Plga-殼聚糖單向緩釋膜及製備方法及用途
2023-05-27 02:18:51 2
Plga-殼聚糖單向緩釋膜及製備方法及用途
【專利摘要】本發明公開了PLGA-殼聚糖單向緩釋膜及製備方法及用途，其製備方法為：(1)以易揮發有機溶劑配製PLGA溶液為溶液1，將溶液1倒入模具自然晾乾，得到PLGA膜；(2)以易揮發有機溶劑配製PLGA溶液，加入羧化殼聚糖，混合均勻為溶液2，將溶液2倒在PLGA膜上使均勻，自然晾乾得到雙層膜；(3)配製殼聚糖溶液和羧化殼聚糖溶液並混合，加入京尼平，加入蛋白類藥物或脂溶性藥物，混合均勻為溶液3，傾倒於雙層膜上使均勻，放置，乾燥。本發明的PLGA-殼聚糖單向緩釋膜，是在常溫下使用，可以單向釋放藥物。可作為藥物載體及組織工程支架使用。生物可降解、生物相容性好，可以攜帶脂溶性藥物和蛋白類藥物。
【專利說明】PLGA-殼聚糖單向緩釋膜及製備方法及用途
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜製劑，具體地涉及一種PLGA-殼聚糖單 向緩釋膜及用途。
【背景技術】
[0002] 本發明所使用的主要材料來源為天然和合成材料，殼聚糖又稱脫乙醯甲殼 質，殼聚糖作為天然來源的高分子材料擁有良好的生物相容性和可降解性，是一種無 毒、無刺激性、無抗原性，具有良好的生物相容性，可降解吸收的材料（Zaktad Fizyki Medycznej, Uniwersytet Adama Mickiewicza w Poznaniu, Poznan, Polska. The Use of Shells Made of Poly (Ethylene Glycol)and Chitosan to Ensure the Biocompatibility of Nanoparticles in Biomedical Applications. Polim. Med. 2014 ;44 (2):119-127.)〇它 的來源豐富，提取工藝簡單，衍生物種類多樣，可以耐熱滅菌。利用殼聚糖製作成的凝膠類 製劑在藥物載體、組織支架等方面都有很廣泛的研究開發（hee Dong han，edna M.Mora，Ju Won Roh, Masato Nishimura, sun Joo Lee, Rebecca L. stone,Menashe Bar-eli, Gabriel Lopez-Berestein, anil K.sood. Chitosan hydrogel for localized gene silencing. Cancer Biology & Therapy, 2011:9, 839-845.)。聚乳酸-輕基乙酸共聚物（PLGA)由 兩種單體，即乳酸和羥基乙酸隨機聚合而成，聚乳酸-羥基乙酸具有良好的生物降解性 和生物相容性，代謝產物將進入朽1檬酸循環（Susanne C Diesner, Xue-Yan Wang, Erika Jensen-Jarolim, Eva Untersmayr, Franz Gabor. Use of lectin-functionalized particles for oral immunotherapy[J]. Ther Deliv. 2012, 3(2) :277-290.)。通過水解反 應將PLGA的降解，因為PLGA的降解產物是乳酸和羥基乙酸，同時也是人代謝途徑的副產 物，所當它應用在醫藥和生物材料中時不會有毒副作用。
[0003] 緩控釋製劑主要有骨架型和貯存庫型兩種。骨架型緩釋控釋製劑是將藥物以分子 或微粒的形式均勻分散在載體材料中。貯庫型緩釋控釋製劑是將藥物包裹在高分子聚合物 內。緩釋控釋製劑的釋藥原理主要為溶出、擴散、溶蝕、滲透壓和離子交換作用。緩控釋制 劑主要的特點為1)針對半衰期較短的藥物或者需要頻繁給藥的藥物，可以減少服藥次數， 提高病人服藥的順應性，使用方便。2)血藥濃度"峰谷"波動小，血濃平穩，在有效濃度範圍 之內維持療效。3)最小劑量達到最大藥效（藥劑學/崔福德主編.-6版.-北京：人民衛 生出版社，2007. 8)。目前很多製劑存在的問題是由於製作過程中存在濃酸、濃鹼和有機試 齊U，故水溶性蛋白類藥物在製劑包載過程中容易失活。而PLGA-殼聚糖單向緩釋膜的製作 過程不存在這些對蛋白類藥物有明顯影響的試劑，且是一種在室溫和37°C或體內均可以穩 定存在的緩控釋製劑。它的一大優點是單向釋放，避免攜帶藥物對周圍組織和器官的毒害， 而且當放置到人體病患處時，可以很好的包裹藥物進行緩釋。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜。
