一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀飼料的製備方法

2023-08-02 16:34:21 2

專利名稱：一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀飼料的製備方法
技術領域：
本發明涉及一種詞料製備方法，尤其涉及一種益生菌發酵飼料製備方法。
背景技術：
目前畜牧養殖行業中較多使用的產品是益生素、合生素等，但受現行詞料 產品中普遍添加抗生素的影響，益生菌難以在飼料中存活。耐受飼料加工和長 期體外保存的益生菌製劑技術尚不過關，活力差，應用效果不理想。有的微生 態製劑雖然採取微囊包被等高技術，但有益菌尤其是厭氧性益生菌存活率及其 活力還很不理想，保存時間短。通過產品進入動物體內存活的只有少量的芽孢 桿菌、酵母菌之類，實際發揮的生物學功能作用有限。又如傳統的發酵飼料由 於設施簡陋，方法原始、簡單、粗放，飼料發酵的生物過程控制不嚴格，操作 不規範，產品質量和使用效果不穩定。而目前工業化發酵飼料只針對部分飼料 原料進行發酵利用，如發酵豆粕、棉菜粕、蘋果渣等。其缺陷是產品發酵後又 經加熱烘乾製成成品，高耗能，而且熱敏性營養活性物質被破壞。因此目前的 益生菌應用於畜牧養殖生產的需求迫切，市場巨大。但用以製作添加劑使用益 生菌，不僅功能性菌種少，關鍵是製劑技術差，許多重要的厭氧性益生菌難以 存活，使用中諸多影響因素難以克服。將其作為發酵劑使用時，在應用領域又 因容易發生雜菌汙染，風險大，益生菌在動物養殖中應用尚處於探索發展階段。 所述益生菌糊狀發酵飼料能有效克服以上有益微生物應用中存在的各種弊端。 能經濟、便捷、安全、高效地應用於養殖生產，具有實用價值。如發酵使飼料 酸化，能抑制病原微生物生長，為實現停用飼料抗生素添加劑創造條件。這是 消除畜產品殘留、控制耐藥菌株產生、實現環境與食品安全的前提與基礎。發 酵詞料直接提供(fc活性益生菌及其生物活性物質，調節動物健康。飼料發酵技 術還可與熟化、酶解、糖化等現代食品加工技術相結合，徹底消除飼料抗營養 因子，降解大分子物質，挖掘出詞料潛在的營養成分。使之能充分被動物消化 利用，實現減少排放，控制環境的汙染、節省飼料資源，降低養殖成本、改善 動物健康狀況目的。發酵飼料能直接對腸道微生態的平衡調節起作用，有益於 動物免疫力、抗應激與生長發育。發酵飼料有利於養殖場環境微生態良性回歸， 改變目前"養殖場即疫源地"的不良環境狀況等。另外現在的詞料，是對不同 的養殖種類進行專門配置，通用性不好，不能有效提高生產效率，產品生產、 運輸銷售也不便。目前還沒有很好地解決辦法。

發明內容
為了克服現有飼料中厭氧性益生菌不能很好地存活、發酵飼料的生產質量 效果不穩定的技術不足；本發明目的是提供一種益生菌能夠良好存活的糊狀發
酵飼料的製備方法，益生菌發酵活性糊狀飼料可作為配方原料直接飼餵動物， 也可作為益生素菌種用於對各種飼料原料進行發酵，是動物通用的飼料，而且 使質量穩定的糊狀發酵飼料工業化生產、標準化管理及產業化應用成為可能。
為實現本發明的目的所採取的技術方案為
一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀飼料的製備方法，其特徵在於所述 的製備方法的步驟為
1、 按配方稱取發酵飼料原料中的發酵基料乾物質，其中發酵基料乾物質 主要由包含以下重量份的原料組份製備而成玉米粉45 70、豆粕粉12 32、
米粉8 20、麥粉0 20、豆粉0 15、麥芽0 8，生長因子0 0.9;
2、 對發酵基料的前處理，對發酵基料進行粉碎，混合，再對發酵基料擠 壓膨化，膨化後再篩片，得到粉狀物料；
3、 益生菌菌種的製備，根據情況製取單一菌種或複合的多菌種發酵；
4、 用步驟3中得到的種子菌液對步驟2中得到的膨化了或微粉化了的發 酵基料進行接種，採用的方式包含有
4.1.1、 直接發酵法，即直接用接種菌液製造糊狀飼料發酵，使糊狀發酵 物料中水分含量為45 65%，或按發酵基料乾物質重量計的40 70%;
4.1.2、 將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，壓實物料，儘量排除物料孔隙 內的氣體；
4.2.1、 連續發酵法，即接種菌液經液態發酵轉糊狀飼料發酵，液態發酵 後轉糊狀飼料發酵，使液態發酵物料中水分含量為65 85%，或按發酵基料幹 物質重量計的15 45%;
4.2.2、 把液態發酵物料置發酵室內靜置發酵、培養，即可轉糊狀飼料發
酵；
4. 2. 3、添加待發酵物料使糊狀發酵物料中水分含量為45 65%，或按發酵 基料乾物質重量計的40 70%;
4.2.4、將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，壓實物料，儘量排除物料孔隙 內的氣體；
4.3.1、 用糊狀發酵物料作益生菌發酵劑，即用糊狀發酵物料為母料進行 連續發酵，糊狀發酵物料與待發酵的粉狀物料按重量比1: 8 30接種，使液 態發酵物料中水分含量為65 85%，或按發酵基料乾物質重量計的50 85%;
4.3.2、 把液態發酵物料置發酵室內靜置發酵、培養，即可轉糊狀飼料發
酵；4.3.3、 按液態發酵物料與待發酵物料1: 0. 45 0. 85配製為糊狀發酵物 料，使糊狀發酵物料中水分含量為45 65%，或按發酵基料乾物質重量計的40
70%;
