一種地西他濱緩釋微球及其製備方法
2023-06-28 04:45:21 2
專利名稱：一種地西他濱緩釋微球及其製備方法
技術領域：
本發明屬於醫藥製劑技術領域，具體的涉及一種抗腫瘤藥物地西他濱緩釋微球及 其製備方法。
背景技術：
骨髓增生異常症候群(MDS)是一種獲得性幹細胞疾病，可導致無效造血和外周血 細胞減少，有發展為急性髓細胞性白血病(AML)的趨勢。其病因不明，男女均可發病，男性 多於女性，多見於60歲以上老年人，據估計，美國每年新診斷MDS患者7000 12000例。近 年來發病率更是呈上升趨勢。臨床表現為造血細胞在質和量上出現不同程度的異常變化， 如貧血，常伴有感染和(或)出血，部分(30%)可發展成為急性白血病。MDS的治療包括支持治療、細胞因子治療、化療和骨髓移植等，大多數臨床療效欠 佳，惟一能治癒MDS的方法是異基因造血幹細胞移植，但對於大多數MDS的老年患者並不適 用，而小劑量化療對中高危患者則療效低、復發率高。近年來發現MDS細胞的基因組DNA存 在異常甲基化，研究表明50%以上的MDS患者存在抑癌基因如pl5的高甲基化，可能採用 DNA甲基化轉移酶抑制劑進行治療。地西他濱(Decitabine，商品名Dacogen)是一種低甲基化試劑，2004年3月， SuperGen公司完成了 Dacogen治療MDS患者的III期臨床試驗，向FDA申請。MGI製藥與 SuperGen公司達成協議，擁有該產品在全世界的獨佔開發、生產和經銷權。由於地西他濱具 有獨特的抑制甲基化轉移酶的作用機制，分別於2006年4月和5月由歐洲EMEA和美國FDA 批准上市，用於治療原發性和繼發性MDS。地西他濱憑藉其直接作用於DNA的獨特作用機 理，被美國癌症綜合網絡指南推薦為MDS的優先用藥。鑑於我國MDS的治療現狀，2008年9 月國家食品藥品監管局(SFDA)批准地西他濱免臨床試驗直接上市，該藥成為2005年以來 SFDA惟一免臨床批准的藥物。地西他濱是一種DNA甲基轉移酶抑制劑，為S期細胞周期特異性藥物，可以降低 DNA的甲基化，使關閉的腫瘤抑制基因重新開始轉錄。其對L1210的細胞毒作用可為胸苷所 加強，這是因為胸苷可使本品摻入DNA的量增加，從而增加本品對DNA甲基化的抑制作用。但地西他濱的不良反應，如白細胞、血小板減少，輕中度噁心、嘔吐；大劑量可引起 神經毒性，表現為嗜睡、失語、偏癱等限制了其臨床應用。為了降低其血液系統毒副作用，延 緩其體內釋放，減少臨床給藥頻次，提高患者依從性，以生物相容且可降解的殼聚糖為載體 材料，製備了可用於注射的地西他濱殼聚糖-海藻酸鈉緩釋微球。2000年我國60歲以上老年人口總數已達到1. 3億，佔總人口的10. 6%，據預測到 2025年，我國老年人口將增至2. 84億，佔全國總人口的24. 48%，進入老齡化高峰期。骨髓 增生異常症候群(MDS)易發於60歲以上的老人，可以預測作為目前國內批准的唯一治療骨 髓增生異常症候群(MDS)的藥物——地西他濱將有廣闊的市場前景。同時，利用各種先進 製劑技術或化學修飾對地西他濱進行優化，使其臨床療效進一步提高也顯得尤為必要。藥物控制釋放技術是生物材料中發展最迅速、對人類健康貢獻最大的領域之一。控制釋放體系與普通劑型相比，能改善藥物療效，降低毒副作用，提高生物利用度，更容易 被患者接受。