一種澳洲堅果雜交育種的方法
2023-06-17 22:17:06
一種澳洲堅果雜交育種的方法
【專利摘要】本發明提供一種澳洲堅果雜交育種的方法，屬於果樹雜交育種【技術領域】。它包括去雄、採集花粉和人工授粉三個步驟，其中去雄是在澳洲堅果盛花期，選擇大部分花蕾發白、花被管裂開且花柱突出第1d的花序，去掉花被管沒有裂開的小花，並對花柱突出第1d的小花進行疏除至每個花序留30-100朵小花，在小花花柱突出彎曲的部位切斷花被管，切斷的花被管上部分向外翻時或切斷花被管10-30分鐘後，去除花被片並套袋封口，得到去雄花序。本發明的方法有效的提高了澳洲堅果去雄的效率，使人工操作去雄更加簡單快捷，同時避免了偽雜種的產生，提高了雜交種的純度。
【專利說明】一種澳洲堅果雜交育種的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於果樹雜交育種【技術領域】，具體涉一種澳洲堅果雜交育種的方法。
【背景技術】
[0002]澳洲堅果(Macadamia spp.),原產於澳大利亞昆士蘭州東南部和新南威爾斯州北部沿海的亞熱帶雨林，為多年生常綠喬木果樹。我國於上世紀70年代開始澳洲堅果引種試種，現今已有50多年的栽培史，澳洲堅果的栽培面積已超過了主產國澳大利亞，但是商業性種植品種主要是國外育成品種，目前我國尚無自己選育的品種，為了滿足生產和研究的需要，為了選育適合我國氣候環境的、具有自主智慧財產權的新品種，我國於2009年開始啟動澳洲堅果育種工作，而雜交育種仍然是澳洲堅果新品種選育的最主要方法，是澳洲堅果育種中最重要和最有效的途徑，也是目前使用最廣泛的方法。由於澳洲堅果的結實率一般較低，為了獲得一定的雜交種子數，就必須做更多的雜交花數。在澳洲堅果雜交育種過程中，為了保證獲得所配置組合的純正雜交種子，去雄雜交是重要的步驟之一。1954年，澳大利亞學者URATA曾用針撕開花被片，後用鑷子去掉雄蕊的方法來去雄，2009年林玉虹、陳顯國等也用此方法對澳洲堅果進行雜交授粉試驗。這種去雄方法費時費力，柱頭受傷的概率較大，由於受傷柱頭多，坐果率比較低。因此，如何克服現有技術中的不足是目前果樹雜交育種【技術領域】亟需解決的問題。
【發明內容】
[0003]針對現有技術存在的上述不足，本發明的目的是提供一種工作效率更高的去雄方法，避免了偽雜種的產生 ，提高了雜交種的純度。
[0004]為實現上述目的，本發明採用如下技術方案:
[0005]一種澳洲堅果雜交育種的方法，包括如下步驟:
[0006]步驟(1)，去雄:在澳洲堅果盛花期，選擇大部分花蕾發白、花被管裂開且花柱突出第Id的花序，去掉花被管沒有裂開的小花，並對花柱突出第Id的小花進行疏除至每個花序留30-100朵小花,在小花花柱突出彎曲的部位切斷花被管，切斷的花被管上部分向外翻時或切斷花被管10-30分鐘後，去除花被片並套袋封口，得到去雄花序，本方法稱之為切管連被去雄法；
[0007]步驟(2)，採集花粉:對母本花序去雄的當天，在父本樹上選擇即將開放的花序套袋，授粉前選擇袋內24小時之內開放的花序，將花序放入試管內，左右各螺旋式旋轉試管
3-5下，讓花粉儘可能多的粘到試管內壁上，待試管內壁上能夠明顯的看到一層花粉時即可，採集完花粉的試管用溼毛巾包裹，試管口包在溼毛巾內，溼毛巾以不滴水為宜，得到授粉試管；
[0008]步驟(3)，人工授粉:步驟(1)得到的去雄花序在40_48h後，去掉步驟(2)得到的授粉試管外包裹的溼毛巾，然後將其放入授粉試管內，左右各螺旋式旋轉試管2-3下，上下移動試管1-2下即完成授粉，套袋，IOd後撤袋。[0009]步驟(1)中所述的切斷花被管採用鋒利的U型小剪刀。
[0010]步驟(1)中所述的去除花被片的方式為用手或鑷子輕輕去除。
[0011]步驟⑵中所述的試管規格為25X200mm，且為透明材質內壁光滑的試管。
[0012]每支步驟⑵得到的授粉試管能授粉3-5個步驟⑴得到的去雄花序。
