治療疼痛、糖尿病和脂質代謝紊亂的製作方法

2023-05-27 20:43:16 3

專利名稱：治療疼痛、糖尿病和脂質代謝紊亂的製作方法
專利說明治療疼痛、糖尿病和脂質代謝紊亂
背景技術：
慢性疼痛的治療，尤其是炎性疼痛和神經性疼痛(neuropathic pain)的治療，是醫療需求高度未滿足的領域。神經性疼痛是神經損傷，其導致涉及痛覺的神經元興奮過度。在疼痛通路的神經元中存在T-電流。T-型鈣通道阻斷劑在神經性疼痛的臨床前模型中是有效的。
II型糖尿病也被稱為非胰島素依賴性糖尿病，是以導致血糖水平升高的葡萄糖代謝受損為特徵的進行性疾病。II型糖尿病患者表現為胰腺β-細胞功能受損，其導致胰腺β-細胞不能響應於高血糖信號而分泌適宜量的胰島素，並在其靶組織產生對胰島素作用的抗性(胰島素抗性)。
當前的II型糖尿病治療旨在逆轉胰島素抗性，控制腸葡萄糖吸收，正常化肝葡萄糖生產，並改善β-細胞葡萄糖感應和胰島素分泌。口服抗高血糖藥物磺醯脲類促進胰腺β-胰島細胞的胰島素分泌，但可能引起低血糖，因為它們的作用與葡萄糖水平無關。抗高血糖藥物包括通過抑制葡糖異生降低肝葡萄糖生產的胰島素增敏劑；抑制複合碳水化合物的降解從而延遲葡萄糖吸收並抑制餐後葡萄糖和胰島素峰的α-葡糖苷酶抑制劑；以及改善胰島素的作用並降低胰島素抗性的噻唑烷二酮。隨著時間的推移，約一半的II型糖尿病患者對這些藥物失去了治療反應。因為當前治療的缺點，高度需要新的II型糖尿病治療。
GPR119是主要在胰腺β-胰島細胞中表達的組成型活性G-蛋白偶聯受體。激動劑對GPR119的活化以葡萄糖依賴性方式增加由胰腺β-胰島細胞的胰島素釋放。因此，GPR119激動劑提供了響應於餐後血糖提升使II型糖尿病患者的血糖水平正常化的可能性，但預期在餐前或空腹狀態應不會刺激胰島素釋放。
WO 2004/110375描述了糖尿病治療的聯合療法，其包括給予抗肥胖藥和抗糖尿病藥的組合。
Niemann-Pick Cl-樣(NPC1L1)已被鑑定為膽固醇吸收的關鍵性介導物。業已確定，膽固醇吸收抑制劑依替米貝靶向NPC1L1。
已公開了用螺環氮雜環丁酮衍生物治療脂質代謝紊亂、糖尿病、血管病症、脫髓鞘和非酒精性脂肪肝疾病。在小腸中抑制膽固醇吸收的螺環氮雜環丁酮衍生物在本領域眾所周知，並描述於例如US RE37，721；US 5,631,356；US 5,767,115；US 5,846,966；US 5,698,548；US 5,633,246；US 5,656,624；US 5,624,920；US 5,688,787；US5,756,470；US公布號2002/0137689；WO 02/066464；WO 95/08522和WO96/19450。每個前述出版物都在此引入作為參考。所述技術指出，這些化合物可用於治療例如冠狀動脈粥樣硬化病，通過單獨給予這些化合物，或與諸如膽固醇生物合成抑制劑的第二種化合物一起給予。
WO 2005/000217描述了用於治療血脂異常的聯合療法，包括給予抗肥胖藥和抗血脂異常藥的組合。WO 2004/110375描述了用於治療糖尿病的聯合療法，包括給予抗肥胖藥和抗糖尿病藥的組合。US2004/0122033描述了用於治療肥胖病的聯合療法，包括給予食慾抑制和/或代謝速率增強劑和/或營養吸收抑制劑的組合。US 2004/0229844描述了用於治療動脈粥樣硬化的聯合療法，包括給予煙酸或另一種煙酸受體激動劑和DP受體拮抗劑的組合。還已知通過給予哺乳動物有效量的治療組合物以治療非酒精性脂肪肝病的方法，所述治療組合物包括至少一種降膽固醇藥和/或至少一種H3受體拮抗劑/反向激動劑。
