一種用於預防及治療急性肝損傷的藥物及其製備方法

2023-06-26 05:59:41 1

專利名稱：：一種用於預防及治療急性肝損傷的藥物及其製備方法
技術領域：
：本發明涉及一種預防及治療由藥物、酒精及毒物等對肝臟造成的急性損害的水飛薊賓，丁二酸鈉鹽的製備方法，更具體地說，涉及一種水飛薊賓'丁二酸鈉凍乾粉針的製備方法。
背景技術：
：肝臟是藥物代謝的主要器官，大多數藥物在肝內經生物轉化排除，在此過程中，一定量的藥物、酒精及毒物等本身及其代謝產物可通過直接作用或免疫機製造成肝臟的急性損害和病變。近年來，隨著藥物品種的不斷增加，酒精消費群體日益龐大，農作物頻繁使用合成農藥，人們誤食有毒蘑菇等因素導致急性肝損害的發生率亦相應增加。其中藥物性肝病佔所有住院黃疸病例的2%5%，佔急性肝炎病例的10%，50歲以上患者中達40%1'2。暴發性肝炎中20%50%與藥物有關[2，3]，中草藥所致肝損害佔藥物性肝病的30%[4。據全球資料證實，60億人口中酒精肝患會約2.3億人，在美國，因酒精攝入過量而導致的肝臟疾患已成為男性的第四大主要死亡原因[5]。我國專家預測，目前酒精肝患者仍然具有很大上升的趨勢。另外農藥殘留量高的蔬菜水果、因誤食毒性較高的蘑菇等造成急性肝損傷的發生率fe低，但中毒後導致肝臟快速損傷，嚴重者數小時內導致死亡，較短時間內搶救病人顯得尤為重要。綜上所述，一種安全、有錄的預防及治療肝損傷的藥物的研究與開發迫在眉睫。水飛薊賓(SIL，SilybummarianumL.Gaertn.)，是菊科水飛薊屬植物，原產南歐、北非，以民間草藥用於治療肝膽疾病，具有抗肝膽中毒，保護肝細胞膜，改善肝功能的生理活性。我國早在50年代初，由英國引入作觀賞，70年代初開始研究其醫藥功^[，國內外學者對水飛薊的有效成分進行了大量的研究，並開發出產品益肝靈片及複方益肝靈片均載入部頒標準。但由於S1L的水溶性和脂溶性均較差，生物利用度低，吸收量不穩定，大大降低了臨床療效，常規劑型如益肝靈片(即水飛薊素片)臨床應用受到很大限制。為提高SIL的生物利用度，增加其療效，將其結構進行衍生化得ft其水溶性化合物水飛薊賓'丁二酸鈉。經動物試驗證明，本品具有預防及治療由於藥物、毒物及酒精等造成的肝損傷。
發明內容本發明所要解決的問題是提供一種水飛薊賓*丁二酸鈉凍乾粉針的製備方法，將水飛薊賓'丁二酸鈉以注射劑的形式直接進入血液以提高生物利用度，使水飛薊賓'丁二酸鈉以固體的形式存在，達到易存儲、更穩定，起效果快的目的。本發明提供的技術方案是，水飛薊賓.丁二酸鈉，其結構式如下OMeOHO本發明提供的製備水飛薊賓*丁二酸鈉凍乾粉針的方法包括以下步驟:(1)將水t薊賓'丁二酸鈉溶解於注射用水中，製備成含水飛薊賓'丁二酸鈉的溶液；(2)於上述溶液中加入附形劑使溶解；(3)將上述溶液中用活性炭加熱脫色後，用稀鹽酸或稀氫氧化鈉溶液調節pH為79，過濾；(4)濾液無菌分裝，冷凍乾燥，即得。上述步驟中所述的(2)中的附形劑為甘露醇或乳糖。本發明工藝簡單，產品水溶性好，可不用加其他助溶劑，直接用注射用水溶解即可使用。下面結合實施例及主要藥效學試驗對本發明作進一步的說明。實施例一取水飛薊賓'丁二酸鈉原料50g，加入注射用水5000ml中得溶液，再加入50g甘露醇，充分攪拌使其溶解，用1%(w/v)的活性炭4(TC加熱脫色並用1M氫氧化鈉溶液調節pH為9.0，冷至室溫，濾過，無菌分裝於西林瓶中，冷卻乾燥後壓塞，即得本發明水飛薊賓*丁二酸鈉凍乾粉針。