[0013]步驟(3)授粉的環境條件為溫度18-21 °C，相對溼度60-70%，晴朗、無風或微風的天氣。
[0014]步驟(3)人工授粉後24小時內降中到大雨，需重新人工授粉。
[0015]所述的步驟(3)所述的人工授粉時期為I月下旬至2月下旬或盛花期，盛花期為父母本樹上開花數量在25% -75%之間時。
[0016]本發明與現有技術相比，其有益效果為:(1)本發明的切管連被去雄法是將花被片一次去除而成功去雄,速度快,受傷柱頭較少,母本花的柱頭外露,便於授粉；(2)本發明在研究了澳洲堅果花器特徵、花葯散粉時間、柱頭可授性、花粉萌發率尖峰時間、花粉的收集等授粉特性的基礎上，確定澳洲堅果人工授粉中的去雄時間、花粉採集時間及方法、授粉時間及方法和撤袋時間，有效地提高了人工雜交授粉的效率，避免了偽雜種的產生，提高了雜交種的純度；(3)經本發明方法雜交育種最終坐果率高達6%，遠遠高出於自然授粉的平均坐果率，其中，自然授粉的平均坐果率為0.22%。
具體實施例
[0017]下面結合實施例對本發明作進一步的詳細描述。
[0018]以下實施例用於說明本發明，但不用來限制本發明的範圍。在不背離本發明精神和實質的情況下，對本發明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬於本發明的保護範圍。若未特別指明，實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規手段。
[0019]實施例1
[0020]本實施例澳洲堅果雜交育種的方法採用的澳洲堅果品種D4為母本，品種HAES900為父本，各選擇3株，具體包括以下步驟:
[0021]步驟(1)，去雄:在澳洲堅果品種D4的盛花期，選擇大部分花蕾發白、花被管裂開且花柱突出第Id的花序，去掉花被管沒有裂開的小花，並對花柱突出第Id的小花進行疏除至每個花序留30朵小花，在小花花柱突出彎曲的部位，用鋒利的U型小剪刀切斷花被管，切斷花被管10分鐘後，用鑷子輕輕去除花被片並套袋封口，得到去雄花序；
[0022]步驟(2)，採集花粉:對母本花序去雄的當天，在父本HAES900的樹上選擇即將開放的花序套袋，授粉前選擇袋內24小時之內開放的花序，用規格為25 X 200mm、透明材質內壁光滑的試管取花粉，把花序放入乾淨的試管內，左右各螺旋式旋轉試管3下，讓花粉儘可能多的粘到試管內壁上，待試管內壁上能夠明顯的看到一層花粉時即可；採集完花粉的試管標上標籤，用溼毛巾包裹，試管口包在溼毛巾內，溼毛巾以不滴水為宜，得到授粉試管；
[0023]步驟(3)，人工授粉:步驟(1)得到的去雄花序在40h後，去掉步驟(2)得到的授粉試管外包裹的溼毛巾，然後將其放入授粉試管內，左右各螺旋式旋轉試管2下，上下移動試管I下即完成授粉，套袋後掛上標籤，註明父母本，每支步驟(2)得到的授粉試管可授粉3個步驟(1)得到的去雄花序；授粉結束後IOd撤袋。
[0024]授粉時期為I月下旬，；授粉環境條件優選為溫度18_21°C、相對溼度60-70%、晴朗、微風；
[0025]授粉後5個月調查最終坐果數，去雄授粉的坐果率為5% (坐果率=坐果數/授粉花朵數*100% )。
[0026]實施例2
[0027]本實施例澳洲堅果雜交育種的方法採用的澳洲堅果品種D4為母本，品種HAES900為父本，各選擇4株，具體包括以下步驟:
[0028]步驟(1)，去雄:在澳洲堅果品種D4的盛花期，選擇大部分花蕾發白、花被管裂開且花柱突出第Id的花序，去掉花被管沒有裂開的小花，並對花柱突出第Id的小花進行疏除至每個花序留100朵小花，在小花花柱突出彎曲的部位，用鋒利的U型小剪刀切斷花被管，切斷花被管30分鐘後，用手輕輕去除花被片並套袋封口，得到去雄花序；
