一種注射用血小板凍乾粉製劑及其製備方法

2023-07-10 07:14:11 3

專利名稱：一種注射用血小板凍乾粉製劑及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種注射用凍 乾粉製劑，特別涉及一種血小板的注射用凍乾粉製劑。
背景技術：
血小板是血液的重要成分，人體在大量失血後需要輸入血小板，進行化療和骨髓移植的患者更需要輸入大量的血小板。目前常用的血小板保存方法是在20°C 24°C震蕩條件下保存，僅能保存5天，之後即會失去活性，且易激活血小板細胞功能和促進微生物生長汙染，很難適應臨床惡需求。目前研究認為，採用凍幹技術可以延長血小板的保存期，研究中常用的冷凍保護劑等關鍵輔料包括海藻糖、二甲基亞碸和可逆性激活抑制劑。海藻糖是一種穩定的非還原性雙糖，其羥基能代替水分子同蛋白質表面部分結合，進入細胞後會形成保護層，對細胞形成保護。但只有當海藻糖達到一定濃度並均勻分布在血小板胞膜內外時，才能在凍幹過程中對血小板起到相對理想的保護作用。因此，凍幹前有效負載海藻糖至胞內是血小板凍幹保存成功的主要因素之一。然而血小板胞膜對其具有非滲透性，因此將海藻糖負載進入血小板胞內，需要複雜的工藝過程，耗時長達4小時， 並需要引入更多種化學物質。使得工藝問題和安全性問題成為困擾血小板凍乾粉應用的難題之一。即使目前認為相對比較簡單的液相內吞負載海藻糖的方法也存在工藝耗時長的問題。此外，重複實驗證明海藻糖用於血小板凍乾粉時，保存的血小板激活率高，體內存活期縮短。二甲基亞碸可防止凍幹過程中形成冰晶對細胞造成損傷。溫度接近0°C時，二甲基亞碸使溶液的凝固點下降，無冰晶形成；溫度繼續降低時，細胞外液中形成冰晶，而血小板內溶液不凍結。血小板胞外水不斷形成冰晶，胞外濃度增大，會使細胞內的自由水透過細胞膜滲出到胞外，如果降溫速度足夠慢，即可使血小板逐漸脫水而不會形成冰晶。但是，二甲基亞碸作為一種化學試劑，對人體具有一定的毒性作用，不適於注射給藥，殘留的二甲基亞碸可能會在長期輸注凍幹血小板的患者體內逐漸積累而形成傷害，所以使用前需要反覆衝洗，在洗滌過程中，血小板易被激活、損傷而喪失其臨床應用價值。在血小板體外凍幹、保存和使用整個過程中，均可引起血小板過度激活，從而使得細胞回收率降低，血小板正常功能降低或喪失。為避免血小板在處理過程中過度激活，需要加入一種或幾種可逆性激活抑制劑來保護血小板，使其在應用前處於暫時休眠狀態，增強凍幹血小板的生存能力，延長其生存時間，並且可以使二甲基亞碸的用量由5%降低至 2%。但是，目前所採用的各種血小板可逆性激活抑制劑，如腺苷(adenosine)、前列腺素El (Prostaglandin El)、阿米洛利(amiloride)和硝普鈉(sodium nitroprusside)等均具有確切並且較強的生物活性，如作為輔料使用，會誘發與治療目的無關的其他藥理或病理現象，不適於作醫藥用輔料。目前採用的血小板凍存方法中，以種三種輔料一般同時使用，以提高血小板的穩定性、存活率和回收率。然而，醫藥界已經認識到，即使同時使用海藻糖、二甲基亞碸和可逆性激活抑制劑製備血小板凍乾粉，其回收率仍比較低，大約65%左右。而其體內存活率則更低，甚至低於40%。加之以上三種輔料中，二甲基亞碸和可逆性激活抑制劑均不適於作為藥用輔料使用，否則會都人體造成損害。因此，目前研發的各種血小板凍乾粉處方和工藝多處於以研究為目的的階段，而無法投入臨床使用。 因此，尋找新的安全性高且能夠維持凍存血小板高回收率和高存活率的血小板凍乾粉處方和工藝，已成為已成為制約血小板臨床使用的關鍵因素。四氫嘧啶，化學名為1，4，5，6-四氫-2-甲基_4_嘧啶羧酸或 2-Methyl-l, 4, 5, 6-tetrahydropyri
midine-4-carboxylic acid 或(S)_2_methyl_l， 4, 5, 6-tetra-hydropyrimidine-4-carboxylic acid gJc , 4, 5, 6-tetrahydro-2-methyl-4-pyrimidine carbonic acid, CAS 號為96702-03-3，是1985年從海洋生物體內發現的胺基酸衍生物，具有保溼、防紫外線照射等作用，近年來已被用於化妝品作為保溼性成分或輔料。

發明內容
針對上述現有技術，本發明的目的在於提供一種注射用凍乾粉製劑，具體的說是一種注射用血小板凍乾粉製劑。另一方面，本發明還提供了一種注射用血小板凍乾粉製劑的製備方法。為實現上述目的，本發明採用的技術方案為
一種注射用血小板凍乾粉製劑，由血小板和冷凍保護劑組成，所述冷凍保護劑由非滲透性冷凍保護劑和四氫嘧啶或羥基四氫嘧啶組成，所述非滲透性冷凍保護劑選自聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖、牛血清白蛋白和海藻糖中的任意一種；所述四氫嘧啶或羥基四氫嘧啶用量為每IO12個血小板細胞用5mg-80mg，所述非滲透性冷凍保護劑的用量為每IO12個血小板細胞用 2mg-50mgo所述四氫嘧啶或羥基四氫嘧啶的用量為每IO12個血小板細胞用10mg-30mg。所述非滲透性冷凍保護劑的用量為每IO12個血小板細胞用2mg-20mg。所述非滲透性冷凍保護劑為聚乙烯吡咯烷酮。所述聚乙烯吡咯烷酮的用量為每IO12個血小板細胞用2mg-14mg。所述注射用血小板凍乾粉製劑的製備方法，步驟為
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入非滲透性冷凍保護劑和四氫嘧啶或羥基四氫嘧啶，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至10Pa-30Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；