4.3.4、 將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，壓實物料，儘量排除物料孔隙 內的氣體；
5、 採用無縫隙包裝袋包裝步驟4得到的糊狀發酵物料；
6、 糊狀發酵物料包裝完成後運至發酵室靜置發酵，排除無縫隙包裝袋內 發酵產生的氣體後，密封無縫隙包裝袋，運出發酵室；
7、 對發酵後的糊狀發酵物料停止發酵；
8、 把封口包裝後的糊狀發酵飼料置倉庫儲存。
所述的製備方法的步驟為
1、 按配方稱取發酵詞料原料中的發酵基料乾物質，其中發酵基料乾物質
由包含以下重量份的原料組份製備而成玉米粉45 65、豆粕粉15 30、米 粉10 18、麥粉5 20、豆粉0 14、麥芽0 7，生長因子0 0.8;
2、 對發酵基料的前處理，
2.1、 發酵基料精選，清除異物，黴敗結塊；
2.2、 對發酵基料進行粉碎，膨化原料使用孔徑2mm篩片，非膨化原料用 孔徑《lmm篩片；
2.3、 對各發酵基料混合；
2.4、 再對發酵基料擠壓膨化，膨化條件，溫度110 145°C，蒸汽壓力3 4. 5個大氣壓，擠壓膨化電機主軸轉速400 600轉/每分鐘；
2.5、 對膨化後的發酵基料使用孔徑1.5 2.0 mm篩片篩選，得到粉狀物
料；
3、 益生菌菌種的製備，根據情況製取單一菌種或複合的多菌種發酵，益 生菌發酵活性糊狀飼料菌種為複合益生菌菌種，益生菌菌種的接種比例為植物 乳酸桿菌2. 2 7. OX 106cfu/ml，酵母菌1. 2 3. 5X 106cfu/ml，枯草芽孢桿菌 1. 2 3. 5X 106cfu/ml，雙歧桿菌2. 2 7. 0 X 106cfu/ml製成種子菌液；
4、 用步驟3中得到的種子菌液對步驟2中得到的膨化了或微粉化了的發 酵基料進行接種，採用的方式為以下方式之一
4.1.1、 直接發酵法，即直接用接種菌液製造糊狀詞料發酵，按發酵基料 重量計算接種菌量，製備接種菌液，製作糊狀發酵物料用水為常規自來水，使 糊狀發酵物料中水分含量為52 63%，或按發酵基料乾物質重量計的45 65%;
4.1.2、 將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，不留空腔，儘量排除糊狀發酵 物料孔隙內的氣體，壓塑成型；
4.2.1、連續發酵法，即接種菌液經液態發酵轉糊狀飼料發酵，液態發酵後轉糊狀飼料發酵，按發酵基料重量計算接種菌量，製備接種菌液，製作糊狀
發酵物料用水為常規自來水，使液態發酵物料中水分含量為70 85%,或按發 酵基料乾物質重量計的20 43%，攪拌均勻，糊狀發酵物料應完全浸泡在含有 發酵劑的接種菌液中，其上層保持高度》5. 0釐米的接種菌液作空氣隔離層；
4. 2. 2、把液態發酵物料置發酵室內於溫度23 42。C下，經20 60小時的 靜置發酵、培養，即可轉糊狀詞料發酵；
4. 2. 3、添加待發酵物料使糊狀發酵物料中水分含量為52 63%，或按發酵 基料乾物質重量計的45 65%;
4.2.4、將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，不留空腔，儘量排除糊狀發酵 物料孔隙內的氣體，壓塑成型；
4.3.1、用糊狀發酵物料作益生菌發酵劑，即用糊狀發酵物料為母料進行 連續發酵，糊狀發酵物料與待發酵的粉狀物料按重量比l: 10 25接種，用常 規自來水配製液態發酵物料，使液態發酵物料中水分含量為70 85%，或按發 酵基料乾物質重量計的20 43%，攪拌均勻，液態發酵物料應完全浸泡在含有 發酵劑的接種菌液中，其上層保持高度》5. 0釐米的接種菌液作空氣隔離層；
4、 3. 2、把液態發酵物料置發酵室內於溫度23 42X:下，經20 60小時的 靜置發酵、培養，即可轉糊狀飼料發酵；
4.3.3、 按液態發酵物料與待發酵物料1: 0. 45 0. 70配製為糊狀發酵物 料，使糊狀發酵物料中水分含量為52 63%，或按發酵基料乾物質重量計的45
65%;
4.3.4、 將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，不留空腔，儘量排除糊狀發酵 物料孔隙內的氣體，壓塑成型；
5、 採用由三層袋膜定向排氣式包裝袋，包裝步驟4得到的糊狀發酵物料;
6、 糊狀發酵物料包裝完成後運至發酵室，呈交錯狀堆碼，環境溫度30 42°C， 30 50小時的靜置發酵，排除中層膜袋內發酵產生的氣體，用皮筋緊箍 中層膜袋口，運出發酵室制酵；
7、 對發酵後的糊狀發酵物料根據發酵基料的原料性質，分別採用自然制 酵和真空包裝制酵的方法停止發酵，
7.1、 發酵飼料原料為粗質廉價原料時實行自然制酵，即使其充分發酵， 待發酵物料因發酵至酸度低，即PH《4.0， 2 4天，微生物停止生長時再封口 包裝；
7.2、 發酵飼料原料為精飼料時，實行了適度發酵，即發酵1 2天，使微 生物增殖停止在對數生長的後期，用真空包裝進行制酵保質，即從發酵室運出 後即行真空包裝；
8、 把封口包裝後的糊狀發酵飼料置倉庫儲存，專用倉庫，常溫儲存，常規碼放，環境整潔乾燥，陰涼通風。
所述發酵詞料原料的發酵基料基本營養含量粗蛋白》16.0%，賴氨酸》
0.7%，蛋+胱氨酸>0. 5%，蘇氨酸》0. 5%;鈣》0.09%;總磷》0. 3%。
所述發酵飼料原料的發酵基料乾物質由以下重量份的原料組份製備成發 酵詞料原料的發酵基料乾物質由以下重量份的原料組份製備成玉米粉53、豆 粕粉25、米粉15、麥粉12、豆粉9、麥芽6，生長因子0.5;糊狀發酵物料中 水分含量57%，或按發酵基料乾物質重量計46%。
