作為因子Xa抑制劑的N－取代甘氨酸衍生物的製作方法

2023-05-26 23:56:16 3

>實施例No.R1XR2R3R4MS*115Ad-樟腦-SO2--CH2COOHCH3H557.6115Bd-樟腦-SO2--CH2C(O)NH2CH3H558115Cd-樟腦-SO2--(CH2)2COOHCH3H573115Dd-樟腦-SO2--(CH2)2C(O)OCH3CH3H587115Ed-樟腦(OH)-SO2--CH2COOHCH3H561*質譜值製備上述化合物所用的方法與實施例5至10，22至28，36至44，52至62和/或68至73中所述的相似，使用了下表中的R2反應劑，形成的R2基團具有R2反應劑的立體構型。R2基團R2反應劑-(CH2)3NH(＝NH)NH2Boc-D-Ng-硝基精氨酸-CH2C(O)NH2Boc-L-天冬氨酸-CH2COOHBoc-L-天冬氨酸-β-苄酯-(CH2)2C(O)OCH3Boc-L-天冬氨酸-β-甲酯-CH2S(O)2CH2COOH一水合鹽酸L-半胱氨酸-CH2C(O)NH2Boc-L-穀氨醯胺-(CH2)2COOHBoc-L-穀氨酸-β-苄酯-(CH2)2C(O)OCH3Boc-L-穀氨酸-β-甲酯-CH2S(O)2CH3L-甲硫氨酸碸-O-苄酯鹽酸鹽實施例116在R1具有苄基的化合物的一般製備方法製備以下化合物。用質譜來證實分子量。*質譜值+L-構型製備上述化合物所用的方法與實施例11至16，29至35和/或63至67中所述的相似，使用了下表中的R2反應劑，形成的R2基團具有R2反應劑的立體構型。R2基團R2反應劑-(CH2)3NH(＝NH)NH2Boc-D-Ng-硝基精氨酸-CH2C(O)NH2Boc-L-天冬氨酸-CH2COOHBoc-L-天冬氨酸-β-苄酯-(CH2)2C(O)OCH3Boc-L-天冬氨酸-β-甲酯-CH2S(O)2CH2COOH一水合鹽酸L-半胱氨酸-CH2C(O)NH2Boc-L-穀氨醯胺-(CH2)2COOHBoc-L-穀氨酸-β-苄酯-(CH2)2C(O)OCH3Boc-L-穀氨酸-β-甲酯-CH2S(O)2CH3Boc-L-甲硫氨酸碸-(CH2)3NH(＝NH)NH2+Boc-L-Ng-硝基精氨酸實施例117苄基磺醯基-(D)-精氨酸N-甲基(O-bn)-精氨醛的製備按照類似本文實施例的方法，使用市售的N-甲基-O-苄基絲氨酸叔丁酯(代替Boc-肌氨酸)，製備具有以下取代基的化合物。以Boc-Ng-精氨酸作為R2反應劑。用質譜來證實分子量。*質譜值實施例118R1為苄基R2為L-asp(OMe)側鏈的化合物的一般製備方法如下製備以下化合物。用質譜來證實分子量。*質譜值製備上述化合物所用的方法與實施例45至51中所述的相似，但使用Boc-L-天冬氨酸-β-甲酯作為R2反應劑，並使用以下R3反應劑。化合物的立體構型與R2反應劑的相同。實施例119R1為4-甲苯基的化合物的一般製備方法如下製備以下化合物。用質譜來證實分子量。*質譜值製備上述化合物所用的方法與實施例中所述的相似，但使用4-甲苯磺醯氯代替苯磺醯氯，並使用以下R2反應劑。化合物在R2位置的立體構型與R2反應劑的相同。實施例120R2為D-arg或L-arg的化合物的一般製備方法按照實施例98至114的方法製備以下化合物*質譜值+L-構型實施例121R2為異丁基的化合物的一般製備方法根據包括實施例37在內的本文所述的方法製備以下化合物，使用氯甲酸甲酯代替二碳酸二叔丁酯，用D-亮氨酸作為R2反應劑代替實施例36化合物，由這些起始物質生成的R1-X-NH-CH(R2)COOH為甲氧羰基-D-亮氨酸。生成的化合物其R2處的立體構型與R2反應劑的相同。*質譜值實施例122R1為烷基、X為羰基的化合物的一般製備方法根據本發明詳細說明和實施例部分所述的方法製備以下化合物，使用實施例118中的R3反應劑，並使用2-丙基戊酸作為生成R1的起始物。使用Boc-L-天冬氨酸-β甲酯作為R2反應劑。生成的化合物其R2處的立體構型與R2反應劑的相同。*質譜值實施例123R1-X為氧基羰基的化合物的一般製備方法根據本發明詳細說明和實施例部分所述的方法製備以下化合物，使用實施例115所述的R2反應劑異生成合適R2基團，使用氧基羰基氯作為R1-X生成基團的起始物*質譜值實施例1243-(4-乙氧羰基苯基)丁-2-酮的製備4-溴苯甲酸乙酯(7.5g)，3-丁-2-酮(3.6g)，三苯基膦(0.17g)，乙酸鈀(0.073g)和碳酸氫鈉(3.5g)在DMF(40ml)中形成懸浮液，在其中通30分鐘氬氣。