c、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。本發明的技術方案中所述的四氫嘧啶，化學名為2-Methyl-l，4，5，6-tetra hydropyrimidine-4-carboxylic acid 或(S)-2-methyl-l, 4, 5, 6-tetra-hydropyrimidine-4-carboxylic acid 或 1,4,5,6-tetrahydro-2~methy1-4-pyrimidinecarbonic acid。1，4，5，6-四氫-2-甲基-5-羥基-4-嘧啶羧酸俗稱羥基四氫嘧啶，CAS號為96702-03-3，這是本領域技術人員所周知的。本發明人在實驗研究中驚奇的發現，將四氫嘧啶與某些非滲透性冷凍保護劑的混合物，對血小板凍幹具有出乎意料的保護作用，血小板與四氫嘧啶及其衍生物和非 滲透性冷凍保護劑混合後進行凍幹，所得的注射用血小板凍乾粉製劑安全性高，穩定性強，回收率、體內存活時間和血小板功能相對較高，凍幹對血小板的影響極小，利於血小板的長期貯存和運輸。
具體實施例方式下面結合實施例對本發明作進一步的解釋。應當理解的是，以下實施例僅用於解釋本發明，而不是限制本發明的保護範圍。實施例1注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
四氫嘧啶12mg
聚乙烯吡咯烷酮IOmg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為IX IO9細胞/ml的懸液， 然後加入四氫嘧啶和聚乙烯吡咯烷酮，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至23Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。實施例2注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
羥基四氫嘧啶20mg
聚乙烯吡咯烷酮7mg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入羥基四氫嘧啶和聚乙烯吡咯烷酮，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至17Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。實施例3 注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
羥基四氫嘧啶30mg海藻糖45mg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入羥基四氫嘧啶和海藻糖，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至10Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。實施例4 注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
羥基四氫嘧啶42mg
牛血清白蛋白18mg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入羥基四氫嘧啶和牛血清白蛋白，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至7Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。實施例5 注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
四氫嘧啶26mg
葡聚糖20mg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入四氫嘧啶和葡聚糖，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至10Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。實施例6 注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X 109細胞/ml 1000ml
四氫嘧啶58mg
海藻糖30mg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液，然後加入四氫嘧啶和海藻糖，靜置1小時； 2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至14Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。實施例7 注射用血小板凍乾粉處方及製備 血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
四氫嘧啶72mg