所述益生菌菌種的接種比例為植物乳酸桿菌5. 5X 106Cfu/ml，酵母菌2. 5 X106cfu/ml，枯草芽孢桿菌2.2Xl6cfu/ml，雙歧桿菌3.5X106 cfu/ml。
所述用糊狀發酵物料作益生菌發酵劑時，發酵基料必須膨化。
所述糊狀發酵物料作為發酵劑連續發酵不得超過兩次。
所述用糊狀發酵物料作發酵劑進行生產放大菌種，經液態發酵放大菌種後 轉糊狀飼料發酵；
用糊狀發酵物料作為發酵劑直接製造液態發酵飼料；
用連續發酵法生產液態發酵物料後再放大生產溼粉狀發酵飼料，含水率 20 42%;
用糊狀發酵飼料放大生產溼粉狀發酵飼料，含水率20 42%。
所述三層袋膜定向排氣式包裝袋，包括內袋、中層膜袋、外層膜袋三層； 內袋為透氣防水式PE塑料膜，透氣防水式PE塑料膜緊貼糊狀發酵飼料表面， 與糊狀發酵詞料之間呈無縫隙包裝；中層膜袋為不透水氣式的食品保鮮PE塑 料膜，發酵產氣過快，或產氣量過大時，可直接放出中層膜袋內積存的發酵氣 體並及時封口/扎口；外層膜袋為外包裝袋。
所述糊狀發酵飼料的產品外形至少軋製成正方體、長方體、圓柱體或球形。
基本原理
本發明飼料是利用益生菌細胞與酶的生物轉化作用，用擠壓膨化方式前處 理的常規原料飼料在特定的糊狀條件下發酵，使發酵飼料原料結構成分分解、 降解或轉化成新的營養成分，成為易於消化利用，益於動物健康，具有無殘留、 低排放、調節微生態作用的動物通用的新型飼料原料。而益生菌尤其是厭氧性 益生菌的活性在糊狀發酵詞料構成的特殊生存條件(糊狀發酵物料提供的特殊 生態環境有密度大且極豐富複雜的飼料營養物質，水分55%左右，含水量〉 1.2g/g,乾物質計的，其水分狀態為約束水與滯留性自由水，水活度>9.0) 下能得到大量增殖和長期保存，成為厭氧性益生菌發酵詞料的益生菌發酵劑。
理化性狀
益生菌發酵高活性糊狀飼料含水份55%左右，靜置無析出水或自由流動水。 呈發酵飼料原料特有的鮮黃色澤或淡灰黃色，具有醇香與酸甜香味。發酵飼料原料中的蛋白質、澱粉大分子營養素物質被不同程度的分解、降解和轉化。胰
蛋白酶抑制因子、非澱粉多糖抗營養因子明顯降低，活性糊狀飼料PH《4.5。 發酵產生的有機酸主要為乳酸，乙酸，其中總乳酸》1.0%，粗蛋白質、碳水化 合物等主要營養物質在動物日糧中的消化率為88%以上。活性的糊狀發酵物料 淺表層菌群主要為酵母菌，芽孢桿菌好氧性益生菌與少量厭氧性益生菌，深層 菌群主要為乳酸菌、雙歧桿菌、糞鏈球菌的厭氧性益生菌與少量好氧性益生菌。 常規保藏條件下糊狀發酵物料的營養品質特性保持60天以上，經真空包裝後 的益生菌糊狀發酵飼料能長期保持益生菌活性(l年以上)。 基本特性
與常規飼料加工，通過粉粹、混合機械性作用或烘烤、膨化、調製、制粒 的熱力性的物理作用相比，本糊狀發酵飼料是通過對發酵飼料原料的生物發酵 作用，使發酵飼料原料成分發生分解、降解、轉化成新營養素生物化學性變化。
應用方法
技術領域：
本發明詞料可作為配方原料直接飼餵動物，發揮調節動物微生態的功能性 詞料的作用；也可作為益生素菌種用於對各種飼料原料進行發酵，改善詞料原 料的營養品質，發揮飼料發酵劑的作用。
1、 糊狀發酵飼料作為配方原料使用-
活性糊狀發酵飼料是各種動物通用的發酵飼料，直接用於配製動物全價日 糧時，首先根據動物種類、生長階段與生產需要，確定適宜的配合比例。 一般 情況下可替代全價飼料中基礎性飼料原料(如玉米、豆粕)的50% (按乾物質 計算，40 60%，下同)，添加比例佔全價配合日糧的30% (15 45%)。在特殊 日糧中的配比如斷奶抗應激飼料，可加大配合比例或全部替代植物源性能量飼 料和蛋白質飼料如玉米、豆粕。另外，維生素、礦物質及微量元素須添加配套 預混料或濃縮料，使之符合營養需求水平。
2、 作為飼料發酵劑使用.-
即用糊狀發酵飼料為母料進行液態發酵，糊狀發酵詞料與待發酵的粉狀物 料按重量l: 10 20接種，加入自來水混合，液態發酵時所有物料的水分含量 為80% (70 85%)，攪拌均勻，所有液態發酵物料要完全經泡在含有發酵劑的接 種菌液中，其表層有高度》5.0cm接種菌液作為空氣隔離層。發酵是在室內環境 溫度25 4(TC下，經24 48小時靜置發酵培養即可，該液態發酵物料可直接加 入其他飼料原料配成全價料詞喂。用於配製動物全價日糧時，應根據動物種類、 生長階段與生產需要，確定適宜的配合比例， 一般情況下配製比例佔動物全價 飼料中基礎性飼料原料(如玉米、豆粕)的25% (按乾物質計算，10 40%)，佔 全價配合日糧的20% (10 30%)，在特殊日糧中的配比如母豬配合飼料，可加大 配合比例或全部替代植物源性能量飼料和蛋白質詞料，如玉米、豆粕。另外，維生素、礦物質及微量元素須添加配套預混料或濃縮料使之符合營養需求水平。 品質檢驗
1、 感官質量糊狀發酵物料開啟密封包裝後，無滲出遊離水，外表溼潤， 質地柔軟，呈淡黃色或黃白色，淺表層極稀薄粘液(活菌)，無黴斑或其他色 斑，散發醇香或酸甜香氣，無腐敗異味，折斷處可見深層物料柔軟溼潤，呈發 酵出發原料鮮亮色澤。
2、 鏡檢鏡下菌體與發酵所接菌種形態一致，如在糊狀發酵物料淺表層 可見大量酵母菌，芽孢桿菌，麴黴菌好氧性益生菌；深層可見密集的與接種的 乳酸菌厭氧性細菌形態相同的菌體。
3、 特殊指標益生菌總數>1 X 10Vg，酸度指標PH《4. 0，總乳酸》1. 0%。
4、 營養指標
乾物質45% :粗蛋白質9.5%、粗纖維素2.5%、粗脂肪1.8%、灰分2. 6%、不 溶性灰分1.2%、能量消化率89.5%、蛋白質消化率92.7%、脂肪消化率86. 0%、 總磷消化率80. 5°/0。