然後將反應容器放在100℃的油浴中。3天後，將反應混合物冷卻，並經硅藻土過濾，用乙酸乙酯稀釋(150ml)，用鹽水(2×300ml)洗滌，用硫酸鎂乾燥，然後濃縮。經矽膠柱色譜(使用己烷/乙酸乙酯(4∶1)洗脫)純化得標題化合物4.7g(57％得率)。Rf(己烷/EtOAc1∶1)＝0.59。實施例1254-(2-乙醯基乙基)苯甲酸的製備在實施例124化合物(4.4g)的氯仿(100ml)溶液中加入50％間氯過苯甲酸(13.8g)。溶液回流19小時，然後再加入50％間氯過苯甲酸(6.9g)，繼續回流24小時。將反應混合物冷卻至室溫，減壓去除溶劑。殘留物用乙酸乙酯(100ml)稀釋。用碳酸氫鈉溶液(100ml)，硫代硫酸鈉溶液(100ml)和鹽水(100ml)洗滌，然後用硫酸鎂乾燥後再濃縮。經矽膠柱色譜(使用己烷/乙酸乙酯(9∶1至4∶1)梯度洗脫)純化得標題化合物2.2g(47％得率)。Rf(己烷/EtOAc1∶1)＝0.70。實施例1264-(2-羥基乙基)苯甲酸乙酯的製備在新鮮製備的乙醇鈉溶液(在25ml乙醇中加入0.20g鈉)中加入實施例125化合物(2.1g)。反應混合物在65℃的油浴中加熱1小時，然後冷卻至室溫，用3％的鹽酸中和。然後減壓去除溶劑。殘留物用乙酸乙酯(100ml)萃取，用鹽水(50ml)洗滌，用硫酸鎂乾燥，然後濃縮。經矽膠柱色譜(使用己烷/乙酸乙酯(9∶1至2∶1)梯度洗脫)純化得標題化合物1.2g(70％得率)。Rf(己烷/EtOAc1∶1)＝0.41。實施例1272-(4-乙氧羰基苯基)乙基氨基甲醯基-(d)-Ng-NO2-精氨醯肌氨酸芴基甲基酯的製備在0℃，用2分鐘時間在實施例126化合物(1.0g)和可力丁(2.7ml)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入碳醯氯(2.7ml，1.93M甲苯溶液)的二氯甲烷(15ml)溶液。45分鐘後，一次性加入(d)-Ng-NO2-精氨醯肌氨酸芴基甲基酯鹽酸鹽(2.6g，實施例12的產物)。去除冷卻浴，反應混合物在室溫下攪拌22小時。用3％的鹽酸中和混合物並減壓濃縮後，殘留物用乙酸乙酯(200ml)稀釋，用3％的鹽酸(50ml)，鹽水(50ml)，碳酸氫鈉溶液(50ml)洗滌，用硫酸鎂乾燥，然後濃縮，得標題化合物3.4g(95％得率)。Rf(CH2Cl2/MeOH95∶5)＝0.19。實施例1282-(4-乙氧羰基苯基)乙基氨基甲醯基-(d)-精氨醯肌氨酸精氨酸乙基aminal的製備如實施例18所述，用哌啶解封閉實施例127的酯(3.4g)，如實施例19所述使生成的羧酸與Ng-NO2-精氨酸乙基aminal鹽酸鹽偶合，如實施例20所述氫解硝基，得1.8g標題化合物(59％總得率)。實施例1292-(4-乙氧羰基苯基)乙基氨基甲醯基-(d)-精氨醯肌氨酸argininal的製備如實施例21所述水解實施例128化合物(1.0g)，得0.54g標題化合物。實施例1302-(4-羰基苯基)乙基氨基甲醯基-(d)-精氨醯肌氨酸精氨酸乙基aminal的製備將實施例128化合物(1.8g)溶解在乙醇(5.0ml)中，加入氫氧化鋰(6.0ml)。反應混合物攪拌4小時，然後用3％鹽酸中和至pH6，濃縮後得標題化合物。實施例1312-(4-羰基苯基)乙基氨基甲醯基-(d)-精氨醯肌氨酸argininal的製備如實施例21所述水解實施例130化合物(1.0g)，得0.39g標題化合物。實施例132N-Boc-L-甲硫氨酸碸-O-苄酯的製備在冷卻至0℃的N-Boc-L-甲硫氨酸碸(50g，178毫摩爾)無水THF(500ml)溶液中加入羰基二咪唑(34.6g，214毫摩爾)。30分鐘後，混合物升溫至室溫保溫2小時，直至CO2放氣終止。此時，加入苄醇(27.6ml，267毫摩爾)，攪拌反應12小時。真空濃縮反應混合物，殘留物用500ml乙酸乙酯稀釋。有機相用飽和碳酸氫鹽(1×100ml)，鹽水(1×100ml)和檸檬酸飽和水溶液(1×100ml)洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並真空去除溶劑後得白色固體。