一種提高藍莓花青素含量和純度的處理方法
2023-06-14 14:45:56 5
專利名稱：一種提高藍莓花青素含量和純度的處理方法
技術領域：
本發明涉及一種提高藍莓花青素含量和純度的處理方法。
背景技術：
藍莓(blueberry),又稱越橘、藍眾果，屬杜胃$花科(Ericaceae)越橘屬(Vaccinium.spp)，多年生落葉或常綠灌木。藍莓果實多為深藍色，被白霜，近圓形，營養豐富。藍莓中含有豐富的功能性成分，如維生素、果膠、S0D、礦物質元素等，尤其是花青素含量居各種水果之冠，一般IOOg鮮藍莓含有花色苷100-200mg左右，被譽為「漿果之王」。藍莓含有的花青素、多酚等活性物質使之具有抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、改善視力、保護神經、預防心腦血管疾病、增強機體免疫力等功能，因此藍莓被聯合國糧農組織(FAO)確定為人類五大健康食品之一。藍莓花青素的提取方法很多，但傳統的方法如溶劑浸提法會直接影響其生物活性及產率降低，而酶解法能最大限度從植物體內提取有效成分，酶解反應既可以較溫和地將植物組織分解，較大幅度提高得率，同時還不易破壞成分的立體結構。藍莓花青素粗提物中的花青素含量較低，需要進一步的分離純化。大孔吸附樹脂是一類有機高分子聚合物吸附劑，它具有物理化學穩定性高、吸附容量大、選擇性好、吸附速度快、解吸容易、可反覆使用等優點，可作為今後天然活性成分提取、精製的一種有效方法
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種提高藍莓花青素含量和純度的處理方法。為解決上述技術問題，本發明採用下列技術方案:纖維素酶提取藍莓花青素的處理方法，其處理步驟包括:準確稱取藍莓鮮果20g，用蒸餾水洗淨，晾乾表面水分後，粉碎、勻漿，放入三角瓶中，2%的鹽酸-甲醇為提取溶劑，設置溶劑與鮮果的比值為5 20，提取P H值為1.5 2.5，纖維素酶佔鮮果重量比為1-4%，酶解溫度為40 70°C，酶解反應時間lh。水浴提取完畢進行抽濾，將所得濾液旋轉蒸發，冷凍乾燥得藍莓花青素粗提物。經高效液相色譜測定，藍莓花青素含量為5.15
5.65mg/100g。而用傳統的只加溶劑浸提法處理的藍莓花青素含量為3.65mg/100g。大孔吸附樹脂純化藍莓花青素粗提物的工藝參數為:選用最優的NKA-9大孔樹脂進行純化，設置藍莓花青素液濃度為0.5 4mg/mL，吸附pH值為2 7，進樣速率0.5
2.5mL/min ;乙醇濃度20 100%，洗脫液體積為5 25倍樣品液體積。最後經旋轉蒸發，冷凍乾燥可得到純度為33.8 35.1 %的藍莓花青素粉末，其純度為市售的藍莓花青素粉末的2倍多。 溶劑與鮮果的比值為優選為15: I。提取pH值優選為2.5。纖維素酶佔鮮果重量比為3%。
酶解溫度優選為70°C。藍莓花青素液濃度優選為2.5mg/mL。乙醇濃度優選為75%。吸附pH值優選為4.5。進樣速率值優選為1.0mL/min。洗脫液與樣品液體積比優選為20: I。該技術方案有以下功效:1.本發明採用纖維素酶提取藍莓花青素，操作簡單，成本低，汙染少，產品含量高。2.本技術對藍莓花青素活性成分的損耗遠遠低於只加溶劑處理技術。3.通過本技術處理得到的藍莓花青素粉末純度要遠遠高於市售的藍莓花青素產品O
具體實施方案實施例1稱取藍莓鮮果20g，用蒸餾水洗淨，晾乾表面水分後，粉碎、勻漿，放入三角瓶中，2%的鹽酸-甲醇為提取溶劑，溶劑與鮮果的比值為15: 1，pH為2.5，加酶量3%，酶解溫度70°C，酶解反應 時間lh。經高效液相色譜測定，藍莓花青素含量為5.42mg/100g,。NKA-9大孔樹脂對得到的粗提物進行純化，藍莓花青素液濃度2.5mg/mL,吸附pH值4.5，進樣速率1.0mL/min,乙醇濃度75%，洗脫液與樣品液體積比20: 1，可得到純度為34.2%的藍莓花青素粉末。實施例2稱取藍莓鮮果20g，用蒸餾水洗淨，晾乾表面水分後，粉碎、勻漿，放入三角瓶中，2%的鹽酸-甲醇為提取溶劑，溶劑與鮮果的比值為15: 1，pH為2.5，加酶量4%，酶解溫度70°C，酶解反應時間lh。經高效液相色譜測定，藍莓花青素含量為5.65mg/100g。NKA-9大孔樹脂對得到的粗提物進行純化，藍莓花青素液濃度2.0mg/mL,吸附pH值4.5，進樣速率1.0mL/min,乙醇濃度75%，洗脫液與樣品液體積比20: 1，可得到純度為