治療疼痛的方法和治療糖尿病(例如II型糖尿病)的方法應是受本領域歡迎的貢獻。本發明提供這樣的貢獻。
發明概述 本發明要求保護治療疾病或病症的方法，其中所述疾病或病症由T-鈣通道(例如疼痛)或GPR119受體(例如糖尿病，如II型糖尿病)或NPC1L1受體(例如抑制膽固醇吸收)介導，所述方法包括給予需要此治療的患者至少一種下式的化合物
其中所述化合物選自由如下所述的表1、2、3a、3b、3c、3d和4a限定的化合物。表1提供了R1的定義，並指定了每個部分在表3a、3b、3c、3d和4a中使用的編號，以限定表3a、3b、3c、3d和4a的指定結構所代表的化合物。表2提供了R2的定義，並指定了每個部分在表3a、3b、3c和3d中使用的編號，以限定表3a、3b、3c和3d的指定結構所代表的化合物。
用於本發明的化合物由在表3a、3b、3c和3d中的「X」限定，並由表4a中的化合物限定。因此，(1)由表3a、3b、3c、3d指定的結構式確定的化合物具有由R2列和R1行交叉形成的框中的「X」指示的R1和R2定義，都屬於本發明的範圍(即可用於本發明的方法)，沒有「X」的框限定了不屬於本發明範圍的化合物，和(2)在表4a中限定的化合物可用於本發明的方法。在表3a、3b、3c和3d中的第一列中的編號代表在表2中限定的R2基團。在表3a、3b、3c和3d的頂行中的編號以及在表4a中的編號代表在表1中限定的R1基團。
用於本發明的化合物為T-型鈣通道阻斷劑。式I的T-鈣通道阻斷化合物可用於治療疼痛(例如炎性疼痛、慢性疼痛和神經性疼痛)。
因此，又一方面，本發明涉及治療疼痛(例如炎性疼痛、慢性疼痛或神經性疼痛)的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物。
又一方面，本發明涉及治療疼痛(例如炎性疼痛、慢性疼痛或神經性疼痛)的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的式I化合物。
又一方面，本發明涉及治療慢性疼痛的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種(例如一種)式I化合物。
更具體地說，又一方面，本發明涉及治療炎性疼痛的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種(例如一種)式I化合物。
此外，更具體地說，又一方面，本發明涉及治療神經性疼痛的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種(例如一種)式I化合物。
又一方面，本發明涉及治療慢性疼痛的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種(例如一種)式I化合物。
更具體地說，又一方面，本發明涉及治療炎性疼痛的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種(例如一種)式I化合物。
另外，更具體地說，又一方面，本發明涉及治療神經性疼痛的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種(例如一種)式I化合物。
又一方面，本發明涉及治療疼痛(例如炎性疼痛、慢性疼痛或神經性疼痛)的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種(例如一種)式I化合物，所述化合物選自表5中的化合物。
又一方面，本發明涉及治療疼痛(例如炎性疼痛、慢性疼痛或神經性疼痛)的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種(例如一種)式I化合物，所述化合物選自表7中的化合物。