白色固體用二乙醚/己烷1∶1混合物(300ml)洗滌，經Buchner漏鬥過濾，得50.0g(92％)標題化合物。標題化合物的薄層色譜分析顯示一個點，Rf＝0.18(矽膠，3∶2己烷/乙酸乙酯)。實施例133L-甲硫氨酸碸-O-苄酯鹽酸鹽的製備在實施例132化合物(50.0g)中加入4M的鹽酸二噁烷溶液200ml。固體在2小時後完全溶解，薄層色譜顯示無起始物。然後真空濃縮溶液，生成的固體用二乙醚洗滌，得55.0g(100％)白色固體狀標題化合物。實施例134N-苄基磺醯基-L-甲硫氨酸碸-O-苄酯鹽酸鹽的製備將實施例133化合物(4.6g，15毫摩爾)的無水CH3CN(35ml)懸浮液在冰浴中冷卻至0℃，先加入苄基磺醯氯(3.46g)的CH3CN(10ml)溶液，然後加入吡啶(3.8ml，45毫摩爾)。在冰浴中攪拌反應15小時，緩慢地升至室溫。真空蒸發溶劑後得到殘留物。將得到殘留物溶解在乙酸乙酯(200ml)中，溶液用碳酸氫鈉飽和水溶液(50ml)，鹽水(50ml)，檸檬酸飽和水溶液(50ml)洗滌，用硫酸鎂乾燥。溶液經過濾和振蕩蒸發後得油狀物。該粗產物經矽膠快速色譜純化得標題化合物。實施例135N-苄基磺醯基-L-甲硫氨酸碸的製備在實施例134化合物(1.6g)的CH3OH(50ml)溶液中加入10％鈀碳250mg。該混合物在室溫下常壓氫化12小時。然後將硅藻土濾片過濾，真空蒸發溶劑後得標題化合物。實施例AIC50的測定使用純化的人Xa因子，測定抑制50％酶活性時的濃度(IC50)，據此評價本發明化合物作為Xa因子催化活性抑制劑的能力。全部試驗所用的緩衝液都是HBSA(10mM的HEPES，pH7.5，150mM的氯化鈉，0.1％牛血清白蛋白)。試驗的進行為，在Corning微滴板上，在相應的格中混合50微升HBSA，50微升稀釋於HBSA中的試驗化合物(或用於測定無抑制速度的純HBSA)和50微升稀釋於HBSA中的酶(用酶研究實驗室(EnzymeReseachLaboratoris)提供的純化的人Xa因子，根據Bock，P.E等(1989)「生物化學及生物生理學成就」(ArchivesofBiochem.Biophs)273375中所述的方法來製備。在試驗前將酶稀釋在HBSA中，最終濃度為0.5nM)。在環境溫度下孵育30分鐘，在格中加入50微升S2765底物(KabiDiagnostica提供的二鹽酸N-α-苄氧基羰基-D-精氨酸-L-甘氨醯-精氨酸-對硝基醯苯胺，在試驗前先溶於去離子水中，再用HBSA稀釋)，使最終體積達到200微升，其最終濃度為250μM(約5倍Km)。使用ThermoMax動力學微滴板讀數儀，在低於5％的底物被消耗的前5分鐘測定405nm處吸光度值的改變，以此測定生色底物水解的初速度。以降低水解初速度50％的抑制劑加入濃度作為IC50值。表1顯示本發明部分化合物(實施例所述)的IC50(nM)。表1.優選化合物的IC50化合物IC50(nM)8.2(Ex.10)1.7(Ex.16)32(Ex.21)1.8(Ex.28)637(Ex.35)7.3(Ex.44)低於25(Ex.4.6(Ex.56)101(Ex.62)926(Ex.67)614(Ex.73)實施例B體外酶專一性測試試驗測定抑制50％酶活性的化合物濃度，將該值與以下相關的絲氨酸蛋白酶中的部分或全部比較凝血酶，重組組織血漿酶原活化劑(rt-PA)、血漿酶，活化蛋白C，胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶，以此測定本發明化合物作為Xa因子催化活性選擇性抑制劑的能力。全部試驗所用的緩衝液都是HBSA(10mM的HEPES，pH7.5，150mM的氯化鈉，0.1％牛血清白蛋白)。IC50測定試驗的進行為，在Corning微滴板上，在相應的格中混合50微升HBSA，50微升稀釋於HBSA中的一定濃度(覆蓋著一個較寬的濃度範圍)的試驗化合物(或用於測定Vo(無抑制速度)的純HBSA)和50微升稀釋於HBSA中的酶。在環境溫度下孵育30分鐘，在格中加入50微升以下濃度的底物，使最終體積達到200微升。