應用實例(益生菌糊狀活性發酵飼料飼養斷奶仔豬)
長期以來，養豬生產為克服早期斷奶應激症候群對子豬生產性能的影響， 人們對仔豬生理、原料選擇、飼糧設計與詞養環境方面做了大量研究，使仔豬 早期斷奶後的健康和生產性能明顯提高。但總體看，由於現實中飼養條件差， 管理落後，更重要是優質動物源性蛋白質飼料不足，配方和生產加工技術落後， 致使實際生產中仔豬斷奶後營養無保障，營養性應激還不同程度的普遍存在。 又由於仔豬斷奶階段抗病力下降，人們為控制疾病發生，飼料中普遍超量添加 抗生素藥物，使得仔豬生產成為飼料抗生素濫用的重災區。
針對上述問題，用所述益生菌糊狀活性發酵飼料進行了斷奶仔豬詞養試驗。 試驗選擇28日齡斷奶仔豬90頭，按胎次、性別、體重相近原則隨機分為試驗 組一、試驗組二與對照組共三個組。每組3個小組，每個小組10頭豬。試驗組 日糧配方與對照組同等營養水平，試驗組一飼料配方為玉米42%，豆粕18%，膨 化大豆13% ，膨化玉米11%，乳清粉6%，魚粉6%，仔豬濃縮料4% (含維生素、 礦物質、胺基酸、調味劑、酶製劑，藥物添加劑，載體)。試驗組二用30%(按幹 物質計算)益生菌活性糊狀發酵飼料替代試驗組一配方中玉米、豆粕用量，即玉 米21%，豆粕9%，發酵料30%，膨化大豆13%，膨化玉米11%，乳清粉6%，魚粉 6%，仔豬預混料4%。配套的4%斷奶仔豬預混料中不含酶製劑，不含任何抗生素。 對照組用市場商品顆粒詞料。
經28天飼餵試驗
與試驗一組相比，生長速度提高6.8%(日增重287克)，飼料轉化率提高12. 3%(飼料增重比1.25:1)，日採食量提高4.6%(日採食量359克)；與對照組 相比，生長速度提高3.3%，飼料轉化率提高15.3%，日採食量提高5.6%。
結果表明經益生菌發酵的糊狀發酵飼料，改進、提高了植物性飼料原料的 營養品質，使之更易於被斷奶仔豬消化利用，能減少斷奶仔豬飼料配方中動物 源性飼料用量(如血漿蛋白粉、脫脂奶粉)，降低生產成本，對增強仔豬抗病力， 提高健康水平，進一步發揮仔豬的生產潛力和改善環境生態都產生了顯著作用。
本發明的有益效果是
作為具有微生態調節劑功能的新型發酵詞料，與粉狀微生物添加劑相比有 多方面優勢1、活性厭氧性益生菌生物含量高；2、活性厭氧性益生菌保存時 間長；3、作為厭氧性益生菌特殊生態(存)環境，糊狀發酵物料不同於一般載體， 是被發酵的常規飼料原料，具有功能性詞料作用；4、生產成本低；5、工藝、 設備不複雜；6、使用方便；7、能改善配方中其他詞料原料品質，如提高配合 詞料的系酸力；8、發酵過程控制操作簡單；9、產品的活性質量易於觀測評判； 10、動物採食後即開始發揮益生作用(作用快)。
所述益生菌糊狀活性發酵飼料的特殊糊狀發酵物料型體積小，質地柔軟， 易於包裝與儲運，可在發酵基地或詞料廠進行規模化生產，而作為終端用戶的 養殖場，可直接用所述糊狀發酵詞料配製全價料飼餵動物，從而極大的簡化養 殖戶的發酵操作，使糊狀發酵飼料工業化生產、標準化管理及產業化開發應用 成為可能。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發明作進一步詳細的說明。 通過本發明方法及配方(或相似的方法及配方、益生菌菌種)製成幹或溼 的粉狀、顆粒狀伺料也是本發明的保護範圍。
實施例l:(單位千克)
本發明實施例的發酵飼料原料中的發酵基料乾物質由包含以下重量份的
原料組份製備而成的玉米粉45、豆粕粉12、米粉8。
糊狀發酵物料中水分含量45%，或按發酵基料乾物質重量計40%。
本發明實施例的製備方法的步驟為(單位千克) 1、按配方稱取發酵詞料原料中的發酵基料乾物質
發酵飼料原料的發酵基料基本營養含量粗蛋白》16.0%，賴氨酸>0.7%，
蛋+胱氨酸>0.5%，蘇氨酸》0.5%;鈣》0.09%;總磷》0.3%。
1. 1、原料品質質量符合相應的國家飼料原料質量標準，如玉米符合
GB/T17890-1999， 2級以上，豆粕NY/T2級以上；
1. 2、發酵物料原料配比按其水分含量、吸水力大小和產品需要作適當調整;1.3、配方中發酵物料原料組成的種類可按生產目的、產品需要和地方飼料 資源特點作適當調整；
1. 4、根據生產需要可配入動物需要量的礦物質與微量元素進行發酵。
2、 對發酵基料的前處理，
2.1、 發酵基料精選，清除異物，黴敗結塊；
2.2、 對發酵基料進行粉碎，膨化原料使用孔徑2mm篩片，非膨化原料用 孔徑《lmm篩片；
2.3、 對各發酵基料混合；
2.4、 再對發酵基料擠壓膨化，膨化條件，溫度110 145。C，蒸汽壓力3 個大氣壓，擠壓膨化電機主軸轉速400 600轉/每分鐘；
所述用糊狀發酵物料作益生菌發酵劑時，發酵基料必須膨化； 所述糊狀發酵物料作為發酵劑連續發酵不得超過兩次；
2.5、 對膨化的發酵基料使用孔徑1.5 2.0mm篩片篩選，得到粉狀物料。
3、 益生菌菌種的製備，根據情況製取單一菌種或複合的多菌種發酵。 益生菌菌種製備包括以下環節種子斜面、平板培養、液體培養、擴大的
種子培養、生產種子菌液製備。益生菌發酵活性糊狀飼料菌種為複合益生菌菌 種，益生菌菌種的接種比例為植物乳酸桿菌2.2X106cfu/ml，酵母菌1.2X 106cfu/ml，枯草芽孢桿菌1.2X106cfu/ml，雙歧桿菌2. 2 X 106cfu/ml製成種 子菌液。
4、 用步驟3中得到的種子菌液對步驟2中得到的膨化後或微粉化的發酵 基料進行接種，採用的方式為以下方式之一 .
