一種山楂葉總黃酮的提取製備方法
2023-08-08 19:18:36 1
專利名稱：一種山楂葉總黃酮的提取製備方法
技術領域：
本發明涉及一種從植物中提取總黃酮的生產工藝，具體地說是一種從山楂葉中提取總黃酮的生產工藝。
背景技術：
山楂葉是薔薇科山楂屬植物山楂Cratogwp/""加:/ ^Bge.的葉子。現代藥理試驗表明，從山楂葉中所提取的總黃酮，具有擴張血管、改善冠脈供血、保護心肌、抑制血小板聚集等作用。臨床資料也表明山楂總黃酮對冠心病、心絞痛病人總有效率為94.4%;對降低血脂總效率為85%;對冠心病、心肌炎及心肌並引起的早搏總有效率為62.5%。此外，山楂總黃酮對降低舒張壓、防治心律失常和活血化瘀也有重要作用。山楂總黃酮所具有的顯著藥理活性，已引起醫藥行業研究人員的高度關注。目前，從山楂葉中提取總黃酮通常是在提取過程中，利用乙酸乙酯和正丁醇進行萃取，該方法操作工藝複雜、製造成本高，且藥液中的有機溶劑殘留物不易徹底清除。CN1436785專利公開了一種用大孔樹脂提取山楂葉總黃酮的方法。該方法是選用淨山楂葉，用50%的乙醇控溫55°。提取三次，然後回收乙醇、靜置沉澱、過濾濃縮，過濾液用強鹼、強酸清洗後再用大孔樹脂分離、洗脫。該方法提取的總黃酮，其中的鞣質不易去除，從而影響了提取物的純度和療效，尤其不宜作為注射劑原料藥使用。另外該方法使用較高濃度的酸洗鹼洗會造成一定的環境汙染。
發明內容
本發明的目的是提供一種工藝流程簡單、生產成本低廉、產品純度高、且益於環境保護的山楂葉總黃酮的提取製備方法。本發明的目的是這樣實現的
本發明方法包括以下步驟
a、取乾燥山楂葉粉末，加入山楂葉粉末重量5~10倍量的20%~80%乙醇，在30 80 'C溫度條件下，浸提2~6小時，過濾；將濾渣再加入濾渣重量5 10倍量的20%~80%乙醇，在30 8(TC溫度條件下，浸提2 6小時，過濾；合併兩
3次濾液，減壓濃縮至無乙醇味，再向濾液中加入山楂葉粉末重量3 8倍量的水，混勻，混合液加熱至沸，靜置放冷，冷藏12—36小時後，吸取上清液，下層濾過，濾液與上清液合併，得山植葉提取液；
本步驟中乙醇濃度優選60%~80% ，乙醇加入量優選山楂葉粉末重量的8~10倍。該優選參數，可進一步提高山楂葉總黃酮的得率。
b、 將上述山楂葉提取液上D101大孔樹脂，用蒸餾水和10%~90%不同濃度的乙醇溶液進行梯度洗脫，收集用鹽酸鎂粉鑑別反應顯陽性反應的乙醇洗脫液，回收乙醇，待溶液無乙醇味時，得濃縮液；
c、 在上述濃縮液中加入濃縮液重量4~10倍量的蒸餾水，靜置，過濾，濾液上聚醯胺層析柱，用蒸餾水和10~80%乙醇分別洗脫，收集加稀醋酸和滴加4 5滴明膠氯化鈉後，無絮狀沉澱產生的乙醇洗脫液；
d、 減壓濃縮乾燥c步驟中的乙醇洗脫液，得山楂葉總黃酮提取物。本發明所製備的山楂葉總黃酮提取物中的主要化學成分為牡荊素鼠李糖苷
和牡荊素葡萄糖苷。
本發明方法具有以下有益效果
