一種治療慢性腎功能衰竭的腎可舒膠囊及其製備工藝的製作方法

2023-07-31 08:39:41 2

專利名稱：一種治療慢性腎功能衰竭的腎可舒膠囊及其製備工藝的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種治療慢性腎功能衰竭的的腎可舒膠囊及其製備工藝。
慢性腎功能不全(簡稱CRF)是各種慢性腎臟疾患進展的共同結局，是內科危重症之一，發病率高而治療困難，在早、中期常有一個相對漫長時間，目前沒有特效藥物。晚期尿毒症階段，雖可接受維持性透析和腎移植，但費用昂貴，並存在透析併發症、腎移植排異反應等問題。目前臨床用中藥治療慢性腎功能衰竭多是採用辨證論治的湯劑治療，缺乏成方製劑，其不足之處在於現有的中藥成方製劑療效較差，而中藥湯劑使用不變，且胃腸反應較大，不宜長期應用。
本發明的目的在於提供一種治療慢性腎功能衰竭的腎可舒膠囊及其製備工藝，它使用方便，療效確切，無明顯毒副作用，適用於長期用藥的慢性腎功能衰竭患者。
本發明由發酵蟲草菌粉、大黃提取製成的膠囊，其配方用量是發酵蟲草菌粉8～2份、大黃2～8份。製備時，將以上兩味，加3-8倍量40～80％乙醇回流提取三次，每次2小時，濾過，合併提取液，減壓回收乙醇，濃縮至60℃相對密度為1.25-1.30的稠膏，真空乾燥，粉碎成細粉，加入10～25％β-環糊精，再加入硬脂酸鎂0.003-0.009份，混勻，幹壓製成顆粒，製成膠囊，即得。
本發明的優點在於製備工藝簡單，成本低、易於操作，使用方便，具有益腎補虛，解毒洩濁之功效，適用於長期用藥的慢性腎功能衰竭患者。主要研究結果如下(1)急性毒性試驗根據動物的急性毒性試驗方法，找不出腎可舒膠囊一次灌胃引起小鼠死亡劑量，故無法測出LD50。用最大耐受量測定方法，測出本品一日最大耐受量相當於臨床用量的376.0倍。由此估計臨床應用本品有較大的安全性。(2)長期毒性試驗觀察大鼠長期口服腎可舒膠囊所產生的毒性反應及其程度，為臨床用藥的安全性提供依據。腎可舒膠囊按3.25、6.5、13.0g/kg/d(相當於人最大日用量的15、30、60倍)給大鼠口服給藥，連續六個月。除雄性大鼠中、高劑量給藥組體重增長比對照組緩慢外，未發現其他與藥物相關的異常情況。給藥三個月時，各項血液學和生化指標檢查均正常。心電圖檢查結果亦正常。病理鏡檢結果表明，各臟器無器質性改變。給藥六個月後，血液學和血清生化指標少數組間有差異，但變化均在正常值範圍內。心電圖檢查結果正常。臟器係數也在正常值範圍。病理檢查結果表明，各臟器無器質性異常改變。停藥一個月後，以上各項檢查仍屬正常。總之，腎可舒膠囊連續給藥六個月對大鼠無明顯毒性反應。(3)主要藥效學究根據腎可舒膠囊的功能主治，選用大鼠腺嘌呤慢性腎功能衰竭(CRF)、5/6腎切除CRF及環磷醯胺所致小鼠免疫功能低下模型，觀察腎可舒膠囊的治療作用。結果表明腎可舒膠囊對大鼠腺嘌呤CRF及5/6腎切除CRF兩種模型都有明顯的治療作用，表現為顯著降低尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)及24h尿蛋白量；明顯提升紅細胞數(RBC)、血紅蛋白(HGB)、紅細胞壓積(HCT)水平；明顯升高血Ca、降低血P、K、Na；明顯保護腎小球、減少腺嘌呤代謝物結晶在腎小管的沉積、減輕腎小球代償性肥大及腎間質病變程度。還明顯提高免疫功能低下小鼠脾淋巴細胞轉化刺激指數、增強腺嘌呤CRF大鼠淋巴細胞轉化cpm數。總之，腎可舒膠囊能顯著改善腎功能，糾正腎性貧血，調節電解質平衡紊亂，減輕腎臟病理損害，增強細胞免疫功能，從而延緩CRF進程。具體實驗數據見以下表1-15。
