一種能有效地延長防止、治療或控制線蟲、蜱蟎類和內外寄生蟲對反芻動物侵染，並能持...的製作方法

2023-08-01 01:23:41 2

專利名稱：一種能有效地延長防止、治療或控制線蟲、蜱蟎類和內外寄生蟲對反芻動物侵染，並能持 ...的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種丸藥組合物，它含預防有效量的LL-F28249α，23-(O-甲基肟)LL-F28249α或其衍生物，及用該藥給反芻動物服用，以防止或控制線蟲、內寄生蟲、外寄生蟲或蟎在較長的時間內對該動物的侵染。
更具體地說，本發明涉及一種新穎持久釋放的藥劑，它包括0.3%-10.0%重量LL-F28249α，23-(O-甲基肟)LL-F28249α。或其衍生物，約10.0%-20.0%重量的甘油單硬脂酸酯，3.0%-10.0%重量的嘏西棕櫚蠟，及70.0%-85.0%重量的硫酸鋇。它還涉及一種方法，能在較長時間內防止反芻動物受線蟲、內、外寄生蟲和蜱蟎類的侵染，通過給反芻動物口服該丸藥，如上所述，在較長時間內，將治療及預防有效量的LL-F28249α，23-(O-甲基肟)LL-F28249α，或其衍生物，持續地釋放入治療動物的瘤胃，以消滅所述寄生蟲的感染階段並消除對牧場的汙染。
使人驚奇的是，還發現通過服用本發明的丸藥，其中極低水平的LL-F28249α或23-(O-甲基肟)LL-F28249α控制和防止反動物中線蟲的侵染，該藥劑含約0.3%到少於1.0%重量的LL-F28249α，23-(O-甲基肟)LL-F28249α或其衍生物，約14%-16%重量的甘油單脂酸酯，約3%-5%重量的巴西棕櫚蠟，及約78.01-82.7%重量的重晶石。
而且我們還發現，本發明的丸藥能有效地提供影響家畜的寄生蟲的預防控制，這種控制很明顯地由於極低水平的LL-F28249α或23-(O-甲基肟)LL-F28249α的不斷存在。還發現對反芻動物的這種預防治療不僅使該動物免於受線蟲、內寄生蟲、外寄生蟲和蜱蟎類的侵染，而且與未處理動物，或用其他驅蟲劑、抗菌劑或殺蟎劑處理的動物相比，使該動物顯著增加了體重。
有效地控制和/或防止昆蟲、線蟲和蜱蟎類侵染反動物，如牛、綿羊、山羊、
犎、水牛、鹿等的較佳丸藥組合物，含約1.0%-8.5%重量的LL-F28249 α，或23-(O-甲基肟)LL-F28249 α，約14.0%-16.0%重量的甘油單脂酸酯，約3.0%-5.0%重量的巴西棕櫚蠟，及約70.0%-80.5%重晶石。
本發明中一個較佳實施例為給反芻動物口服的一種持久釋放丸藥，能有效地在較長時內(可在六個月以內)保護該動物使不受蠕蟲、內寄生蟲、外寄生蟲和蜱蟎類的成蟲和幼蟲的侵染，該藥主要含約0.3%-10%重量的LL-F28249α，23-(O-甲基肟)LL-F28249α其衍生物，約10%-20%重量的甘油單脂酸酯，約3.0%-10%重量的巴西棕櫚蠟，及約70.0%-85%重量的硫酸鋇或重晶石細粉。一個最佳持久釋放的丸藥主要含約0.3%到小於1%重量的LL-F28249α，或23-(O-甲基肟)LL-F28249α，約14%-16%重量的甘油單硬脂酸酯，約3.0%-5.0%重量的巴西棕櫚蠟，及約78.01%-82.7%重量的硫酸鋇或重晶石細粉。
使人吃驚的是反芻動物的預防治療(在有些實施例中每天以超低的劑量)不僅防止和/或控制線蟲，內、外寄生蟲和蜱蟎類的侵染，而且與未處理動物或用其它驅蟲劑，抗菌劑或殺蟎劑處理的動物相比，使動物顯著地增加體重。
本發明持久釋放丸藥配方的製備，通過在重量基礎上混合，在低於蠟或混合物的熔點下，將約0.3%-10%活性組分，約3.0%-10%巴西棕櫚蠟，約10%-20%甘油單硬脂酸酯，及約70%-85%高密度，藥物學上和藥理上可接受的選自硫酸鋇和重晶石填充劑混合而成。這混合物可用於注模步驟，或用擠壓機或切片機將混合物做成小丸藥或片劑，然後用於注模。
