香葉蒿揮髮油及其提取工藝和應用的製作方法

2023-06-03 14:48:11 4

專利名稱：：香葉蒿揮髮油及其提取工藝和應用的製作方法
技術領域：
：本發明涉及一種植物揮髮油，尤其涉及香葉蒿揮髮油，以及其提取工藝和應用。香葉蒿(Artemisiarutifolia)為菊科蒿屬半灌木狀草本植物，生於山間盆地(荒漠)、階地衝溝，海拔32003800米，分布於青海、新疆、西藏；中亞地區及伊朗、阿富汗巴基斯坦、俄羅斯也有分布。香葉蒿在青海有相當豐富的資源，一般成簇生長，其莖葉部分散發有濃鬱的香氣。揮髮油成分中以萜類成分多見，包括單萜和倍半萜等，另外，尚含有小分子脂肪族化合物和小分子芳香族化合物。其中萜類的含氧衍生物或芳香族化合物等散發的特異芳香味，且有顯著的生物活性，但其含量通常較少，佔揮髮油成分的20%以下，揮髮油主要成分多為萜類化合物，包括單萜和倍半萜等。揮髮油是中藥中的一類有效成分，在植物界分布廣泛，且具有多種藥理活性和廣泛的用途。隨著社會的發展，其開發和利用也日益受到有關專家和學者的關注。目前，國內外對香葉蒿的研究較少，其應用更無文獻報導。因此本發明充分利用青藏高原豐富的香葉蒿植物資源開發出一種新的揮髮油提取物，並對其在醫藥領域中的應用進行了有益的探索。
發明內容本發明所要解決的技術問題是提供一種高含量的香葉蒿揮髮油。本發明所要解決的另一個技術問題是提供一種工藝簡單、有效成分提取率高、易於工業化生產的香葉蒿揮髮油的提取工藝。本發明所要解決的第三個技術問題是提供香葉蒿揮髮油在製藥中的應用。為解決上述問題，本發明所述的一種香葉蒿揮髮油，其特徵在於該揮髮油為有濃鬱香味的淡黃色油狀液體，溶於醇及脂溶性溶劑，主要由單萜、倍半萜、含氧衍生物構成，主要成分包括質量百分含量為1520%的桉樹醇、1520%的樟腦、812%的孟烯醇-4、510%的異丁酮-2-基-苯、35%的對異丁基苯酚、36%的孟烯醇-8、35%的守酮、35%的水芹烯、35%的6-甲基-2-乙烯基_庚二烯醛、24%的間-甲氧基-大茴香腦、24%的蒈烯-3和0.21%的P-香葉烯。所述主要成分化學結構式如下
背景技術：
：樟腦4P-香葉烯異丁酮-2-基-苯對異丁基苯酚a-水芹烯6-甲基-2-乙烯基-庚二烯醛間-甲氧基-大茴香腦蒈烯-3—種如上所述的香葉蒿揮髮油的提取工藝，包括以下步驟(1)將新鮮香葉蒿地上部分除雜、切碎至0.53cm後，用其重量的1020倍水浸泡212小時，使香葉蒿碎段充分浸潤；(2)將所述步驟(1)所得的香葉蒿碎段及其浸泡液進行水蒸氣蒸餾，收集蒸餾液；(3)將蒸餾液自然冷卻後，用無水硫酸鈉按1:31:IO的重量比乾燥並濾除固體後即得香葉蒿揮髮油。所述步驟(2)中的蒸餾溫度為8012(TC，蒸餾時間為315h。如上所述的香葉蒿揮髮油在製藥中的應用，其特徵在於所述香葉蒿揮髮油作為祛痰止咳、清咽潤喉活性成分在醫藥上的應用。在所述香葉蒿揮髮油中配以藥用鋪料以及藥學上或生理學上可接受的載體，以常規的中藥製備工藝製備成藥劑學上的任何一種劑型。所述膠囊劑由下述重量百分含量的原料按常規工藝製成香葉蒿揮髮油510%、牛黃1030%、化橘紅1020%、甘草3050%、牡荊油05%、陳皮05%、苦杏仁1020%。