預防和治療魚類和有殼水生動物感染性疾病的藥物的製作方法

2023-06-14 12:09:46 3

專利名稱：預防和治療魚類和有殼水生動物感染性疾病的藥物的製作方法
技術領域：
本發明涉及預防和治療由病原性細菌和病毒等引起的魚類和有殼水生動物感染性疾病等的藥物，含有這類藥物的飼料和通過飼餵該飼料養殖魚類和有殼水生動物的方法。
背景技術：
目前，日本各地都有各種魚類和有殼水生動物養殖。其中，蝦、黃條鰤、真鯛和鰈等的養殖量很大，魚類和有殼水生動物的大量養殖是由於有著巨大的市場需求。
不象野生魚類和有殼水生動物的那樣，在養殖中，魚類和有殼水生動物的養殖密度很高，因此常常患病。疾病的主要起因是病原性細菌、病毒和寄生蟲等的感染。為避免這類疾病，採取了各種對策。
魚類和有殼水生動物的養殖之初是將各種種苗(魚苗)撒入養殖池中。雖然此前一般是採用國內種苗，但近年來出於成本等因素的考慮，採用進口魚苗的情況有所增加。
但是，在臺灣、中國和東南亞國家，數年前已經開始有一種病毒感染[PRDV(對蝦棒狀DNA病毒)感染]由進口商波及到了日本，感染了這種病毒的明蝦和龍蝦等被導致死亡。因此，這給除衝繩外的地區帶來了嚴重損失。但至今仍未確立有效的預防和治療手段。PRDV，該疾病的起因病毒，是一種帶有被膜的、大小約為400×150nm的棒狀病毒。感染了這種病毒的蝦外殼上形成大量白斑，其死亡率可至少達80％。
由於PRDV是一種病毒，因此還沒有採用藥物直接治療這種感染的方法。因此，目前僅是嘗試性地對養殖的魚類(蝦類)施用免疫增強劑，以提高存活率。
因此，當蝦或其他養殖池中發生該病毒感染時，所有的蝦等都需要從養殖池中撈出，養殖池需在較長的一段時間內排乾水，然後再將安全的種苗重新放入養殖池。但病毒感染常會再發生。由於最近發現生活在養殖池內或養殖池外的甲殼類動物是該病毒的攜帶者，因此在這種情況下，預防這類感染疾病的手段等於沒用。
除了蝦的這種病毒感染，其他魚類和有殼水生動物的細菌感染等也都成為問題。魚和有殼水生動物的這類疾病包括發生於真鯛，黃條鰤和紫鰤等的由虹彩病毒感染的疾病，發生在鮭魚中的血細胞生成器官感染性壞死，黃條鰤的鏈球菌病，真鯛和黃條鰤的弧菌病和黃條鰤的Benedetia寄生蟲病。在魚類的這些疾病中，細菌疾病主要通過施用抗生素治療。但在一些情況下沒有獲得充分的效果。抗生素的使用不但會招致耐藥菌的出現，還會引起是否會對人體產生影響的擔心。因此，需要開發可替代抗生素的安全物質。
本發明的目的是提供一種對病毒、病原性細菌和寄生蟲的感染具有預防和治療作用的安全物質，並由此提高養殖池中的魚類和有殼水生動物的存活率。
發明描述根據前述的情況，本發明者進行了廣泛的研究。結果，發現硫酸化多糖可用於預防和治療由病毒、病原性細菌引起的魚類和有殼水生動物感染性疾病，由此完成了本發明。
依據本發明，提供了一種預防和治療魚類和有殼水生動物的感染性疾病的藥物，它含有硫酸化多糖作為活性成分。
依據本發明，還提供了一種養殖魚類和有殼水生動物的飼料，它含有硫酸化多糖。
依據本發明，還提供了一種養殖魚類和有殼水生動物的方法，該方法包括飼餵上述飼料養殖魚類和有殼水生動物。
附圖概述附


圖1圖示說明了病毒感染後蝦的存活率。
附圖2圖示說明了病毒感染後黃條鰤的存活率。