使用ThermoMax動力學微滴板讀數儀，在低於5％的底物被消耗的前5分鐘測定405nm處吸光度值的改變，以此測定生色底物水解的初速度。Xa因子的試驗根據實施例A所述進行。凝血酶試驗利用生色底物Pefachromet-PA(PentapharmLtd.的CH3SO2-D-六羥基酪氨酸-甘氨醯-L-精氨酸對硝基苯胺)測定凝血酶催化活性。在使用前將底物配製在去離子水中，再用HBSA稀釋，其最終濃度為300μM(約5倍Km)。向酶研究實驗室(EnzymeReseachLaboratorisInc.)獲取純化的人α-凝血酶。在試驗前將酶稀釋在HBSA中，使得最終濃度為0.25μM。重組組織血漿酶原活化劑(rt-PA)利用底物Pefachromet-PA(PentapharmLtd.的CH3SO2-D-六羥基酪氨酸-甘氨醯-L-精氨酸對硝基苯胺)測定rt-PA的催化活性。在使用前將底物配製在去離子水中，再用HBSA稀釋，其最終濃度為500μM(約3倍Km)。向基因技術公司(GenentechInc.)獲取人rt-PA(Activase)。在試驗前將酶在去離子水中再生，然後稀釋在HBSA中，使得最終濃度為1.0nM。血漿酶試驗利用生色底物，KabiDiagnostica的S-2251(二鹽酸D-纈氨醯-L-亮氨醯-硝基醯苯胺)測定血漿酶的催化活性。在使用前將底物配製在去離子水中，再用HBSA稀釋，其最終濃度為300μM(約2.5倍Km)。向酶研究實驗室(EnzymeReseachLaboratorisInc.)獲取純化的人血漿酶。在試驗前將酶稀釋在HBSA中，使得最終濃度為1.0nM。活化的蛋白C(aPC)利用PentapharmLtd.的生色底物PefachromePC(二鹽酸d苄氧羰基-D-纈氨酸-L-脯氨醯-L-精氨酸硝基苯胺)測定aPC的催化活性。在使用前將底物配製在去離子水中，再用HBSA稀釋，其最終濃度為250μM(約3倍Km)。向HematologicTechnologies，Inc獲取純化的人aPC。在試驗前將酶稀釋在HBSA中，使得最終濃度為1.0nM。胰凝乳蛋白酶利用生色底物，KabiDiagnostica的S-2586(甲氧基-琥珀醯-L-精氨酸-L-脯氨醯-L-亮氨醯-對硝基醯苯胺)測定胰凝乳蛋白酶的催化活性。在使用前將底物配製在去離子水中，再用HBSA稀釋，其最終濃度為100μM(約9倍Km)。向WorthingtonBiochemicalCorp.獲取純化的(3X-結晶的；CDI)牛α胰凝乳蛋白酶。在試驗前將酶稀釋在HBSA中，使得最終濃度為1.0nM。胰蛋白酶利用生色底物，KabiDiagnostica的S-2222(苄氧基-L-異亮氨酸-L-穀氨酸(γ甲酯)-L-精氨酸-對硝基醯苯胺)測定胰蛋白酶的催化活性。在使用前將底物配製在去離子水中，再用HBSA稀釋，其最終濃度為250μM(約4倍Km)。向WorthingtonBiochemicalCorp.獲取純化的(3X-結晶的；TRL3)牛α胰蛋白酶。在試驗前將酶稀釋在HBSA中，使得最終濃度為0.5nM。表2給出本發明部分化合物的IC50值(nM)，並證明了與相關絲氨酸蛋白酶比較，本發明化合物對Xa因子的專一性。表2-表示未測定實施例C(D)-樟腦磺醯基天冬氨醯基肌氨酸精氨醛在人血漿中的體外抗凝血作用使用匯集的正常人血漿，測定加入多種濃度抑制劑後的部分活性促凝血酶原激酶時間(APTT)和凝血酶原時間(PT)的延長，從而確定本發明化合物之一，(D)-樟腦磺醯基天冬氨醯基肌氨酸精氨醛(實施例56)的體外抗凝血作用。由GeorgeKingBiomedical，OverlandPark，KA獲得新鮮冷凍的異檸檬酸緩衝的正常人匯集血漿。使用Coag-α-MateRA4自動血凝度計(GeneralDiagnostics，OrganonTechnica，OklahomaCity，OK)，該血凝度計使用PatelinL或SimplastinExcel(OrganonTechnica，Durham，NC)作為血凝引發劑，根據製造商的說明來測定APTT和PT。將試驗化合物在快速解凍的血漿中製成一系列濃度的稀釋液，然後在測試盤上測試APTT的格中加入200微升，在測試PT的格中加入100微升。如圖2所示，(D)-樟腦磺醯基天冬氨醯基肌氨酸精氨醛在人血漿中劑量依賴性地延長了APTT，這表明其具有在人體內的抗血凝作用。