又一方面，本發明涉及阻斷T-鈣通道的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種(例如一種)式I化合物。
因此，又一方面，本發明涉及治療神經性疼痛的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種(例如一種)式I的T-型鈣通道阻斷劑。
式I的化合物為GPR119的激動劑。為GPR119的激動劑的式I化合物可用於治療例如糖尿病(例如II型糖尿病)。
因此，又一方面，本發明涉及治療由GPR119受體介導的疾病(如糖尿病，例如II型糖尿病)的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物。
又一方面，本發明涉及治療由GPR119受體介導的疾病(如糖尿病，例如II型糖尿病)的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的式I化合物。
又一方面，本發明涉及治療由GPR119受體介導的疾病(如糖尿病，例如II型糖尿病)的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種化合物，所述化合物選自表6中的化合物。
又一方面，本發明涉及治療由GPR119受體介導的疾病(如糖尿病，例如II型糖尿病)的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種化合物，所述化合物選自表8中的化合物。
又一方面，本發明涉及糖尿病治療，所述治療包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種(例如一種)式I的GPR119激動劑。
本發明還涉及治療疼痛的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物和至少一種用於治療疼痛的其它藥物的組合。
本發明進一步涉及治療慢性疼痛的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物和至少一種用於治療慢性疼痛的其它藥物的組合。
本發明還涉及治療炎性疼痛的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物和至少一種用於治療炎性疼痛的其它藥物的組合。
本發明還涉及治療神經性疼痛的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物和至少一種用於治療神經性疼痛的其它藥物的組合。
本發明還涉及治療糖尿病(例如II型糖尿病)的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物和至少一種用於治療糖尿病(例如II型糖尿病)的其它藥物的組合。
具體地說，本發明涉及治療糖尿病(例如II型糖尿病)的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物和至少一種用於治療糖尿病的其它藥物的組合。
本發明還涉及治療脂質代謝紊亂的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物的組合。
本發明還涉及抑制膽固醇吸收的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物。