4.1.1、 直接發酵法，即直接用接種菌液製造糊狀飼料發酵，按發酵基料 重量計算接種菌量，製備接種菌液，製作糊狀發酵物料用水為常規自來水，使 糊狀發酵物料中水分含量為45%，或按發酵基料乾物質重量計的40%;
4.1.2、 將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，不留空腔，儘量排除糊狀發酵 物料孔隙內的氣體，壓塑成型。
4.2.1、連續發酵法，即接種菌液經液態發酵轉糊狀飼料發酵，液態發酵 後轉糊狀飼料發酵，按發酵基料重量計算接種菌量，製備接種菌液，製作糊狀 發酵物料用水為常規自來水，使液態發酵物料中水分含量為65%，或按發酵基 料乾物質重量計的15%，攪拌均勻，液態發酵物料應完全浸泡在含有發酵劑的 接種菌液中，其上層保持高度^5. 0釐米的接種菌液作空氣隔離層；
4. 2. 2、把液態發酵物料置發酵室內於溫度23 42'C下，經20小時的靜置 發酵、培養，即可轉糊狀飼料發酵；
4. 2. 3、添加待發酵物料使糊狀發酵物料中水分含量為45%，或按發酵基料 乾物質重量計的40;4.2.4、將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，不留空腔，儘量排除糊狀發酵 物料孔隙內的氣體，壓塑成型。
4.3.1、用糊狀發酵物料作益生菌發酵劑，即用糊狀發酵物料為母料進行 連續發酵，糊狀發酵物料與待發酵的粉狀物料按重量比1: 8接種，用常規自 來水配製液態發酵物料，使液態發酵物料中水分含量為65%，或按發酵基料幹 物質重量計的50%,攪拌均勻，液態發酵物料應完全浸泡在含有發酵劑的接種 菌液中，其上層保持高度》5. 0釐米的接種菌艱作空氣隔離層；
4、 3. 2、把液態發酵物料置發酵室內於溫度23 42X:下，經20小時的靜置 發酵、培養，即可轉糊狀飼料發酵；
4.3.3、 按液態發酵物料與待發酵物料1: 0. 45配製為糊狀發酵物料，使 糊狀發酵物料中水分含量為45%,或按發酵基料乾物質重量計的40%;
4.3.4、 將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，不留空腔，儘量排除糊狀發酵 物料孔隙內的氣體，壓塑成型。 '
所述用糊狀發酵物料作發酵劑進行生產放大菌種，經液態發酵放大菌種後 轉糊狀飼料發酵。
用糊狀發酵物料作為發酵劑直接製造液態發酵飼料。 用連續發酵法生產液態發酵物料後再放大生產溼粉狀發酵飼料，含水量
20%。
用糊狀發酵飼料放大生產溼粉狀發酵飼料，'含水率20%。
5、 採用由三層袋膜定向排氣式包裝袋，包裝步驟4得到的糊狀發酵物料。 所述三層袋膜定向排氣式包裝袋，包括內袋、中層膜袋、外層膜袋三層。
內袋為透氣防水式PE塑料膜，透氣防水式PE塑料膜緊貼糊狀發酵飼料表面， 與糊狀發酵飼料之間呈無縫隙包裝。並且內膜品質符合飼料與食品衛生要求， 發酵產生的氣體可排除到膜外。中層膜袋為不透水氣式的食品保鮮PE塑料膜， 封口/扎口後只允許空氣自內向外流出(袋內發酵產氣，氣體壓強增大所致)， 能阻隔外環境空氣及氧氣與糊狀發酵物料接觸。發酵產氣過快，或產氣量過大， 直接放出中層膜袋內積存的發酵氣體並及時封口 /扎口 。外層膜袋為外包裝袋。 外層膜袋主要功能是產品保護的，能經受儲運及應用過程中搬運、碰撞，根據 產品特性與生產需要實行真空包裝或常規包裝。包裝外形要以利於保潔防汙、 方便儲運與使用為原則。
所述糊狀發酵詞料的產品外形至少軋製成正方體、長方體、圓柱體或球形。
6、 糊狀發酵物料包裝完成後運至發酵室，呈交錯狀堆碼，環境溫度30 42°C， 30小時的靜置發酵，排除中層膜袋內發酵產生的氣體，用皮筋緊箍中層 膜袋口，運出發酵室制酵。
7、 對發酵後的糊狀發酵物料根據發酵基料的原料性質，分別採用自然制酵和真空包裝制酵的方法停止發酵，
7.1、 發酵飼料原料為粗質廉價原料時實行自然制酵，即使其充分發酵，
待發酵物料因發酵至酸度低，PH《4.0， 2天，微生物停止生長時再封口包裝；
7.2、 發酵飼料原料為精飼料時，實行了適度發酵，即發酵1天，使微生 物增殖停止在對數生長的後期，用真空包裝進行制酵保質，即從發酵室運出後 即行真空包裝。
8、把封口包裝後的糊狀發酵飼料置倉庫儲存，專用倉庫，常溫儲存，常 規碼放，環境整潔乾燥，陰涼通風。 .
