具有血管保護和抗氧化作用的製劑及其用途的製作方法

2023-06-09 19:57:56 1

專利名稱：具有血管保護和抗氧化作用的製劑及其用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及具有血管保護和抗氧化劑作用的製劑及其用途。
血膽固醇過多，特別是血液中和動脈血管內皮損害處的升高的膽固醇運載率(低密度脂蛋白，LDL)和LDL的氧化變化是引發動脈粥樣硬化的主要因素。動脈粥樣硬化是一種潛伏的疾病，它由於脂質在人動脈系統的沉積而在數十年內逐步發展。
本疾病可以由於增長的斑塊(在血管內的脂質沉積)或損害導致冠狀動脈閉塞(心臟梗塞)。另外，衝掉的斑塊會引起腦動脈閉塞(中風)。但動脈粥樣硬化也會發生在循環系統的其他部位。
使用抗氧化劑強烈抑制LDL氧化(從定量的觀點看，LDL氧化在動脈粥樣硬化的發生中最重要)可以降低患心臟梗塞或中風的危險。
動脈粥樣硬化的發生主要是因為所謂的脂蛋白，特別是LDL的氧化。脂蛋白是蛋白質和脂質的大分子複合物，其特徵在於物理和化學參數，例如鹽的密度和超速離心性質以及特別的蛋白質(載脂蛋白)。脂蛋白在血液中循環並使水不溶性脂肪-例如膽固醇、中性脂肪(甘油三酯)和磷脂的輸送和轉移能夠進行；根據它們的氫化密度區分極低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)。LDL膽固醇水平的增加及其氧化態是引起動脈粥樣硬化發展的主要原因。
LDL是血漿中膽固醇和膽固醇脂的主要載體分子。它由被磷脂殼包圍的脂質核和未酯化的膽固醇構成。蛋白質分子(apo B-100)包含在此殼中。
LDL膽固醇在血漿中部分生物氧化，這可能是由於以原子團形態存在的活化的氧的種類。另外的氧化通過內皮細胞(動脈的內層，也稱為內膜)和通過無橫紋的肌細胞(動脈的中層，血管中部)發生在動脈粥樣硬化塊中。LDL中的脂質過氧化過程將LDL的多聚不飽和脂肪酸分解成為各種產物。這些過程尤其產生可反應的醛，它與apoB-100的胺基酸反應並引起進一步的結構改變。LDL結構變化，即其脂肪和蛋白質部分的氧化變化，通過一種重要的內源性受體系統引起識別障礙，此系統的功能是引起人體各組織中的LDL膽固醇的代謝。這些不能通過其真實結構被識別的改變的LDL被巨噬細胞(至今已知道4種不同的受體吸收氧化的LDL)自由地吸收，並沉積在內膜中。這導致血管壁此部分(內皮、內膜和無橫紋的肌細胞)的機能障礙，和形成斑塊或血管損害，形成動脈粥樣硬化的初始階段。
用各種抗氧化劑，已在多種動物模型中證實，這些藥劑抑制LDL、VLDL和HDL氧化，並防止發生動脈粥樣硬化，以這種方式研究了植物提取物的多種成分。這些大部分是含有類黃酮的水提物。
因此本發明的目的是提供一種預防血漿中LDL氧化的新製劑。
通過具有在權利要求1中列出的特徵的製劑解決了此問題。
根據本發明，本製劑含有含松油烯的精油或松油烯。優選從柑橘屬果實-特別是檸檬中得到的含γ-松油烯作為天然成分的精油。
當用精油製備本發明的製劑時，也可以使用其富含松油烯的形式。
根據本發明的特別優選的實施方案，本製劑另外還含有α-生育酚(維生素E)和/或輔酶Q(Q10)。根據本發明所述的與這些活性成分的結合產生本領域的技術人員不能預見的有益的協同效果。結果是顯著抑制血液中的LDL氧化。
