一種治療肝病的中藥製劑及製備方法
2023-07-28 03:43:46
專利名稱：一種治療肝病的中藥製劑及製備方法
技術領域：
本發明涉及中藥製劑及製備方法，具體涉及一種含有龍膽總苦甙的中藥製劑、製備方法以及該製劑作為製備治療肝病藥物的應用。
背景技術：
目前世界各地各種類型的肝病發病率較高，尤其在發展中國家發病率更高。如埃及已成為一個全國性的問題，每年約有50萬人患病毒性肝炎。在國內雖無全國性的流行病等報告，從局部地區調查表明發病率已超過5％，上海地區在80年代大規模A肝流行也說明病毒性肝病的嚴峻性。有人估計目前世界上治療肝病藥物有500種之多，但事實上至今尚無一種能真正根治的。不少肝病患者由於得不到有效的藥物治療，由慢性肝炎發展成結節性肝硬化，有的慢性活動性肝炎長期持續不愈，有些肝硬化和慢性活動性肝病進一步惡化成肝癌。上醫大病理解剖教研室從220例肝癌屍檢的觀察和分析表明肝癌患者的肝炎和肝硬化均發生在肝癌之前，說明急慢性肝病治療的重要性。它不僅能使失去勞動力的肝病患者有所恢復，而且對預防肝癌起積極有效的作用，減少肝癌發病率。對人民健康建設國家是至關重要的。
由於病毒性肝炎傳播的傳染方式和途徑很多，它可以通過灰塵、接觸、食物或血製品使人感染上慢性病毒性肝炎或肝壞死等病症，而目前治療病毒性肝病尚無確切有效的藥物。如廣西中醫學院附院等單位，用巖黃連注射液治療464例急慢性肝病臨床治癒率31.47％，好轉率50％。採用中西結合治療的，能提高治癒率，但往往復發率較高。重型肝炎的治療，目前病死率尚較高，近年來經國內外學者的努力，雖有可喜進展，但國內對重型肝炎肝壞死的死亡率在50％左右。因此研究確有療效的肝病藥物是當務之急。
龍膽草為龍膽科龍膽屬的植物，在國內以龍膽為主的中藥複方，治療急慢性肝病都有良好的效果。湖北省中醫學院附屬醫院，曾用複方龍膽(所II)治療166例急性黃疸性肝炎，治癒121例(72％)，上海第一醫學院內科學院治療谷丙轉氨酶持續增高的遷延性和慢性傳染性肝炎20例，對降轉氨酶有較好效果。對脅痛、口苦、尿赤、脈弦、舌邊紅等肝膽鬱熱的清除有良效。湖北醫學院附一內科，治療25例急黃和105例兒童黃疸型肝炎，治癒率91.42％；其他各地也以龍膽為主的複方，治療各種類型的膽病，都收到良好的效果。龍膽科獐牙菜屬植物青葉膽(Swertia chinensis Franch)和當藥(S.pseudochinensis Hara)，單獨用於急慢性肝炎，都顯示很好的效果。
在祖國醫藥記載中龍膽草也是瀉肝膽火的要藥。如《本草綱目》記載龍膽能益肝之氣，瀉肝膽之邪熱，……。《本草新編》中龍膽草其功專利水，清溼除黃疸，……。在《本經》中龍膽主骨問寒熱……清洩肝膽有餘之火，疏通下焦溼熱……。與現代的藥理和臨床相吻合，尤其近幾年的研究工作證實，龍膽草中的龍膽苦甙具有對小鼠或大鼠實驗性的肝保護作用和肝損害的抑制作用。
發明內容
本發明在廣泛臨床實踐基礎上對肝II方(龍膽、青蒿、大青葉、車前、敗醬草)進行藥理篩選，認為龍膽有利疸、保肝和消炎等作用，且優於其他四味藥。
本發明所要解決的技術問題是在現有的藥理試驗基礎上，通過提取龍膽草中的有效成分，製備質量穩定，療效確切，方便使用的治療肝病的中藥製劑。