實施例2:(單位千克)
本發明實施例的發酵詞料原料中的發酵基料乾物質由包含以下重量份的 原料組份製備而成的玉米粉70、豆粕粉32、米粉20、麥粉20、豆粉15、麥 芽8，生長因子0.9。
糊狀發酵物料中水分含量65%，或按發酵基料乾物質重量計70%。
本發明實施例的製備方法的步驟為(單位千克)
1、 按配方稱取發酵飼料原料中的發酵基料乾物質
2、 對發酵基料的前處理，
本步驟的主要內容同實施例l，但膨化條件，溫度120 14(TC，蒸汽壓力 4. 5個大氣壓，擠壓膨化電機主軸轉速450 600轉/每分鐘。
3、 益生菌菌種的製備
本步驟的主要內容同實施例1，但益生菌菌種的接種比例為植物乳酸桿菌 7.0X106cfu/ml，酵母菌3. 5X106cfu/ml，枯草芽孢桿菌3. 5X 106cfu/ml，雙 歧桿菌7. 0X106cfu/ml。
4、 用步驟3中得到的種子菌液對步驟2中得到的膨化了的發酵基料進行 接種，採用的方式為以下方式之一
4.1、 直接發酵法，
本步驟的主要內容同實施例1，但使糊狀發酵物料中水分含量為65%，或 按發酵基料乾物質重量計的70%。
4.2、 連續發酵法，
本步驟的主要內容同實施例1，但使液態發酵物料中水分含量為85%,或 按發酵基料乾物質重量計的45%;
把液態發酵物料置發酵室內於溫度25 42"C下，經60小時靜置發酵培養;
添加待發酵物料使糊狀發酵物料中水分含量為65%，或按發酵基料乾物質 重量計的70%;
4. 3、用糊狀發酵物料作益生菌發酵劑，本步驟的主要內容同實施例1，但糊狀發酵物料與待發酵的粉狀物料按重
量比l: 30接種，使液態發酵物料中水分含量為85%，或按發酵基料乾物質重
量計的85%;
把液態發酵物料置發酵室內於溫度25 42"C下，經60小時靜置發酵培養； 按液態發酵物料與待發酵物料l: 0.85配製為糊狀發酵物料，使糊狀發酵 物料中水分含量為65%，或按發酵基料乾物質重量計的70%。
用連續發酵法生產液態發酵物料後再放大生產溼粉狀發酵詞料，含水率
42%。
用糊狀發酵詞料放大生產溼粉狀發酵飼料，含水率42%。
5、 採用由三層袋膜定向排氣式包裝袋，包裝步驟4得到的糊狀發酵物料。 本步驟的基本內容同實施例l。
6、 糊狀發酵物料包裝完成後運至發酵室發酵，
本步驟的主要內容同實施例l，但環境溫度34 39°C,50小時的靜置發酵。
7、 對發酵後的糊狀發酵物料根據發酵基料的原料性質，分別採用自然制 酵和真空包裝制酵的方法停止發酵，
7.1、 自然制酵，
本步驟的主要內容同實施例i，但待發酵物料因發酵至酸度低，即ra《4.0，
4天，微生物停止生長時再封口包裝；
7.2、 適度發酵，
本步驟的主要內容同實施例l，但發酵2天。
8、 封口儲存，
本步驟的基本內容同實施例1。 實施例3:(單位千克)
本發明實施例的發酵飼料原料中的發酵基料乾物質由包含以下重量份的 原料組份製備成玉米粉53、豆粕粉25、米粉15、麥粉12、豆粉9、麥芽6， 生長因子0.5。
糊狀發酵物料中水分含量57%，或按發酵基料乾物質重量計46%。 本發明實施例的製備方法的步驟為(單位千克)
1、 配方稱取發酵飼料原料中的發酵基料乾物質
2、 對發酵基料的前處理，
本步驟的主要內容同實施例1，但膨化條件，溫度120 140。C，蒸汽壓力 4個大氣壓，擠壓膨化電機主軸轉速500 600轉/每分鐘。
3、 益生菌菌種的製備
本步驟的主要內容同實施例1，但益生菌菌種的接種比例為植物乳酸桿菌5. 5X10 cfu/ml ，酵母菌2. 5X10 cfu/ml ，枯草芽孢桿菌2. 2 X 10 cfu/ml ，雙 歧桿菌3. 5X106 cfu/ml 。
4、 用步驟3中得到的種子菌液對步驟2中得到的膨化了的發酵基料進行 接種，採用的方式為以下方式之一-
4.1、 直接發酵法，
本步驟的主要內容同實施例1，但使糊狀發酵物料中水分含量為57%，或 按發酵基料乾物質重量計的46%。
4.2、 連續發酵法，
本步驟的主要內容同實施例1，但使液態發酵物料中水分含量為80%，或
按發酵基料乾物質重量計的40%;
把液態發酵物料置發酵室內於溫度25 42°CT,經40小時靜置發酵培養； 添加待發酵物料使糊狀發酵物料中水分含量為59%，或按發酵基料乾物質
重量計的50%;
4.3、 用糊狀發酵物料作益生菌發酵劑，
本步驟的主要內容同實施例1，但糊狀發酵物料與待發酵的粉狀物料按重 量比l: 22接種，使液態發酵物料中水分含量為80%，或按發酵基料乾物質重 量計的40%;
把液態發酵物料置發酵室內於溫度25 42'C下，經40小時靜置發酵培養； 按液態發酵物料與待發酵物料l: 0.60配製為糊狀發酵物料，使糊狀發酵 物料中水分含量為58%，或按發酵基料乾物質重量計的50%。
用連續發酵法生產液態發酵物料後再放大生產溼粉狀發酵詞料，含水率
37%。
用糊狀發酵飼料放大生產溼粉狀發酵飼料，含水率37%。
5、 採用由三層袋膜定向排氣式包裝袋，包裝步驟4得到的糊狀發酵物料。 本步驟的基本內容同實施例l。
6、 糊狀發酵物料包裝完成後運至發酵室發酵，
本步驟的主要內容同實施例l，但環境溫度34 39°C，42小時的靜置發酵。
7、 對發酵後的糊狀發酵物料根據發酵基料的原料性質，分別採用自然制 酵和真空包裝制酵的方法停止發酵，
7.1、 自然制酵，
本歩驟的主要內容同實施例1，但待發酵物料因發酵至酸度低，即PH《4.0， 3.2天，微生物停止生長時再封口包裝；
7.2、 適度發酵，
本步驟的主要內容同實施例1，但發酵1.5天。
8、 封口儲存，本步驟的基本內容同實施例l。
所述益生菌發酵活性糊狀飼料含水份57%，靜置無析出水或自由流動水。 呈發酵飼料原料特有的鮮黃色澤或淡灰黃色，具有醇香與酸甜香味，糊狀發酵 物料淺表層菌群主要為酵母菌，芽孢桿菌好氧性益生菌與少量厭氧性益生菌， 深層菌群主要為乳酸菌、雙歧桿菌厭氧性益生菌與少量好氧性益生菌。用於配 制各種動物的無抗生素飼料和作為飼料發酵劑。