[0029]步驟(2)，採集花粉:對母本花序去雄的當天，在父本HAES900的樹上選擇即將開放的花序套袋，授粉前選擇袋內24小時之內開放的花序，用規格為25 X 200mm、透明材質內壁光滑的試管取花粉，把花序放入乾淨的試管內，左右各螺旋式旋轉試管5下，讓花粉儘可能多的粘到試管內壁上，待試管內壁上能夠明顯的看到一層花粉時即可；採集完花粉的試管標上標籤，用溼毛巾包裹，試管 口包在溼毛巾內，溼毛巾以不滴水為宜，得到授粉試管；
[0030]步驟(3)，人工授粉:步驟⑴得到的去雄花序在48h後，去掉步驟⑵得到的授粉試管外包裹的溼毛巾，然後將其放入授粉試管內，左右各螺旋式旋轉試管3下，上下移動試管2下即完成授粉，套袋後掛上標籤，註明父母本，每支步驟(2)得到的授粉試管可授粉5個步驟(1)得到花序；授粉結束後IOd撤袋。
[0031]授粉時期為2月下旬，授粉環境條件優選為溫度18_21°C、相對溼度60-70%、晴朗、無風；
[0032]授粉後5個月調查最終坐果數，去雄授粉的坐果率為5.6%。
[0033]實施例3
[0034]本實施例澳洲堅果雜交育種的方法採用的澳洲堅果品種D4為母本，品種HAES900為父本，各選擇5株，具體包括以下步驟:
[0035]步驟(1)，去雄:在澳洲堅果品種D4的盛花期，選擇大部分花蕾發白、花被管裂開且花柱突出第Id的花序，去掉花被管沒有裂開的小花，並對花柱突出第Id的小花進行疏除至每個花序留60朵小花，在小花花柱突出彎曲的部位，用鋒利的U型小剪刀切斷花被管，切斷的花被管上部分向外翻時，用手輕輕去除花被片並套袋封口，得到去雄花序；
[0036]步驟(2)，採集花粉:對母本花序去雄的當天，在父本HAES900的樹上選擇即將開放的花序套袋，授粉前選擇袋內24小時之內開放的花序，用規格為25 X 200mm、透明材質內壁光滑的試管取花粉，把花序放入乾淨的試管內，左右各螺旋式旋轉試管4下，讓花粉儘可能多的粘到試管內壁上，待試管內壁上能夠明顯的看到一層花粉時即可；採集完花粉的試管標上標籤，用溼毛巾包裹，試管口包在溼毛巾內，溼毛巾以不滴水為宜，已收集好花粉的試管稱為授粉試管；
[0037]步驟(3)，人工授粉:步驟(1)得到去雄花序在去除花被片44h後，去掉步驟(2)得到的授粉試管外包裹的溼毛巾，然後將其放入授粉試管內，左右各螺旋式旋轉試管2下，上下移動試管2下即完成授粉，套袋後掛上標籤，註明父母本，每支步驟(2)得到的授粉試管可授粉4個步驟(1)得到花序；授粉結束後IOd撤袋。[0038]授粉時期為2月上旬；授粉環境條件優選為溫度18_21°C、相對溼度60-70%、晴朗、無風；
[0039]授粉後5個月調查最終坐果數，去雄授粉的坐果率為6%。
[0040]實施例4
[0041]本實施例澳洲堅果雜交育種的方法採用的澳洲堅果品種788為母本，品種HAES900為父本，各選擇3株，具體包括以下步驟:
[0042]步驟(1)，去雄:在澳洲堅果品種788的盛花期，選擇大部分花蕾發白、花被管裂開且花柱突出第Id的花序，去掉花被管沒有裂開的小花，並對花柱突出第Id的小花進行疏除至每個花序留50朵小花，在小花花柱突出彎曲的部位，用鋒利的U型小剪刀切斷花被管，切斷花被管20分鐘後，用鑷子輕輕去除花被片並套袋封口，得到去雄花序；
[0043]步驟(2)，採集花粉:對母本花序去雄的當天，在父本HAES900的樹上選擇即將開放的花序套袋，授粉前選擇袋內24小時之內開放的花序，用規格為25 X 200mm、透明材質內壁光滑的試管取花粉，把花序放入乾淨的試管內，左右各螺旋式旋轉試管4下，讓花粉儘可能多的粘到試管內壁上，待試管內壁上能夠明顯的看到一層花粉時即可；採集完花粉的試管標上標籤，用溼毛巾包裹，試管口包在溼毛巾內，溼毛巾以不滴水為宜，已收集好花粉的試管稱為授粉試管； [0044]步驟(3)，人工授粉:步驟(1)得到去雄花序在去除花被片45h後，去掉步驟(2)得到的授粉試管外包裹的溼毛巾，然後將其放入授粉試管內，左右各螺旋式旋轉試管3下，上下移動試管2下即完成授粉，套袋後掛上標籤，註明父母本，每支步驟(2)得到的授粉試管可授粉4個步驟(1)得到花序；授粉結束後IOd撤袋。