本領域熟練技術人員可由此推定，該化合物可能是有效的人體內抗血栓形成劑。實施例D使用口服劑型的大鼠多重體外分路模型在大鼠體內以多室a-V分路模型來評價實施例56化合物。a-V分路模型是評價抗血栓形成化合物的最常用系統。Smith，J.R.和White，A.M.Br.J.Pharmaco1.，7729-38(1982)。在此模型中，在作為頸總動脈和頸靜脈之間外置分路一部分的矽鋁室中的人造血栓形成表面(通常是絲線或棉線片段)上形成一主要由纖維蛋白和部分介入的血小板及巨噬細胞構成的局部血栓(Shand，R.A.和Smith，J.R.和Wallis，R.B.Thromb.Res.，36，223-232(1984))。在本實施例中所述的方法是改進過的a-V分路模型，該模型允許待測劑的口服給藥，然後評價一2至3小時時間之窗內的藥效。主要過程為，在使用前令雄性HarlanSpragueDawley大鼠(420-450g)適應至少72小時。在手術前12小時，僅餵以水而不給以食物。將未麻醉的大鼠分成4個劑量組(每組6至7個鼠)，利用胃管口服待測藥物，劑量分別為1.0、3.0、10和50mg/kg。口服後馬上按50mg/kg體重的劑量腹膜內注射戊巴比妥鈉(Nembutal)進行麻醉，並放在一保溫墊上以保持體溫。通過對掐尾的神經反應，呼吸及核心體溫每隔15分鐘對麻醉水平進行監測。通過靜脈注射後續劑量(5mg/kg)來維持理想的手術麻醉深度。使用標準方法在左側股動脈插入聚乙烯導管(PE50)以便監測血壓和抽取血樣。左側股靜脈插以PE50導管以給予麻醉劑。將兩根充有生理鹽水的12.5cmPE50導管與一根6cm的PE160導管(具有6cm的3號絲縫線)連接來組裝外置分路並用止血器夾緊。一小段0.5cm的絲線頭拖出腔室與分路接縫之外。將PE90分路的末端插入左側頸靜脈和右側頸總動脈。該分路不夾止血鉗，血液可從頸動脈經腔室從頸靜脈流出旁管。15分鐘後，夾住腔室兩側，拆下腔室的動脈端後，取出含血栓的縫線部分。馬上稱重血栓並進行記錄。在預定的間隔(口服後60、90、120和150分鐘)進行該過程，以便再較大範圍的時間窗內評價藥效。在口服化合物後45、75、105和135分鐘，給予4次分路引發血流。對來自4次分路的血栓稱重是本試驗的最終目的。繼續監測血壓、心率、核心體溫和呼吸。試驗結束後給大鼠注射以Nembutal120mg/kg致死。每頭鼠進行一次實驗。表3給出了由該方法得出的數據，並顯示了實施例56化合物在抑制血栓形成方面的口服活性。在每一被測劑量，施用了實施例56化合物的鼠其形成的血栓小於施用水的鼠。化合物降低血栓形成的能力可以維持一定的時間。表3口服試驗化合物或水一定時間後形成血栓的大小實施例E試驗化合物在FeCl3誘導的血小板依賴性動脈血栓形成大鼠模型中的抗血栓形成活性的評價利用一已建立的急性血管內血栓形成實驗性大鼠模型來評價本發明化合物的抗血栓形成(即防止血栓的形成)性能。大鼠的FeCl3模型是一個血小板依賴性動脈血栓形成的典型模型，被用於評價潛在的抗血栓形成化合物。Kurz，K.D.，Main，B.M.和Sandusky，G.E.，Thromb.Res.，60269-280(1990)。在此模型中，用吸收了FeCl3新鮮溶液的濾紙局部處理大鼠的頸總動脈中的一段，在其中形成了一塊富含血小板的閉塞性血栓。FeCl3被認為擴散進入被處理的動脈段，並引起受作用的血管表面去內皮化作用。結果導致血液與亞內皮結構接觸，由此引起血小板粘附，血栓形成和血小板凝聚。直接結果是閉塞性血栓的形成。利用超聲波血流計來監測試驗化合物對使用FeCl3後閉塞性血栓的形成機率的影響，並以此作為最終目的。利用血流計來測定頸總動脈血流是對原方法的一種改進，原方法使用的是血栓形成的熱力學檢測。Kurz，K.D.，Main，B.M.和Sandusky，G.E.，Thromb.Res.，60269-280(1990)。在使用前令雄性HarlanSpragueDawley大鼠(420-450g)適應至少72小時。在手術前12小時，僅餵以水而不給以食物。準備大鼠，並用Nembutal麻醉，然後插入導管以監測血壓，以及施用藥物和麻醉劑。分離出左頸總動脈，即開一頸部中線切口，然後利用鈍器解剖和分散術從頸動脈鞘分離一段2cm的血管。