權利要求
1、一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀飼料的製備方法，其特徵在於所述的製備方法的步驟為[1]、按配方稱取發酵飼料原料中的發酵基料乾物質，其中發酵基料乾物質主要由包含以下重量份的原料組份製備而成玉米粉45～70、豆粕粉12～32、米粉8～20、麥粉0～20、豆粉0～15、麥芽0～8，生長因子0～0.9；[2]、對發酵基料的前處理，對發酵基料進行粉碎，混合，再對發酵基料擠壓膨化，膨化後再篩片，得到粉狀物料；[3]、益生菌菌種的製備，根據情況製取單一菌種或複合的多菌種發酵；[4]、用步驟[3]中得到的種子菌液對步驟[2]中得到的膨化了或微粉化了的發酵基料進行接種，採用的方式包含有[4. 1.1]、直接發酵法，即直接用接種菌液製造糊狀飼料發酵，使糊狀發酵物料中水分含量為45～65％，或按發酵基料乾物質重量計的40～70％；[4. 1.2]、將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，壓實物料，儘量排除物料孔隙內的氣體；[4. 2.1]、連續發酵法，即接種菌液經液態發酵轉糊狀飼料發酵，液態發酵後轉糊狀飼料發酵，使液態發酵物料中水分含量為65～85％，或按發酵基料乾物質重量計的15～45％；[4. 2.2]、把液態發酵物料置發酵室內靜置發酵、培養，即可轉糊狀飼料發酵；[4. 2.3]、添加待發酵物料使糊狀發酵物料中水分含量為45～65％，或按發酵基料乾物質重量計的40～70％；[4. 2.4]、將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，壓實物料，儘量排除物料孔隙內的氣體；[4. 3.1]、用糊狀發酵物料作益生菌發酵劑，即用糊狀發酵物料為母料進行連續發酵，糊狀發酵物料與待發酵的粉狀物料按重量比18～30接種，使液態發酵物料中水分含量為65～85％，或按發酵基料乾物質重量計的50～85％；[4. 3.2]、把液態發酵物料置發酵室內靜置發酵、培養，即可轉糊狀飼料發酵；[4. 3.3]、按液態發酵物料與待發酵物料1∶0.45～0.85配製為糊狀發酵物料，使糊狀發酵物料中水分含量為45～65％，或按發酵基料乾物質重量計的40～70％；[4. 3.4]、將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，壓實物料，儘量排除物料孔隙內的氣體；[5]、採用無縫隙包裝袋包裝步驟[4]得到的糊狀發酵物料；[6]、糊狀發酵物料包裝完成後運至發酵室靜置發酵，排除無縫隙包裝袋內發酵產生的氣體後，密封無縫隙包裝袋，運出發酵室；[7]、對發酵後的糊狀發酵物料停止發酵；[8]、把封口包裝後的糊狀發酵飼料置倉庫儲存。
2、根據權利要求1所述的一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀飼料的制 備方法，其特徵為所述的製備方法的步驟為[l]、按配方稱取發酵飼料原料中的發酵基料乾物質，其中發酵基料乾物 質由包含以下重量份的原料組份製備而成玉米粉45 65、豆粕粉15 30、 米粉10 18、麥粉5 20、豆粉0 14、麥芽0 7，生長因子0 0.8;[2]、對發酵基料的前處理，[2.1]、發酵基料精選，清除異物，黴敗結塊；[2.2]、對發酵基料進行粉碎，膨化原料使用孔徑2mm篩片，非膨化原料 用孔徑《lmm篩片；[2.3]、對各發酵基料混合；[2.4]、再對發酵基料擠壓膨化，膨化條件，溫度110 145"C，蒸汽壓力 3 4. 5個大氣壓，擠壓膨化電機主軸轉速400 600轉/每分鐘；[2. 5]、對膨化後的發酵基料使用孔徑1. 5 2. 0皿篩片篩選，得到粉狀物料；[3]、益生菌菌種的製備，根據情況製取單一菌種或複合的多菌種發酵， 益生菌發酵活性糊狀飼料菌種為複合益生菌菌種，益生菌菌種的接種比例為植 物乳酸桿菌2. 2 7.0X106cfu/ml，酵母菌1. 2 3. 5X 106Cfu/ml，枯草芽孢杆 菌1. 2 3. 5X 106cfu/ml，雙歧桿菌2. 2 7. OX 106cfu/ml製成種子菌液；[4]、用步驟[3]中得到的種子菌液對步驟[2]中得到的膨化了或微粉 化了的發酵基料進行接種，採用的方式為以下方式之一[4.1.1]、直接發酵法，即直接用接種菌液製造糊狀飼料發酵，按發酵基 料重量計算接種菌量，製備接種菌液，製作糊狀發酵物料用水為常規自來水， 使糊狀發酵物料中水分含量為52 63%，或按發酵基料乾物質重量計的45 65%;[4.1.2]、將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，不留空腔，儘量排除糊狀發 酵物料孔隙內的氣體，壓塑成型；[4.2.1]、連續發酵法，即接種菌液經液態發酵轉糊狀飼料發酵，液態發 酵後轉糊狀飼料發酵，按發酵基料重量計算接種菌量，製備接種菌液，製作糊 狀發酵物料用水為常規自來水，使液態發酵物料中水分含量為70 85%，或按發酵基料乾物質重量計的20 43%，攪拌均勻，糊狀發酵物料應完全浸泡在含 有發酵劑的接種菌液中，其上層保持高度》5. 0釐米的接種菌液作空氣隔離層;[4. 2. 2]、把液態發酵物料置發酵室內於溫度23 42'C下，經20 60小時 的靜置發酵、培養，即可轉糊狀飼料發酵；[4.2.3]、添加待發酵物料使糊狀發酵物料中水分含量為52 63%，或按 發酵基料乾物質重量計的45 65%;[4.2.4]、將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，不留空腔，儘量排除糊狀發 酵物料孔隙內的氣體，壓塑成型；[4.3.1]、用糊狀發酵物料作益生菌發酵劑，即用糊狀發酵物料為母料進 行連續發酵，糊狀發酵物料與待發酵的粉狀物料按重量比l: 10 25接種，用 常規自來水配製液態發酵物料，使液態發酵物料中水分含量為70 85%，或按 發酵基料乾物質重量計的20 43%，攪拌均勻，液態發酵物料應完全浸泡在含 有發酵劑的接種菌液中，其上層保持高度》5. 