功能主治潤肺祛痰、止咳定喘，臨床上用於肺炎的治療。用法用量每日23次，一次24粒(以膠囊劑為例)。所述含片由下述重量百分含量的原料按常規工藝製成香葉蒿揮髮油515%、化橘紅1040%、甘草2040%、陳皮1030%、蜂蜜525%。功能主治可治療咽喉腫痛、痰涎壅盛，清咽潤喉，臨床上用於急慢性咽喉炎的治療。用法用量每日35次，一次12片(以含片為例)。本發明與現有技術相比具有以下優點1、本發明所得的香葉蒿揮髮油經氣相色譜-質譜聯合分析發現，該揮髮油有56種以上化合物，主要成分為桉樹醇(Eucalyptol)(17.703%)、樟腦(Camphor)(17.017%)、孟烯醇-4(Menthen-4-ol)(10.296%)、異丁酮-2-基-苯(2-Butanone，3-phenyl)(7.335%)、對異丁基苯酚(Pheno，14-(2-methylpropyl)(4.762%)、孟烯醇-8(Menthen-8-ol)(4.477%)、守酮(Thujone)(4.007%)、1-4-(l-methylethyl)-水片烯(l，4-Cyclohexadiene，1-methy)(3.863%)、6-甲基_2_乙烯基-庚二烯醛(3，5-H印tadiena，12-ethylidene-6—methyl)(3.543%)、間_甲氧基_大茴香腦(Anisol-p-allyl-o-methoxyl)(3.145%)、蒈烯-3(3-Carene)(3.038%)、P-香葉烯5(13-Myrcene)(0.386%)等。其中桉樹醇廣泛應用於醫藥(主要用於祛痰劑)及配製牙膏香精等；樟腦也廣泛用於醫藥衛生工業，是感冒康噴霧劑、舒腹貼膏、牙痛水、青銀注射液的主要有效成分之一，而且也是常用的防蛀劑；P-香葉烯則具有祛痰、鎮咳作用等。因此，該香葉蒿揮髮油具有廣泛的應用價值和開發前景。(氣相色譜條件GC汽化室溫度25(TC，美國J&W.HP-5(30mX0.25mmX0.25ym)彈性石英毛細管柱，以4°C/min的升溫速率由80°C程序升溫至29(TC，恆溫30min，載氣為99.999%高純氦；質譜條件MSD離子源為EI源，離子源溫度230°C，電子能量70eV;使用美國NIST02L譜庫。)2、本發明所得的香葉蒿揮髮油應用於治療肺炎的藥物組合物中時，其中的香葉蒿揮髮油可潤肺祛痰、止咳定喘，牛黃清熱解毒力強、消咽喉腫痛，二者為君藥；化橘紅可行氣開鬱、理氣和中、燥溼化痰，苦杏仁中的苦杏仁苷對呼吸中樞有抑制作用，可達到鎮咳、平喘作用，二者為臣藥；牡棘油和陳皮用於理氣調中、燥溼化痰為佐藥；甘草用於調和藥物烈性，且味甘，在本方中為使藥；方中各藥物相輔相成，協同作用。經小鼠實驗，療效顯著。香葉蒿膠囊劑對小鼠流感病毒肺炎治療作用實驗。實驗方法甲型流感病毒鼠肺適應株A/FM1/47(H1N1)(由中國預防醫學科學院病毒研究所提供)，昆明種小鼠60隻，雌雄各半(由廣西醫科大學醫學實驗動物中心繁殖，實驗動物質量合格證號NO.0001104，實驗動物使用許可證號SYXK桂2007-0003)，依據隨機數字表法將60隻昆明種小鼠隨機分成6組，分別為香葉蒿膠囊劑大劑量組、中劑量組、小劑量組、空白對照組、模型組、利巴韋林組，每組10隻。