在分離血管的近心端和遠心端埋設絲縫線，以形成圍繞血管近心端放置超聲波流速探頭(Transonic)的間隙。然後利用一靜止臂固定探頭。手術後，隨機地將大鼠分成對照組(生理鹽水)和治療組(實施例56或16化合物)。在埋設血流探頭後，血栓形成刺激前5分鐘，按各種濃度一次性大藥丸靜脈注射以試驗化合物。t＝0時，在分離頸總動脈距血流探頭遠端敷以浸漬了35％FeCl3新鮮溶液(水溶液)10ml的濾紙(直徑3mm，Whatman#3)。監測60分鐘內的血壓，血流，心率和呼吸。記錄閉塞(血流量為0)的發生機率作為最終目的。在血栓性閉塞發生機率上的劑量依賴性降低證明了本發明化合物作為抗血栓形成藥在此體內模型中防止血栓形成的藥效。下文表4列出了試驗化合物和幾種已知抗血栓形成藥在此模型中的ED50值，證明了本發明化合物的藥效。表4aED50為在50％的試驗動物中防止血栓性全閉塞的劑量。權利要求1.一種化合物，它具有下式結構其中(a)X選自-S(O)2-、-N(R′)-S(O)2-、-(C＝O)-、-OC(＝O)-、-NH-C(＝O)-、-P(O)(R″)-和直接的連接，其中R』是氫、1-約4個碳原子的烷基、約6-14個碳原子的芳基或約6-16個碳原子的芳烷基，R」是NR』、OR』、R』或SR』，條件是R」不是NH、OH、H或SH，和；(b)R1選自下列基團(1)任意被Y1取代的1-約12個碳原子的烷基，(2)被約5-8個碳原子環烷基取代的1-約3個碳原子的烷基，環烷基的環上的原子任意被Y1、Y2和/或Y3所取代，(3)約3-15個碳原子環烷基，環烷基環上的原子任意被Y1、Y2和/或Y3所取代，(4)有4到約10個選自碳和雜原子的環中原子的雜環烷基，其中雜原子選自氧、氮和S(O)i，其中i是0、1或2，環上任意地被Y1、Y2和/或Y3所取代，(5)有4到約10個選自碳和雜原子的環中原子的雜環，其中雜原子選自氧、氮和S(O)i，包括，其中是有3-6個碳原子的5-7個成員的雜環，其中V是-CH2-，-O-，-S(＝O)-，-S(O)2-或-S-，它可被Y1、Y2和/或Y3在環上任意地取代，(6)任意地被約5-8個碳原子的環烷基所取代的約2-6個碳原子的烯基，環上碳原子可被Y1、Y2和/或Y3任意地取代，(7)約6-14個碳原子的芳基，它可分別被Y1、Y2和/或Y3任意地單-、雙-或三-取代，(8)選自碳和雜原子的5-14個原子的雜芳基，其中雜原子選自氧、氮氣和S(O)i，雜芳基可分別被Y1、Y2和/或Y3任意地單-、雙-或三-取代，(9)約7-15個碳原子的芳基烷基，其烷基鏈上可被羥基或滷素取代，芳環上可被Y1、Y2和/或Y3單-、雙-或三-取代，(10)環中原子選自碳和雜原子的6-11個原子的雜芳烷基，其中雜原子選自氧、氮和S(O)i，其烷基鏈上可被羥基或滷素任意取代，環上可任意被Y1、Y2和/或Y3單-、雙-或三-取代，(11)約8-15個碳原子的芳烯基，芳環上可分別被Y1、Y2和/或Y3任意地單-、雙-或三-取代，(12)環中原子選自碳和雜原子的7-12個原子的雜芳基烯基，其中雜原子選自氧、氮氣和S(O)i，雜芳基烯基可分別被Y1、Y2和/或Y3任意地單-、雙-或三-取代，(17)1到約12個碳原子的二氟甲基或全氟烷基，(18)約6-14個碳原子的全氟芳基，(19)約7-15個碳原子的全氟芳烷基，和(20)氫，其中Y1、Y2和Y3是(i)獨立地選自滷素、氰基、硝基、四唑基、氨基、胍基、醯氨基、甲氨基和甲基胍基，-CF3、-CF2CF3、-CH(CF3)2，-C(OH)(CF3)2，-OCF3、-OCF2CF3、-OC(O)NH2、-OC(O)NHZ1、-OC(O)NZ1Z2、-NHC(O)Z1、-NHC(O)NH2、-NHC(O)NZ1、-NHC(O)NZ1Z2、-C(O)OH、-C(O)OZ1、-P(O)3H、-P(O)3H2、-P(O)3(Z1)2、-S(O)3H、-S(O)mZ1、-Z1、-OZ1、-OH、-NH2、-NHZ1、-NZ1Z2和N-嗎啉基，其×中m是0、1或2，Z1和Z2各自選自1到約12個碳原子的烷基、約6-14個碳原子的芳基、有1到約9個碳原子的約5-14個碳原子的雜芳基、約7-15個碳原子的芳烷基和有約3-9個碳原子的約6-11個原子的雜芳基烷基，或(ii)Y1和Y2被選擇地結合在一起，為OC(Z3)(Z4)O-，其中Z3和Z4獨立地選自氫