模擬移動床色譜拆分匹諾塞林對映體的方法

2023-07-05 02:12:26 1

模擬移動床色譜拆分匹諾塞林對映體的方法
【專利摘要】本發明公開了一種模擬移動床色譜拆分匹諾塞林對映異構體的方法。本發明的特徵是：採用模擬移動床色譜系統，填料為直鏈澱粉-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)，流動相為甲醇，在正相條件下拆分匹諾塞林對映異構體得到高純度的R-匹諾塞林和S-匹諾塞林。模擬移動床色譜系統是連續化生產，自動化程度高，生產效率高。
【專利說明】模擬移動床色譜拆分匹諾塞林對映體的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種手性藥物的拆分技術，特別是匹諾塞林的模擬移動床色譜分離方法。
【背景技術】
[0002]匹諾塞林(pinocembrin),化學名稱為2，3_ 二氧-5, 7_ 二羥基-2-苯基-4H-1-苯並批喃 _4_ 酮(2，3_d ihydro-5, 7-d ihydroxy-2-phenyl-4H-l-benzopyran-4_one),最初是從蜂膠中得到的一種具有多種生物活性的黃烷酮類化合物。在藥理篩選的過程中首次發現消旋的匹諾塞林對急性腦缺血大鼠的神經血管單元(NVU)具有顯著的保護活性，可明顯降低腦水腫百分率和腦梗塞體積，改善神經行為學特徵，有治療急性腦缺血的作用，具有良好的開發前景。匹諾塞林的分子結構中含有I個手性中心，存在I對光學異構體，天然立體構型為S構型，在植物中含量很低，而對於R構型匹諾塞林的生物活性未見報導，因此，有必要對其消旋體進行拆分。
[0003]近年來，模擬移動床色譜技術已在藥物分離方面取得了快速發展，特別是在手性藥物的拆分方面顯示出獨特的優勢，目前，使用模擬移動床色譜分離匹諾塞林對映體的方法迄今仍未見公開報導。本方法採用模擬移動床色譜拆分匹諾塞林對映體具有高效、節約成本，並能實現連續分離等特點。
[0004]