造模除空白對照組外，其它各組用甲型流感病毒FM1接種小鼠造模(劑量為半致死劑量LD50)，空白對照組給予同等劑量的生理鹽水。給藥各膠囊劑治療組灌胃給藥，每日1次，每次O.2ml/10g，利巴韋林組用利巴韋林注射液每次腹腔注射O.075ml/10g，每日1次；空白對照組和模型組以等體積生理鹽水灌胃；以上均連續灌胃5天。檢測處死動物取材。處死前禁食禁水8h，稱重後斷頸處死取材。在無菌條件下，把整個肺取出。將肺組織放入無菌生理鹽水中洗滌兩次，用無菌濾紙吸乾表面水分，觀察並記錄病變程度，稱肺重；取左側肺葉放入無菌EP管中，迅速置於冰壺中，在-8(TC冰箱中保存，用於Westernblot檢測；右側肺葉用多聚甲醛固定，用於免疫組織化學檢測。觀察指標及方法動態觀察小鼠生命狀態、肺組織病理觀察及肺組織懸液血凝滴度測定並計算肺指數。結果表明該香葉蒿膠囊劑對IV小鼠肺炎有明顯的抑制作用，中劑量的膠囊劑組與利巴韋林組作用相當。3、本發明所得的香葉蒿揮髮油應用於治療咽喉炎的藥物組合物中時，其中的香葉蒿揮髮油和甘草具有殺菌抗感染作用，可以殺滅口腔、咽喉部位的致病微生物；化橘紅、陳皮可理氣和中、行氣開鬱；蜂蜜可滋咽潤喉，改善口感。為確切評價香葉蒿揮髮油的臨床療效和藥物的安全性，用香葉蒿揮髮油製成的香葉蒿含片進行臨床試驗，分別總結了急性咽喉炎56例，慢性咽喉炎70例，經臨床實驗療效顯著，顯效病例達107例，安全有效，均未發現明顯毒副作用(參見表1)。表1:香葉蒿揮髮油治療咽喉炎臨床試驗tableseeoriginaldocumentpage74、由於本發明的製備方法採用水蒸氣蒸餾法，因此，不但工藝流程簡單，設備投入小，生產成本低，易於工業化生產，而且揮髮油主要藥用成分得率高；同時由於沒有使用有機溶劑，因此對環境汙染小。具體實施例方式下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用於說明本發明而不用於限制本發明的範圍；此外，任何與所記載內容相似或均等的方法及材料皆可應用於本發明中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示範之用。實施例1一種香葉蒿揮髮油的提取工藝，包括以下步驟(1)將2kg新鮮香葉蒿地上部分除雜、切碎至0.53cm後，放入上海同歆生物醫藥科技有限公司生產的揮髮油提取器中，用其重量的10倍水浸泡12小時，使香葉蒿碎段充分浸潤。(2)將步驟(1)中盛有香葉蒿碎段及其浸泡液的揮髮油提取器移至天津市泰斯特儀器有限公司生產的98-1-B型電子恆溫電熱套上進行水蒸氣蒸餾，蒸餾溫度為8(TC，蒸餾時間為3h，每lh收集一次蒸餾液。(3)將蒸餾液自然冷卻後，用無水硫酸鈉按1:6的重量比乾燥並濾除固體後即得5.4ml香葉蒿揮髮油，得率為0.27%。實施例2—種香葉蒿揮髮油的提取工藝，包括以下步驟(1)將3kg新鮮香葉蒿地上部分除雜、切碎至0.53cm後，放入揮髮油提取器中，用其重量的20倍水浸泡2小時，使香葉蒿碎段充分浸潤。