0釐米的接種菌液作空氣隔離層；[4. 3. 2]、把液態發酵物料置發酵室內於溫度23 42"C下，經20 60小時 的靜置發酵、培養，即可轉糊狀飼料發酵；[4.3.3]、按液態發酵物料與待發酵物料l: 0. 45 0. 70配製為糊狀發酵 物料，使糊狀發酵物料中水分含量為52 63%，或按發酵基料乾物質重量計的 45 650/0;[4.3.4]、將糊狀發酵物料充分攪拌均勻後，不留空腔，儘量排除糊狀發 酵物料孔隙內的氣體，壓塑成型；[5]、採用由三層袋膜定向排氣式包裝袋，包裝步驟[4]得到的糊狀發 酵物料；[6]、糊狀發酵物料包裝完成後運至發酵室，呈交錯狀堆碼，環境溫度30 42°C， 30 50小時的靜置發酵，排除中層膜袋內發酵產生的氣體，用皮筋緊箍 中層膜袋口，運出發酵室制酵；[7]、對發酵後的糊狀發酵物料根據發酵基料的原料性質，分別採用自然 制酵和真空包裝制酵的方法停止發酵，[7. 1]、發酵飼料原料為粗質廉價原料時實行自然制酵，即使其充分發酵， 待發酵物料因發酵至酸度低，即PH《4.0， 2 4天，微生物停止生長時再封口 包裝；[7.2]、發酵伺料原料為精詞料時，實行了適度發酵，即發酵1 2天，使微生物增殖停止在對數生長的後期，用真空包裝進行制酵保質，即從發酵室 運出後即行真空包裝；[8]、把封口包裝後的糊狀發酵詞料置倉庫儲存，專用倉庫，常溫儲存， 常規碼放，環境整潔乾燥，陰涼通風。
3、 根據權利要求1所述的一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀飼料的製備方法，其特徵為發酵飼料原料的發酵基料基本營養含量粗蛋白>16.0%,賴氨酸》0.7%，蛋+胱氨酸》0.5%，蘇氨酸》0.5%;鈣》0.09%;總磷》0.3%。
4、 根據權利要求1所述的一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀飼料的制 備方法，其特徵為發酵詞料原料的發酵基料乾物質由以下重量份的原料組份 製備成玉米粉53、豆粕粉25、米粉15、麥粉12、豆粉9、麥芽6，生長因 子0.5;糊狀發酵物料中水分含量57%，或按發酵基料乾物質重量計46%。
5、 根據權利要求1所述的一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀飼料的制 備方法，其特徵為益生菌菌種的接種比例為植物乳酸桿菌5.5Xl6cfu/ml， 酵母菌2. 5X106cfu/ml，枯草芽孢桿菌2.2X106cfu/ml，雙歧桿菌3. 5X106 cfu/ml。
6、 根據權利要求1所述的一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀飼料的製備方法，其特徵為用糊狀發酵物料作益生菌發酵劑時，發酵基料必須膨化。
7、 根據權利要求1所述的一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀伺料的制 備方法，其特徵為糊狀發酵物料作為發酵劑連續發酵不得超過兩次。
8、 根據權利要求1所述的一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀飼料的製備 方法，其特徵為用糊狀發酵物料作發酵劑進行生產放大菌種，經液態發酵放 大菌種後轉糊狀飼料發酵；用糊狀發酵物料作為發酵劑直接製造液態發酵飼料；用連續發酵法生產液態發酵物料後再放大生產溼粉狀發酵詞料，含水率 20 42%;用糊狀發酵飼料放大生產溼粉狀發酵飼料，含水率20 42%。
9、 根據權利要求1或2所述的一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀\飼料 的製備方法，其特徵為三層袋膜定向排氣式包裝袋，包括內袋、中層膜袋、 外層膜袋三層；內袋為透氣防水式PE塑料膜，透氣防水式PE塑料膜緊貼糊狀 發酵飼料表面，與糊狀發酵飼料之間呈無縫隙包裝；中層膜袋為不透水氣式的 食品保鮮PE塑料膜，發酵產氣過快，或產氣量過大時，可直接放出中層膜袋 內積存的發酵氣體並及時封口 /扎口 ；外層膜袋為外包裝袋。
10、 根據權利要求1或2所述的一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀飼料 的製備方法，其特徵為糊狀發酵飼料的產品外形至少軋製成正方體、長方體、 圓柱體或球形。
全文摘要
本發明公開了一種動物通用的益生菌發酵活性糊狀飼料的製備方法，製備方法為按配方稱取原料，發酵基料乾物質主要由包含以下重量份的原料組份製備而成玉米粉45～70、豆粕粉12～32、米粉8～20、麥粉0～20、豆粉0～15、麥芽0～8，生長因子0～0.9；對發酵基料的前處理，粉碎、擠壓膨化、篩片；益生菌菌種製備；用種子菌液對發酵基料接種，方式包含直接發酵法，直接用接種菌液製造糊狀飼料發酵，使糊狀發酵物料中水分含量為52～63％，連續發酵法，接種菌液經液態發酵轉糊狀飼料發酵，用糊狀發酵物料作益生菌發酵劑；採用無縫隙包裝袋包裝；靜置發酵，排除發酵的氣體，密封無縫隙包裝袋；停止發酵；封口儲存。本發明飼料益生菌保存較長時間，糊狀發酵飼料的生產質量及效果穩定。
文檔編號A23K1/00GK101449738SQ20071019553
公開日2009年6月10日 申請日期2007年12月4日 優先權日2007年12月4日
發明者李紹章, 楊雪海, 娜 趙 申請人:李紹章