘油酯0. 35 g、單硬脂酸甘油酯0.15g、 泊洛沙姆188 0.25g和超純水10ml製成，其中，精密稱取各成分，將山嵛酸甘 油酯、單硬脂酸甘油酯及泊洛沙姆188在95'C溫度下加熱熔融後，加入葫蘆素 BE，用玻璃棒快速攪拌混勻，置冰箱冷凍層使之凝固，再將凝固的混合物轉移 至具保溫套管的超聲管中，超聲溫度為8(TC，加10ml超純水，用超聲波細胞粉 碎機在超聲功率500W的條件超聲16次，每次超聲5S、間隔5S，之後保溫吸取 超聲之後的分散液，過0.22[im微孔濾膜，濾液在室溫下冷卻並充氮氣熔封，即 得葫蘆素固體脂質納米粒製劑，室溫條件下避光放置。
實施例5
本發明也可由葫蘆素BE 0.008g、山嵛酸甘油酯1.00g、單硬脂酸甘油 酯0.60g、泊洛沙姆188 1.40 g、超純水40ml製成，其中，將山嵛酸甘油酯、 單硬脂酸甘油酯及泊洛沙姆188避光加熱熔融後加入葫蘆素BE，攪拌使之充分 混勻，在8(TC保溫條件下進行以下操作混合物中首先加10ml同溫超純水，磁 力攪拌10min後補充30ml同溫超純水，用高速分散機以10000r/min的轉速分散 10min，將初分散液趁熱在18k的設定壓力下用微射流反覆勻化10次，勻化液過0.45)im微孔濾膜，過濾後在室溫下冷卻並充氮氣熔封，即得。 實施例6
本發明是由葫蘆素BE 0.012g、山嵛酸甘油酯1.00 g、泊洛沙姆188 0.70 g、超純水40ml製成，其中，精密稱取各成分，將山嵛酸甘油酯及泊洛沙姆188 在95"C溫度下加熱熔融後，加入葫蘆素BE，攪拌使之充分混勻，在8(TC保溫 條件下進行以下操作混合物中首先加10ml同溫超純水，磁力攪拌10min後補 充30ml同溫超純水，用高速分散機以9500r/min的轉速分散10min，將初分散液 趁熱在18k的設定壓力下用微射流反覆勻化10次，勻化液過0. 45pm微孔濾膜， 過濾後在室溫下冷卻並充氮氣熔封，即得葫蘆素固體脂質納米粒製劑，室溫條 件下避光放置。
實施例7
本發明由葫蘆素BE 0.004g、山嵛酸甘油酯0. 50 g、泊洛沙姆188 0.35 g、 超純水10ml製成，其中，精密稱取各成分，將山嵛酸甘油酯、泊洛沙姆188在 95'C溫度下避光加熱熔融後，加入葫蘆素BE，攪拌使之充分混勻，8(TC保溫條 件下進行以下操作混合物中首先加6ml同溫超純水，在磁力攪拌8min後補充 4ml同溫熱水，用高速分散機以21500r/min的轉速分散10min，之後保溫(80 'C)吸取分散液，過0.45pm微孔濾膜，濾液在室溫下冷卻並充氮氣熔封，即得 葫蘆素固體脂質納米粒製劑，室溫條件下避光放置。
實施例8
本發明由葫蘆素BE0.004g、十六酸0.05g、硬脂酸0.05g、單硬脂酸甘油 酯0.40g、泊洛沙姆407 0.35g、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油O.lg、超純水10ml制
成，其中，精密稱取各成分，將十六酸、硬脂酸、單硬脂酸甘油酯和泊洛沙姆 407、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油在在95。C溫度下避光加熱熔融後，加入葫蘆素 BE，用玻璃棒快速攪拌混勻，置冰箱冷凍層使之凝固，再將凝固的混合物轉移 至具保溫套管的超聲管中，超聲溫度為8(TC，加10ml超純水，用超聲波細胞粉 碎機在超聲功率400W的條件超聲18次，每次超聲IOS、間隔IOS，之後保溫(80 °C)吸取超聲之後的分散液，過0.22nm微孔濾膜，濾液在室溫下冷卻並充氮氣 熔封，即得葫蘆素固體脂質納米粒製劑，室溫條件下避光放置。實施例9