(2)將步驟(1)中盛有香葉蒿碎段及其浸泡液的揮髮油提取器移至98-l-B型電子恆溫電熱套上進行水蒸氣蒸餾，蒸餾溫度為12(TC，蒸餾時間為15h，每lh收集一次蒸餾液。(3)將蒸餾液自然冷卻後，用無水硫酸鈉按l:10的重量比乾燥並濾除固體後即得8.9ml香葉蒿揮髮油，得率為0.30%。實施例3—種香葉蒿揮髮油的提取工藝，包括以下步驟(1)將2kg新鮮香葉蒿地上部分除雜、切碎至0.53cm後，放入揮髮油提取器中，用其重量的15倍水浸泡7小時，使香葉蒿碎段充分浸潤。(2)將步驟(1)中盛有香葉蒿碎段及其浸泡液的揮髮油提取器移至98-l-B型電子恆溫電熱套上進行水蒸氣蒸餾，蒸餾溫度為IO(TC，蒸餾時間為9h，每lh收集一次蒸餾液。(3)將蒸餾液自然冷卻後，用無水硫酸鈉按1:3的重量比乾燥並濾除固體後即得6.4ml香葉蒿揮髮油，得率為0.32%。上述實施例13中的香葉蒿揮髮油為有濃鬱香味的淡黃色油狀液體，溶於醇及脂溶性溶劑，主要由單萜、倍半萜、含氧衍生物構成，主要成分包括質量百分含量為1520%的桉樹醇、1520%的樟腦、812%的孟烯醇-4、510%的異丁酮-2-基-苯、35%的對異丁基苯酚、36%的孟烯醇-8、35%的守酮、35%的水芹烯、35%的6-甲基-2-乙烯基-庚二烯醛、24%的間-甲氧基-大茴香腦、24%的蒈烯-3和0.21%的P-香葉烯。其中主要成分化學結構式如下樟腦桉樹醇守酮孟烯醇P-香葉烯異丁酮-2-基-苯對異丁基苯酚a-水芹烯6-甲基-2-乙烯基_庚二烯醛間_甲氧基_大茴香腦蒈烯_3在香葉蒿揮髮油中配以藥用鋪料以及藥學上或生理學上可接受的載體，以常規的中藥製備工藝製備成藥劑學上的任何一種劑型，可作為祛痰止咳、清咽潤喉活性成分在醫藥上的應用。香葉蒿揮髮油在醫藥中的應用實例治療肺炎實施例1香葉蒿揮髮油5%、牛黃10%、化橘紅10%、甘草30%、牡荊油0、陳皮0、苦杏仁10%(重量百分含量)按常規工藝製成膠囊劑。實施例2香葉蒿揮髮油10%、牛黃30%、化橘紅20%、甘草50%、牡荊油5%、陳皮5%、苦杏仁20%(重量百分含量)按常規工藝製成膠囊劑。實施例3香葉蒿揮髮油8%、牛黃20%、化橘紅15%、甘草40%、牡荊油3%、陳皮3%、苦杏仁15%(重量百分含量)按常規工藝製成膠囊劑。治療急慢性咽喉炎實施例1香葉蒿揮髮油5%、化橘紅10%、甘草20%、陳皮10%、蜂蜜5%(重量百分含量)按常規工藝製成含片。實施例2香葉蒿揮髮油15%、化橘紅40%、甘草40%、陳皮30%、蜂蜜25%(重量百分含量)按常規工藝製成含片。實施例3香葉蒿揮髮油10%、化橘紅25%、甘草30%、陳皮20%、蜂蜜15%(重量8百分含量)按常規工藝製成含片'權利要求一種香葉蒿揮髮油，其特徵在於該揮髮油為有濃鬱香味的淡黃色油狀液體，溶於醇及脂溶性溶劑，主要由單萜、倍半萜、含氧衍生物構成，主要成分包括質量百分含量為15～20％的桉樹醇、15～20％的樟腦、8～12％的孟烯醇-4、5～10％的異丁酮-2-基-苯、3～5％的對異丁基苯酚、3～6％的孟烯醇-8、3～5％的守酮、3～5％的水芹烯、3～5％的6-甲基-2-乙烯基-庚二烯醛、2～4％的間-甲氧基-大茴香腦、2～4％的蒈烯-3和0.2～1％的β-香葉烯。