[0005] 本發明的第二個目的是提供PLGA-殼聚糖單向緩釋膜的製備方法。
[0006] 本發明的第二個目的是提供PLGA-殼聚糖單向緩釋膜的用途。
[0007] 本發明的技術方案概述如下：
[0008] -種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜的製備方法，包括如下步驟：
[0009] (1)以易揮發有機溶劑配製濃度為0. 1-0. 2g/ml的PLGA溶液為溶液1，將溶液1 倒入模具自然晾乾，得到厚度為〇. 5-1. 5mm的半透明的PLGA膜；
[0010] (2)以易揮發有機溶劑配製濃度為0? 02-0. 04g/ml的PLGA溶液，加入羧化殼聚糖 使濃度為〇. 0013-0. 0267g/ml，混合均勻為溶液2,將溶液2倒在PLGA膜上使均勻，自然晾 幹得到雙層膜；
[0011] (3)以生理鹽水或蒸餾水為溶劑配製濃度為0. 044-0. 088g/ml的殼聚糖溶液；以 生理鹽水或蒸餾水為溶劑，配製濃度為0. 066-0. 133g/ml的羧化殼聚糖溶液；取等體積的 殼聚糖溶液和羧化殼聚糖溶液混合，加入京尼平使濃度為〇. 002-0. 004g/ml，加入蛋白類藥 物或脂溶性藥物，混合均勻為溶液3,傾倒於雙層膜上使均勻，在37°C放置24h，真空乾燥， 取出後放置於乾燥器中保存，得到PLGA-殼聚糖單向緩釋膜；所述溶液1、溶液2和溶液3的 體積比為3 :1 :3 ;所述PLGA的分子量為7600-11500Da ;羧化殼聚糖的粘度10-80mpa. s，羧 化度彡60% ;殼聚糖的分子量為3-8kDa，脫乙醯度為65% -98%。
[0012] 易揮發有機溶劑為丙酮、二氯甲烷或乙酸乙酯。
[0013] 上述方法製備的一種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜。
[0014] 一種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜在製備藥物載體的用途。
[0015] 本發明的優點：
[0016] 1、本發明的PLGA-殼聚糖單向緩釋膜，是在常溫下使用，可以單向釋放藥物。
[0017] 2、本發明的PLGA-殼聚糖單向緩釋膜可作為藥物載體及組織工程支架使用。
[0018] 3、本發明PLGA-殼聚糖單向緩釋膜生物可降解、生物相容性好，可以攜帶脂溶性 藥物和蛋白類藥物。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0019] 圖1為PLGA-殼聚糖單向緩釋膜包載牛血清白蛋白的累計釋放量緩釋行為圖。
[0020] 圖2為PLGA-殼聚糖單向緩釋膜包載牛血清白蛋白的單位時間釋放量緩釋行為 圖。
[0021] 圖3為PLGA-殼聚糖單向緩釋膜包載淫羊藿苷的累計釋放量緩釋行為圖。
[0022] 圖4為PLGA-殼聚糖單向緩釋膜包載淫羊藿苷的單位時間釋放量緩釋行為圖。
【具體實施方式】
[0023] 下面結合具體實施例對本發明作進一步的說明。
[0024] 實施例1
[0025] -種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜的製備方法，包括如下步驟：
[0026] (1)以丙酮為溶劑配製濃度為0. 12g/ml的PLGA溶液為溶液1，將溶液1倒入模具 自然瞭幹，得到厚度為Imm的半透明的PLGA膜；