實施例二取水飛薊賓'丁二酸鈉原料30g，加入注射用水1000ml中得溶液，再加入60g乳糖，充分攪拌使其溶解，用3W(w/v)的活性炭5(TC加熱脫色並用0.5M稀鹽酸溶液將上述溶液調節pH為7.0,冷至室溫，濾過，無菌分裝於西林瓶中，冷凍乾燥後壓塞，壓蓋，即得本發明水飛薊賓*丁二酸鈉凍乾粉針。藥效學試驗-一、注射用'水飛薊賓，丁二酸鈉凍乾粉對小鼠四氯化碳急性肝損傷的影響1受試藥物實施例一的注射用水飛薊賓'丁二酸鈉凍乾粉針，氯化鈉注射液。2受試動物昆明種SPF級小鼠，雌性，體重18g22g，由廣東醫學動物試驗中心提供。3試驗方法3.1動物分組將50隻小鼠隨機分層分組，每組10隻，共5組。分別為正常對照組、模型組、注射用水飛薊賓*丁二酸鈉30mg&g"、15mg*kg—!、7.5mg-kg'1組。3.2試驗步驟將正常對照組、模型組給予小鼠0.9%生理鹽水尾靜脈注射0.5m1/只，注射用水飛薊賓*丁二酸鈉三個劑量依照劑量尾靜脈注射，每天1次，連續5天，於第6天，除正常對照組外，其餘各組用0.P/。四氯化碳10mhkg—i腹腔注射1次，2^小時後各組小鼠摘除眼球取血，分離血清，測定ALT和AST活性。結果用t檢驗，與模型組進行比較。表l.不同劑量注射用水飛薊賓，丁二酸鈉對小鼠四氯化碳急性肝損傷的影響(均數±標準差)tableseeoriginaldocumentpage6注與模型教$較，進行t檢驗，'p<0.01從以上結果可見模型組與正常對照組相比有顯著性差異(pO.01);注射用水飛薊賓'丁二酸鈉30、15、7.5mg-kg"高、中、低劑量均能明顯降低四氯化碳所致小鼠血清中的ALT和AST，且降低AST作用最為明顯，注射用水飛薊賓-丁二酸鈉高、中、低劑量組的降酶作用與劑量存在量效關係呈劑量正相關關係。注射用水飛薊賓'丁二酸鈉具有保護急性肝損傷的作用。二、注射用水飛薊賓'丁二酸鈉過敏性、溶血性和血管刺激性試驗1受試藥物實施例二注射用水飛薊賓，丁二酸鈉凍乾粉針，注射用氯化鈉溶液。2受試動物家兔2.1-2.5kg，雌雄兼用；豚鼠200300g，雌雄兼用。動物均由廣東省醫學試驗動物中心提供。3試驗方法3.1全身過敏試驗取健康豚鼠18隻，隨機分為3組，每組6隻①氯化鈉注射液對照組，②卵白蛋白組(0.5%)，③注射用水飛薊賓*丁二酸鈉30mg/kg。各組分別按無菌操作隔H腹腔注射氯化鈉注射液、0.5%卵白蛋白和注射用水飛薊賓《丁二酸鈉30mg/kg，0.5mi/只，共3次進行動物致敏。致敏後將每組動物隨機分為2批，每批各3隻，一批於首次致敏後第14天靜脈注射對應藥液1ml/只進行攻擊；另一批於首次致敏後第21天同法攻擊。觀察動物攻擊後30分鐘內有無咳嗽、抓鼻、豎毛、呼吸困難、痙寧、休克及死亡等情況。結果按表2進行過敏反應評分，計算出每批動物反應平均分數。_表2全身過敏性反應評分標準__反短芬叛^^0無明顯反應1隻有輕微抓鼻、顫抖或豎毛2有幾次咳嗽、有抓鼻、顫抖或豎毛3多次或連續咳嗽、伴有呼吸困難或痙攣、抽搐等4痙攣、抽搐、大小便失禁、休克、死亡試驗結果見表3，鹽水組兩次攻擊試驗結果均呈陰性。根據結果判斷標準認為注射用水飛i]賓J一二酸鈉無明顯致敏作用。表3注射用水飛薊賓，丁二酸鈉過敏試驗結果tableseeoriginaldocumentpage73.2溶血試驗家兔頸動脈插管取血約20ml,將所得紅細胞用生理鹽水禱釋成2%的混懸液，備用。將注射用水飛薊賓.丁二酸鈉用生理鹽水稀釋50倍，備用。取試管7支分別進行注射用水飛薊賓.丁二酸鈉2%的溶血試驗。按表4加樣，第6管不加受試品，作為空白對照，第7管不加受試品，用蒸餾水代替生理鹽水，作為溶血的陽性對照。