實現發明的最佳模式作為本發明實踐中使用的活性成分，硫酸化多糖的實例包括巖藻多糖、硫酸鼠李糖(rhamnan)和角叉菜膠(carrageenan)。巖藻多糖是一種主要由巖藻糖組成的硫酸化多糖，其分子量約為數十萬，富含在海蘊，海扇，海藻，裙帶菜，昆布和amijigusa(網地藻屬)等棕色藻類中，它對人體安全。硫酸鼠李糖是一種主要由鼠李糖組成的硫酸化多糖，其分子量約為數萬至數十萬，存在於石蓴和Hitoegusa(Eugomontia sp.)等綠色藻類中。角叉菜膠是一種含有半乳糖、脫水半乳糖和硫酸等作為主要成分的硫酸化多糖，其分子量約為數十萬，存在於kirinsai(麒麟菜屬)，ibaranori(Hiynea sp.)和suginori(杉藻屬)等的紅色藻類中。
其中，巖藻多糖曾被報導具有抑制幽門螺旋桿菌的作用，據說幽門螺旋桿菌是胃潰瘍的起因，由於巖藻多糖可固定於胃黏膜，由此可用作預防和治療胃潰瘍和胃癌的藥物。但至今尚未獲知它可用作預防和治療魚類和有殼水生動物感染性疾病的藥物。
由於巖藻多糖、硫酸鼠李糖和角叉菜膠分別存在於棕色藻類、綠色藻類和紅色藻類中，由此可將這些藻類研碎或採用類似手段及直接飼喂。巖藻多糖、硫酸鼠李糖和角叉菜膠的提取方法已經建立，優選使用它們的提取物。提取方法的實例包括酸提取法和熱水提取法。但提取方法不限於這些方法，也可採用其他方法進行提取。
通過水解由相應的藻類提取得到的高分子量產物後的巖藻多糖、硫酸鼠李糖和角叉菜膠也可用於本發明中，所述水解是通過例如弱酸處理，將它們轉化為低分子量產物或寡糖。
巖藻多糖、硫酸鼠李糖和角叉菜膠也可以含有它們的藻類或幹提取物形式飼喂。但通常優選在使用前，將它們與養殖飼料混合或摻合。這些物質混入或摻入飼料的比例可根據魚和有殼水生動物的種類以及飼養方法有所變化。但對於預防感染目的，其混合比例通常優選約為0.5～50g/kg。每日飼餵含有這類物質的飼料的比率可優選控制在養殖的魚或有殼水生動物重量的約3wt％。
對本發明適用的魚類和有殼水生動物沒有特別限制。但它們的實例包括淡水魚，如鰻、鯉魚、虹鱒魚、香魚、tirapia和鯽魚；鹹水魚，例如黃條鰤，鯛，銀大麻哈魚，鯖，鰈，比目魚，kurosoi(鱸鮋屬)，東方魨(Fugu rubripes rubripes)和紫鰤；以及無脊椎動物，例如明蝦，black tiger，ushiebi(對蝦屬)，黃海明蝦和槍蟹。適用於本發明的感染性疾病的實例包括由病毒，如虹彩病毒，雙節段RNA病毒和PRDV引起的感染性疾病；和細菌性感染，例如弧菌病，假單孢菌病，鏈球菌病和結核菌病(tuberculoidosis)。
巖藻多糖、硫酸鼠李糖和角叉菜膠預防和治療感染性疾病的機理尚未澄清，但據認為是由於下列原因。存在於細菌和病毒表面的糖脂和糖鏈在它們黏附於生物體的細胞進行感染時起著重要作用。例如，巖藻多糖的巖藻糖殘基等參與該糖脂和糖鏈，由此預防了感染。
實施例下文將通過下列實施例更詳細地說明本發明。但本發明並非受限於下列實施例。實施例1巖藻多糖對PRDV引起的明蝦感染的作用試驗明蝦使用的明蝦平均重8g，得自MITSUI NORIN CO.，LTD，開始試驗前先飼養一周，然後將它們用於試驗。試驗用的明蝦數量對照組使用28尾明蝦，用以0.5g/kg比例混合的含巖藻多糖的飼料飼養的組使用26尾明蝦，用以1.0g/kg比例混合的含巖藻多糖的飼料飼養的組使用26尾明蝦，用以3.0g/kg比例混合的含巖藻多糖的飼料飼養的組使用28尾明蝦，用以5.0g/kg比例混合的含巖藻多糖的飼料飼養的組使用28尾明蝦。