[0027] (2)以丙酮為溶劑配製濃度為0. 024g/ml的PLGA溶液，加入羧化殼聚糖使濃度為 0. 016g/ml，混合均勻為溶液2,將溶液2倒在PLGA膜上使均勻，自然晾乾得到雙層膜；
[0028] (3)以生理鹽水為溶劑配製濃度為0. 053g/ml的殼聚糖溶液；以生理鹽水為溶 齊IJ，配製濃度為〇. 〇80g/ml的羧化殼聚糖溶液；取等體積的殼聚糖溶液和羧化殼聚糖溶 液混合，加入京尼平使濃度為〇.〇〇27g/ml，加入蛋白類模擬藥物牛血清白蛋白使濃度為 0. 0267g/ml，混合均勻為溶液3,傾倒於雙層膜上使均勻，在37°C放置24h，取出於真空度 為-0. IMPa真空乾燥器中乾燥5h，取出後放置於乾燥器中保存，得到PLGA-殼聚糖單向緩釋 膜；所述溶液1、溶液2和溶液3的體積比為3 :1 :3 ;所述PLGA的分子量為7600-11500Da ; 羧化殼聚糖的粘度10_80mpa. s，羧化度> 60% ;殼聚糖的分子量為3-8kDa，脫乙醯度為 65% -98%。
[0029] 將含有牛血清白蛋白的一種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜9. 6cm2平放在平皿中，加入 lmlPBS，在37°C條件下放置，每隔24h取上清，同時再加入Iml新的PBS，168h後將收集的上 清液分別通過酶標儀進行檢測。載蛋白模擬釋放見圖1。
[0030] 實驗證明，用本實施例製備的一種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜包埋脂溶性藥物：雷 帕黴素和包埋蛋白類藥物BMP各模似釋放效果與實施例1相似。
[0031] 實驗證明，與牛血清白蛋白性質類似的水溶性蛋白藥物：〇VA(雞卵清蛋白）、 BSA(牛血清白蛋白）、疫苗類（例如卡介苗）、細胞因子（例如細胞白介素）、重組多肽（例 如人白細胞介素-2)替代實施例1中的牛血清白蛋白，其它同實施例1，所獲得的載藥物模 擬釋放與實施例1的結果相似。
[0032] 實施例2
[0033] -種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜的製備方法，包括如下步驟：
[0034] (1)-(2)同實施例 1(1)-(2);
[0035] (3)以生理鹽水為溶劑配製濃度為0. 053g/ml的殼聚糖溶液；以生理鹽水為溶劑， 配製濃度為〇. 080g/ml的羧化殼聚糖溶液；取等體積的殼聚糖溶液和羧化殼聚糖溶液混 合，加入京尼平使濃度為〇. 〇〇27g/ml，加入淫羊藿苷溶液使淫羊藿苷濃度為2. 5mg/ml (淫 羊藿苷溶液是用25 iU的DMSO溶解的7. 5mg淫羊藿苷），混合均勻為溶液3,傾倒於雙層膜 上使均勻，在37°C放置24h，取出於真空度為-0. IMPa真空乾燥器中乾燥5h，取出後放置於 乾燥器中保存，得到PLGA-殼聚糖單向緩釋膜；所述溶液1、溶液2和溶液3的體積比為3 :1 :3 ;所述PLGA的分子量為7600-11500Da ;羧化殼聚糖的粘度10-80mpa. s，羧化度彡60%; 殼聚糖的分子量為3-8kDa，脫乙醯度為65% -98%。
[0036] 將含有淫羊藿苷膜的PLGA-殼聚糖單向緩釋膜0. 32cm2平放在平皿中，加入 200 iUPBS，在37°C條件下放置，每隔24h取樣上清，同時再加入200 ill新的PBS。168h後 將收集的上清液分別通過紫外分光光度計進行檢測。載淫羊藿苷藥物模擬釋放見圖3。
[0037] 實驗證明，用脂溶性藥物：甲氨蝶呤、氟尿嘧啶、巰嘌呤、羥基脲、雷帕黴素、甲氨蝶 呤、氟尿嘧啶、巰嘌呤、羥基脲、阿糖胞苷、腎上腺皮質激素、雄激素、皮質類固醇、類固醇替 代實施例2中的淫羊藿苷，其它同實施例2,所獲得的載藥物模擬釋放與實施例2的結果相 似。
[0038] 實施例3
[0039] -種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜的製備方法，包括如下步驟：
[0040] (1)以丙酮為溶劑配製濃度為0. 12g/ml的PLGA溶液為溶液1，將溶液1倒入模具 自然瞭幹，得到厚度為Imm的半透明的PLGA膜；
