用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法
2023-08-05 11:37:01 2
專利名稱：用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法
技術領域：
本發明涉及一種測定方法，具體的說是一種用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法。
背景技術：
牧草被草食動物採食或人為剪割後，常常表現出「再生性」，這是牧草維持自身生存，抵禦草食動物傷害的最基本的生物學特性之一，其對維持草場生產、提高產草量也都有重要的意義，牧草去葉後所留的不同茬高，會對牧草的再生產生重要的影響。不同的茬高會造成的地上部分貯存的有機物質的不同，從而會對牧草的再生產生不同的影響。因為牧草再長的本質問題是一個利用能量和物質來製造新生有機物質的過 程，然而，牧草去葉不但會嚴重抑制其光合作用，減少光合產物的供應，甚至在去葉嚴重的情況下，會導致光合作用完全中斷，所以，由於去葉後所留茬高差別所造成的體內貯存的有機產物量的差別，有可能會對其再生產生非常重要的影響。有效排除由茬高所引起的體內貯存的有機產物量的差別對再生的影響，才能從本質上反映不同茬高黑麥草的再生能力的強弱，但如何有效地檢測到，這種排除茬高所造成的體內貯存的有機產物量的差別對再生的影響後，不同茬高多花黑麥草再生能力的強弱，至今未見報導。尋找一種有效的方法，來檢測不同茬高多花黑麥草，由非茬高因素所誘導的再生能力的強弱，對研究牧草的再生具有重要的意義，然而至今還未見關於這方面具體測量方法的報導。
發明內容
本發明針對上述問題的不足，提供用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法。本發明為解決上述問題所採用的技術方案是
一種用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法，包括以下步驟
步驟一選取生長一致的2周齡多花黑麥草108株，以每盆6株植入18個相同的花盆內，花盆內裝有混合基質，按重量份數比混合基質由3份蛭石和I份草炭土組成，在平均溫度為25°C，每天平均光照為8小時條件下，培養70天後，將這18盆多花黑麥草隨機分為2組，每組9盆，即試驗組a和試驗組b，再把試驗組a和試驗組b分別隨機分為al、a2、a3亞組和bl、b2、b3亞組，每亞組3盆；剪去試驗組a和試驗組b中的多花黑麥草葉片，a組和b組分別留不同茬高；
直接取試驗亞組al和bl，或者將試驗組a和b中已剪去葉的多花黑麥草繼續培養並剪葉後取試驗亞組al和bl，培養和剪葉方法為日均溫度20°C條件下培養，每隔6天剪掉葉片一次，連續剪葉N次，a組和b組每次剪過之後分別與之前留相同茬高；
將剪葉後的試驗亞組al和bl的根與茬分離，得到多花黑麥草茬，將多花黑麥草茬放入75 V的烘乾箱內，烘乾，得到每盆多花黑麥草茬烘乾物，然後用電子天平測每盆多花黑麥草茬烘乾物質量，分別得到試驗亞組al和試驗亞組bl的茬生物量Ra和Rb，備用；
步驟二 將試驗亞組a2、a3和b2、b3中多花黑麥草在溫度為20_25°C條件下培養，6天後，在步驟一所留茬高的位置上剪掉新生的多花黑麥草葉片，得到多花黑麥草新生葉，將試驗亞組a2和b2中的多花黑麥草新生葉送入75°C的烘乾箱內，烘乾，得到每盆多花黑麥草新生葉烘乾物，然後用電子天平測每盆多花黑麥草新生葉烘乾物質量，分別得到試驗亞組a2和b2新生葉生物量La和Lb，備用；
步驟三利用測得的多花黑麥草茬生物量Ra、Rb，新生葉生物量La、Lb，根據公式RIa =
JaTL·
—X 100%和RIb = -- X 100%計算多花黑麥草再生能力指數RIa和RIb的大小，備用；hixRh
步驟四用酶聯免疫法測量步驟二中的試驗亞組a3和b3新生葉片的玉米素核苷含量， 得到試驗亞組a3和b3新生葉玉米素核苷含量Za和Zb，備用；