藥物控制釋放一般採用暫時控制和分布控制兩種方法。前者的目的是在較長 時間內或治療過程中的特定時間內釋放藥物，適用於給藥後迅速代謝排出的藥物。後者將 藥物靶向釋放至體內精確的病灶部位，它適用於兩種情況其一，當藥物的自然分布使藥物 分子到達敏感組織，引起劇烈副反應，從而影響進一步治療時；其二，當藥物的自然分布難 以使藥物分子到達發揮療效位點時。如今，緩釋、控釋、靶向等新的製劑技術正日新月異地發展起來。微型包囊與微型 成球技術是近30年來應用與發展起來的藥物新工藝、新技術，醫用微球是隨生物材料科 學、臨床醫學及藥物學的發展而逐漸興起的一種醫用生物材料製品。其作為抗腫瘤藥物靶 向製劑研究已有廣泛報導。通過控制微球粒徑大小，使藥物濃集靶區，達到提高療效，降低 不康反應的目的。藥物尤其是難溶性藥物的粒徑控制將直接影響微球粒徑及其靶向性。微球是藥物和其他活性成分溶解或分散在高分子材料中經固化而形成的微小球 狀實體的固體骨架物，其直徑大小不一，一般在1 300 μ m,甚至更大，屬於基質型骨架微 粒。微球從內到外成分都一樣，沒有包裹。微球的給藥方式有口服、皮下植入、肌注、靜脈注射、腹腔注射、眼內、關節腔注射 等。注射用微球直徑極小，以便於能夠通過注射器進行給藥。注射用微球具有緩釋、長效和 靶向作用等優點，可以實現1個月甚至3個月乃至更長時間的一次給藥，大大提升了病人用 藥的方便性，提高了依從性。靶向作用的特點則可以提高療效，降低副作用。因此，注射用 微球劑型也作為控釋及靶向治療的發展方向被各大國際醫藥巨頭所重視。1986年，法國益普生(Ipsen pharma Biotech)公司生產的促黃體生成激素釋放激 素(LHRH)類似物曲普瑞林(triptorelin)是第一個上市的緩釋多肽微球製劑，緩釋可以達 到1個月。之後，亮丙瑞林(leuprorelin)、那法瑞林(nafarelin)、重組人生長因子等緩釋 微球注射劑也紛紛上市。通過調節聚合物的種類、相對分子質量、晶型、共聚物中單體的摩 爾比、微球粒徑、微球表面狀態及內部結構、藥物的水溶性、藥物含量等，達到藥物的緩釋或 控釋目的。殼聚糖是甲殼素的主要衍生物，是甲殼素脫乙醯化後的直鏈多糖，由葡糖胺和 N-乙醯基葡糖胺結構組成，是唯一的帶正電荷的多糖材料。其來源豐富，廣泛存在於甲殼綱 動物蝦、蟹及昆蟲的甲殼和植物細胞壁中。具有無毒性、生物黏附性、生物相容性、生物可降 解性及可被吸收等優點。殼聚糖是一種良好的藥物釋放載體，可以用做微囊、微球、納米粒 等。作為藥物載體它可以控制藥物釋放、延長藥物療效、降低藥物毒副作用，提高疏水性藥 物對細胞膜的通透性和藥物的穩定性及改變給藥途徑，還可以大大加強制劑的靶向給藥能 力，是一種新型藥物製劑輔料。採用殼聚糖製備微球，可控制藥物的釋放，改善易降解物質 的生物利用度。同時。殼聚糖可與一定量的多價陰離子反應，形成殼聚糖分子的交聯，這一 性質可應用於殼聚糖微球的製備。海藻酸鹽是一種水溶性線形多糖，由β -D-甘露醇醛酸和α -L-古羅糖醛酸以1， 4_交聯後得的多糖，因結構中帶有羧基，因此為帶負電的材料。普遍存在於裼藻類中，可從 海洋植物巨藻、海帶、馬尾藻等中提取。海藻膠包括水不溶必的海藻酸及各種水溶性和水不 溶性的海藻酸鹽，如海藻酸鈉、海藻酸銨、海藻酸鈣等。目前市售主要指海藻酸鈉。