本發明公開的治療肝病的中藥製劑由重量百分比為0.3--85％龍膽草活性成分提取物和15--99.7％藥用輔料組成的醫學上可接受的各種劑型的製劑，其中龍膽草活性成分提取物中的主要活性成分龍膽總苦甙含量≥90％。
本發明所述的醫學上可接受的各種劑型為注射劑(包括水針、粉針、凍幹針、大輸液等)、固體製劑(包括各類片劑、膠囊劑、顆粒劑等)、霜劑和口服液。
本發明所要解決的另一技術問題是提供上述治療肝病的中藥製劑的製備方法。
本發明公開的治療肝病的中藥製劑的製備方法包括下列步驟1.龍膽總苦甙提取物的製備
取龍膽草用65-95％醇溶液滲漉至無苦味，藥液減壓濃縮得粗粉，粗粉去脂後用溶劑純化，減壓濃縮，真空乾燥後即得淡黃色的提取物固體，龍膽總苦甙含量≥90％。
其中所用的醇溶液可以是甲醇或乙醇溶液；
其中所述的去脂方法可以是超臨界液態CO2萃取法或酯溶性溶劑如石油醚等抽提法；
其中所述的溶劑純化選用的溶劑為丙酮、甲醇、乙酸乙酯、正丁醇或上述溶劑二種或多種的混合溶劑。2.注射液的製備
取上述龍膽總苦甙提取物，加注射用水溶解，脫色，過濾；
濾液若直接灌封、消毒即製成水針劑；若消毒灌裝後凍幹即為凍幹針；若直接消毒、乾燥、粉碎、灌裝即為粉針；若與輸液配製即可製成大輸液；所製成的製劑龍膽總苦甙含量為3-5％；3.固體製劑的製備
按處方量分別稱取龍膽總苦甙提取物和藥用輔料用流化床噴霧制粒法制粒，用常規方法製成片劑、膠囊劑和顆粒劑等，使每片、粒或袋的龍膽總苦甙含量為100-600mg；4、霜劑的製備
按處方量分別稱取龍膽總苦甙提取物和藥用輔料，用常規方法製成水包油的霜劑，使龍膽總苦甙含量為1-10％；5.口服液的製備
按處方量分別稱取龍膽總苦甙提取物和藥用輔料，用常規方法製成口服掖，使龍膽總苦甙含量為100-600mg/ml。
本發明上述製劑均採用HPLC或TCL-scan方法測定龍膽總苦甙含量。
本發明所要解決的再一技術問題是提供上述製劑在製備治療肝病藥物中的應用。
本發明公開的製劑可用於病毒性肝炎高峰期的重症肝炎或高峰期後病情遷延不愈，而且反覆發作的黃疸性重症肝炎；尤其是預防亞急性肝壞死和肝癌。
中國藥典確定的龍膽草有4種，即龍膽科植物條葉龍膽Gentianamanshuriea Kitag.、龍膽G.scabra Bge.、三花龍膽G.triflora Pall.，前三種統稱龍膽，另外還有一種堅龍膽G.rigescens Franch。
在市售的龍膽中龍膽屬各種品種至少有40多種，龍膽科獐牙菜屬含有龍膽苦甙也有幾十種。本發明所用的龍膽為我國東北等地產的粗糙龍膽Gengtiana scabra Bge.，即龍膽科，龍膽屬scabra種的龍膽草。
根據文獻報導龍膽草含有龍膽總甙(包括當藥甙)，龍膽鹼，龍膽酸及龍膽二糖、三糖等龍膽成份，龍膽甙能促進胃液分泌，胃酸增加。塗擦家兔皮膚後，皮膚溫度上升，皮膚復元時間縮短、毛細管抵抗運動減弱，皮膚酸化還原功能增大，對皮膚肌肉有顯著的亢進作用，說明龍膽苦甙能使血管微循環增加。從中醫理論說明能活血化瘀，促進肝循環，增進肝細胞的營養；對胃酸增加，促進胃的消化功能也有利肝功能的恢復。另外有瑞士學者報導，龍膽鹼小劑量對中樞神經有興奮作用，大劑量有抑制麻痺作用，因此治肝病的成分應是龍膽苦甙。