、1到約12個碳原子的烷基、約6-14個碳原子的芳基有1到約9個碳原子的約5-14個原子的雜芳基，約7-15個碳原子的芳烷基，和有約3-9個碳原子的約6-11個原子的雜芳烷基，條件是若X不是直接連接的，則R1不是氫，(c)R2選自氫，-(CH2)pNHC(＝NH)NH2，-(CH2)pS(O)2CH3，-(CH2)pC(O)z5，-(CH2)pC(O)Oz6，-(CH2)pC(O)Nz6，-CH2S(O)2(CH2)pC(O)Z5，-CH2S(O)2(CH2)pC(O)Oz6，-CH2S(O)2(CH2)pC(O)NR5R6，-(CH2)pS(O)2Z6，-(CH2)pNH2，-(CH2)pC(O)NR5R6，-(CH2)pC(O)z6，-(CH2)pOZ6和其中p是1-6的整數，Z5是-OH、-OCH3、-OCH2CH3或-NR5R6，Z6是1到約4個碳原子的烷基、約6-14個碳原子的芳基或約7-16個碳原子的芳烷基，R5是氫，或是Z6，R6是氫或是任意被Y1、Y2和/或Y3單-、二-或三-取代的3到約15個碳原子的環烷基，任意被Y1、Y2和/或Y3單-、二-或三-取代的約7-15個碳原子的芳烷基，選自碳和雜原子的5-14個原子的雜芳基，其中雜原子選自氧、氮氣和S(O)i，雜芳基可分別被Y1、Y2和/或Y3任意地單-、雙-或三-取代，喹寧環或金剛烷基。是6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氫異喹啉基、4-羥基哌啶基、4-酮基哌啶基、N-嗎啉基、3，4-亞甲基二氧基苄基哌嗪基、任意被氟、氯、甲氧基或三氟甲基單取代的4-苯基哌嗪基或是任意被氟、氯、甲氧基或三氟甲基單取代的4-苄基哌嗪基。和它們的藥學上可接受的季銨鹽；(d)R3選自(1)氫；(2)任意被-OH取代的1到約8個碳原子的烷基；(3)約3-10個碳原子的環烷基；(4)被約5-8個碳原子環烷基取代的約1-3個碳原子的烷基；(5)任意被Y1、Y2和/或Y3單-、二-或三-取代的約3-10個碳原子的烷基；(6)1到約3個碳原子的烷基，在其末端碳處被約4-10個碳原子的芳基所取代，芳基任意被Y1、Y2和/或Y3單-、二-或三-取代；(7)1到約6個碳原子的烷基，其烷基支鏈在1-約6個碳原子的α、β、γ碳處；和(e)R4選自氫、任意被-OH取代的1到約7個碳原子的烷基或苯甲醯基，和1到約3個碳原子的烷基，在其末端碳處被約4-10個碳原子的芳基所取代，芳基任意被Y1、Y2和/或Y3單-、二-或三-取代。2.根據權利要求1所述的化合物，其中X選自…SO2-、-NH-S(O)2-和-N(R』)-S(O)2。3.根據權利要求1所述的化合物，其中X是-SO2-。4.根據權利要求1所述的化合物，其中R1選自烷基、環烷基、被環烷基取代的烷基、芳烷基和芳基，所有這些基團都被任意地取代。5.根據權利要求4所述的化合物，其中R1選自未取代的萘基、取代萘基、未取代的苯基、取代苯基、未取代苄基和取代苄基。6.根據權利要求5所述的化合物，其中R1是取代苄基或取代萘基。7.根據權利要求6所述的化合物，其中R1被選自-C(O)OH、-C(O)OZ1、-S(O)mZ1和-CF3的取代基所取代。8.根據權利要求7所述的化合物，其中取代基在環的間位或鄰位。9.根據權利要求4所述的化合物，其中R1是環己基或環己基甲基。10.根據權利要求1所述的化合物，其中R2選自-CH2CH2CH2NHC(＝NH)NH2、-CH2CH2S(O)2CH3、-CH2S(O)2(CH2)nC(O)Z3、-(CH2)nC(O)NR5R6和-11.根據權利要求10所述的化合物，其中R2選自-CH2CH2CH2NHC(＝NH)NH2、-CH2CH2S(O)2CH3和-(CH2)nC(O)NR5R6。12.根據權利要求11所述的化合物，其中R2是-CH2CH2CH2NHC(＝NH)NH2。13.根據權利要求1所述的化合物，其中R5是氫。14.