在晚上指定時間飼餵飼料，各組飼餵比率定在明蝦重量的2％。試驗方法將各種飼料連續飼餵17天。在第8天，飼餵飼料後，用PRDV感染各組明蝦，以測定感染後第10天的存活率。感染按照下述方法進行。將感染了病毒的明蝦的頭胸甲在無菌海水中勻漿，之後離心。將所得上清液懸浮在海水中以獲得約1/8000的稀釋液。將各組明蝦放在該懸浮液中，並在通氣條件下使其浸沒2小時，由此用病毒感染明蝦。飼養期間的水溫保持在23℃。對於試驗期間死亡的明蝦，採用PCR方法檢測病毒，以證實明蝦的死亡是由於病毒引起的。
感染後的存活率如附
圖1所示。
結果，發現由PRDV引起的明蝦死亡可根據施用的巖藻多糖的劑量得以預防。實施例2巖藻多糖對由虹彩病毒(Iridoviridae)引起的黃條鰤的感染性疾病的作用試驗魚在開始試驗前，將平均重量為400g/魚的黃條鰤先飼養14天，然後用於試驗。飼養方法設立1000升循環Panlight缸，放入循環使用的飼養海水。進行充分通氣。試驗用黃條鰤的數量使用150尾健康的黃條鰤(每組30尾黃條鰤)。飼餵(黃條鰤)對照組使用溼的小丸，試驗組使用這種溫的小丸與巖藻多糖的混合物(加入量分別為1.0，1.5，2.0和2.5g/kg)。各種飼料都在每天指定的時間10點鐘飼喂，各組的飼餵比率定為黃條鰤重量的44％。實驗方法將試驗的各種飼料連續飼餵39天。使用的魚預先餵養14天。在預先餵養完成的當天，將各組的黃條鰤用虹彩病毒感染。將測試天數定為25天，對各組黃條鰤存活率進行測定。感染按照下述方法進行。將感染了虹彩病毒的一尾黃條鰤的一部分在無菌海水中勻漿，然後高速離心。將所得上清液用海水稀釋到1/8000。將各組的黃條鰤放在該懸浮液中，並在通氣下使其浸沒2小時。試驗期間的水溫保持在20℃。對於試驗期間死亡的黃條鰤，採用PCR方法檢測它們是否感染了虹彩病毒。結果發現黃條鰤的死亡均是由於病毒感染引起的。
感染後的存活率如附圖2所示。
結果，發現由虹彩病毒引起的黃條鰤死亡可根據施用的巖藻多糖的劑量得以預防。
工業實用性依據本發明，魚類和有殼水生動物的感染性疾病可安全穩定地得以預防或治療，由此可向市場穩定地提供養殖魚類等。
權利要求
1.一種預防和治療魚類和有殼水生動物感染性疾病的藥物，它含有硫酸化多糖作為活性成分。
2.權利要求1的預防和治療魚類和有殼水生動物的感染性疾病的藥物，其中的硫酸化多糖是巖藻多糖。
3.一種養殖魚類和有殼水生動物的飼料，含有硫酸化多糖。
4.權利要求3的養殖魚類和有殼水生動物的飼料，其中的硫酸化多糖是巖藻多糖。
5.一種養殖魚類和有殼水生動物的方法，包括飼餵權利要求3或4的飼料。
全文摘要
本發明涉及預防和治療魚類和有殼水生動物感染性疾病的藥物,該藥物含有硫酸化多糖作為活性成分;和養殖魚類和有殼水生動物的飼料,這種飼料含有硫酸化多糖。硫酸化多糖有效安全地預防或治療了魚類和有殼水生動物的感染性疾病。
文檔編號A23K1/16GK1251020SQ98803571
公開日2000年4月19日 申請日期1998年3月18日 優先權日1997年3月21日
發明者高橋幸則, 兼光明男, 大村浩, 長岡正人, 上山貞夫, 山下哲郎, 橫倉輝男 申請人:株式會社益力多本社, 美雅克化學株式會社