從總成分的藥理獲得信息，苦甙與生物鹼不分離，其藥理只見毒性不見療效，從動物解剖中觀察到動物內臟的麻痺現象。聯繫生物鹼對中樞作用，說明大劑量的龍膽鹼毒性掩蓋了龍膽苦甙的藥理作用。要達到治療目的，需分離龍膽鹼，純化龍膽苦甙。以後的試驗均證明了這一點。
用本發明方法製得的龍膽總苦甙及龍膽總苦甙注射液進行高效液相色譜分析，結果如下
裝置JASCO FLC-350高效液相色譜儀
層析柱JASCO WC-01(吸附)500×2.3mm
流動相氯仿∶己烷∶甲醇(100∶50∶5)0.5ml/min
檢測器UVIDEC-2 紫外檢測258nm、0.056AUFS
記錄器50Mvfs紙速2mm/min
選擇量數十微克龍膽總甙
圖譜分析
圖1為龍膽總苦甙的色譜圖，其中①號峰經鑑別是溶媒甲醇引起，其餘10個峰均是樣品的組分，號峰含量最大，⑩號峰次之(由峰面積推測)，這兩種成分合起來佔總量90％以上。其餘各成分經正丁醇精製，大部分可以被除去(見圖2)；圖3為龍膽注射液的色譜，⑩和號峰是注射液的主要成分，與圖1比較稍有差異，可能由於水溶液稀釋所引起。
用本發明方法製得的龍膽總苦甙進行有關毒性試驗，結果如下
1.LD50＝163.49/kg(貫序法)；
2.對貓的血壓呼吸影響(常規法)未見明顯影響；
3.對狗的毒性總甙注射液40毫升，加10％葡萄糖注射液500毫升，靜脈滴注。對血壓、血膽紅素、血鉀、血SGPT及尿膽元等均無明顯影響，也未見有溶血反應。
實驗證明無明顯毒性，安全、有效、可供臨床。
用本發明方法製得的龍膽總苦甙進行有關藥理試驗與臨床療效觀察。
(一)龍膽總苦甙的藥理
1.利膽作用(大鼠毛細管插入法)
用75和76二個批號進行4次實驗，給藥後膽汁流量有增加，增加率為23％-42％，3次實驗P值均小於0.05，表明龍膽總甙有明顯的利膽作用。(詳見表1)
表1 龍膽總苦甙對大鼠膽汁流量的影響
2.抗炎作用(急性蛋清性關節炎的抗炎作用)
實驗結果(見表2)表明龍膽總苦甙對蛋清性關節炎有一定的抗炎作用。
表2 龍膽總甙對大鼠蛋清性關節炎的影響注*與對照組間比較P＜0.05
3.對實驗性高SGPT的作用(CCL4引起高SGPT)；結果(見表3)似有一定的降酶作用。
表3 龍膽總苦甙對SGPT的影響
從以上的初步實驗結果表明龍膽總苦甙具有明顯的利膽作用和抗炎作用，對四氯化碳引起的高SGPT有一定降酶效果，毒性小、較安全、可供臨床試用。
4、本發明曾在上海藥物所用CCL4損傷肝細胞後用龍膽總苦甙成分治療，經病理切片證實能使破壞的肝細胞恢復正常。
(二)龍膽總苦甙臨床療效觀察
1.病例及治療方法(在武漢同濟醫院傳染科進行臨床觀察)
選擇急慢性肝炎合併黃疸的患者，黃疸指數在30-140單位，谷丙轉氨酶活力在500-720單位，其中黃疸肝炎第二次復發患者，黃疸指數入院時為90單位，3天後檢測至140單位，說明在黃疸上升期，且病情嚴重，SGPT600單位，伴發熱、噁心、嘔吐、昏沉。此外有膽管癌一例肝外阻塞，黃疸指數120單位，SGPT 370單位。臨床用龍膽總苦甙40ml，加入500ml10％葡萄糖注射液，靜脈滴注，每日一次，療程13-28天，每3-7天記錄臨床症狀並測定黃疸指數和SGPT，同時選擇病情相似的3例，用其他中西藥治療作對照。
2.療效觀察結果
(1)臨床觀察無毒副反應，安全可靠。