根據權利要求1所述的化合物，其中R6選自-(R)-喹寧環、3-(S)-喹寧環、4-三氟甲基-7-基-香豆素、4-甲基-7-基-香豆素、7-基-香豆素、3-基-2-乙基-4(3H)-喹唑啉酮、2-基-苯並噻唑、3-基-苯甲酸、3-基-4-羥基苯甲酸、4-羥基-1-甲基-6-苯基-3-基-2(1H)-吡啶酮和1-金剛烷基或是乙基嗎啉、乙基哌啶、2-(2-乙基)吡啶、4-羥基苯乙基、(R)-α-甲基苄基、(S)-α-甲基苄基、4-(甲基)-5-羥基-6-甲基-3-吡啶甲醇、(1R，2S)-(N-甲基-N-(1-乙基))苄基醇、(1S，2R)-(N-甲基-N-(1-乙基))苄基醇、(1R，2R)-(N-甲基-N-(1-乙基))苄基醇、(1S，2S)-(N-甲基-N-(1-乙基))苄基醇和4-(甲基)-5-羥基-6-甲基-3-吡啶甲醇。15.根據權利要求1所述的化合物，其中R3選自末端碳原子上任意被-OH取代的1到約7個碳原子的烷基，環己基甲基，苯基和苄基。16.根據權利要求15所述的化合物，其中R3是甲基或環己基。17.根據權利要求16所述的化合物，其中R4是氫或末端碳原子處被-OH任意取代的、有1到約7個碳原子的烷基。18.根據權利要求17所述的化合物，其中R4是氫。19.根據權利要求1所述的化合物，其中X是-S(O)2-，R1是取代或未取代的芳烷基，R2是-CH2CH2CH2NHC(＝NH)NH2，R3是甲基，R4是氫。20.根據權利要求1所述的化合物，其中X是-S(O)2-，R1是取代或未取代的芳烷基，R2是-CH2CH2CH2NHC(＝NH)NH2，R3是環己基，R4是氫。21.根據權利要求20所述的化合物，其中R1是取代或未取代的苄基。22.根據權利要求1所述的化合物，它選自D-樟腦磺醯基天冬氨醯基肌氨酸精氨酸醛、D-樟腦磺醯基半胱氨酸碸-乙酸肌氨酸-精氨酸醛、D-樟腦磺醯基-L-甲硫氨酸碸肌氨酸-精氨酸醛、苄基磺醯基-D-精氨酸-肌氨酸-精氨酸醛、(2-樟腦甲氧基)苯磺醯基-(D)-精氨醯基-肌氨酸-精氨醛、N-苄基磺醯基-(D)-甲硫氨醯碸肌氨酸精氨醛、苄基磺醯基甲硫氨醯基(碸)N-環己基甘氨醯基精氨醛、(D)-樟腦磺醯基天冬氨醯肌氨酸精氨醛、(D)-樟腦磺醯基-3-(3-吡啶基)-丙氨酸肌氨酸精氨醛、苄基磺醯基-3-(3-吡啶基)-丙氨酸肌氨酸精氨醛和(D)-樟腦磺醯基-甘氨酸肌氨酸-精氨醛、23.根據權利要求1所述的化合物，其中R1被Y1、Y2和/或Y3單-、二-或三-取代，Y1、Y2和/或Y3獨立地選自-C(O)OH、-C(O)OZ1、-S(O)mZ1和-CF3。24，根據權利要求12所述的化合物，其中X是-S(O)2-。25.根據權利要求24所述的化合物，其中R1是烷基、環烷基、被環烷基取代的烷基、芳基或芳烷基，所有這些基團被任意地取代。26.根據權利要求25所述的化合物，其中R1被Y1、Y2和/或Y3單-、二-或三-取代，Y1、Y2和/或Y3獨立地選自-C(O)OH、-C(O)OZ1、-S(O)mZ1和-CF3。27.根據權利要求25所述的化合物，其中R1是未取代萘基、取代萘基、未取代苯基、取代苯基、未取代苄基或取代苄基。28.根據權利要求27所述的化合物，其中R1是苄基。29.根據權利要求25所述的化合物，其中R1是環己基或環己基甲基。30.根據權利要求1所述的化合物，其中R2是-CH2CH2S(O)2CH3。31.根據權利要求30所述的化合物，其中X是-S(O)2-，R1是芳烷基。32.根據權利要求31所述的化合物，其中R1被Y1、Y2和/或Y3單-、二-或三-取代，Y1、Y2和/或Y3獨立地選自-C(O)OH、-C(O)OZ1、-S(O)mZ1和-CF3。33.根據權利要求1所述的化合物，它有下式結構34.根據權利要求1所述的化合物，它有下式結構35.根據權利要求1所述的化合物，它有下式結構36.根據權利要求1所述的化合物，其中X是-S(O)2-，R1是芳烷基，R2是，R3是甲基、環己基甲基、苯基或苄基，R4是氫。37.根據權利要求36所述的化合物，其中R1是未取代苄基或取代苄基。38.根據權利要求37所述的化合物，其中Y1和Y2獨立地選自-C(O)OH、-C(O)OZ1、-S(O)mZ1和-CF3。全文摘要本發明揭示了是因子Xa有效抑制劑的肽醛,它們的藥學上可接受的鹽、藥學上可接受的組合物,和它們作為治療患有以異常血栓形成為特徵的哺乳動物疾病的治療劑的方法。文檔編號A61K38/00GK1171116SQ95196925公開日1998年1月21日申請日期1995年12月21日優先權日1994年12月21日發明者M·M·阿貝爾曼,T·A·密勒,R·F·納特申請人:科爾凡斯國際股份有限公司