本發明還涉及抑制膽固醇吸收的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I的NPC1L1拮抗劑化合物。
本發明還涉及抑制膽固醇吸收的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物連同有效量的至少一種用於治療脂質代謝紊亂的其它藥物(例如至少一種用於降低膽固醇的其它藥物)。
本發明還涉及抑制膽固醇吸收的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I的NPC1L1拮抗劑化合物連同有效量的至少一種用於治療脂質代謝紊亂的其它藥物(例如至少一種用於降低膽固醇的其它藥物)。
本發明還涉及抑制膽固醇吸收的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物連同有效量的至少一種HMG-CoA還原酶抑制劑(例如他汀類，例如辛伐他汀、阿託伐他汀鈣和瑞舒伐他汀鈣)。
本發明還涉及抑制膽固醇吸收的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物連同有效量的至少一種煙酸受體激動劑(例如煙酸)。
本發明還涉及抑制膽固醇吸收的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物連同有效量的至少一種CETP抑制劑(例如torcetrapib)。
本發明還涉及抑制膽固醇吸收的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物連同有效量的至少一種NPC1L1拮抗劑(例如依替米貝，如

牌的依替米貝)。
本發明還涉及抑制膽固醇吸收的方法，該方法包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物連同有效量的至少一種HMG-CoA還原酶抑制劑(例如他汀類，例如辛伐他汀、阿託伐他汀鈣和瑞舒伐他汀鈣)連同有效量的至少一種NPC1L1拮抗劑(例如依替米貝，如

牌的依替米貝)。可用於此實施方案的已包括HMG-CoA還原酶和NPC1L1拮抗劑組合的藥物的實例為

牌的依替米貝和辛伐他汀的組合。
本發明還涉及在單個包裝中包括含至少一種式I化合物的藥物組合物和至少一種獨立的藥物組合物的藥盒，所述獨立的藥物組合物包含至少一種其它治療劑(例如至少一種用於治療疼痛的其它藥物，或至少一種用於治療脂質紊亂的其它藥物(例如至少一種用於降低膽固醇的其它藥物)，或至少一種用於治療糖尿病的其它藥物)。
發明詳述 當前的慢性疼痛療法在響應患者中僅提供了部分緩解，在其它病人中或者不能耐受或者無效。慢性疼痛可能由於組織炎症、病毒感染(HIV、帶狀皰疹)、直接的組織損傷或外傷引起、由於化療(例如紫杉醇、長春新鹼)、中樞神經系統損傷(例如中風、MS)引起、或糖尿病引起。當慢性疼痛與體細胞或內臟組織損傷相關時，症狀通常包括以自發性疼痛(經常被描述為刺痛、灼痛、電擊樣痛或悸痛)、痛覺過敏(對疼痛刺激的過度反應)和痛覺異常(非有害的刺激感覺為疼痛)為特徵的嚴重知覺紊亂。在人類患者中的普遍症狀包括冷痛覺過敏、觸痛覺異常和不常見的熱痛覺過敏。症狀可獨立或組合存在，在與不同病症相關的症狀學方面並通常在表現為相同狀況的患者之間經常有可感知的差異。就體細胞或內臟組織傷害/疾病而言，這些失真的感官知覺與受影響區域的外周神經的不適宜活動(病理性興奮過度)相關。神經元性興奮過度可能由於離子通道的功能或活性改變而產生。