本發明由葫蘆BE0.004g、三硬脂酸甘油酯0.005g、硬脂酸棕櫚酸甘油酯 0.25g、單硬脂酸甘油酯0.2(^、泊洛沙姆188 0.20g、吐溫80 0.05g、超純水 10ml製成，其中，精密稱取各成分，將三硬脂酸甘油酯、硬脂酸棕櫚酸甘油酯、 單硬脂酸甘油酯和泊洛沙姆188在卯'C溫度下避光加熱熔融後，加入葫蘆素BE， 用玻璃棒快速攪拌混勻，置冰箱冷凍層使之凝固，再將凝固的混合物轉移至具 保溫套管的超聲管中，超聲溫度為75'C，加溶解處方量吐溫80的10ml超純水， 用超聲波細胞粉碎機在超聲功率500W的條件超聲36次，每次超聲5S、間隔5S， 之後保溫(75°C)吸取超聲之後的分散液，過0.22pm微孔濾膜，濾液在室溫下 冷卻並充氮氣熔封，即得葫蘆素固體脂質納米粒製劑，室溫條件下避光放置。
本發明產品經測定和試驗，其包封率高，質量穩定，具體情況如下 製劑表徵方法及結果 (一)表徵方法
l含量測定採用HPLC法測定製劑的含量
取40 u 1待測SLN樣品置於5ml量瓶中，加入0. 5ml甲醇和1. Oml 二氯甲 垸溶解，用甲醇定容，過0.45um的有機微孔濾膜，取濾液20 ul進樣測定， 記錄記錄色譜圖及峰面積。將所得值代入標準曲線，計算葫蘆素SLN中的葫戶 素B含量。
色譜柱Hypersil BDS C18(4. 6X250mm， 5Mm); 流動相乙腈-O. 06mol 1_1 KH2P04(45 : 55);流速l.Oml/min;紫外檢測波長233nm;柱溫室溫；進樣
量20Ug/ml;
2粒徑及zeta電位
精密量取400pL的SLN制剤，用超純水稀釋50倍，通過納米電位粒度測定 儀進行平均粒徑及zeta電位的測定，樣品池選用DTS1060-Disposable Zeta Cell,溫度設為25r，得到3個Z均粒徑值及3個zeta電位值。
3.包封率
採用離心-超濾法測定葫蘆素固體脂質納米粒的包封率。先離心移取游離藥 物沉澱，再超濾得到游離藥物溶液的方式，採用HPLC法測定，兩者藥量之和即為游離藥物總量。
包封率(％)=(游離藥物沉澱量+游離藥物溶液量)/藥物總量，具體見表2。 (二)表徵結果
表l各實施例粒徑的初步穩定性考査結果(n=3)
保存時 間參數S固SLN2SLN3SLN4SLN5SLN6SLN7SLN8SLN9
粒徑118.4151.2121.063.3128.2216.0164.828.297.3
製備 初時±1.5±1.6±0.9±2. 1±3.2±4. 5±1. 5±2. 5±1. 1
PDI0. 23 +0. 24 +0.23 +0. 45 +0.45 +0. 46 +0. 39 +0. 55 +0. 28 +
0. 030. 020. 030. 050.060. 030. 040. 070. 03
粒徑117.9 ±1.7153.1129.2 ±1. 164.5 ±2. 3129.1 ±3.5220.3 ±3.5162.5 ±2.429.3 ±1.897. 9 ±1.2
4個月PDI0.23 +0.25 +0.24 +0.47 +0.47 +0.45 +0.40 +0.53 ±0,28 ±
0. 050. 020. 050.040. 080. 050. 070. 060. 05
注PDI:粒徑分布的多分散係數
由上表可知，各製劑室溫避光條件下保存4個月，其粒徑及分布與製備初時 相比均未發生顯著變化，說明製劑具有較好的物理穩定性，在考察期間沒有粒 子聚集現象發生。
表2綜合穩定性及包封率試驗結果(以實施例l為例，n二3)
保存時間含量％粒徑(Z均)PDI (多分散 係數)zeta電位包封率％
製備初時100118.4±1.50. 23±0. 03-20. 37±1. 1797±2. 5
l個月101±0. 5119.5±2. 00. 24±0. 05-18. 88±2. 3598±3. 7
3個月98±2.6116. 1±2.60. 25±0. 03-19. 65±2,2997±4. 0
6個月99%±1. 6118. 7±1.80.23±0.06-18.65±3. 1296±2.8
由上表可知，製劑在6個月的儲藏期間，各項指標均無顯著變化，這說明 該製劑不僅具有較好的物理穩定性，還具有較好的化學穩定性。
權利要求
1、一種葫蘆素固體脂質納米粒製劑，其特徵在於，葫蘆素、脂質材料和表面活性劑以重量比計為0.001-30∶0.01-99∶0.01-50，葫蘆素、脂質材料與表面活性劑之和，為納米粒製劑原料總重量的0.1-40％。