(1) 本發明工藝中的山楂葉提取液經大孔樹脂柱分離後，直接使用聚醯胺柱層析分離，從而改變了現有技術中採用乙酸乙酯和正丁醇等有機溶劑進行萃取的工藝步驟。它一方面簡化了工藝過程，降低了生產成本，同時也從根本上解除了提取物中有機溶劑殘留物的存在。
(2) 本發明工藝採用大孔樹脂柱和聚醯胺柱聯用分離，有效去除了鞣質，提高了提取物的純度。其所含總黃酮以牡荊素鼠李糖苷計>85%;山楂葉總黃酮中牡荊素鼠李糖苷與牡荊素葡萄糖苷HPLC色普圖峰面積之比可控制在1.2 2.5: 1。該方法所提取的山楂葉總黃酮可以直接作為山楂葉注射液的原料藥使用。
本發明方法所提取的山楂葉總黃酮在用於製備山楂葉注射劑時，可以製成粉針劑，也可以製成水針劑。注射液每毫升溶液所含總黃酮以牡荊素鼠李糖苷計，可為0.2—30mg。在臨床應用時，水針劑可以直接加入生理鹽水或5—10%的葡萄糖溶液中靜脈滴注；粉針劑可以先加入少量注射用水或生理鹽水溶解後再加入到生理鹽水或5—10%的葡萄糖溶液中靜脈滴注。
本發明方法所提取的山楂葉總黃酮經急性毒性以及長期毒性實驗表明，其無
4毒副作用。
具體實施例方式
下面通過實施例的方式進一步說明本發明，但並不因此將本發明限制於此。實施例1
(1) 山楂葉提取液的製備
採集山西晉城的山楂屬植物山楂Cratoegw / /""加y^/a Bge.的新鮮山楂葉於室溫陰乾後，稱取500g粉碎成山楂葉粉末，以加入醇濃度為20。/。的乙醇2500g於30 'C浸提2小時，過濾，將濾渣再加入醇濃度為20%的乙醇3000 g於30 °C浸提2小時，過濾；合併兩次濾液，減壓濃縮至無乙醇味。再向濾液中加入1500g的水，混勻，靜置，加熱至沸，靜置放冷，冷藏過夜後，吸取上清液，下層濾過，濾液與上清液合併得山楂葉提取液；
(2) 山楂葉總黃酮的製備
將上述山楂葉提取液上D101大孔樹脂，用蒸餾水和10%~90%不同濃度乙醇溶液分別洗脫，收集鹽酸鎂粉顯陽性反應的乙醇洗脫液，回收乙醇，待溶液無乙醇味時，加濃縮液4倍量的蒸餾水，靜置，過濾，濾液上聚醯胺層析柱，用蒸餾水和10~80%乙醇分別洗脫。收集加稀醋酸和滴加4 5滴明膠氯化鈉，無絮狀沉澱產生的乙醇洗脫液；洗脫液減壓濃縮乾燥成棕紅色粉末狀，得含量為86.5%的山楂葉總黃酮。實施例2
(1) 山楂葉提取液的製備
稱取乾燥山楂葉750 g粉碎成粉末，以8倍量的50%乙醇於6(TC浸提4小時，過濾，將濾渣再以8倍量的50。/。乙醇於6(TC浸提4小時，過濾，合併兩次濾液，減壓濃縮至無乙醇味。再向濾液中加入山楂葉重量5倍量的水，混勻，加熱至沸，靜置放冷，冷藏24小時後，吸取上清液，下層濾過，濾液與上清液合併得山楂葉提取液。
(2) 山楂葉總黃酮的製備
將上述山楂葉提取液上DIOI大孔樹脂，用蒸餾水和10%~90%不同濃度乙醇溶液分別洗脫，收集鹽酸鎂粉顯陽性反應的乙醇洗脫液，回收乙醇，待溶液無乙醇味時，加濃縮液8倍量的蒸餾水，靜置，過濾，濾液上聚醯胺層析柱，