慢性疼痛是一種確實的疾病。一般認為至少部分是引起疼痛的處理中心中的突觸可塑性的結果，這是一種被稱為「中樞敏化」的現象，其由脊髓背角神經元的興奮性增加組成。一般認為中樞敏化的維持需要在感覺傳入神經中維持外周神經元活性(超興奮性)，此活性可作為異常病灶的結果產生。大的T-型鈣電流可存在於背根神經節(DRG)的感覺傳入神經元中。T-型鈣通道已被暗示為產生這種異常超興奮性的根本因素，原因是已知它們能夠起神經起步點的作用。藥理學和反義寡核苷酸證據支持慢性疼痛的DRG T-型鈣通道臨床前模型的關鍵作用。
T-型鈣通道是電壓門控通道，可採用易激細胞靜息電位的相對小的去極化將其打開。針對T-型鈣電流有3種不同的基因，其編碼Cav3.1、Cav3.2和Cav3.3。單個亞型具有獨特的分布模式，並在疼痛途徑的外周和中樞部分中表達。T-型鈣通道存在於小和中等大小的DRG神經元(Cav3.2)和涉及疼痛處理的CNS區域中，包括脊髓背角和丘腦(Talley等人，J Neurosci，1999，191895-1911)。業已表明，T-型鈣電流在神經元點射中經由低閾值鈣離子電位起作用，所述鈣離子電位允許神經元動作電位快速釋放(Suzuki和Rogwoski，Proc Natl Acad SciUSA，1989，867228-7232；White等人，Proc Natl Acad Sci USA，1989，866802-6806)。
通過使用藥理學阻斷劑或反義寡核苷酸介導的敲減抑制體內T-型鈣通道功能使T-型通道強烈涉及正常的和病理的疼痛過程。米貝拉地爾和/或乙琥胺對T-型鈣通道是選擇性的，已表明其在眾多臨床前疼痛模型中有效，所述模型包括急性熱和機械疼痛、I期和II期福馬林模型、大鼠脊神經結紮模型、辣椒素誘發的機械痛覺過敏、大鼠甩尾、紫杉醇和長春新鹼誘導的化學神經病(Barton等人，Eur JPharmacol，2005，52179-8；Dogrul等人，Pain，2003，105159168；Flatters和Bennett，Pain，2004，109150-161；Todorovic等人，Brain Res，2002，951336-340)。
響應於乙琥胺的疼痛緩解可歸因於中樞性或外周性作用。然而，響應於米貝拉地爾的效力可由於兩個原因而歸因於外周作用。首先，系統給予的米貝拉地爾不進入腦。另外，鞘內給予米貝拉地爾是無效的(Dogrul等人，Pain，2003，105159168)。支持外周T-型通道阻斷效力的進一步證據來自採用針對T-型通道類型Cav3.2的反義寡核苷酸的研究。鞘內注射hCaV3.2特異性寡核苷酸降低了DRG神經元中的T-型鈣電流，並產生鎮痛、抗痛覺過敏和抗痛覺異常的作用。在這些研究中，在DRG神經元中存在的寡核苷酸吸收和反義介導的T-型電流敲減接近注射部位，但不在脊髓中(Bourinet等人，EMBO J，200524315-324)。
本發明的式I化合物是T-型鈣通道阻斷劑。因此，本發明的化合物可用於治療或預防通過給予T-型鈣通道阻斷劑可治療或預防的病症。這樣的病症包括神經性疼痛的治療或預防。
本文使用的神經性疼痛是指其中疼痛閾值降低等持續的異常痛覺狀態，原因在於伴隨著神經、神經叢或外周神經軟組織的損傷或退化的功能異常，所述損傷或退化由傷口(例如破口、挫傷、神經撕裂傷害、截肢)、壓迫(腕管症候群、三叉神經痛、腫瘤活動)、感染、癌症、缺血等或代謝障礙(如糖尿病等)引起。神經性疼痛包括由中樞性或外周性神經損傷引起的疼痛。其還包括由單神經病或多神經病引起的疼痛。在某些實施方案中，神經性疼痛由糖尿病引起。