表1腎可舒膠囊對腺嘌呤大鼠24h尿蛋白的影響(Mean±SD)
注與模型對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001(以下同)從表1可見，0.5％腺嘌呤飼料造模後，大鼠24h尿蛋白明顯高於正常對照組(P＜0.01)。腎可舒膠囊治療後，高、中劑量組的24h尿蛋白明顯低於模型對照組(P＜0.05)，低劑量及陽性對照藥尿毒清組的24h尿蛋白有下降趨勢，但與模型組比較無顯著性差異。
表2腎可舒膠囊對腺嘌呤CRF大鼠血清BUN、Crea的影響(Mean±SD)
從表2可見，大鼠進食兩周0.5％腺嘌呤飼料後(即給藥前)，血清BUN、Crea明顯升高，各組與正常對照組比較差異非常顯著(P＜0.001)。在給予腎可舒高、中、低劑量治療四周後，三個劑量的血清BUN、Crea水平均明顯低於模型組並有非常顯著差異(P＜0.001)。陽性對照藥尿毒清的治療作用亦很明顯(P＜0.001)。
表3腎可舒膠囊對腺嘌呤CRF大鼠血Ca、P、K、Na的影響(Mean±SD)
從表3可見，腺嘌呤造模型後，大鼠出現低Ca、高P、高K、高Na的電解質平衡紊亂症狀，給予腎可舒膠囊治療後，使血Ca升高、血P、血K下降具有糾正電解質紊亂的作用。與對照組比較，其中高、低劑量明顯升高血Ca(P＜0.05、P＜0.01)，中劑量有升高血Ca的趨勢，但無統計學意義。中、低劑量明顯降低血P(均P＜0.01)。低劑量明顯降低血K(P＜0.01)。尿毒清也顯示出升高血Ca、降低血K和血P的作用(均為P＜0.05)。
表4腎可舒膠囊對腺嘌呤CRF大鼠RBC、HGB、HCT的影響(Mean±SD)
從表4可見，0.5％腺嘌呤飼料造模後，CRF大鼠的RBC、HGB、HCT均非常明顯的低於正常對照組，即出現非常明顯的貧血症狀。腎可舒膠囊治療四周後，高、中劑量組的RBC、HGB、HCT明顯上升，與模型對照組比較有顯著性差異(P＜0.05、P＜0.01)，低劑量及尿毒清顆粒組的HCT高於模型組，有顯著差異(P＜0.05)。
表5腎可舒膠囊對腺嘌呤CRF大鼠腎臟係數及正常腎小球數的影響(Mean±SD)
表6腎可舒膠囊對腺嘌呤CRF大鼠腎內結晶沉積程度的影響(Mean±SD)
注Ridit分析，可信限下限＞0.5時，P＜0.05，與模型組比較*P＜0.05。
從表5、6研究結果，腎臟係數與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05、P＜0.001)，模型對照組腎組織正常腎小球數目明顯減少，腎組織呈萎縮傾向，腎小球囊腔擴大，腎間質增生，腎小管腔擴大，可見大量棕黑色腺嘌呤代謝物結晶沉積，大部分腎小管破壞，有淋巴細胞浸潤，腎間質結締組織增生。腎可舒給藥各組腎組織病變較模型對照組輕，正常腎小球數目較模型組多，並有顯著性差異(P＜0.05、P＜0.01)；結晶沉積有不同程度地減輕，與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05)；尿毒清顆粒作用相似。
表7腎可舒膠囊對5/6腎切除CRF大鼠24h尿蛋白的影響(Mean±SD)
注與模型對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