[0045]授粉時期為盛花期；授粉環境條件優選為溫度18_21°C、相對溼度60-70%、晴朗、無風；
[0046]授粉後5個月調查最終坐果數，去雄授粉的坐果率為4.5%。
[0047]對比試驗:用本發明的切管連被去雄法與URATA和林玉虹的針撕去雄方法作比較，以澳洲堅果品種D4為母本，品種HAES900為父本，各選擇3株。切管連被去雄法的具體步驟同實例3，URATA的針撕去雄方法為:用針輕輕撕開花被片後用鑷子去掉雄蕊，再用手指將花被片推回原來的位置，使小花恢復原狀。試驗按完全隨機設計，根據去雄時的小花所處狀態，針撕去雄法設3個處理為花被管裂開前Id、花被管裂開花柱突出第Id、花被管裂開花柱突出第2d，去雄後套袋，開花後授粉。每處理去雄50朵小花，重複3次。調查去雄所需時間、柱頭受傷率及授粉後20d的坐果率。結果如表1。由表1可以看出本發明的切管連被去雄方法是將花被片一次去除而成功去雄，速度快，受傷柱頭較少，母本花的柱頭外露，便於授粉；去雄後，母本花朵無花瓣和花葯，不誘傳媒昆蟲，為防萬一有傳媒昆蟲停留柱頭，而需套袋，傳媒昆蟲少的地方，可以不套袋，而且由於受傷柱頭少，坐果率比較高；URATA和林玉虹的針撕去雄法是用針輕輕撕開花被片後用鑷子逐一去掉雄蕊來達到去雄的目的，這種去雄方法費時費力，柱頭受傷的概率較大，由於受傷柱頭多，坐果率比較低。
[0048]表1
[0049]
【權利要求】
1.一種澳洲堅果雜交育種的方法，其特徵在於包括如下步驟: 步驟(1)，去雄:在澳洲堅果盛花期，選擇大部分花蕾發白、花被管裂開且花柱突出第Id的花序，去掉花被管沒有裂開的小花，並對花柱突出第Id的小花進行疏除至每個花序留30-100朵小花，在小花花柱突出彎曲的部位切斷花被管，切斷的花被管上部分向外翻時或切斷花被管10-30分鐘後，去除花被片並套袋封口，得到去雄花序； 步驟(2)，採集花粉:對母本花序去雄的當天，在父本樹上選擇即將開放的花序套袋，授粉前選擇袋內24小時之內開放的花序，將花序放入試管內，左右各螺旋式旋轉試管3-5下，採集完花粉的試管用溼毛巾包裹，得到授粉試管； 步驟(3)，人工授粉:步驟(1)得到的去雄花序在40-48h後，去掉步驟(2)得到的授粉試管外包裹的溼毛巾，然後將其放入授粉試管內，左右各螺旋式旋轉試管2-3下，上下移動試管1-2下即完成授粉，套袋，IOd後撤袋。
2.根據權利要求1所述的澳洲堅果雜交育種的方法，其特徵在於:步驟(1)中所述的切斷花被管採用鋒利的U型小剪刀。
3.根據權利要求1所述的澳洲堅果雜交育種的方法，其特徵在於:步驟(1)中所述的去除花被片的方式為用手或鑷子輕輕去除。
4.根據權利要求1所述的澳洲堅果雜交育種的方法，其特徵在於步驟(2)中所述的試管規格為25 X 200mm,且為透明材質內壁光滑的試管。
5.根據權利要求1所述的澳洲堅果雜交育種的方法，其特徵在於每支步驟(2)得到的授粉試管能授粉3-5個步驟(1)得到去雄花序。
6.根據權利要求1所述的澳洲堅果雜交育種的方法，其特徵在於步驟(3)授粉的環境條件為溫度18-21°C，相對溼度60-70%，晴朗、無風或微風的天氣。
7.根據權利要求1所述的澳洲堅果雜交育種的方法，其特徵在於步驟(3)人工授粉後24小時內降中到大雨，需重新人工授粉。
8.根據權利要求1所述的澳洲堅果雜交育種的方法，其特徵在於所述的步驟(3)所述的人工授粉時期為I月下旬至2月下旬或盛花期。
【文檔編號】A01H1/02GK103999765SQ201410234111
【公開日】2014年8月27日 申請日期:2014年5月29日 優先權日:2014年5月29日
【發明者】陶麗, 賀熙勇, 倪書邦, 陳麗蘭, 肖曉明, 陳國雲, 孔廣紅 申請人:雲南省熱帶作物科學研究所