2、 根據權利要求1所述的葫蘆素固體脂質納米粒製劑，其特徵在於，所說 的葫蘆素、脂質材料與表面活性劑之重量比為0.01-10:50-80:20-50。
3、 根據權利要求1或2所述的葫蘆素固體脂質納米粒製劑，其特徵在於， 所說的葫蘆素、脂質材料與表面活性劑之和，為納米粒製劑原料總重量的 0.1-10%。
4、 根據權利要求1或2或3所述的葫蘆素固體脂質納米粒製劑，其特徵在 於，所說的葫蘆素為葫蘆素有效部位提取物、葫蘆素單體、葫盧素BE、葫蘆素 B、葫蘆素E的任何一種，或其兩種以上的混合物。
5、 根據權利要求1或2或3所述的葫戸素固體脂質納米粒製劑，其特徵在 於，所說的脂質材料為單、二或三脂肪酸甘油酯、脂肪酸、脂肪醇、蠟類、膽 固醇中的任何一種或兩種以上的混合物。
6、 根據權利要求1或5所述的葫蘆素固體脂質納米粒製劑，其特徵在於， 所說的脂質材料為硬脂酸、十八醇、三硬脂酸甘油酯、棕櫚酸、肉豆蔻酸、單 硬脂酸甘油酯、硬脂酸棕櫚酸甘油酯、山嵛酸甘油酯、十六酸的任何一種，或 其兩種以上的混合物。
7、 根據權利要求5所述的葫蘆素固體脂質納米粒製劑，其特徵在於，所說 的單硬脂酸甘油酯硬脂酸棕櫚酸甘油酯/山嵛酸甘油酯的重量比為2 4 : 6 8。
8、 根據權利要求1或2或3所述的葫蘆素固體脂質納米粒製劑，其特徵在 於，所說的表面活性劑為泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、泊洛沙姆124、泊洛沙 姆237、泊洛沙姆338、卵磷脂、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油、苄澤、吐溫、司盤 中的一種或兩種以上的混合物。
9、 權利要求1所述的葫蘆素固體脂質納米粒製劑的製備方法，其特徵在於， 將脂質材料、表面活性劑和葫蘆素避光加熱熔融並充分混勻，加水相分散至納 米級，保持熔融狀態下過濾並冷卻，其步驟是1) 含藥相的製備在高於脂質熔點1(TC以上的溫度，將脂質材料和表面活 性劑加熱熔融，加入葫蘆素快速混合攪拌均勻，備用，或在高於脂質熔點l(TC 以上的溫度，先將脂質材料加熱熔融，再將表面活性劑與葫蘆素混合後快速與 熔融的脂質材料攪拌混合均勻，備用；2) 水相的製備將處方中含藥相以外的其它成分加入水中混勻；3) 粒子分散在高於脂質熔點溫度條件下，將水相加入到含藥相中，用磁 力攪拌器或攪拌分散機等初步混勻，再採用超聲波細胞粉碎機、微射流、高壓 乳勻機、剪切式高速分散機、膠體磨等中的一種或者幾種進行操作將製劑進一 步分散至納米級粒子，或採用超聲法，將含藥相與水相混合後直接分散至納米 級。4) 過濾分散好的製劑在保溫條件下擠壓通過孔徑為0.1-0.8 um的微孔濾膜；5) 儲存密封后室溫18-25"C條件下避光放置。
10、權利要求1所述的葫蘆素固體脂質納米粒製劑在製備治療疾病的注射 劑、合劑、軟膠囊、軟膏、凝膠劑、栓劑、噴霧劑、滴鼻劑、滴丸劑型藥物中 應用。
全文摘要
本發明之目的就是提供一種葫蘆素固體脂質納米粒製劑及其製備方法，可有效解決穩定性差、質量差的問題，其解決的技術方案是，該製劑由葫蘆素、脂質材料和表面活性劑以重量比計為0.001-30∶0.01-99∶0.01-50，葫蘆素、脂質材料與表面活性劑之和，為納米粒製劑原料總重量的0.1-40％；其製備方法是將脂質材料、表面活性劑和葫蘆素避光加熱熔融並充分混勻，加水相分散至納米級，保持熔融狀態下過濾並冷卻，本發明組方簡單科學，配伍科學，用量合理，質量好，使用方便，穩定性好，既具備聚合物納米粒物理穩定性高、藥物洩漏慢的優勢，又兼具了脂質體、乳劑的毒性低、能大規模生產的問題，是葫蘆素固體脂質納米粒製劑上的創新，經濟和社會效益巨大。
文檔編號A61K9/10GK101612119SQ20091006552
公開日2009年12月30日 申請日期2009年7月24日 優先權日2009年7月24日
發明者徐炳欣, 王豔芝, 鄭甲信 申請人:鄭州大學