混合後，混合物被排出，或被轉到成丸擠壓機，或直接裝到注模中，如果需要提高丸藥的均一性，可利用三段溫度分布使混合物成丸，此分布包含一進料部分，其溫度保持在低於蠟熔點下，一灼熱的過渡部分，溫度保持在高於蠟和硬脂酸酯的熔點以上，及一計量部分，溫度保持在低於蠟和硬脂酸的溫度以下，使用裝有粉碎機括片的直通模，設有粉碎機括片裝置保持在與計量部分溫度區域相似的溫度處。
所得的擠壓成形物質用空氣冷卻，然後切成所需大小的丸藥。為了提高均一性，還可以通過將活性組分、蠟、及硫酸鋇或重晶石細粉混合物壓成薄片，然後用商業上可得的裝置使成顆粒狀，或用蠟使做成顆粒。
所得的丸劑和/或乾燥的混合物材料被轉送到注模系統中，此系統用三段溫度分布操作，與成丸藥時所用的相似，即一進料相在軟化點下，一過渡相在軟化點之上，及一注入相，其中混合物在混合物軟化點溫度下注入模具。冷卻模具，使丸藥冷卻。生產出大丸藥從模具中取出，包裝。
以上過程中可用硫酸鋇或其它填充劑，及加重劑，較佳的是用重晶石細粉。在這個過程中用重晶石細粉片用純的USP級硫酸鋇有幾個優點，例如用重晶石可增加藥劑的硬度，減少大丸藥的磨損率。這樣，該大丸藥具有更具控制磨損率，及更持久釋放LL-F28249α，或23-(O-甲基肟)LL-F28249α的速率。
同樣，在處理含蠟，甘油單硬脂酸酯和活性組分的混合物時，發理用重晶石細粉比用USP級硫酸鋇所產生粘度減少，這樣更易常握的固體混合物。
用注模製備本發明的大丸藥避免對固體混合物的冷凍碾磨，及使用附加的潤滑劑，而這些在其它方法中常常是必需的，如固體的片劑模壓方法。另外一個優點是避免了保持在100目網篩上的微粒藥物的再循環。片劑模壓中模壓需100目篩孔的物質，因為用大於100目篩孔的材料將引起丸藥中活性組分的釋放加快。
用注模方法製備本發明LL-F28249α和23-(O-甲基肟)LL-F28249α丸藥的一個較佳方法中，操作周期可減少到約40-50秒。當操作條件溫度保持在140℃以下時，可保持預期的全部活力。顯得非常需要的實際操作條件包括a)增加溫度分布，即一個在室溫的筒及90℃噴嘴溫度;b)注射時間為20秒;c)注射壓力為0.5噸表壓;及d)20秒鐘的冷卻時間。這些條件導致在89-90℃之間的熔化溫度，遠遠低於分解的臨界溫度。時間/溫度研究表明，因為這傑出的穩定性，使熔渣的連續再循環成可能。注模生產大丸藥比澆注大丸藥有更高密度，更硬，及以更低的速率磨損(由甲醇崩解法測定)。而且，流變學數據表明重晶石的更好的「可溼性」，可能保護活性組分不受熱分解。
雖然注模方法是製備本發明的藥劑的較好方法，但須意識到用手模方法也可以製備該藥劑。也可看到丸藥的大小可以有顯著的變動，以適合所有反芻動物的大小和種類。用手工模製技術，單硬脂酸酯和巴西棕櫚蠟先行混合，熔融、加熱到105±5℃。在此熔化物中加入活性組分，混合成均勻的懸浮液。在此懸浮液中，邊加入重晶石邊不斷攪拌。混合直到獲得一種均勻的似乳油混合物。所得的物質注入模中，冷卻到室溫，去模。製備的丸藥的大小和重量當然是由所用模型的大小決定的。
以下非限制性實施例用來進一步解釋本發明。
實施例1製備接種物用來培養各種階段的菌種的一典型培養基是按下列配方製備的葡萄糖……1.0%糊精……2.0%酵母浸膏……0.5%NZ胺……0.5%碳酸鈣……0.1%水……足量……至……100%將此培養基滅菌，取100毫升此無菌培養基，置於瓶中，用長在瓊脂斜面上的藍灰色鏈黴菌NRRL15773(StreptomycesCyaneogriseusnoncyanogenusNRRL15773)的菌絲體碎片接種。在28℃，在旋轉搖床上劇然搖動此培養基，產生初級接種物。然後將它接種在1升此無菌培養基中，在28℃需氧培養48小時，產生二級接種物。
實施例2發酵按下列配方製備發酵培養基葡萄糖……1.0%大豆腖……1.0%糖漿……2.0%碳酸鈣……0.1%水……足量……至…100%將此培養基滅菌，取30升，用實施例1中製備的二級接種物1升接種。發酵在30℃進行，每分鐘通入30升無菌空氣流，反壓為8表壓，用葉輪以500rpm攪動91小時，收穫發酵後的漿狀物。