海藻酸鈉，分子量32000 250000，不溶於乙醇、乙醚、氯仿和酸(PH <5. 4)，溶於水成黏稠狀膠體。海藻酸鹽無毒性，具有生物黏附性、生物相容性和生物可降解性。可用大 多數多價陽離子反應交聯。海藻酸鹽中的羧基可與殼聚糖的氨基通過正負電荷吸引形成聚電解質複合膜，以 其作為藥物載體具有生物相容性好、製備條件溫和等優點。用半合成或合成的高分子材料作為載體材料製備微球具有以下限制(1)材料本 身製備過程比較複雜，成本相對較高；(2)製備微球時加入的有機溶劑較多，不利於環保； (3)微球製備工藝相對複雜，對設備等要求較高；(4)疏水性強，親水性能較差。海藻酸鈉和殼聚糖均為天然高分子多糖，具有很好的生物相容性和生物可降解 性，在藥物的控釋、緩釋、靶向以及智能釋藥系統中具有獨特的優勢，應用範圍較泛。目前，國內外已上市地西他濱只有普通凍幹注射劑，規定貯藏溫度25°C，說明本品 穩定性不佳；藥代動力學研究表明，地西他濱在人體內由於肝胞嘧啶脫氨酶的快速滅活，其 半衰期為15 25min，半衰期較短，引起臨床用量增加(約20000元/50mg/瓶)，給病人的 醫藥費帶來嚴重負擔；本品不良反應有白細胞、血小板減少，輕中度噁心、嘔吐等，其主要毒 性為骨髓抑制。
發明內容
為克服現有技術中的不足，提高地西他濱穩定性，延長體內藥效，同時降低毒副作 用，本發明的目的在於提供一種以天然材料為載體的地西他濱緩釋微球，該地西他濱緩釋 微球外觀優良，粒徑可控，包封率高。本發明的另一個目的在於提供一種製備所述地西他濱 緩釋微球的方法。為解決上述技術問題，實現上述技術效果，本發明採用了以下技術方案一種地西他濱緩釋微球，包括地西他濱以及載體材料，所述地西他濱與所述載體 材料的重量百分比為 80%。優選的，所述地西他濱與所述載體材料的重量百分比為 50%。進一步的，所述地西他濱為地西他濱活性成分及其藥學上可接受的鹽，其鹽形式 包括但不限於鹽酸鹽、L-乳酸鹽、乙酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、碳酸鹽、磷酸鹽、抗壞血酸鹽、富 馬酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、苯磺酸鹽、對氨基苯磺酸鹽、L-酒石酸鹽、檸檬酸鹽、半乳糖 鹽、葡萄糖酸鹽、泛酸鹽、海藻酸鹽。進一步的，所述載體材料為殼聚糖及其衍生物或海藻酸及其鹽或殼聚糖及其衍生 物和海藻酸及其鹽的混合物。進一步的，所述地西他濱緩釋微球的粒徑在10 μ m以下，所述地西他濱緩釋微球 的包封率在75%以上。本法的地西他濱緩釋微球可通過以下三種類似的製備方法製備而得製備方法一，包括以下步驟①將殼聚糖用醋酸溶解配製成殼聚糖溶液，然後加入地西他濱，攪拌使其分散均 勻，用鹼性溶液調節PH值後所得的溶液作為水相；②配製含司盤-20和普朗尼克F68的液體石蠟溶液作為油相；③將水相滴加至油相中，製成W/0型乳劑；④向所述W/0型乳劑中加入交聯劑進行交聯固化；