5用蒸餾水和10 80%乙醇分別洗脫。收集加稀醋酸和滴加4 5滴明膠氯化鈉，無絮狀沉澱產生的乙醇洗脫液，減壓濃縮乾燥成棕紅色粉末狀，即得含量為88.8%的山楂葉總黃酮。實施例3:
(1) 山楂葉提取液的製備
稱取乾燥山楂葉750 g粉碎成粉末，以10倍量的80%乙醇於8(TC浸提6小時，過濾，將濾渣再以10倍量的80。/o乙醇於8(TC浸提6小時，過濾，合併兩次濾液，減壓濃縮至無乙醇味。再向濾液中加藥材重量8倍量水混懸，加熱至沸，靜置放冷，冷藏過夜後，吸取上清液，下層濾過，濾液與上清液合併得山楂葉提取液。
(2) 山楂葉總黃酮的製備
將上述山楂葉提取液上D101大孔樹脂，用蒸餾水和10% 90%不同濃度乙醇溶液分別洗脫，收集鹽酸鎂粉顯陽性反應的乙醇洗脫液，回收乙醇，待溶液無乙醇味時，加濃縮液IO倍量的蒸餾水，靜置，過濾，濾液上聚醯胺層析柱，用蒸餾水和10~80%乙醇分別洗脫。收集加稀醋酸和滴加4 5滴明膠氯化鈉，無絮狀沉澱產生的乙醇洗脫液，減壓濃縮乾燥成棕紅色粉末狀，即得含量為87.6%的山楂葉總黃酮。
權利要求
1、一種山楂葉總黃酮的提取製備方法，其特徵在於它包括以下步驟a、取乾燥山楂葉粉末，加入山楂葉粉末重量5～10倍量的20％～80％乙醇，在30～80℃溫度條件下，浸提2～6小時，過濾；將濾渣再加入濾渣重量5～10倍量的20％～80％乙醇，在30～80℃溫度條件下，浸提2～6小時，過濾；合併兩次濾液，減壓濃縮至無乙醇味，再向濾液中加入山楂葉粉末重量3～8倍量的水，混勻，混合液加熱至沸，靜置放冷，冷藏12—36小時後，吸取上清液，下層濾過，濾液與上清液合併，得山楂葉提取液；b、將上述山楂葉提取液上D101大孔樹脂，用蒸餾水和10％～90％不同濃度的乙醇溶液進行梯度洗脫，收集用鹽酸鎂粉鑑別反應顯陽性反應的乙醇洗脫液，回收乙醇，待溶液無乙醇味時，得濃縮液；c、在上述濃縮液中加入濃縮液重量4～10倍量的蒸餾水，靜置，過濾，濾液上聚醯胺層析柱，用蒸餾水和10～80％乙醇分別洗脫，收集加稀醋酸和滴加4～5滴明膠氯化鈉後，無絮狀沉澱產生的乙醇洗脫液；d、減壓濃縮乾燥c步驟中的乙醇洗脫液，得山楂葉總黃酮。
2、根據權利要求l所述的山楂葉總黃酮的提取製備方法，其特徵在於a步 驟中所說的乙醇濃度為60% 80% ,加入量是山楂葉粉末重量的8 10倍。
全文摘要
本發明公開了一種山楂葉總黃酮的提取製備方法，它主要包括以下工藝a.取乾燥山楂葉粉末，加入山楂葉粉末重量5～10倍量的20％～80％乙醇，在30～80℃溫度條件下，浸提2～6小時；浸提兩次；濾液減壓濃縮加入3～8倍量的水加熱、靜置放冷，得山楂葉提取液；b.山楂葉提取液上D101大孔樹脂，用蒸餾水和乙醇溶液進行梯度洗脫；濾液上聚醯胺層析柱，洗脫液減壓濃縮乾燥。本發明方法工藝流程簡單、生產成本低廉、產品純度高、且有益於環境保護。
文檔編號C07D311/22GK101463025SQ20071018545
公開日2009年6月24日 申請日期2007年12月20日 優先權日2007年12月20日
發明者李振江 申請人:神威藥業有限公司