實施例3分離LL-F28249α取如實施例2製備的所收穫的發酵漿狀物共26升，用1500克硅藻土混合，過濾。菌絲體濾餅用5升水洗滌，齊去濾液及洗滌水。菌絲體餅與10升甲醇混合1小時，過濾，用5升甲醇洗滌。甲醇提取物和甲醇洗滌液合在一起，蒸發至大約1-2升的液體殘留物。此液體殘留物與兩倍於它體積的二氯甲烷混合半小時。分離二氯甲烷相，然後濃縮成漿，得27克粗產物。
27克粗產物溶於二氯甲烷和甲醇的混合物中，通過棉花和無水硫酸鈉過濾，然後蒸發，得7.0克油狀物。
將170克矽膠在含12.5%乙酸乙酯的二氯甲烷中攪成淤漿，裝入柱中使形成2.5×58釐米的柱。將油狀物溶解於含12.5%乙酸乙酯的二氯甲烷中，施加到柱上。用同樣的混合溶劑展開，流動相以1.3毫升/分鐘流下，收集每15分鐘流出的部分。在10次分級收集後，流速減到0.5毫升/分鐘，這樣1-10次分級收集為20毫升，均勻地降至約10毫升，級分11-98為大約7毫升，在第99級分時，流速增加到在10分鐘內，得25毫升流出液，總共收集到105個極分。用薄層色譜法在乙酸乙酯∶二氯甲烷(1∶1)中測定這些級分。
將級分55-62合在一起，蒸發，得150毫克含LL-F28249α和β的固體。
用以80%(v/v)甲醇水溶液展開的反相柱(Whatman，2.2×50釐米)，通過製備型HPLC，用色譜法分離含LL-F28249α和β的150毫克的固體。收集流速為約10毫升/分鐘，2分鐘的流出液。
將級分58-69合在一起，蒸發去甲醇，加入叔丁醇，混合物冷凍乾燥，得60毫克純LL-F28249α。
此化合物可以以下分子式說明
實施例45-O-叔丁基二甲基甲矽烷基LL-F28249α在500毫升CH2Cl2中，在20℃，氮氣氛下，加入70克LL-F28249 α與82.04克咪唑攪拌。然後，在5分鐘中加入含43克叔丁基二甲基甲矽基氯的400毫升CH2Cl2，1小時後，用高效液相色譜法(HPLC)測定反應是否完全，具體地是採用Whatman Partisi 1CCS/C8，快速分析柱，以1毫升/分鐘流速，在10分鐘時間內用50% CH3CN/50%水以曲線梯度方法展開。另加入3克叔丁基二甲基甲矽烷基氯，3小時後，組合物為92.3%產物，0.3%LL-F28249 α及1.16%二甲矽烷基化的物質。混合物用CH2Cl2稀釋，倒入2升水中。分離CH2Cl2層。水相用2升CH2Cl2萃取，合併有機層並用Na2SO4乾燥。CH2Cl2在真空中蒸發，產生166克標題化合物，用質譜方法和核磁共振(NMR)譜法鑑定證實。
實施例55-O-叔丁基二甲基甲矽烷基-23氧代LL-F28249α在5升幹CH2Cl2中，在N2氣氛下攪拌116克5-O-叔丁基兩甲基甲矽烷基化LL-F28249 α，並在22℃加入540克NaOAc，再加172.5克吡啶鎓氯鉻酸鹽(PCC)。1小時後，由於HPLC測試反應未完全，另加入15克PCC2小時後，再加入10克PCC，攪拌反應共5小時。混合物注入6升冰水混合物中，分離CH2Cl2層。水層用CH2Cl2萃取，合併CH2Cl2層並用水洗滌及乾燥(Na2SO4)。CH2Cl2在真空中蒸發，產生197.8克粗產物，溶於2升Et2O中並過濾。Et2O溶液用水洗滌(2×1000毫升)，乾燥(Na2SO4)，並且蒸發至乾燥，產生60克標題化合物，用質譜方法和NMR光譜學方法鑑定證實。
上述步驟中吡啶鎓氯鉻酸鹽用吡啶重鉻酸鹽替代，也可得標題化合物。
實施例623-氯代-LL-F28249α在1.5升MeOH中，通過加溫使60克5-O-叔丁基二甲基甲矽烷基-23-氧代-LL-F28249 α溶解，在0℃時，加入含30克對甲苯磺酸的300毫升MeOH液。混合物攪拌3小時，倒入6升飽和NaHCO3溶液的6升水中。攪拌後，用4升EtOAc萃取混合物，分層。水相用NaCl使之飽和，用6升EtOAc萃取兩次。第一次的EtOAc萃取液層用飽和NaCl溶液洗滌，並與其它EtOAc萃取液合併，乾燥(Na2SO4)。EtOAc在真空中蒸發，得148.1克黑暗色殘餘物。粗產物通過HPLC色譜法分離，HPLC系在1200克SiO2上，用含1%異丙醇的CH2Cl2洗脫，用紫外線標測器/254mM過濾器控制。將級分39-42合在一起，蒸發至乾燥，得12.65克標題化合物，分析如下C36H50O8分析計算值C，70.79;H，8.25實測值C，70.33;H，8.31標題化合物進一步用質譜法和NMR光譜法鑑定證實。