將各管輕輕搖勻，在37t:水浴中保溫4小時，觀察各管的溶血和凝集現象。分別於保溫0.5、1、2、3和4小時肉眼觀察各管溶血情況。結果判斷標準參見表5。表4.2%注射用水飛薊賓.丁二睡鈉溶血試驗加樣表__管號J^^^J"2%紅細胞懸液(ml)2.52.52.52.52.52%注射用水飛薊賓'丁二0.10.20.30.40.5酸鈉(ml)生理鹽水(ml)2.42.32.22.1,,2.0蒸餾水(ml)_----'-_表5.紅細胞溶血、凝集判斷標準全溶血溶液澄明紅色，管底無細胞殘留；部分溶血溶液澄明紅色或棕色，管底有少量紅細胞殘留；無溶血紅細胞全部下沉，上層液體無色澄明；凝集_紅細胞凝聚成塊，振搖後不能分散;_2%注射用水飛薊賓*丁二酸鈉試驗結果顯示，本品對紅細胞無明顯的影響。3.3血管刺激試驗取健康、耳緣無損傷家兔6隻，隨機分為兩組5%注射用水飛薊賓'丁二酸鈉組和0.9%生理鹽水對照組。給藥容積15ml/kg,給藥速度為lml/min，每天1次，連續7天。給藥期間至未次給藥後24小時肉眼觀察給藥局部的靜脈血管及周圍組織的紅腫情況。然後分別於注射部位近心端24cm處剪取耳緣，用10%甲醛固定，常規組織切片，觀察病理變化。肉眼觀察可見葡萄糖對照組和葛根素組662.572.52.;2.5隻家兔的注射部位血管均有不同程度的淤血，距注射部位2cm和距注射部位4cm耳廓未見明顯充血、水腫。結合病理切片結果顯示5%注射用水飛薊賓《丁二酸鈉對血管無明顯剌激作用。參考文獻D]潘國宗主譯.胃腸急症學.人民衛生出版社.1999，381403.[2]梁擴寰，李紹白.肝臟病學.人民衛生出版社.1995，750769.[3]魏鏡龍,內科講座.人民衛生出版社.i985,4754.[4]姚光弼.藥物性肝病.中華消化雜誌.1999，19(5):339342.[5]Sm他W,CecilB.Textbookofedicine[M].l她ed.Pennsylvania:SzundersCompany,1992—230259,權利要求1.一種成分為水飛薊賓·丁二酸鈉凍乾粉針的製備方法，包括以下步驟(1)將水飛薊賓·丁二酸鈉溶解於注射用水中，充分攪拌成溶液。(2)於上述溶液加入甘露醇或乳糖使溶解。(3)將上述溶液用活性炭加熱脫色並用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液調節pH7～9，過濾。(4)濾液無菌分裝，冷凍乾燥，即得。2.根據權利要求1所述的水飛薊賓'丁二酸鈉凍乾粉針，其特徵在於所述的水飛薊賓-丁二酸鈉為水飛薊賓經丁二酸反應製備得到的化學純度為90%以上的化學物質。3.—種成分為水飛薊賓*丁二酸鈉凍乾粉針應用於預防及治療由藥物、酒精及毒物等對肝臟造成的急性損害。全文摘要本發明公開了一種用於預防及治療急性肝損傷的水飛薊賓·丁二酸鈉凍乾粉針的製備方法，包括以下步驟(1)將水飛薊賓·丁二酸鈉原料溶解於注射用水中，製備成溶液；(2)於上述溶液中加入甘露醇或乳糖使溶解；(3)將上述溶液用活性炭加熱脫色並調節pH7～9，過濾；(4)濾液無菌分裝，冷凍乾燥，即得。本發明方法工藝簡單，用注射用水溶解即可使用。可用於預防及治療由藥物、酒精及毒物等對肝臟造成的急性損害。文檔編號A61K9/19GK101244041SQ200710026898公開日2008年8月20日申請日期2007年2月13日優先權日2007年2月13日發明者傅衛國,偉王,王佩賢,黃偉靜申請人:廣州安健實業發展有限公司