【發明內容】

[0005]本發明的目的是提供一種匹諾塞林對映體模擬移動床拆分的方法。
[0006]本發明為實現上述發明目的採用的技術方案如下:一種匹諾塞林對映體的模擬移動床的拆分方法，其特徵在於用塗敷型直鏈澱粉-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)為固定相，用甲醇流動相，用模擬移動床系統從匹諾塞林外消旋物中拆分出高純度的R-匹諾塞林和S-匹諾塞林，包括以下步驟:
(1)、將匹諾塞林外消旋體溶於甲醇中，濃度為:(T50g/L；
(2)、用模擬移動床拆分匹諾塞林外消旋體；
(3)、濃縮、重結晶得到高純度的兩種匹諾塞林對映體。
[0007]本發明具有以下技術效果:本發明採用模擬移動床系統，從匹諾塞林的外消旋體中拆分出具有光學純度的匹諾塞林對映體，工藝簡單，生產連續自動化，產品質量穩定，溶劑採用正己烷與醇類有機改性劑的混合物，可回收利用，無汙染，實現清潔生產。
【具體實施方式】
[0008]1、設備及條件選擇
採用模擬移動床色譜系統，該系統包括洗脫泵、進樣泵、萃取泵、色譜柱、電磁閥、單向閥、控溫器和PLC系統控制器及計算機組成。樣品溶液和洗脫液分別從樣品液入口和洗脫液入口注入系統，匹諾塞林的兩個對映體分別從提餘液和提取液兩個出口中流出，每隔一定的時間樣品液和洗脫液入口，提取液和提餘液出口沿流動相流動的方向切換至下一支色譜柱。
[0009]2、色譜柱填料及流動相(溶劑)選擇
以塗覆型直鏈澱粉-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)為手性固定相，填料粒度為fl50um，微粒越小，粒徑分布越窄，越有利於分離；但粒徑越小系統壓力越大，最適宜的粒徑範圍是20~40um ；
流動相(溶劑)為甲醇。 [0010]3、分離步驟
A、樣品用甲醇溶解，濃度為(T50g/L，色譜系統由4~12根製備柱組成，分為4個區，色譜柱數目越多分離越好，但系統的複雜度及系統壓力越高，最適合的是41根，通過模擬移動床色譜系統的控制器，定期控制電磁閥的開閉，使進樣口、萃取液出口及殘餘液出口沿流動相的方向定期變換，使匹諾塞林的兩個對映體從提取液和提餘液兩個出口流出系統；
B、得到的產品溶液，經過濃縮、重結晶得到純度在96%以上的合格產品；
C、成品檢驗 流動相:甲醇 流速:lmL/min
泵:江蘇漢邦科技分析泵
色譜柱:Chiralpak AD-RH 柱(4.6*250mm)
檢測器:江蘇漢邦科技紫外檢測器 檢測波長:290nm
下面結合實例進一步說明本發明:
分離實例一
1、樣品的配製:樣品用甲醇溶解，製成濃度為5g/L，經0.45um有機濾膜過濾後備用；
2、模擬移動床參數的選擇:確定參數如下:進樣流速0.3mL/min,洗脫流速2.0mL/min,提取液流速1.2mL/min，提餘液流速1.lmL/min，切換時間13min，溫度控制在20_30°C ；
3、產品收集:待模擬移動床系統運行穩定後，分別從兩齣口收集產品，減壓濃縮、重結晶後得到最終產品；
4、成品檢驗:得到的產品用流動相溶解後，用分析條件檢測兩齣口產品R-匹諾塞林和S-匹諾塞林的純度分別為97.3%和98.1% ；
每公斤固定相每天可生產R-匹諾塞林和S-匹諾塞林各0.55kg，流動相消耗為21.5L/kg,回收率為96.4%。
[0011]分離實例二
1、樣品的配製:樣品用甲醇溶解，製成濃度為10g/L，經0.45um有機濾膜過濾後備用；
2、模擬移動床參數的選擇:確定參數如下:進樣流速0.6mL/min,洗脫流速4.2mL/min,提取液流速2.6mL/min，提餘液流速2.2mL/min，切換時間12min，溫度控制在20_30°C ；
3、產品收集:待模擬移動床系統運行穩定後，分別從兩齣口收集產品，減壓濃縮、重結晶後得到最終產品；
4、成品檢驗:得到的產品用流動相溶解後，用分析條件檢測兩齣口產品R-匹諾塞林和S-匹諾塞林的純度分別為97.3%和97.9% ；
每公斤固定相每天可生產R-匹諾塞林和S-匹諾塞林各1.26kg，流動相消耗為67.5L/kg，回收率為96.8%。
[0012]分離實例三
1、樣品的配製:樣品用甲醇溶解，製成濃度為20g/L，經0.45um有機濾膜過濾後備用；
2、模擬移動床參數的選擇:確定參數如下:進樣流速1.2mL/min,洗脫流速6.8mL/min,提取液流速4.2mL/min，提餘液流速3.8mL/min，切換時間llmin，溫度控制在20_30°C ；
3、產品收集:待模擬移動床系統運行穩定後，分別從兩齣口收集產品，減壓濃縮、重結晶後得到最終產品；
4、成品檢驗:得到的產品用流動相溶解後，用分析條件檢測兩齣口產品R-匹諾塞林和S-匹諾塞林的純度分別為97.3%和98.3% ；
每公斤固定相每天可生產R-匹諾塞林和S-匹諾塞林各2.32kg，流動相消耗為95.5L/kg，回收率為96.6%ο
[0013]上述實施實例用來解釋說明本發明，而不是對本發明進行限制，在本發明的精神和權利要求的保護範圍內，對本發明做出的任何修改和改變，都落入本發明的保護範圍。
[0014]
【權利要求】
1.一種匹諾塞林對映體的模擬移動床色譜拆分方法，其特徵在於:採用模擬移動床色譜(簡稱SMBC)分離系統，系統中的洗脫泵流量O~100mL/min，壓力O~lOMpa，進樣泵流量O~50mL/min,壓力O~IOMpa,萃取泵流量O~100mL/min,壓力O~IOMpa,工作溫度20~35°C，色譜柱填料為直鏈澱粉-三(3，5- 二甲基苯基氨基甲酸酯)，填料粒度20~40um，流動相為甲醇，該方法的分離步驟如下: A、匹諾塞林外消旋體用甲醇溶解，濃度為O~50g/L，由進樣泵進入色譜系統，色譜系統由4~12根製備柱組成，分成四個區，每區有I~3支柱子，其中I區位於洗脫液入口與提取液出口之間，在此區實現S-匹諾塞林的解吸；II區位於提取液出口與進樣口之間，在此區使S-匹諾塞林反覆吸附、解吸、濃縮；111區位於進樣口與提餘液出口之間在此區得到R-匹諾塞林；IV區位於提餘液出口與洗脫液入口之間，一方面III區的洗脫液進入到該區可循環利用，另一方面將III區與I區隔開，防止提餘液中的R-匹諾塞林進入到I區； B、得到兩個對映體產品，經過濃縮重結晶，得到純度為95%以上的合格產品。
2.根據權利要求1所述的匹諾塞林的模擬移動床色譜分離方法，其特徵在於所述的流動相為甲醇。
3.根據權利要求1所述的匹諾塞林的模擬移動床色譜分離方法，其特徵在於進入模擬移動床系統的濃度為O~50g/L，進樣流速為O~50mL/min，洗脫液流速為O~100mL/min，萃取液流速為O~100mL/min,提餘液流速為O~100mL/min。
4.根據權利要求1所述的匹諾塞林的模擬移動床色譜分離方法，其特徵在於所述的定期切換電磁閥的時間為:5~20min。
5.根據權利要求1所述的匹諾塞林的模擬移動床色譜分離方法，其特徵在於所述的模擬移動床色譜系統的操作溫度`為20~30°C。
【文檔編號】C07D311/32GK103788049SQ201210431001
【公開日】2014年5月14日 申請日期:2012年11月2日 優先權日:2012年11月2日
【發明者】張大兵, 張寧, 劉玉明, 羅軍俠, 王亞輝 申請人:江蘇漢邦科技有限公司