實施例723-(O-甲基肟)LL-F28249α室溫下，在930毫升幹二氧雜環己烷中，加入70克23-氧代-LL-F28249 α，11.8克NaOAc，11.8克CH3ONH2·HCl和2.1毫升HOAc。混合在N2氣氛下攪拌3天，在HPLC測定無起始物質後，在真空中蒸發去650毫升二氧雜環己烷。殘餘物倒入5升水中，產物用CH2Cl2(4×2升)萃取。合併的萃取物用水洗滌，乾燥(Na2SO4)，蒸發至幹。殘留物溶於1500毫升Et2O中，溶液用水洗滌，乾燥(Na2SO4)，蒸發至幹。這樣得11.84克標題化合物，用質譜法和NMR光譜法鑑定證實。它還可分析如下
C37H53O8N·1.5H2O的分析計算值C，66.64;H，8.46;N，2.10實測值C，66.82;H，8.13;N，2.32此化合物可用下圖表示
實施例8持久釋放丸藥的製備根據下列配方製備藥劑組分%23-(O-甲基肟)LL-F28249α(89%實測)0.34甘油單硬脂酸酯15.95巴西棕櫚蠟3.96重晶石79.75將單硬脂酸酯和巴西棕櫚蠟混合，溶融，加熱至105±5℃。在這個熔融物中加入活性組分，混合成均勻的懸浮液。在懸浮液中，邊加入重晶石，邊不斷攪拌，直至獲得似乳油狀混合物，不停止攪拌。所得物質倒入模型中，冷卻至室溫，去模。所得丸藥重量在51到53克之間。每個藥劑兩端呈半球形，厚度為3/4英寸，寬度為7/8英寸，長度為3.0英寸。
甘油單硬脂酸酯規格表明這物質應是白色粉末，或念珠狀，基本上無外來物質。顆粒大小不應超過美國標準篩子第20號的5%，酸值2-3.0，含溼量不超過1.5%。總共的單硬脂酸酯應超過40%，但游離酸不應超過1.5%。
巴西棕櫚蠟應為黃色粉末，基本無外來物質。100%的蠟應能通過美國標準篩子第80號。蠟的酸值應為2.0-6.0，丙酮可溶性樹脂狀物質在15℃不應超過5.0%。
重晶石應為灰色粉末，基本上無外來物質，堆積密度大約為150英磅/立方英尺。粒子的大小須是不超過4%能留在美國標準篩子第200號上，不少於80%能通過美國標準篩子第325號。對可接受產物的化學分析為;Ba SO490-94%;SiO27-8%，及Fe2O30.1-0.2%。本發明的藥劑的密度應在2.35到2.6±0.6之間。
其它丸藥組合物以同樣方法製備，在表1中顯示。
實施例9本發明丸藥的磨損率的決定在表1中命名為A，B和C的藥物釋放率由最初檢測該丸藥的化合物23-(O-甲基肟)LL-F28249α的量決定，該丸藥系被選擇來測試的小牛服用。這些測試表明用來評價的藥劑含0，713，1035，或1260毫克23-(O-甲基肟)LL-F28249α。將50-53克重丸藥分為二半，稱量，口服，每頭小牛半顆。處理過的小牛然後按傳統的或標準養牛過程那樣圈養，餵食及飲水。所有動物的食譜為標準牛配給量。
在口服後70，119和167天後，解剖每個處理組的四頭動物，重新找到丸藥，檢查其表面為粗糙的還是光滑的，然後稱量。結果記錄下來，評估。每次處理的第二組動物在處理後119天後，重複上面步驟，在每個處理組的第3組動物處理167天後再次重複此步驟。
為方便起見，從每個處理組，每組四頭小牛所得的結果平均，列在表2中。
實施例10持久釋放丸藥配方的製備，及它對胃腸蠕蟲和微小牛蜱控制的評估主要含23-(O-甲基肟)LL-F28249α，甘油單硬脂酸酯，巴西棕櫚蠟和重晶石的持久釋放丸藥，是通過在混合器中，將各種組分的合適量混合，保持約80℃10分鐘而製備的。
混合後，混合物排出，移到成丸擠壓機上，和/或直接排入至注模。
如果進行成丸形生產，混合物用設有20號篩孔破碎括片的直通1/8英寸模，具有進料部分(50-60℃)，熱過渡部分(100-110℃)，和冷卻計量部分(50-60℃)的鐘狀溫度分布圖加工成丸形。模的溫度保持在55-60℃。所得一條擠壓出物質用空氣冷卻(吹向模開口的空氣流)，用熱面切削器切成1/4″英寸長的丸藥。