[0041] ⑵以丙酮為溶劑配製濃度為0. 〇24g/ml的PLGA溶液，加入羧化殼聚糖使濃度為 0. 016g/ml，混合均勻為溶液2,將溶液2倒在PLGA膜上使均勻，自然晾乾得到雙層膜；
[0042] (3)以蒸餾水為溶劑配製濃度為0. 053g/ml的殼聚糖溶液；以蒸餾水為溶劑，配製 濃度為〇. 080g/ml的羧化殼聚糖溶液；取等體積的殼聚糖溶液和羧化殼聚糖溶液混合，力口 入京尼平使濃度為0. 〇〇27g/ml，加入蛋白類模擬藥物牛血清白蛋白使濃度為0. 0267g/ml， 混合均勻為溶液3,傾倒於雙層膜上使均勻，在37°C放置24h，取出於真空度為-0. IMPa真 空乾燥器中乾燥5h，取出後放置於乾燥器中保存，得到PLGA-殼聚糖單向緩釋膜；所述溶液 1、 溶液2和溶液3的體積比為3 :1 :3 ;所述PLGA的分子量為7600-11500Da ;羧化殼聚糖的 粘度10_80mpa. s，羧化度彡60% ;殼聚糖的分子量為3-8kDa，脫乙醯度為65% -98%。
[0043] 將含有牛血清白蛋白的一種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜9. 6cm2平放在平皿中，加入 lmlPBS，在37°C條件下放置，每隔24h取上清，同時再加入Iml新的PBS，168h後將收集的上 清液分別通過酶標儀進行檢測。載蛋白模擬釋放見圖2。
[0044] 實施例4
[0045] -種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜的製備方法，包括如下步驟：
[0046] (1)-(2)同實施例 1(1)-(2);
[0047] (3)以蒸餾水為溶劑配製濃度為0. 053g/ml的殼聚糖溶液；以蒸餾水為溶劑，配製 濃度為〇. 080g/ml的羧化殼聚糖溶液；取等體積的殼聚糖溶液和羧化殼聚糖溶液混合，力口 入京尼平使濃度為0. 〇〇27g/ml，加入淫羊藿苷溶液使淫羊藿苷濃度為2. 5mg/ml (淫羊藿苷 溶液是用25 ill的DMSO溶解的7. 5mg淫羊藿苷），混合均勻為溶液3,傾倒於雙層膜上使均 勻，在37°C放置24h，取出於真空度為-0. IMPa真空乾燥器中乾燥5h，取出後放置於乾燥器 中保存，得到PLGA-殼聚糖單向緩釋膜；所述溶液1、溶液2和溶液3的體積比為3 :1 :3 ;所 述PLGA的分子量為7600-11500Da ;羧化殼聚糖的粘度10-80mpa. s，羧化度彡60%;殼聚糖 的分子量為3-8kDa，脫乙醯度為65% -98%。
[0048] 將含有淫羊藿苷膜的PLGA-殼聚糖單向緩釋膜0. 32cm2平放在平皿中，加入 200 iUPBS，在37°C條件下放置，每隔24h取樣上清，同時再加入200 ill新的PBS。168h後 將收集的上清液分別通過紫外分光光度計進行檢測。載淫羊藿苷藥物模擬釋放見圖4。
[0049] 實施例5
[0050] -種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜的製備方法，包括如下步驟：
[0051] (1)以乙酸乙酯為溶劑配製濃度為0. lg/ml的PLGA溶液為溶液1，將溶液1倒入 模具自然晾乾，得到厚度為〇. 5mm的半透明的PLGA膜；
[0052] (2)以乙酸乙酯為溶劑配製濃度為0? 02g/ml的PLGA溶液，加入羧化殼聚糖使濃度 為0. 013g/ml，混合均勻為溶液2,將溶液2倒在PLGA膜上使均勻，自然晾乾得到雙層膜；
[0053] (3)以生理鹽水為溶劑配製濃度為0. 044g/ml的殼聚糖溶液；以生理鹽水為溶劑， 配製濃度為〇. 〇66g/ml的羧化殼聚糖溶液；取等體積的殼聚糖溶液和羧化殼聚糖溶液混 合，加入京尼平使濃度為〇. 〇〇2g/ml，加入雷帕黴素溶液使雷帕黴素濃度為2. 5mg/ml，混合 均勻為溶液3,傾倒於雙層膜上使均勻，在37°C放置24h，取出於真空度為-0. IMPa真空幹 燥器中乾燥5h，取出後放置於乾燥器中保存，得到PLGA-殼聚糖單向緩釋膜；所述溶液1、溶 液2和溶液3的體積比為3 :1 :3 ;所述PLGA的分子量為7600-11500Da ;羧化殼聚糖的粘度 10-80mpa. s，羧化度彡60% ;殼聚糖的分子量為3-8kDa，脫乙醯度為65% -98%。