通過本發明的化合物可治療或預防的神經性疼痛的其它實例包括但不限於痛覺異常(由一般不引起疼痛的機械性或熱性刺激誘發的痛覺)、痛覺過敏(對一般疼痛的刺激過度反應)、感覺過敏(對接觸刺激的過度反應)、糖尿病性多神經病、嵌壓性神經病、癌症疼痛、中樞性疼痛、分娩疼痛、心肌梗塞疼痛、中風後疼痛、胰腺疼痛、疝痛、肌肉痛、手術後疼痛、中風後疼痛、與帕金森氏病相關的疼痛、與重病特護相關的疼痛、與牙周疾病(包括齒齦炎和牙周炎)相關的疼痛、月經痛、偏頭痛、持久性頭痛(例如叢集性頭痛或慢性緊張性頭痛)、持久性疼痛狀態(例如纖維肌痛或肌筋膜痛)、三叉神經痛、皰疹後神經痛、粘液囊炎、與AIDS相關的疼痛、與多發性硬化相關的疼痛、歸因於脊椎外傷和/或退化的疼痛、灼痛、牽涉性痛、疼痛記憶和涉及應付疼痛的神經機制增強。炎性疼痛可由於軟組織損傷引起，包括涉及肌肉組織(肌炎)和內臟(結腸炎和炎性腸病、胰腺炎、膀胱炎、迴腸炎、克羅恩氏病)、神經(神經炎、神經根病、神經根神經節炎(radioculogangionitis))、關節病症(例如類風溼病和相關疾病，例如強直性脊柱炎)、關節疾病(包括骨關節炎)。本發明的化合物尤其可用於治療或預防痛覺異常和痛覺過敏。
用於治療神經性疼痛的其它藥物包括非阿片類鎮痛藥、阿片類鎮痛藥、抗偏頭痛藥、Cox-II抑制劑、止吐藥、β-腎上腺素能阻斷劑、抗痙攣藥、抗抑鬱藥、其它Ca2+通道阻斷劑、鈉通道阻斷劑、抗癌藥、治療或預防UI的藥物、治療高血壓的藥物、治療或預防心絞痛的藥物、治療心房纖維性顫動的藥物、治療失眠的藥物、治療腎衰竭的藥物、治療阿爾茨海默氏病的藥物、治療或預防IBD的藥物、治療或預防IBS的藥物、治療帕金森氏病和震顫麻痺症的藥物、治療焦慮的藥物、治療癲癇的藥物、治療中風的藥物、治療精神病的藥物、治療亨廷頓氏舞蹈病的藥物、治療ALS的藥物、治療嘔吐的藥物、治療運動障礙的藥物和治療抑鬱症的藥物。
用於治療神經性疼痛的其它優選藥物包括選自以下的那些非-阿片類鎮痛藥和阿片類鎮痛藥。
用於治療炎性疼痛的其它藥物包括皮質類固醇、非甾族抗炎藥、COX-I和COX-II抑制劑、用於治療炎性腸病的藥物和用於治療類風溼性關節炎的藥物。
糖尿病是指來源於多種致病因子的疾病過程，以血漿葡萄糖水平升高為特徵，被稱為高血糖症。過早出現動脈粥樣硬化以及心血管和外周血管疾病的比率增加是糖尿病患者的特有特徵。有兩種主要的糖尿病形式I型糖尿病(也稱為胰島素依賴性糖尿病或IDDM)和II型糖尿病(也稱為非胰島素依賴性糖尿病或NIDDM)。式II的化合物可用於治療II型糖尿病。
I型糖尿病是調節葡萄糖利用的激素—胰島素絕對缺乏的結果。此胰島素缺乏通常以胰腺中的β細胞破壞為特徵，β細胞破壞通常導致絕對的胰島素缺乏。I型糖尿病具有兩種形式免疫介導的糖尿病，其由細胞介導的胰腺β細胞的自身免疫破壞產生；和先天性糖尿病，其是指病因未知的疾病形式。
II型糖尿病是以胰島素抗性為特徵的疾病，並伴隨相對而不是絕對的胰島素缺乏。II型糖尿病可由顯著的胰島素抗性連同相對的胰島素缺乏涵蓋至顯著的胰島素缺乏連同一定的胰島素抗性。胰島素抗性是胰島素在廣泛濃度之間發揮其生物學作用的能力降低。在胰島素抗性個體中，機體分泌異常大量的胰島素來補償該缺乏。當存在的胰島素量不足以補償胰島素抗性和足夠的控制葡萄糖時，出現葡萄糖耐受受損的情形。胰島素分泌隨著時間推移可進一步下降。
II型糖尿病可歸因於在主要的胰島素敏感組織如肌肉、肝臟和脂肪組織中的葡萄糖和脂質代謝的胰島素刺激調節作用的抵抗。對胰島素響應性的這種抗性導致葡萄糖攝取的胰島素活化、在肌肉中的氧化和儲存不足，以及脂肪組織中的脂解和肝臟中的葡萄糖生產和分泌的胰島素抑制不足。在II型糖尿病中，游離脂肪酸水平經常在肥胖患者和某些非肥胖患者中提升，且脂質氧化增加。
具體地說，II型糖尿病可單獨用式II的GPR119激動劑治療，或與一種或多種用於治療糖尿病的其它藥物組合治療。