從表7可見，模型對照組大鼠24h尿蛋白量明顯高於正常對照組(P＜0.001)。給予腎可舒膠囊治療後，三個劑量組的24h尿蛋白量都明顯低於模型對照組(P＜0.05、P＜0.01)，陽性對照藥尿毒清的作用相似。
表8腎可舒膠囊對5/6腎切除CRF大鼠血BUN、Crea的影響(Mean±SD)
從表8可見，大鼠切除5/6腎臟後，模型組血BUN、Crea明顯升高，與正常對照組比較差異非常顯著(P＜0.01、P＜0.001)。治療四周後，腎可舒高、中劑量能使血BUN、Crea明顯降低，與模型對照組比較差異非常顯著(P＜0.05、P＜0.01)，腎可舒膠囊低劑量也能明顯降低血Crea(P＜0.05)。陽性對照藥尿毒清對血BUN有明顯作用(P＜0.05)，對血Crea有作用趨勢。
表9腎可舒膠囊對5/6腎切除CRF大鼠血Ca、P、K、Na的影響(Mean±SD)
從表9可見，造模型後，模型組血Ca明顯低於正常組(P＜0.001)，血P、K、Na明顯高於正常對照組(P＜0.01、P＜0.001)，腎可舒膠囊治療後，血Ca明顯恢復，而血P、K、Na明顯降低，其中高、低劑量組的血Ca與模型組比較差別非常顯著(均為P＜0.01)，中劑量有升高血Ca的趨勢，但無統計學意義。中、低劑量組的血P與模型組比較差別非常顯著(均P＜0.01)。高、中、低三個劑量組的血K、Na都明顯低於模型組(均為P＜0.001)。尿毒清也有明顯升高血Ca，降低血P、K、Na的作用。
表10腎可舒膠囊對5/6腎切除CRF大鼠RBC、HGB、HCT的影響(Mean±SD)
從表10可見，造模後，模型大鼠隨著慢性腎功能衰竭進程，出現貧血症狀，RBC、HGB、HCT與正常對照組比較有非常明顯差異(均為P＜0.001)。腎可舒膠囊高、中、低三劑量組與模型組比較都有明顯提高HGB的作用(均為P＜0.05)，高劑量RBC明顯高於模型組(P＜0.05)，三個劑量組對HCT都有升高的趨勢，但無統計學意義。尿毒清對RBC、HGB、HCT有升高的趨勢但都無統計學意義。
表11腎可舒膠囊對5/6腎切除CRF大鼠腎小球直徑的影響(Mean±SD)
表12腎可舒膠囊對5/6腎切除CRF大鼠腎間質病變程度的影響(Mear±SD)
注Ridit分析，可信限下限＞0.5時，P＜0.05，與模型組比較*P＜0.05。
表13腎可舒膠囊對5/6腎切除CRF大鼠PAS染色反應程度的影響(Mean±SD)
注Ridit分析，可信限下限＞0.5時，P＜0.05，與模型組比較*P＜0.05。
從表11、12、13及病理報告可見。大鼠5/6腎切除後，模型組殘留腎臟明顯代償性肥大，腎小球面積顯著增大，腎小球包氏囊內有不同程度粘連，繫膜細胞及繫膜基質增生，腎小球間質有炎症細胞浸潤，近、遠曲管明顯擴張，小管內皮細胞腫脹，上皮呈裸核，部分動物曲管內有蛋白管型。治療四周後，給藥各組的殘留腎臟病理改變較模型組輕，腎可舒膠囊高、中、低三個劑量都能使殘留腎代償性肥大縮小，腎小球直徑與模型組比較均有非常顯著性差異(均為P＜0.001)。尿毒清亦能使殘留代償性肥大及其腎小球直徑小於模型組(P＜0.001)。
模型組腎間質病變程度及PAS染色反應程度與正常對照組比較，經Ridit分析有顯著性差異(P＜0.05)。腎可舒高、中、低三個劑量治療後，均明顯改善腎間質病變及PAS染色反應程度，與模型組比較都有顯著性差異(均為P＜0.05)，陽性對照藥尿毒清的作用相似。