步驟五比較RIa和RIb的大小或Za和Zb的大小，值較大者就說明該組黑麥草的再生能力較強。如果當RIa大於RIb時，Za大於Zb ;當RIa小於RIb時，Za小於Zb，則說明用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法為有效方法。本發明的有益效果為
a、本發明能有效測定不同茬高多花黑麥草再生能力的強弱，對研究牧草的再生具有重要的意義；
b、本發明的測量方法簡單，易於操作，便於廣泛應用，並且實用性強；
C、本發明所需儀器簡單，成本低廉，提高了經濟效益。
具體實施例方式下面結合具體實施方式
對本發明做進一步的闡述。一種用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法，包括以下步驟 步驟一選取生長一致的2周齡多花黑麥草108株，以每盆6株植入18個相同的花盆
內，花盆內裝有混合基質，按重量份數比混合基質由3份蛭石和I份草炭土組成，在平均溫度為25°C，每天平均光照為8小時條件下，培養70天後，將這18盆多花黑麥草隨機分為2組，每組9盆，即試驗組a和試驗組b，再把試驗組a和試驗組b分別隨機分為al、a2、a3亞組和bl、b2、b3亞組，每亞組3盆；剪去試驗組a和試驗組b中的多花黑麥草葉片，a組和b組分別留不同茬高；
直接取試驗亞組al和bl，或者將試驗組a和b中已剪去葉的多花黑麥草繼續培養並剪葉後取試驗亞組al和bl，培養和剪葉方法為日均溫度20°C條件下培養，每隔6天剪掉葉片一次，連續剪葉N次，a組和b組每次剪過之後分別與之前留相同茬高；
將剪葉後的試驗亞組al和bl的根與茬分離，得到多花黑麥草茬，將多花黑麥草茬放入750C的烘乾箱內，烘乾，得到每盆多花黑麥草茬烘乾物，然後用電子天平測每盆多花黑麥草茬烘乾物質量，分別得到試驗亞組al和試驗亞組bl的茬生物量Ra和Rb，備用；
步驟二 將試驗亞組a2、a3和b2、b3中多花黑麥草在溫度為20_25°C條件下培養，6天後，在步驟一所留茬高的位置上剪掉新生的多花黑麥草葉片，得到多花黑麥草新生葉，將試驗亞組a2和b2中的多花黑麥草新生葉送入75°C的烘乾箱內，烘乾，得到每盆多花黑麥草新生葉烘乾物，然後用電子天平測每盆多花黑麥草新生葉烘乾物質量，分別得到試驗亞組a2和b2新生葉生物量La和Lb，備用；
步驟三利用測得的多花黑麥草茬生物量Ra、Rb，新生葉生物量La、Lb，根據公式RIa =
ΓT Jk
X 100%和RIb = -- X 100%計算多花黑麥草再生能力指數RIa和RIb的大小，備用；EaRb
步驟四用酶聯免疫法測量步驟二中的試驗亞組a3和b3新生葉片的玉米素核苷含量，
得到試驗亞組a3和b3新生葉玉米素核苷含量Za和Zb，備用；
步驟五比較RIa和RIb的大小或Za和Zb的大小，值較大者就說明該組黑麥草的再生
能力較強。如果當RIa大於RIb時，Za大於Zb ;當RIa小於RIb時，Za小於Zb，則說明用
玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法為有效方法。實施例I
一種用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法，包括以下步驟
步驟一選取生長一致的2周齡多花黑麥草108株，以每盆6株植入18個相同的花盆內，花盆內裝有混合基質，按重量份數比混合基質由3份蛭石和I份草炭土組成，在平均溫度為25°C，每天平均光照為8小時條件下，培養70天後，將這18盆多花黑麥草隨機分為2組，每組9盆，即試驗組a和試驗組b，再把試驗組a和試驗組b分為隨機分為al、a2、a3亞組，和bl、b2、b3亞組，每亞組3盆；剪去試驗組a和試驗組b中的多花黑麥草葉片，試驗組a和試驗組b分別留Icm和5cm的茬高，記為剪葉第I次，在第I次剪葉後立即取試驗亞組al和bl，將根與茬分離，得到多花黑麥草茬。將多花黑麥草茬送入75°C的烘乾箱內，烘乾，得到每盆多花黑麥草茬烘乾物，然後用電子天平測每盆多花黑麥草茬烘乾物質量，分別得到試驗亞組al和試驗亞組bl的茬生物量Ra和Rb，備用；