在直接送入幹混合物的情況下，可用如振蕩篩(Vibra-Screen)的進料系統，用熱流道系統和一關閉噴嘴將物質移到注模中去。注模的操作條件應與上述成丸操作所述的鐘狀溫度分布一致。即進料時間(10-20秒)，注入時間(10-20秒)，注入壓力0.5噸表壓，及維持時間(5-10秒)，所產的丸藥每個重51克，密度為2.5g/cc，由DelamerPress測量的硬度為77-80千克。
用這種方法製備的丸藥如以下所示。
通過注模方法製備的藥劑組成重量%組分丸藥IJKL23-(O-甲基肟)LL-F28249α0.03.244.846.46甘油單硬脂酸酯14.4014.4014.4014.40巴西棕櫚蠟3.603.603.603.60重晶石82.2078.7677.1675.54(重量單位為克)23-(O-甲基肟)028.4942.1526.49
LL-F28249α甘油單硬脂酸脂125.20125.28125.2859.04巴西棕櫚蠟31.3231.3231.3214.76重晶石713.60685.21671.29309.71為評估以上組合物對侵染牛的胃腸蠕蟲和牛蜱(在牛體內或牛身上)的控制，進行了以下測試。
52頭abedeenangus小牛(小於1歲)及在牧場上，被選擇來評述上面所描述並命名為I，J，K和L的丸藥。
依次含0，713，1035，或1260毫克23-(O-甲基肟)LL-F28249α的藥，其一半的重量為約25克。
在處理的前一周，對小牛上的兩類不同的線蟲卵計數，並估定蜱侵染的嚴重程度。這些動物耳上作標籤，稱重，並分入四個處理組中，每組12頭牛。第5組4個動物也在耳上作標籤並稱重。這組是用來研究解剖後重新找到的丸藥再用到其它動物上的可用性。
對不同線蟲卵的計數在一周，二周，1月及連續5個月進行，或者直到不須作適當的控制為止。
在以下表3和表4中獲得的數據表明，在測試的前67天不處理的對照動物，在這部分的整個測試階段中一直受嚴重的侵染。這些動物然後用左旋咪唑治療，可見線蟲侵染的顯著降低。接受本發明的含713到1260毫克23-(O-甲基肟)LL-F28249α丸藥處理的動物，在處理後28天到167天基本上無線蟲侵染。
在用含1035毫克到1260毫克23-(O-甲基肟)LL-F28249α的丸藥處理後一周內，可清除蜱。接受含713毫克活性組分的丸藥處理的動物用二周消除蜱。對照動物不得不浸入殺蜱溶液以防止死亡。治療動物97天保持無蜱，對照組動物直到寒冷的氣候到來才能消除蜱的侵染。
實施例11持久釋放的丸藥對牛的癢蟎疥癬的預防控制的評估每1/2丸藥含375毫克23-(O-甲基肟)LL-F28249α，通過實施例10中所述的注模技術製備。製備的丸藥具以下組分。
組分重量%克數23-(O-甲基肟)LL-F28249α1.531.61甘油單硬脂酸酯15.7316.52巴西棕櫚蠟3.934.12重晶石78.8182.75100.00105.00接受丸藥的牛給予50克丸藥的一半，含750毫克23-(O-甲基肟)LL-F28249α。
選擇雜種的小母牛測試。動物置於乾燥的地方，並起用健康方案以防止普通的疾病。它們耳上做標籤，並置於牲畜欄中枷內，以防止舔上疥癬感染。
然後將活蟎接到每頭動物身上。在嚴重感染的供體動物上取下片斷，移到候選動物上。
從未置於牲口棚的動物中隨機選四個未感染動物。這四個動物然後接受丸藥處理，在一周後受感染。在隨後兩周內，共六次，把蟎放有這些動物的每一頭上。
小心防止動物中的交叉汙染。在每周間隙，刮下蟎，並在當天評估。
蟎按階段用20-30x解剖顯微鏡計數，375毫克重丸藥使接受6次蟎接種的牛防止了癢蟎疥癬侵染。
所獲數據在下面表5中顯示。
實施例12含23-(O-甲基肟)LL-F28249α的丸藥對牛上的吹吮蝨和秋家蠅的評估這些評估中用的丸藥是由實施例10中所述的注模技術製備。製備的藥劑有以下組分。