牛血清白蛋白8mg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入四氫嘧啶和牛血清白蛋白，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至12Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。實施例8 注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
四氫嘧啶60mg
聚乙烯吡咯烷酮3mg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入四氫嘧啶和聚乙烯吡咯烷酮，靜置1小時；
2)凍幹a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至12Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時，滅菌分裝即得。實施例9 注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
四氫嘧啶15mg
聚乙烯吡咯烷酮12g
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入四氫嘧啶和聚乙烯吡咯烷酮，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至10Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. rc /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。

實施例10 注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
四氫嘧啶17mg
聚乙烯吡咯烷酮19mg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入四氫嘧啶和聚乙烯吡咯烷酮，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C /分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2 小時；b、一次乾燥抽真空至16Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8 小時；c、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時，滅菌分裝即得。實施例11 注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
羥基四氫嘧啶20mg
聚乙烯吡咯烷酮IOmg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入羥基四氫嘧啶和聚乙烯吡咯烷酮，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至24Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。實施例12 注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
羥基四氫嘧啶12mg
牛血清白蛋白5mg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入羥基四氫嘧啶和牛血清白蛋白，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至24Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。實施例13 注射用血小板凍乾粉處方及製備血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
四氫嘧啶18mg
海藻糖35mg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入四氫嘧啶和海藻糖，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至10Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。實施例14 注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
四氫嘧啶Ilmg
海藻糖18mg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入四氫嘧啶和海藻糖，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至10Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。實施例15 注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
四氫嘧啶Ilmg
牛血清白蛋白32mg
1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入四氫嘧啶和牛血清白蛋白，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至7Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。實施例16 注射用血小板凍乾粉處方及製備
血小板細胞2 X IO9細胞/ml 1000ml
四氫嘧啶19mg