步驟二 將試驗亞組a2、a3和b2、b3中多花黑麥草在溫度為25°C條件下培養，6天後，在步驟一所留茬高的位置上剪掉新生的多花黑麥草葉片，得到多花黑麥草新生葉，將試驗亞組a2和b2中的多花黑麥草新生葉送入75°C的烘乾箱內，烘乾，得到每盆多花黑麥草新生葉烘乾物，然後用電子天平測每盆多花黑麥草新生葉烘乾物質量，分別得到試驗亞組a2和b2新生葉生物量La和Lb，備用；
步驟三利用測得的多花黑麥草茬生物量Ra、Rb，新生葉生物量La、Lb，根據公式RIa =
TI Si
—X 100%和RIb = — X 100%計算多花黑麥草再生能力指數RIa和RIb的大小，備用；EaEb
步驟四用酶聯免疫法測量步驟二中的試驗亞組a3和b3新生葉片的玉米素核苷含量，得到試驗亞組a3和b3新生葉玉米素核苷含量Za和Zb，備用；
步驟五比較RIa和RIb的大小，Za和Zb的大小。值較大者就說明該組黑麥草的再生能力較強。如果當RIa大於RIb時，Za大於Zb ;而當RIa小於RIb時，Za小於Zb，則說明可用再生葉中玉米素核苷含量的高低來間接反映黑麥草再生能力的強弱；
結果表明RIa % 81. 30%, RIb 為 70. 19%, Za 為 234. 51ng/g, Zb 為 150. 21 ng/g ；RIa 比RIb高15. 82%，說明在I次去葉的情況下，留有茬高為Icm的多花黑麥草比留茬高為5cm的多花黑麥草具有更強的再生能力；Za比Zb高56. 1%，證明在I次去葉的情況下，用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法為有效方法。實施例2
用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法，包括以下步驟步驟一選取生長一致的2周齡多花黑麥草108株，以每盆6株植入18個相同的花盆內，花盆內裝有混合基質，按重量份數比混合基質由3份蛭石和I份草炭土組成，在平均溫度為25°C，每天平均光照為8小時條件下，培養70天後，將這18盆多花黑麥草隨機分為2組，每組9盆，即試驗組a和試驗組b，再把試驗組a和試驗組b分為隨機分為al、a2、a3亞組，和bl、b2、b3亞組，每亞組3盆；剪去試驗組a和試驗組b中的多花黑麥草葉片，試驗組a和試驗組b分別留Icm和5cm的茬高，將試驗組a和b中已剪去葉的、且留茬高分別為Icm和5cm的多花黑麥草在日均溫度為20°C條件下培養，每隔6天剪掉葉片一次，連續剪葉2次，a組和b組所留茬高同樣分別為Icm和5cm，記為剪葉第3次，，在第3次剪葉後立即取試驗亞組al和bl，將根與茬分離，得到多花黑麥草茬。將多花黑麥草茬送入75°C的烘乾箱內，烘乾，得到每盆多花黑麥草茬烘乾物，然後用電子天平測茬烘乾物質量，分別得到試驗亞組al和試驗亞組bl的茬生物量Ra和Rb，備用；
步驟二 將試驗亞組a2、a3和b2、b3中多花黑麥草在溫度為25°C條件下培養，6天後，在步驟一所留茬高的位置上剪掉新生的多花黑麥草葉片，得到多花黑麥草新生葉，將試驗亞組a2和b2中的多花黑麥草新生葉送入75°C的烘乾箱內，烘乾，得到每盆多花黑麥草新生葉烘乾物，然後用電子天平測新生葉烘乾物質量，分別得到試驗亞組a2和b2新生葉生物量La和Lb,備用；
步驟三利用測得的多花黑麥草茬生物量Ra、Rb，新生葉生物量La、Lb，根據公式RIa =
TJ- 7
~ X 100%和RIb = Ir X 100%計算多花黑麥草再生能力指數RIa和RIb的大小，備用；RaBh
步驟四用酶聯免疫法測量步驟二中的試驗亞組a3和b3新生葉片的玉米素核苷含量，得到試驗亞組a3和b3新生葉玉米素核苷含量Za和Zb，備用；