⑤對步驟④後的溶液用有機溶劑洗滌除去油相，然後再用交聯劑洗滌試劑洗滌除 去殘留的交聯劑；⑥對步驟⑤後的溶液進行脫水，抽濾，所得產物進行無菌冷凍乾燥後即為所述地 西他濱緩釋微球。進一步的，所述交聯劑為甲醛或戊二醛。進一步的，所述交聯劑洗滌試劑為亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、注射用水中的一種或 幾種。製備方法二，包括以下步驟①取海藻酸鈉用注射用水溶解製成海藻酸鈉溶液，然後加入地西他濱，攪拌使其 分散均勻，用鹼性溶液調節PH值後所得的溶液作為水相；②取氯化鈣，加注射用水製成氯化鈣溶液，作為固化液；③將所述固化液攪拌下緩慢滴加至所述水相中；④對步驟③後的溶液進行抽濾，用有機溶劑或注射用水洗滌，所得產物進行無菌 冷凍乾燥後即為地西他濱緩釋微球。製備方法三，包括以下步驟①取海藻酸鈉用注射用水溶解製成海藻酸鈉溶液，然後加入地西他濱，攪拌使其 分散均勻，用鹼性溶液調節PH值後所得溶液作為水相；②取氯化鈣和殼聚糖，加注射用水製成分別含氯化鈣和殼聚糖的混合溶液；③將所述混合溶液攪拌下緩慢滴加至所述水相中；④對步驟③後的溶液進行抽濾，用有機溶劑或注射用水洗滌，所得產物進行無菌 冷凍乾燥後即為地西他濱緩釋微球。由於上述方案的運用，本發明與現有技術相比具有以下優點和技術效果1、良好的生理相容性本發明提供的地西他濱緩釋微球良好的生理相容性取決於其載體材料和製備工 藝。地西他濱緩釋微球的載體材料為具有無毒性、生物黏附性、生物相容性、生物可降解性 及可被吸收性的單一成分或其混合物。2、提高藥物的穩定性地西他濱在人體內由於肝胞嘧啶脫氨酶的快速滅活，將其製成微球製劑後可保護 藥物免遭破壞，從而可延長藥物半衰期，延長體內藥效。3、緩釋功能本發明提供的地西他濱緩釋微球，通過天然載體材料在體內的緩慢降解釋放藥 物，避免了藥物突釋現象，使藥物在到達靶組織前損失較小，增強了療效的同時降低了毒副 作用。4、降低了毒副作用本發明提供的地西他濱緩釋微球，其中的藥物地西他濱均勻分散於載體材料中， 一方面，藉助天然載體與細胞組織的特殊親和性，攜帶藥物能被器官組織的網狀內皮系統 所內吞(吞噬，胞飲)或被細胞融合，使藥物濃集於靶區逐步擴散釋放出藥物，提高藥物的 有效濃度，更好的發揮療效，同時降低對非靶區細胞組織的毒副作用。另一方面，藥物被分 散於載體材料中，避免了藥物與血管的直接接觸，減輕了對血管的刺激性。
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5、包封率較高本發明提供的地西他濱緩釋微球，其製備方法製得簡單可行，所用試劑及材料均 易得、價廉，且在提供的參數控制範圍內製備地西他濱微球的具有較高的藥物包封率，可達 75%以上。
具體實施例方式一種地西他濱緩釋微球，包括地西他濱以及載體材料，地西他濱與所述載體材料 的重量百分比為 80%，優選的地西他濱與所述載體材料的重量百分比為 50%。地西他濱包括地西他濱活性成分以及鹽酸鹽、L-乳酸鹽、乙酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、 碳酸鹽、磷酸鹽、抗壞血酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、苯磺酸鹽、對氨基苯磺酸鹽、 L-酒石酸鹽、檸檬酸鹽、半乳糖鹽、葡萄糖酸鹽、泛酸鹽和海藻酸鹽中的一種鹽。。載體材料為殼聚糖及其衍生物或海藻酸及其鹽或殼聚糖及其衍生物和海藻酸及 其鹽的混合物。地西他濱緩釋微球的粒徑在IOym以下，所述地西他濱緩釋微球的包封率在75% 以上。