[0054] 實施例6
[0055] -種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜的製備方法，包括如下步驟：
[0056] (1)以二氯甲烷為溶劑配製濃度為0. 2g/ml的PLGA溶液為溶液1，將溶液1倒入 模具自然晾乾，得到厚度為I. 5mm的半透明的PLGA膜；
[0057] (2)以二氯甲烷為溶劑配製濃度為0. 04g/ml的PLGA溶液，加入羧化殼聚糖使濃度 為0. 0267g/ml，混合均勻為溶液2,將溶液2倒在PLGA膜上使均勻，自然晾乾得到雙層膜；
[0058] (3)以生理鹽水為溶劑配製濃度為0. 088g/ml的殼聚糖溶液；以生理鹽水為溶劑， 配製濃度為〇. 133g/ml的羧化殼聚糖溶液；取等體積的殼聚糖溶液和羧化殼聚糖溶液混 合，加入京尼平使濃度為0. 004g/ml，加入BMP (骨形態發生蛋白）使濃度為0. 2ng/L，混合 均勻為溶液3,傾倒於雙層膜上使均勻，在37°C放置24h，取出於真空度為-0. IMPa真空幹 燥器中乾燥5h，取出後放置於乾燥器中保存，得到PLGA-殼聚糖單向緩釋膜；所述溶液1、溶 液2和溶液3的體積比為3 :1 :3 ;所述PLGA的分子量為7600-11500Da ;羧化殼聚糖的粘度 10-80mpa. s，羧化度彡60% ;殼聚糖的分子量為3-8kDa，脫乙醯度為65% -98%。
【權利要求】
1. 一種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜的製備方法，其特徵是包括如下步驟： (1) 以易揮發有機溶劑配製濃度為〇. 1-0. 2g/ml的PLGA溶液為溶液1，將溶液1倒入 模具自然晾乾，得到厚度為〇. 5-1. 5mm的半透明的PLGA膜； (2) 以易揮發有機溶劑配製濃度為0. 02-0. 04g/ml的PLGA溶液，加入羧化殼聚糖使濃 度為0. 0013-0. 0267g/ml，混合均勻為溶液2,將溶液2倒在PLGA膜上使均勻，自然晾乾得 到雙層膜； (3) 以生理鹽水或蒸餾水為溶劑配製濃度為0. 044-0. 088g/ml的殼聚糖溶液；以生理 鹽水或蒸餾水為溶劑，配製濃度為〇. 066-0. 133g/ml的羧化殼聚糖溶液；取等體積的殼聚 糖溶液和羧化殼聚糖溶液混合，加入京尼平使濃度為〇. 002-0. 004g/ml，加入蛋白類藥物或 脂溶性藥物，混合均勻為溶液3,傾倒於雙層膜上使均勻，在37°C放置24h，真空乾燥，取出 後放置於乾燥器中保存，得到PLGA-殼聚糖單向緩釋膜；所述溶液1、溶液2和溶液3的體 積比為3 :1 :3 ;所述PLGA的分子量為7600-11500Da ;羧化殼聚糖的粘度10-80mpa. s，羧化 度彡60% ;殼聚糖的分子量為3-8kDa，脫乙醯度為65% -98%。
2. 根據權利要求1所述的一種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜的製備方法，其特徵是所述易 揮發有機溶劑為丙酮、二氯甲烷或乙酸乙酯。
3. 權利要求1或2的方法製備的一種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜。
4. 權利要求3的一種PLGA-殼聚糖單向緩釋膜在製備藥物載體的用途。
【文檔編號】A61L27/58GK104382844SQ201410669286
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年11月20日 優先權日:2014年11月20日
【發明者】俞玫, 夏婷, 孫洪範, 孔德領, 李書儀 申請人:中國醫學科學院生物醫學工程研究所