步驟五比較RIa和RIb的大小，Za和Zb的大小。值較大者就說明該組黑麥草的再生能力較強。如果當RIa大於RIb時，Za大於Zb ;而當RIa小於RIb時，Za小於Zb，則說明可用再生葉中玉米素核苷含量的高低來間接反映黑麥草再生能力的強弱；
結果表明，RIa 為 20. 59%, RIb 為 37. 51%, Za 為 83. 96ng/g, Zb 為 33. 90 ng/g ；RIb 比RIa高82. 18%，說明在3次去葉的情況下，留有茬高為5cm的多花黑麥草比留茬高為Icm的多花黑麥草具有更強的再生能力；Za比Zb高147. 7%，證明在3次去葉的情況下，用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法為有效方法。
權利要求
1.一種用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法，其特徵在於，包括以下步驟 步驟一選取生長一致的2周齡多花黑麥草108株，以每盆6株植入18個相同的花盆內，花盆內裝有混合基質，按重量份數比混合基質由3份蛭石和I份草炭土組成，在平均溫度為25°C，每天平均光照為8小時條件下，培養70天後，將這18盆多花黑麥草隨機分為2組，每組9盆，即試驗組a和試驗組b，再把試驗組a和試驗組b分別隨機分為al、a2、a3亞組和bl、b2、b3亞組，每亞組3盆；剪去試驗組 a和試驗組b中的多花黑麥草葉片，a組和b組分別留不同茬高； 直接取試驗亞組al和bl，或者將試驗組a和b中已剪去葉的多花黑麥草繼續培養並剪葉後取試驗亞組al和bl，培養和剪葉方法為日均溫度20°C條件下培養，每隔6天剪掉葉片一次，連續剪葉N次，a組和b組每次剪過之後分別與之前留相同茬高； 將剪葉後的試驗亞組al和bl的根與茬分離，得到多花黑麥草茬，將多花黑麥草茬放入75°C的烘乾箱內，烘乾，得到每盆多花黑麥草茬烘乾物，然後用電子天平測每盆多花黑麥草茬烘乾物質量，分別得到試驗亞組al和試驗亞組bl的茬生物量Ra和Rb，備用； 步驟二 將試驗亞組a2、a3和b2、b3中多花黑麥草在溫度為20_25°C條件下培養，6天後，在步驟一所留茬高的位置上剪掉新生的多花黑麥草葉片，得到多花黑麥草新生葉，將試驗亞組a2和b2中的多花黑麥草新生葉送入75°C的烘乾箱內，烘乾，得到每盆多花黑麥草新生葉烘乾物，然後用電子天平測每盆多花黑麥草新生葉烘乾物質量，分別得到試驗亞組a2和b2新生葉生物量La和Lb，備用； 步驟三利用測得的多花黑麥草茬生物量Ra、Rb，新生葉生物量La、Lb，根據公式RIa =TaTL·—X 100%和RIb = -- X 100%計算多花黑麥草再生能力指數RIa和RIb的大小，備用；ΑλRh 步驟四用酶聯免疫法測量步驟二中的試驗亞組a3和b3新生葉片的玉米素核苷含量，得到試驗亞組a3和b3新生葉玉米素核苷含量Za和Zb，備用； 步驟五比較RIa和RIb的大小或Za和Zb的大小，值較大者就說明該組黑麥草的再生能力較強；如果當RIa大於RIb時，Za大於Zb ;當RIa小於RIb時，Za小於Zb，則說明用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法為有效方法。
全文摘要
本發明涉及一種用玉米素核苷測定不同茬高多花黑麥草再生能力的方法，培植不同茬高多花黑麥草，用酶聯免疫法測量新生葉片中玉米素核苷，通過比較新生葉片中玉米素核苷含量，含量大者說明其再生能力更強。本發明能有效測定不同茬高多花黑麥草再生能力的強弱，對研究牧草的再生具有重要的意義；本發明的測量方法簡單，易於操作，便於廣泛應用，並且實用性強。
文檔編號A01G7/00GK102919066SQ20121046331
公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月17日 優先權日2012年11月17日
發明者王曉凌, 朱亞平, 亓琳, 李雪林, 董普輝 申請人:河南科技大學