34.7%的藍莓花青素粉末。實施例3稱取藍莓鮮果20g，用蒸餾水洗淨，晾乾表面水分後，粉碎、勻漿，放入三角瓶中，2%的鹽酸-甲醇為提取溶劑，溶劑與鮮果的比值為15: 1，pH為2.0，加酶量3%，酶解溫度70°C，酶解反應時間lh。經高效液相色譜測定，藍莓花青素含量為5.35mg/100g,。NKA-9大孔樹脂對得到的粗提物進行純化，藍莓花青素液濃度2.5mg/mL，吸附pH值4.5，進樣速率1.0mL/min,乙醇濃度70%，洗脫液與樣品液體積比20: 1，可得到純度為
35.1 %的藍莓花青素粉末。實施例4稱取藍莓鮮果20g，用蒸餾水洗淨，晾乾表面水分後，粉碎、勻漿，放入三角瓶中，2%的鹽酸-甲醇為提取溶劑，溶劑與鮮果的比值為20: 1，pH為2.0，加酶量3%，酶解溫度70°C，酶解反應時間lh。經高效液相色譜測定，藍莓花青素含量為5.15mg/100g,。NKA-9大孔樹脂對得到的粗提物進行純化，藍莓花青素液濃度2.5mg/mL,吸附pH值6.5，進樣速率1.0mL/min,乙醇濃度70%，洗脫液與樣品液體積比20: 1，可得到純度為33.8%的藍莓花青 素粉末。
權利要求
1.纖維素酶提取藍莓花青素的處理方法，其處理步驟包括:準確稱取藍莓鮮果20g，用蒸餾水洗淨，晾乾表面水分後，粉碎、勻漿，放入三角瓶中，2 %的鹽酸-甲醇為提取溶劑，設置溶劑與鮮果的比值為5 20，提取P H值為1.5 2.5，纖維素酶佔鮮果重量比為1-4%，酶解溫度為40 70°C，酶解反應時間lh。水浴提取完畢進行抽濾，將所得濾液旋轉蒸發，冷凍乾燥得藍莓花青素粗提物。經高效液相色譜測定，藍莓花青素含量為5.15 5.65mg/100g。
2.根據權利要求1所述的纖維素酶提取藍莓花青素的處理方法，其特徵是:大孔吸附樹脂純化藍莓花青素粗提物的工藝參數為:選用最優的NKA-9大孔樹脂進行純化，設置藍莓花青素液濃度為0.5 4mg/mL，吸附pH值為2 7，進樣速率0.5 2.5mL/min ；乙醇濃度20 100%，洗脫液體積為5 25倍樣品液體積。最後經旋轉蒸發，冷凍乾燥可得到純度為33.8 35.1 %的藍莓花青素粉末。
3.根據權利要求1所述的纖維素酶提取藍莓花青素處理方法，其特徵是:所述溶劑與鮮果的比值為優選為15: I。
4.根據權利要求1所述的纖維素酶提取藍莓花青素處理方法，其特徵是:所述提取PH值優選為2.5。
5.根據權利要求1所述的纖維素酶提取藍莓花青素處理方法，其特徵是:所述纖維素酶佔鮮果重量比為3%。
6.根據權利要求1所述的纖維素酶提取藍莓花青素處理方法，其特徵是:所述酶解溫度優選為70°C。
7.根據權利要求1所述的纖維素酶提取藍莓花青素處理方法，其特徵是:所述藍莓花青素液濃度優選為2.5mg/mL。
8.根據權利要求1所述的纖維素酶提取藍莓花青素處理方法，其特徵是:所述乙醇濃度優選為75%。
9.根據權利要求1所述的纖維素酶提取藍莓花青素處理方法，其特徵是:所述吸附pH值優選為4.5。
10.根據權利要求1所述的纖維素酶提取藍莓花青素處理方法，其特徵是:所述進樣速率值優選為1.0mL/min。
11.根據權利要求1所述 的纖維素酶提取藍莓花青素處理方法，其特徵是:所述洗脫液與樣品液體積比優選為20: I。
全文摘要
本發明涉及一種提高藍莓花青素含量和純度的處理方法。其處理步驟包括準確稱取藍莓鮮果20g，用蒸餾水洗淨，晾乾表面水分後，粉碎、勻漿，放入三角瓶中，2％的鹽酸-甲醇為提取溶劑，設置溶劑與鮮果的比值為5～20，提取p H值為1.5～2.5，纖維素酶佔鮮果重量比為1-4％，酶解溫度為40～70℃，酶解反應時間1h。水浴提取完畢進行抽濾，將所得濾液旋轉蒸發，冷凍乾燥得藍莓花青素粗提物。經高效液相色譜測定，藍莓花青素含量5.15～5.65mg/100g。而用傳統的只加溶劑浸提法處理的藍莓花青素含量為3.65mg/100g。採用這種方法處理藍莓花青素，操作簡單，成本低，汙染少，產品含量高。對藍莓花青素活性成分的損耗遠遠低於只加溶劑處理技術，且得到的藍莓花青素粉末純度要遠遠高於市售的藍莓花青素產品。
文檔編號C07D311/62GK103073532SQ20121049179
公開日2013年5月1日 申請日期2012年11月28日 優先權日2012年11月28日
發明者孫愛東, 陳健, 陶曉贇, 李路寧, 張師 申請人:北京林業大學