藥劑ⅠⅡⅢ組分重量%克數重量%克數重量%克數23-(O-甲基肟)1.626.643.2428.494.8442.15LL-F28249α甘油單硬脂酸酯14.4059.0414.40125.2814.40125.28巴西棕櫚蠟3.6014.763.6031.323.6031.32重晶石80.38329.5678.76685.2177.16671.29為了便於評估，藥劑剖成兩半丸藥Ⅰ含375毫克AI/半粒丸藥丸藥Ⅱ含750毫克AI/半粒丸藥丸藥Ⅲ含1125毫克AI/半粒丸藥AI＝活性組分在處理前，給所有的動物稱重，耳上作標籤，並檢查蝨子。通過肉眼觀察以下部位的2-3釐米的毛髮處來估計蝨的數目耳朵，眼睛，鼻口部，下巴，胸部，頸部垂肉，肩部，背脊，尾部，及髖部。動物隨機地被分到每個含5頭動物的3個處理組及一個對照組中去。組Ⅰ，Ⅱ，和Ⅲ均給予含實驗化合物的丸藥，而組Ⅰ不處理。所有的動物圈在2英畝地內，能自由地接近苜蓿乾草及礦物質補充物。在測試中第7天，第14天，第28天及兩月一次，估算動物上的蝨數。
在人工燈光下，牛關在總閘門內估計蝨數。
在第7、28天及隨後每月取排洩物試樣(約10克)，做線蟲分析，試樣貯存在-10℃。
所有動物的丸藥處理組(375毫克，750毫克，及1125毫克)均在處理一周後，顯示藍牛蝨，牛管蝨(Solenoptescapillatus)水平的顯著降低。
在100天內，在所有藥劑處理牛上可見吸吮蝨(Silenoptescapillatus)的完全控制。
實施例13對慢釋放丸藥在較長時間內對牛皮蠅屬(Hypodermaspp.)控制的評估在此評估中用的藥劑是用上面實施例10中所述的注模方法製備的。所評估的丸藥具以下組成組分重量克數23-(O-甲基肟)LL-F28249α1.63.2甘油單硬脂酸酯14.428.8巴西棕櫚蠟3.67.2重晶石80.4160.8100.0200.0在這些測試中，自然感染第一齡期皮蠅(Hypodermaspp)的雜種牛隨機地分入四頭牛一組的處理組中。一組作為未處理對照，另一組接受50-54克重丸藥的一半，含375毫克23-(O-甲基肟)LL-F28249α。半粒丸藥用一種槍(ballinggun)使小牛應用。
在服藥後，在每周的基礎上通過肉眼觀察及觸診小牛背來確證牛蠅的存在，以決定藥效。用23-(O-甲基肟)LL-F28249α處理對皮蠅(Hypodermaspp.)完全有效。在72天的試驗中，接受含375毫克上述化合物的藥劑處理的牛背上不出現蠅，未處理對照動物在58天內平均為12(在4＝19之間)蠅/頭，及72天內為8.8。
實施例14含75到1875毫克LL-F28249α的丸藥對牛的線蟲和蜱的延長期控制的評估。
評估用藥按下列步驟製備混合單硬脂酸酯及巴西棕櫚蠟，熔化並加熱至105±5℃。再加入活性組分，並混合成均一的懸浮液。在懸浮液中，邊不停攪拌邊加入重晶石，繼續攪拌直至得均勻乳油狀混合物。得到的物質倒入模中，冷卻到室溫，並去模。得到的丸藥重量在51到53克。每個藥劑兩端為半圓形，厚3/4英寸，寬7/8英寸，長3.0英寸。
半粒丸藥(重25.5到27.5克)給牧場上牛服用。根據120天內內及外寄生蟲的數目來評估藥效。
組分重量%克數重量%克數重量%克數LL-F28249α0.345.11.6925.358.44126.6甘油單硬脂酸酯15.95239.2515.73235.9514.65219.75巴西棕櫚蠟3.9659.403.9358.953.6654.90重晶石79.751196.2578.651178.7573.251098.75丸藥Ⅰ每半粒含75毫克LL-F28249α.丸藥Ⅱ每半粒含375毫克LL-F28249α，藥劑Ⅲ每半粒含1875毫克LL-F28249α。
在此測試中，放牧動物隨機地分入5個動物1組的組中去，並在耳上做標籤。在測試前，檢測所有動物的排洩物，以確定每克測試動物排洩物中線蟲卯的平均數目。所有的小牛似乎都是每克排洩物含2700個到3000個卵。測試開始是所有動物接受重為25到27克的半粒丸藥。對照動物在測試開始，及在第62天，接收3.75毫克/千克體重的左旋咪唑，其它處理組接受如上述依次含75，375或1875毫克LL-F28249α的一半藥劑Ⅰ，Ⅱ或Ⅲ。動物然後置於單個圍場內，並在維持達120天的時期內，間歇檢查。在處理後第7，16，32，62，91及106天，從每個動物處收集排洩物，並確定每克排洩物中線蟲卵的平均數，所得數據表明給予75毫克重的丸藥減少了線蟲卵數，並且線蟲的水平比用左旋咪唑兩次處理的低。375毫克及1875毫克丸藥在一周內減少99.9%的線蟲卵，並且對線蟲的控制達99.9%。接受375和1875毫克丸藥的動物，在統計上很明顯，具更好的重量表現。接受75毫克丸藥的動物的重量與左旋咪唑控制的一致。