表14 腎可舒膠囊對小鼠脾淋巴細胞轉化的影響
從表14可見，小鼠ip.cy後，模型對照組脾淋巴細胞轉化刺激指數明顯低於正常對照組(P＜0.05)，腎可舒膠囊低劑量可明顯拮抗cy的免疫抑制作用，其刺激指數明顯高於模型對照組(P＜0.05)；腎可舒中劑量有拮抗cy免疫抑制作用趨勢，但與模型對照組比較無顯著性差異。陽性對照藥珍奧核酸亦可明顯拮抗cy免疫抑制作用(與模型組比較P＜0.05)。
表15腎可舒膠囊對腺嘌呤CRF大鼠脾淋巴細胞轉化的影響
從表15可見，0.5％腺嘌呤飼料造模後，大鼠脾淋巴細胞轉化cpm數明顯低於正常對照組(P＜0.05)同時給予腎可舒膠囊服用四周後，高、中劑量組cpm數明顯高於模型對照組(均為P＜0.05)，低劑量組cpm數有上升趨勢，但無統計學意義。而尿毒清組cpm數卻明顯低於模型組(P＜0.001)。
下面以具體實施例對本發明作詳細說明實施方案1發酵蟲草菌粉4份、大黃2份。製備時，將以上兩味，加5倍量50％乙醇回流提取三次，每次2小時，濾過，合併提取液，減壓回收乙醇，濃縮至60℃相對密度為1.25-1.30的稠膏，真空乾燥，粉碎成細粉；加入15％β-環糊精，再加入硬脂酸鎂0.006份，混勻，幹壓製成顆粒，製成粒膠囊，即得。
實施方案2發酵蟲草菌粉5份、大黃5份。製備時，將以上兩味，加7倍量60％乙醇回流提取三次，每次2小時，濾過，合併提取液，減壓回收乙醇，濃縮至60℃相對密度為1.25-1.30的稠膏，真空乾燥，粉碎成細粉；加入20％β-環糊精，再加入硬脂酸鎂0.006份，混勻，幹壓製成顆粒，製成膠囊，即得。
實施方案3發酵蟲草菌粉2份、大黃4份。製備時，將以上兩味，加4倍量70％乙醇回流提取三次，每次2小時，濾過，合併提取液，減壓回收乙醇，濃縮至60℃相對密度為1.25-1.30的稠膏，真空乾燥，粉碎成細粉；加入10％β-環糊精，再加入硬脂酸鎂0.006份，混勻，幹壓製成顆粒，製成膠囊，即得。
權利要求
1.一種治療慢性腎功能衰竭的腎可舒膠囊，其特徵在於它是由下述原料和用量提取製成的膠囊發酵蟲草菌粉8～2份、大黃2～8份。
2.如權利要求1所述的腎可舒膠囊的製備工藝，其特徵在於製備時，將發酵蟲草菌粉8～2份、大黃2～8份，加3-8倍量40～80％乙醇回流提取三次，每次2小時，濾過，合併提取液，減壓回收乙醇，濃縮至60℃相對密度為1.25-1.30的稠膏，真空乾燥，粉碎成細粉，加入10～25％β-環糊精，再加入硬脂酸鎂0.003-0.009份，混勻，幹壓製成顆粒，製成膠囊，即得。
全文摘要
本發明涉及一種治療慢性腎功能衰竭的腎可舒膠囊及其製備工藝。它是將發酵蟲草菌粉等藥，加乙醇回流提取，濾過，合併提取液，減壓回收乙醇，濃縮，真空乾燥，粉碎成細粉，加入β－環糊精及硬脂酸鎂，混勻，幹壓製成顆粒，製成膠囊即得。本發明的優點在於製備工藝簡單，成本低、易於操作，使用方便，具有益腎補虛，解毒洩濁之功效，適用於長期用藥的慢性腎功能衰竭患者，可能顯著改善腎功能，糾正腎性貧血，調節電解質平衡紊亂，減輕腎臟病理損害，增強細胞免疫功能，從而延緩CRF進程。
文檔編號A61K9/48GK1657059SQ200410004358
公開日2005年8月24日 申請日期2004年2月17日 優先權日2004年2月17日
發明者熊玉蘭, 許靖, 呂仁和, 範賦勝, 仝燕, 陶學仁, 劉岱, 胡寧, 王筱萍 申請人:江西金水寶製藥有限公司, 中國中醫研究院中藥研究所