實施例1 一種地西他濱緩釋微球，其製備的過程如下①將殼聚糖用 5%醋酸溶解配製成3.0% 10.0% (V/W)的溶液，加入 0. 15% 3% (V/W)的藥物地西他濱，攪拌使其分散均勻，用0. Imol/LNaOH溶液調節ρΗ值 至5 7作為水相；②配製含1. 5% 3% (W/W)司盤-20、0. 0. 2% (W/W)普朗尼克F68的液體 石蠟溶液作為油相；③按水相油相體積比1 8 1 10將水相滴加至油相中，15 25°C, 1200 1500r/min條件下攪拌10 30分鐘，製成W/0型乳劑；④向所述W/0型乳劑中加入適宜交聯劑進行交聯固化1 3小時；⑤用有機溶劑洗滌2 3次除去油相，用交聯劑洗滌試劑洗滌除去殘留交聯劑；⑦再用有機溶劑洗滌2 3次脫水，抽濾；⑧所得產物進行無菌冷凍乾燥後得地西他濱緩釋微球。所述交聯劑包括但不限於甲醛、戊二醛。所述交聯劑洗滌試劑包括但不限於 3%亞硫酸氫鈉、 3%焦亞硫酸 鈉、注射用水中的一種或幾種。所述有機溶劑包括但不限於無水乙醚、石油醚、二氯甲烷、三氯甲烷、無水乙醇。實施例2 一種地西他濱緩釋微球，其製備的過程如下①取海藻酸鈉用注射用水溶解製成1. 0% 6. 0% (W/V)的海藻酸鈉溶液，加入 0. 15 % 3 % (V/W)的藥物地西他濱，攪拌使其分散均勻，用適宜鹼性溶液調節ρΗ值至5 7作為水相；②取氯化鈣，加注射用水製成2. 0% 4. 0% (W/V)的氯化鈣溶液，作為固化液；③將固化液攪拌下緩慢滴加至水相中，15 25°C，1200 1500r/min條件下攪拌10 30分鐘；④抽濾，適宜有機溶劑或注射用水洗滌3 4次；⑤所得產物進行無菌冷凍乾燥後得地西他濱緩釋微球。實施例3:一種地西他濱緩釋微球，其製備的過程如下①取海藻酸鈉用注射用水溶解製成1. 0% 6. 0% (W/V)的海藻酸鈉溶液，加入 0. 15 % 3 % (V/W)的藥物地西他濱，攪拌使其分散均勻，用適宜鹼性溶液調節pH值至5 7作為水相；②取氯化鈣和殼聚糖，加注射用水製成分別含氯化鈣2. 0% 4. 0% (W/V)、殼聚 糖0. 0. 3% (W/V)的溶液；③將氯化鈣和殼聚糖的混合溶液攪拌下緩慢滴加至水相中，15 25°C，1200 1500r/min條件下攪拌10 30分鐘；④抽濾，適宜有機溶劑或注射用水洗滌3 4次；⑤所得產物進行無菌冷凍乾燥後得地西他濱緩釋微球。上述實施例只是為了說明本發明的技術構思及特點，其目的是在於讓本領域內的 普通技術人員能夠了解本發明的內容並據以實施，並不能以此限制本發明的保護範圍。凡 是根據本發明內容的實質所作出的等效的變化或修飾，都應涵蓋在本發明的保護範圍內。
權利要求
一種地西他濱緩釋微球，包括地西他濱以及載體材料，其特徵在於所述地西他濱與所述載體材料的重量百分比為1％～80％。
2.根據權利要求1所述的地西他濱緩釋微球，其特徵在於所述地西他濱與所述載體 材料的重量百分比為 50%。
3.根據權利要求1所述的地西他濱緩釋微球，其特徵在於所述地西他濱包括地西他 濱活性成分以及鹽酸鹽、L-乳酸鹽、乙酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、碳酸鹽、磷酸鹽、抗壞血酸鹽、 富馬酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、苯磺酸鹽、對氨基苯磺酸鹽、L-酒石酸鹽、檸檬酸鹽、半乳糖 鹽、葡萄糖酸鹽、泛酸鹽和海藻酸鹽中的一種鹽。