體外LDL氧化是測試各種物質的抗氧化性質的常規模型，因為在體外實驗中，由於血漿與(主要是親脂的)測試物的預溫育，它們在LDL中積聚(McLean und Hagaman，1989，Biochemistry28(1)；pp.321-327，Esterbauer等，1991b，Am.J.Clin.Nutr.53，pp.315S-321S)。在積聚後，可以研究這些物質對LDL氧化能力的影響。
在LDL氧化模型中測定檸檬油或γ-松油烯的抗氧化和由此生產的減少脂質的作用。此作用可能是由於結構特徵通過脂肪酸過氧化氫原子團的H-去除反應，可以在異丙基基團上形成相對穩定的叔原子團，通過共振雙鍵使此原子團進一步穩定。 因此通過所含有的檸檬油或γ-松油烯防止LDL氧化是基於此油與脂質過氧化氫原子團反應並以此途徑阻斷脂質過氧化的鏈反應，從而延遲蛋白質氧化的能力。
本發明的製劑可以用於各領域。因此可以用此製劑作為藥品、營養補充劑和/或食品，並且在需要時可以含有其它活性成分、無害添加劑和/或輔劑。
根據本發明製劑的優選實施方式，使用以下濃度的活性成分γ-松油烯 0.5-20重量％α-生育酚 10-50重量％輔酶Q 10-50重量％在從屬權利要求中記載了其他有益的實施方式。
下面將參考在

圖1-5中所示的結果更詳細地解釋本發明。其中圖1檸檬油在LDL中的積聚對LDL中共軛雙鍵的形成的影響圖2γ-松油烯在LDL中的積聚對LDL中共軛雙鍵的形成的影響圖3由於γ-松油烯、α-生育酚和減少的輔酶Q(Q10)在LDL中的積聚對LDL中共軛雙鍵形成的延遲作用意外的效果圖4在對照LDL和富集檸檬油的LDL中，銅(II)-導致的色氨酸螢光損失圖5在對照LDL和富集γ-松油烯的LDL中，銅(II)-導致的色氨酸螢光損失檸檬油和γ-松油烯對LDL中共軛雙鍵形成的影響連續測定LDL中共軛雙鍵的形成是一種比較各種LDL樣品的脂質部分的氧化能力的可接受的方法(Esterbauer等，1989，Free Rad.Res.Comms.6(1)，pp.67-75；Parthasarathy等，1998，Free Rad.Res.28，pp.583-591)。遲滯期顯示LDL的氧化能力；較長的遲滯期意味著較強的抗氧化能力。本研究是要發現是否檸檬油和γ-松油烯在LDL中的積聚可以保護LDL免受Cu(II)-誘發的氧化。如圖1所示，檸檬油的積聚明顯擴大LDL中共軛雙鍵的形成。
在另一試驗中，血漿與0.5、0.25、0.1和0.01％γ-松油烯保溫，測定從中分離出的LDL的對抗銅誘發的氧化的能力。發現遲滯期隨濃度而延長。血漿中0.01％γ-松油烯明顯使遲滯期延長，血漿中0.1％γ-松油烯使遲滯期延長約250分鐘，血漿中有更高濃度的γ-松油烯的樣品即使在500分鐘後也不達到增殖相(圖2)。
當將血漿與γ-松油烯溫育並加入α-生育酚和輔酶Q時，可以再一次顯著增加LDL的抗氧化能力。