(2)治療組的血清膽血素恢復時間為12.7天，對照組為27.3天。
(3)治療組ALT復常時間為22.8天，對照組為45.3天。
(4)臨床痊癒(症狀、體徵顯著好轉或消失，肝功能指標復常)治療組平均為22.8天，對照組為45.7天。
初步臨床觀察龍膽總苦甙靜脈注射液，對急慢性肝炎活動期並發黃疸患者能迅速退黃，高SGPT也都能在13-28天內降至正常。1例重症病人也能迅速緩解，且無其他副作用，安全、可靠，在治療中病人食慾增加各種病症得到改善，病人出院時面色紅潤，心情愉快、體力得到恢復。醫師們在小結時指出GS注射液從6個病例來看，對急慢性肝病有確切的療效，而且對重症病人也能迅速緩解是值得進一步研究的藥物，還有可能用於治療重症肝壞死患者。
本發明通過對龍膽草有效成分的篩選，提取其龍膽總苦甙製成適用於治療肝病的製劑，具有明顯的利膽、消炎作用。對於急慢性傳染性肝炎，在退黃、降酶、增進食慾及完善精神狀態方面，都顯示有良好的療效和獨特的作用，且無任何的副作用，安全無毒。為肝病患者提供了一種療效顯著、使用方便的新型藥物。對促進肝病患者恢復健康，減低肝病死亡率，減少肝癌發病均具有積極的意義。
圖1龍膽總苦甙的HPLC色譜圖
圖2精製後龍膽總苦甙的HPLC色譜圖
圖3龍膽總苦甙注射液的HPLC色譜圖
具體實施例方式
實施例1
龍××(27歲，女)門診檢查為慢性肝炎，多次反覆發作的肝病，有發熱、噁心、嘔吐、無力，用擔架抬進醫院。當時黃疸指數為90，轉氨酶570，膽紅素9mg，是重症肝炎。進院後第二天開始用龍膽總甙注射液進行治療，住院第5天進行抽血化驗，黃疸指數140單位，膽紅素14mg，谷丙轉氨酶600單位，說明正處在病情重，上升期，但患者自覺症狀改善，故繼續應用龍膽注射液，於第九天降至70單位，發熱等症狀也漸漸消失，第28天SGPT降至190單位，黃疸指數降至13單位。因供試藥用完，改用一般保肝藥至臨床痊癒出院。半年後隨訪患者一切正常，未發現再復發。實施例2 龍膽總苦甙的製備
取龍膽草用75％乙醇溶液滲漉至無苦味，藥液減壓濃縮得粗浸膏，粗浸膏用超臨界液態CO2萃取法去脂後，濃縮除去溶劑，用乙酸乙酯及正丁醇精製，真空乾燥後即得淡黃色的提取物固體，龍膽總苦甙含量為93％。實施例3 龍膽總苦甙注射液的製備
取按實施例1方法製得的龍膽總苦甙提取物，加注射用水溶解，活性炭脫色，過濾，消毒滅菌後灌裝成20ml/支，使每支含龍膽總苦甙0.5g，供靜脈注射。實施例4 龍膽總苦甙凍幹針的製備
取按實施例1方法製得的龍膽苦甙提取物，加注射用水及少量乙醇溶解，活性炭脫色，過濾，消毒滅菌後灌裝，凍幹，使每支含龍膽總苦甙1g。實施例5 龍膽總苦甙片劑的製備
取按實施例1方法製得的龍膽苦甙提取物，加10％重量的麥芽糊精，40％微晶纖維素，用流化床制粒，加1％硬酯酸鈣後混勻壓片，每片含龍膽總苦甙250mg。實施例6 龍膽總苦甙膠囊劑的製備
取按實施例1方法製得的龍膽苦甙提取物，加20％重量的麥芽糊精，60％微晶纖維素，1％硬酯酸鈣後混勻灌入膠殼中即得，每粒含龍膽總苦甙150mg實施例7 龍膽總苦甙霜劑的製備配方
龍膽總苦甙 16.9g
矽油100g
石蠟油 500g
硬脂酸 500g
硬酯醇 50g
A-209g
SG 16g
甘油500g