4.根據權利要求1所述的地西他濱緩釋微球，其特徵在於所述載體材料為殼聚糖及 其衍生物或海藻酸及其鹽或殼聚糖及其衍生物和海藻酸及其鹽的混合物。
5.根據權利要求1所述的地西他濱緩釋微球，其特徵在於，所述地西他濱緩釋微球的 粒徑在10 μ m以下，所述地西他濱緩釋微球的包封率在75%以上。
6.一種根據權利要求1至5中任意一項所述的地西他濱緩釋微球的製備方法，其特徵 在於，包括以下步驟①將殼聚糖用醋酸溶解配製成殼聚糖溶液，然後加入地西他濱，攪拌使其分散均勻，用 鹼性溶液調節PH值後所得的溶液作為水相；②配製含司盤-20和普朗尼克F68的液體石蠟溶液作為油相；③將水相滴加至油相中，製成W/0型乳劑；④向所述W/0型乳劑中加入交聯劑進行交聯固化；⑤對步驟④後的溶液用有機溶劑洗滌除去油相，然後再用交聯劑洗滌試劑洗滌除去殘 留的交聯劑；⑥對步驟⑤後的溶液進行脫水，抽濾，所得產物進行無菌冷凍乾燥後即為所述地西他 濱緩釋微球。
7.一種根據權利要求1至5中任意一項所述的地西他濱緩釋微球的製備方法，其特徵 在於，包括以下步驟①取海藻酸鈉用注射用水溶解製成海藻酸鈉溶液，然後加入地西他濱，攪拌使其分散 均勻，用鹼性溶液調節PH值後所得的溶液作為水相；②取氯化鈣，加注射用水製成氯化鈣溶液，作為固化液；③將所述固化液攪拌下緩慢滴加至所述水相中；④對步驟③後的溶液進行抽濾，用有機溶劑或注射用水洗滌，所得產物進行無菌冷凍 乾燥後即為地西他濱緩釋微球。
8.一種根據權利要求1至5中任意一項所述的地西他濱緩釋微球的製備方法，其特徵 在於，包括以下步驟①取海藻酸鈉用注射用水溶解製成海藻酸鈉溶液，然後加入地西他濱，攪拌使其分散 均勻，用鹼性溶液調節PH值後所得溶液作為水相；②取氯化鈣和殼聚糖，加注射用水製成分別含氯化鈣和殼聚糖的混合溶液；③將所述混合溶液攪拌下緩慢滴加至所述水相中；④對步驟③後的溶液進行抽濾，用有機溶劑或注射用水洗滌，所得產物進行無菌冷凍 乾燥後即為地西他濱緩釋微球。
9.根據權利要求6所述的地西他濱緩釋微球的製備方法，其特徵在於，所述交聯劑為甲醛或戊二醛。
10.根據權利要求6所述的地西他濱緩釋微球的製備方法，其特徵在於，所述交聯劑洗 滌試劑為亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、注射用水中的一種或幾種。
全文摘要
本發明公開了一種地西他濱緩釋微球，包括地西他濱以及載體材料，所述地西他濱與所述載體材料的重量百分比為1％～80％，所述地西他濱緩釋微球的粒徑在10μm以下，所述地西他濱緩釋微球的包封率在75％以上，本發明提供的地西他濱緩釋微球具有較高的載藥量、體內無突釋現象、血藥濃度平穩，且無藥物釋放停滯期，大大減少了臨床給藥頻次，減小給藥量，提高了患者的順應性，降低了不良反應的危害程度。
文檔編號A61K31/706GK101966157SQ20101050606
公開日2011年2月9日 申請日期2010年10月14日 優先權日2010年10月14日
發明者初虹, 王浩, 龔金紅 申請人:蘇州特瑞藥業有限公司