表3對含23-(O-甲基肟)LL-F28249alpha的丸藥對牛線蟲侵染的延長期控制評價處理後0mg丸藥713mg丸藥1035mg丸藥1260mg丸藥天數動物平均動物平均動物平均動物平均WB/T1EPGWB/T1EPGWB/T1EPGWB/T1EPG012/1251912/1287312/1255212/125812811/11104112/12012/12012/1204411/11146512/12012/12010/1006510/10＃204312/12012/12010/100977/71088/808/806/601167/73087/8258/806/601403/33174/4255/503/301672/37174/403/501/3100WB/T1＝所用丸藥/動物總數＃在測試的第67天用左旋咪唑(3.75mg/kg)處理的對照動物EPG＝每克排洩物中線蟲卵
表5每頭動物上平均活蟎數(癢蟎屬)處理後天數處理處理前一天816222934434756含375mg23-(O-甲基肟)XX--000000LL-F28249alpha丸藥XX--000000XX--000000XX--000000未處理對照組274130421757285464停止12314950403218停止6966392062714161414391591616XX＝測試開始一周後感染，然後發現蟎群不能在丸藥處理動物上生長，計數根據2刮出物/動物/試樣階段-＝蟎群不能生長表6含75，375和1875毫克LL-F28249alpha的藥劑對牛上線蟲控制的評估每克排洩物中線蟲卵平均數處理＃小牛0天762119左旋咪唑(推薦劑量)左旋咪唑10(2850)5(99.9%)7551460天及第62天丸藥Ⅰ(75mg)10(2850)940(67%)2055丸藥Ⅱ(375mg)10(2850)0(100%)05＊丸藥Ⅲ(1875mg)10(2850)0(100%)05＊＊＊有25EPG的動物＊＊用藥劑處理的6個動物無EPG，未處理的4個動物具EPG值的正值表7LL-F28249丸藥對牛中線蟲的藥效線蟲控制%處理＃小牛血矛線蟲胃線蟲古柏線蟲結節線蟲75mg丸藥1092100025375mg丸藥101001009799+1875mg丸藥1010010099+100左旋咪唑1023257295937117控制的蟲的平均數(57天前去蟲)
表8在第一天及第62天接受左旋咪唑的牛，及接受含LL-F28249alpha，並且每天輸送LL-F28249alpha0.37mg/頭/日，1.96mg/頭/日或3.76mg/頭/日的牛的增重從第一天起平均增重(kg)處理第7天第62天第110天左旋咪唑7021(第1天及第62天3.75mg/kg)丸藥Ⅰ75mg5724(0.0031mg/kg/day)丸藥Ⅱ375mg61137(0.016mg/kg/day)丸藥Ⅲ1875mg81540(0.031mg/kg/day)
權利要求
1.一種反芻動物口服的持久釋放丸藥，能在延長的時間內有效地保護反芻動物使其不受蠕蟲、內寄生蟲、外寄生蟲和蜱蟎類的成蟲和幼蟲的侵染，其特徵在於它含有約0.3%-10%重量的LL-F28249α，23-(0-甲基肟)LL-F28249α或其衍生物，約10%-20%重量的甘油單硬脂酸酯，約3.0%-10%重量的巴西棕櫚蠟，及約70.0%-85%重量的硫酸鋇或重晶石細粉。
2.根據權利要求1所述的持久釋放丸藥，其特徵在於它含有約1.0%-8.5%重量所述的23-(O-甲基肟)LL-F28249 α或LL-F28249 α，約14%-16%重量的甘油單硬脂酸酯，約3.0%-5.0%重量的巴西棕櫚蠟，及約70%-80%重量的重晶石。