葡聚糖41mg1)配液:
將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入四氫嘧啶和葡聚糖，靜置1小時；
2)凍幹
a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至10Pa，然後以5°C /分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥8小時；C、二次乾燥一次乾燥後，以0. 1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。實施例17 注射用血小板凍乾粉製劑的急性毒性實驗
SPF級KM小鼠，雌雄各半，體重16g-30g，稱重後隨機 為17組，一組尾靜脈注射給予未凍幹的血小板，其餘16組分別靜脈注射給予實施例1-實施例16所製備的凍乾粉(凍乾粉用生理鹽水復溶)，以血小板細胞個數計算給藥劑量為IO12/只，給藥後連續觀察14天。觀察項目包括毒性反應、體重和組織病理學。結果表明，小鼠尾靜脈注射給予血小板凍乾粉，以血小板細胞個數計為IO14/只時，無明顯毒性反應，給藥前後及實驗結束時小鼠體重無明顯差異，組織病理學觀察，未發現顯著異常。說明本發明設計的注射用血小板凍乾粉製劑安全性良好，單次大劑量給藥不會引發不良反應。實施例18 注射用血小板凍乾粉製劑的長期毒性實驗
Wister大鼠，雌雄各半，420g-600g，稱重後隨機分為17組，一組尾靜脈注射給予未凍幹的血小板，其餘16組分別靜脈注射給予實施例1至實施例16所製備的凍乾粉(凍乾粉用生理鹽水復溶)，以血小板細胞個數計算給藥劑量為2 X IO9/只，每兩天給藥1次，共30天， 恢復期為14天。給藥期間及恢復期內，觀察大鼠給藥前及給藥後進行大體觀察，記錄大鼠的一般症狀、記錄給藥前及給藥後大鼠的體重，並定期進行血液學、尿液學和血生化檢查， 記錄給藥前及給藥後大鼠的心電圖。結果顯示，各組動物體重與對照組無顯著差異，大體觀察未發現異常。實驗組動物的血液學、尿液學和血生化數據與對照組無顯著差異。說明四注射用血小板凍乾粉製劑長期給藥的安全性良好，耐受性符合臨床用藥的要求。實施例19 注射用血小板凍乾粉製劑的血小板回收率
體外血小板細胞回收率=(復水後血小板數目/凍幹前血小板數目)X100% 將實施例1-實施例16所製備的凍乾粉用生理鹽水復水，對復水前及復水後各組血小板細胞個數進行計數，計算各組血小板細胞回收率(每組取三份樣品測定後取平均值)。結果表明，各組凍乾粉的體外血小板細胞回收率(均值)為81. 7%-94. 2%，其中實施例1、實施例 2、實施例9和實施例11製備的由四氫嘧啶或羥基四氫嘧啶與聚乙烯吡咯烷酮組成的凍乾粉的體外血小板細胞回收率集中於85. 4%-95. 0%，顯著高於其他各組。實施例20 注射用血小板凍乾粉製劑的血小板最大聚集率
分別以不同濃度的二磷酸腺苷、凝血酶和瑞斯託黴素作為誘導劑，測定新鮮血小板及實施例1至實施例16製備的凍幹血小板，復水後血小板的最大凝集率，並進行比較。結果見表新鮮血小板組命名為第0組，實施例1至實施例16組分別命名為第1、2、3、4、5、6、8、 8、9、10、11、12、13、14、15 和 16 組。
表 權利要求
1.一種注射用血小板凍乾粉製劑，其特徵在於由血小板和冷凍保護劑組成，所述冷凍保護劑由非滲透性冷凍保護劑和四氫嘧啶或羥基四氫嘧啶組成，所述非滲透性冷凍保護劑選自聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖、牛血清白蛋白和海藻糖中的任意一種；所述四氫嘧啶或羥基四氫嘧啶用量為每IO12個血小板細胞用5mg-80mg，所述非滲透性冷凍保護劑的用量為每 IO12個血小板細胞用ang-50mg。
2.根據權利要求1所述的注射用血小板凍乾粉製劑，其特徵在於所述四氫嘧啶或羥基四氫嘧啶的用量為每IO12個血小板細胞用10mg-30mg。
3.根據權利要求1所述的注射用血小板凍乾粉製劑，其特徵在於所述非滲透性冷凍保護劑的用量為每IO12個血小板細胞用ang-20mg。
4.根據權利要求1-3所述的注射用血小板凍乾粉製劑，其特徵在於所述非滲透性冷凍保護劑為聚乙烯吡咯烷酮。
5.根據權利要求4所述的注射用血小板凍乾粉製劑，其特徵在於所述聚乙烯吡咯烷酮的用量為每IO12個血小板細胞用ang-Hmg。
6.權利要求1-5所述的注射用血小板凍乾粉製劑的製備方法，其特徵在於，步驟為1)配液:將血小板用生理鹽水洗滌2次，用滅菌注射用水配成濃度為2X IO9細胞/ml的懸液， 然後加入非滲透性冷凍保護劑和四氫嘧啶或羥基四氫嘧啶，靜置1小時；2)凍幹a、預凍將分裝於西林瓶的溶液以10°C/分鐘的速度從22°C降至_40°C，維持冷凍2小時；b、一次乾燥抽真空至7Pa-30I^，然後以5°C/分鐘的升溫速度升溫至_5°C，維持乾燥 8小時；c、二次乾燥一次乾燥後，以0.1°C /分鐘的升溫速度升溫至22°C，維持乾燥5小時， 滅菌分裝即得。
全文摘要
本發明公開了一種注射用血小板凍乾粉製劑及其製備方法。注射用血小板凍乾粉製劑由血小板和冷凍保護劑組成，其中冷凍保護劑由非滲透性冷凍保護劑和四氫嘧啶或羥基四氫嘧啶組成。本發明的注射用血小板凍乾粉製劑能夠顯著提高製劑中血小板的穩定性，並維持血小板的生物活性，凍乾粉復溶後仍保持較高的生物活性。
文檔編號A61K47/42GK102327288SQ20111031237
公開日2012年1月25日 申請日期2011年10月17日 優先權日2011年10月17日
發明者厲保秋, 房世紅, 高繼友 申請人:濟南環肽醫藥科技有限公司