用常規方法製成水包油霜劑，龍膽總苦甙含量1％。
權利要求
1、一種治療肝病的中藥製劑，其特徵在於該製劑由重量百分比為0.3-85％龍膽草活性成分提取物和15-99.7％藥用輔料組成的醫學上可接受的各種劑型的製劑，其中龍膽草活性成分提取物中的主要活性成分龍膽總苦甙含量≥90％。
2、一種如權利要求1所述的治療肝病的中藥製劑，其特徵在於其中所述劑型為注射劑、固體製劑、霜劑和口服液。
3、一種如權利要求1所述的治療肝病的中藥製劑的製備方法，其特徵在於該製備方法包括下列步驟(1)龍膽總苦甙提取物的製備
取龍膽草用65-95％醇溶液滲漉至無苦味，藥液減壓濃縮得粗粉，粗粉去脂後用溶劑純化，減壓濃縮，真空乾燥後即得淡黃色的提取物固體，龍膽總苦甙含量≥90％；(2)注射液的製備
取上述龍膽總苦甙提取物，加注射用水溶解，脫色，過濾；
濾液直接灌封、消毒即製成水針劑；消毒灌裝後凍幹即為凍幹針；直接消毒、乾燥、粉碎、灌裝即為粉針；與輸液配製即可製成大輸液；所製成的製劑龍膽總苦甙含量為3-5％；(3)固體製劑的製備
按處方量分別稱取龍膽總苦甙提取物和藥用輔料用流化床噴霧制粒法制粒，用常規方法製成片劑、膠囊劑和顆粒劑等，使每片、粒或袋的龍膽總苦甙含量為100-600mg；(4)霜劑的製備
按處方量分別稱取龍膽總苦甙提取物和藥用輔料，用常規方法製成水包油的霜劑，使龍膽總苦甙含量為1-10％；(5)口服液的製備
按處方量分別稱取龍膽總苦甙提取物和藥用輔料，用常規方法製成口服掖，使龍膽總苦甙含量為100-600mg/ml。
4、一種如權利要求3所述的治療肝病的中藥製劑的製備方法，其特徵在於其中所用的醇溶液選用甲醇或乙醇溶液。
5、一種如權利要求3所述的治療肝病的中藥製劑的製備方法，其特徵在於其中所述的去脂方法為超臨界液態CO2萃取法或酯溶性溶劑如石油醚抽提法。
6、一種如權利要求3所述的治療肝病的中藥製劑的製備方法，其特徵在於其中所述的溶劑純化選用的溶劑為丙酮、甲醇、乙酸乙酯、正丁醇或上述溶劑二種或多種的混合溶劑。
7、一種如權利要求1所述的含有龍膽總苦甙中藥製劑在製備治療肝病藥物中的應用。
8、一種如權利要求7所述的含有龍膽總苦甙中藥製劑在製備治療肝病藥物中的應用，其特徵在於該製劑可用於病毒性肝炎高峰期的重症肝炎或高峰期後病情遷延不愈，而且反覆發作的黃疸性重症肝炎；尤其是預防亞急性肝壞死和肝癌。
全文摘要
本發明涉及一種含有龍膽總苦甙的中藥製劑、製備方法以及該製劑作為製備治療肝病藥物的應用。本發明公開的含有龍膽總苦甙的中藥製劑由重量百分比為0.3－85％龍膽草活性成分提取物和15－99.7％藥用輔料組成的醫學上可接受的各種劑型的製劑如注射劑、固體製劑、霜劑和口服液，其中龍膽草活性成分提取物中的主要活性成分龍膽總苦甙含量≥90％。本發明還公開了上述中藥製劑的製備方法。本發明製劑具有明顯的利膽、消炎、降酶作用，對於急慢性傳染性肝炎，都顯示有良好的療效和獨特的作用，且安全無毒，為肝病患者提供了一種療效顯著、使用方便的新型藥物。對促進肝病患者恢復健康，減低肝病死亡率，減少肝癌發病均具有積極的意義。
文檔編號A61P1/16GK1403099SQ0112670
公開日2003年3月19日 申請日期2001年9月7日 優先權日2001年9月7日
發明者婁如菊 申請人:婁如菊