檸檬油和γ-松油烯對Cu(II)-導致的LDL中色氨酸螢光損失的影響由於在apo B-100中的37色氨酸殘基，LDL在紫外範圍顯示螢光。HDL或LDL用Cu(II)的氧化伴隨著色氨酸殘基的還原(Reyftmann等，1990，Biochem.Biophys.Acta 1042，pp.159-167)，這可以通過測定螢光觀察到。向LDL溶液中加入Cu(II)後，由於銅產生的猝滅效應使螢光在最初幾秒鐘內降低。然後螢光顯示或多或少的線性衰退，在第二階段，螢光迅速減小。可以將慢相變為快相前的時間定義為遲滯期，如同共軛雙鍵那樣(Giessauf等，1995，Biochem.Biophys.Acta 1256，pp.221-232)。螢光的快速衰退大約開始在雙鍵共軛的增殖相的同時，最可能以脂質過氧化產物與色氨酸殘基的反應為基礎。我們還用此試驗體系，揭示是否檸檬油或γ-松油烯在LDL中的積聚影響Cu(II)-導致的色氨酸螢光的損失。顯然，檸檬油可以顯著延遲後期的蛋白質氧化，γ-松油烯也顯示減緩早期的蛋白質氧化；血漿中0.5％的γ-松油烯濃度幾乎完全阻止了LDL中色氨酸殘基的氧化(圖4和圖5)。
本發明的製劑可以製成各種給藥形式。它可以作為藥品、營養補充劑或食品。例如，它可以稀釋後作為糖漿或液滴給藥。也可以將它加到液體-例如奶液或固體-如粗飼料或穀類中。
當給藥方式允許時，本發明的製劑可以另外含有無害的天然或合成添加劑或輔劑，例如粘合劑、崩解劑(blasting agent)、潤滑劑、分離劑、溶劑、穩定劑、染料和矯味劑。根據本發明可以使用的輔劑的例子是-粘合劑，例如澱粉、藻酸鹽、明膠、糖、角豆樹種子粉、纖維素衍生物-例如纖維素醚，和聚合物-例如聚乙烯吡咯烷酮；-崩解劑(blasting agent)，例如澱粉和羥乙基澱粉；-潤滑劑和分離劑，例如滑石、硬脂酸鹽-例如硬脂酸鈣和硬脂酸鎂、碳酸鎂和碳酸鈣、纖維素、氧化鎂、膠態矽膠、矽酸鹽-例如矽酸鈉、矽酸鎂、矽酸鈣和矽酸鋁，分離粉，例如麵包粉、斯卑爾脫小麥粉、土豆粉、蕎麥粉、木粉和角豆樹種子粉；-溶劑，例如水、乙醇和粘合劑的溶液；-穩定劑，例如脂肪、油、調味劑，和澱粉衍生物；-著色劑，例如與食品和藥品相關的法規批准的天然和合成染料和色素，例如胡蘿蔔素、糖著色劑、甜菜鹼和菌脂色素；和-矯味劑，例如香料、鹽、人工甜味劑和調味劑。
以上列出的輔劑特別適於製備片劑或膠囊。當作為營養補充劑時，本發明的製劑可以在製備過程的任何階段加到所需要的產品中。
權利要求
1.具有血管保護和抗氧化作用的製劑，其特徵在於其中含有含松油烯的精油或松油烯。
2.根據權利要求1所述的製劑，其中的松油烯是γ-松油烯。
3.根據權利要求1或2所述的製劑，其中的精油是檸檬油。
4.根據權利要求1-3中任一權利要求所述的製劑，其特徵在於它含有其它活性成分、無害添加劑和/或輔劑。
5.根據權利要求4所述的製劑，其特徵在於它含有α-生育酚。
6.根據權利要求4或5中任一權利要求所述的製劑，其特徵在於它含有輔酶Q(Q10)。
7.根據權利要求1所述的製劑，其中的精油富含有松油烯。
8.根據權利要求1-7中任一權利要求所述的製劑作為藥品的用途。
9.根據權利要求1-7中任一權利要求所述的製劑作為營養補充劑的用途。
10.根據權利要求1-7中任一權利要求所述的製劑作為食品的用途。
全文摘要
提供了一種新的製劑，它具有血管保護作用，並能預防動脈粥樣硬化的發生。此製劑包含含有松油烯的精油或松油烯。
文檔編號A61K36/75GK1444475SQ01813403
公開日2003年9月24日 申請日期2001年5月28日 優先權日2000年7月28日
發明者E·埃爾斯特納 申請人:施泰格瓦爾德製藥有限公司