2.如權利要求1所述的香葉蒿揮髮油，其特徵在於所述主要成分化學結構式如下formulaseeoriginaldocumentpage2樟腦formulaseeoriginaldocumentpage2桉樹醇formulaseeoriginaldocumentpage2守酮formulaseeoriginaldocumentpage2孟烯醇P-香葉烯formulaseeoriginaldocumentpage2異丁酮-2-基-苯formulaseeoriginaldocumentpage2對異丁基苯酚formulaseeoriginaldocumentpage2a-水芹烯6-甲基-2-乙烯基-庚二烯醛間-甲氧基-大茴香腦蒈烯-33.—種如權利要求1所述的香葉蒿揮髮油的提取工藝，包括以下步驟(1)將新鮮香葉蒿地上部分除雜、切碎至0.53cm後，用其重量的1020倍水浸泡212小時，使香葉蒿碎段充分浸潤；(2)將所述步驟(1)所得的香葉蒿碎段及其浸泡液進行水蒸氣蒸餾，收集蒸餾液；(3)將蒸餾液自然冷卻後，用無水硫酸鈉按l:31:10的重量比乾燥並濾除固體後即得香葉蒿揮髮油。4.如權利要求3所述的香葉蒿揮髮油的提取工藝，其特徵在於所述步驟(2)中的蒸餾溫度為80120。C，蒸餾時間為315h。5.如權利要求1所述的香葉蒿揮髮油在製藥中的應用，其特徵在於所述香葉蒿揮髮油作為祛痰止咳、清咽潤喉活性成分在醫藥上的應用。6.如權利要求5所述的香葉蒿揮髮油在製藥中的應用，其特徵在於在所述香葉蒿揮髮油中配以藥用鋪料以及藥學上或生理學上可接受的載體，以常規的中藥製備工藝製備成藥劑學上的任何一種劑型。7.如權利要求6所述的香葉蒿揮髮油在製藥中的應用，其特徵在於所述膠囊劑由下述重量百分含量的原料按常規工藝製成香葉蒿揮髮油510%、牛黃1030%、化橘紅1020%、甘草3050%、牡荊油05%、陳皮05%、苦杏仁1020%。8.如權利要求6所述的香葉蒿揮髮油在製藥中的應用，其特徵在於所述含片由下述重量百分含量的原料按常規工藝製成香葉蒿揮髮油515%、化橘紅1040%、甘草2040%、陳皮1030%、蜂蜜525%。全文摘要本發明涉及一種香葉蒿揮髮油，該揮髮油為有濃鬱香味的淡黃色油狀液體，溶於醇及脂溶性溶劑，主要由單萜、倍半萜、含氧衍生物構成，主要成分包括質量百分含量為15～20％的桉樹醇、15～20％的樟腦、8～12％的孟烯醇-4、5～10％的異丁酮-2-基-苯、3～5％的對異丁基苯酚、3～6％的孟烯醇-8、3～5％的守酮、3～5％的水芹烯、3～5％的6-甲基-2-乙烯基-庚二烯醛、2～4％的間-甲氧基-大茴香腦、2～4％的蒈烯-3和0.2～1％的β-香葉烯。同時，本發明還公開了一種提取率高、工藝流程簡單的該揮髮油的製備方法。由於該香葉蒿揮髮油具有祛痰止咳、清咽潤喉活性成分，因此可應用於治療肺炎及咽喉炎疾病中。文檔編號A61K36/185GK101717692SQ20091011763公開日2010年6月2日申請日期2009年12月2日優先權日2009年12月2日發明者張興旺,羅智敏,邵贇,陶燕鐸申請人:中國科學院西北高原生物研究所