3.一種持久釋放的丸藥，能有效地控制或防止反芻動物受蠕蟲的侵染，其特徵在於它含有約0.3%-1.0%重量的LL-F28249 α，或23-(O-甲基肟)LL-F28249 α，約14%-16%重量的甘油單硬脂酸酯，約3.0%-5.0%重量的巴西棕櫚蠟，及約78.01%-82.7%重量的硫酸鋇或重晶石細粉。
4.一種給反芻動物的單次服藥治療方法，以保護它們在120-180天中，不受蠕蟲、內寄生蟲、外寄生蟲及蜱蟎類的侵染，其特徵在於它包含給尋求保護的該動物口服一種持久釋放的丸藥，該丸藥能以約0.04毫克/頭/日到15.63毫克/頭/日的量，連續釋放LL-F28249 α或23-(O-甲基肟)LL-F28249 α至該反芻動物的消化道。
5.根據權利要求4所述的方法，其特徵在於該丸藥以約0.2毫克/頭/日到10.4毫克/頭/日的量，把LL-F28249 α或23-(O-甲基肟)LL-F28249 α釋放入該反芻動物的消化道。
6.一種在167天期間內防止和抑制牛受線蟲和蜱侵染的方法，其特徵在於它包括給該牛口服持久釋放的丸藥，該丸藥含分散於一種混合物中的75毫克-1875毫克LL-F28249 α或23-(O-甲基肟)LL-F28249 α，混合物含約14.00%-16%重量的甘油單硬脂酸酯，約3.00%-5.0%重量的巴西棕櫚蠟，及約70.00%-80.5%重量的硫酸鋇或重晶石細粉。
7.根據權利要求6所述的方法，其特徵在於所述丸藥能以每天0.001毫克/千克動物體重到0.075毫克/千克動物體重的量，將LL-F28249 α或23-(O-甲基肟)LL-F28249 α釋放入該反芻動物的消化道。
8.一種對反芻動物的外寄生蟲的全身性控制，其特徵在於它包含對該動物口服一種持久釋放的丸藥，該丸藥含殺蟲有效量的LL-F28249 α，23-(O-甲基肟)LL-F28249 α或其衍生物，它能持續釋放全身性有效量的LL-F28249 α，23-(O-甲基肟)LL-F28249 α或其衍生物至所治療動物的瘤胃中。
9.根據權利要求8所述的方法，其特徵在於該丸藥含約375毫克到1875毫克LL-F28249 α或23-(O-甲基肟)LL-F28249 α，約14%-16%重量的甘油單硬脂酸酯，約3%-5%重量的巴西棕櫚蠟，及約70%-80%重量的重晶石細粉。
10.一種減少或防止線蟲、內寄生蟲、外寄生蟲和蜱蟎類在它們的感染性階段侵染反芻動物，使所述動物對牧場的汙染，其特徵在於它包括給該反動物口服一緩慢釋放的丸藥，能在較長時間內有效地保護該反 動物不受蠕蟲、內寄生蟲、外寄生蟲和蜱蟎類的侵染，該丸藥約含0.3%-10%重量的LL-F28249 α或23-(O-甲基肟)LL-F28249 α約10%-20%重量的甘油單硬脂酸酯，3.0%-10%重量的巴西棕櫚蠟，及70.0%-85%重量硫酸鋇或重晶石細粉，這樣，所述的處理方法殺滅內寄生蟲和外寄生蟲，和/或抑制它們的生殖循環，及消除處理動物排洩物中所述寄生蟲的卵。
全文摘要
本發明涉及一種持久釋放的丸藥組合物，含從LL-F28249α，23-(O-甲基肟)-LL-F28249α及其衍生物中選出的化合物的預防有效量，提供一種在延長時間內防止反芻動物受線蟲、蜱蟎類和內、外寄生蟲的侵染，及在此期間還能消除治療中出現的寄生蟲的起始群體。本發明還涉及一種通過給反芻動物口服一種持久釋放丸藥，全身性地控制外寄生蟲對該動物的侵染的方法，該丸藥含殺蟲有效量的LL-F28249α，23-(O-甲基肟)-LL-F28249α或其衍生物，它能持續地將全身性有效量的LL-F28249α，23-(O-甲基肟)-LL-F28249α或其衍生物釋放入處理動物的瘤胃中。
文檔編號A61K31/7036GK1045228SQ9010095
公開日1990年9月12日 申請日期1990年2月21日 優先權日1989年2月28日
發明者歐文·博伊登·伍德, 裡查德·博德曼·圖特希爾, 約瑟夫·查爾斯·迪茨 申請人:美國氰胺公司