可與本發明的用於治療II型糖尿病的式II化合物組合使用的用於治療II型糖尿病的其它治療劑包括磺醯脲、胰島素增敏劑、PPAR激動劑、α-葡糖苷酶抑制劑、胰島素促泌素、肝葡萄糖輸出降低化合物和胰島素。
本發明的式I化合物為NPC1L1拮抗劑，因此可用於治療脂質代謝紊亂，尤其是可用於抑制膽固醇吸收。
式I的化合物可用於治療脂質代謝紊亂。式I的化合物為NPC1L1拮抗劑。在一個實施方案中，式I的化合物因此可用於治療脂質代謝紊亂，尤其是可用於抑制膽固醇吸收。要理解的是，在給予式I的化合物來抑制患者的膽固醇吸收時，抑制可為部分的或完全的。因此，在一個實施方案中，患者的膽固醇吸收被部分抑制。在又一個實施方案中，患者的膽固醇吸收被完全抑制。
治療脂質代謝紊亂的方法包括治療高脂血、高膽固醇血症、高甘油三酯血症、谷固醇血症和動脈硬化病症；抑制腸的膽固醇吸收；降低血漿或血清的LDL膽固醇濃度；降低血漿或血清中的膽固醇和膽固醇酯的濃度；降低血漿或血清的C-反應蛋白(CRP)濃度；降低血漿或血清的甘油三酯濃度；降低血漿或血清的阿樸脂蛋白B濃度；增加血漿或血清的高密度脂蛋白(HDL)膽固醇濃度；提高膽固醇的糞便排洩；治療膽固醇吸收抑制劑適用的臨床病症；降低心血管疾病相關事件的發病率；降低血漿或組織的至少一種非膽固醇甾醇或5α-固醇濃度；治療或預防血管炎症；預防、治療或改善阿爾茨海默氏病的症狀；調節患者血流和/或腦中至少一種澱粉樣β肽的生產或水平；調節血流和/或腦中的ApoE異構體4的量；預防和/或治療肥胖；以及預防或降低黃瘤的發病率。
治療脂質代謝紊亂的方法包括給予式I的膽固醇吸收抑制劑。
治療脂質代謝紊亂的其它藥物包括膽固醇吸收抑制劑(例如NPC1L1拮抗劑，如依替米貝(如

牌的依替米貝))、膽固醇生物合成抑制劑，包括但不限於HMG CoA還原酶抑制劑(例如他汀類，如辛伐他汀(如

牌的辛伐他汀)、阿託伐他汀鈣(如

牌的阿託伐他汀鈣)和瑞舒伐他汀鈣(如

牌的瑞舒伐他汀鈣))、膽固醇生物合成抑制劑、膽固醇酯轉移蛋白(CETP)抑制劑(例如torcetrapib)、膽汁酸螯合物；煙酸受體激動劑，如煙酸或其衍生物(例如Niacin(煙酸)和

牌煙酸緩釋片)、過氧化物酶體增殖物-活化劑受體(PPAR)α激動劑或活化劑；乙醯輔酶A膽固醇乙醯轉移酶(「ACAT」)抑制劑；肥胖控制藥物、低血糖藥、抗氧化劑、抗高血壓藥、迴腸膽汁酸轉運體(「IBAT」)抑制劑(或頂端鈉共依賴性膽汁酸轉運體(「ASBT」)抑制劑；普羅布可或其衍生物；低密度脂蛋白(「LDL」)受體活化劑；ω3脂肪酸(「3-PUFA」)；天然水溶性纖維；植物甾醇和植物固醇和/或植物固醇的脂肪酸酯。
2005年12月20日申請的美國臨時申請60/752710和2006年3月29日申請的美國臨時申請60/77048公開了膽固醇吸收抑制劑的用途。
可在本發明方法中用於治療脂質代謝紊亂的降膽固醇藥的類型包括以下的非限制性藥物類型NCP1L1抑制劑，例如依替米貝；HMG-CoA還原酶抑制劑；膽汁酸螯合物；PPAR激動劑或活化劑；迴腸膽汁酸轉運體(「IBAT」)抑制劑(或頂端鈉共依賴性膽汁酸轉運體(「ASBT」)抑制劑；煙酸和/或煙酸受體激動劑；乙醯輔酶A膽固醇O-乙醯轉移酶(「ACAT」)抑制劑；膽甾醇酯轉移蛋白(「CETP」)抑制劑；普羅布可或其衍生物；低密度脂蛋白(「LDL」)受體活化劑；ω3脂肪酸(「3-PUFA」)；天然水溶性纖維；植物甾醇、植物固醇和/或植物固醇的脂肪酸酯。
適用於本發明方法的膽固醇生物合成抑制劑的非限制性實例包括HMG CoA還原酶—膽固醇生物合成中的限速步驟—的競爭性抑制劑、角鯊烯合成酶抑制劑、角鯊烯環氧酶抑制劑及其混合物。適用於本發明方法的HMG CoA還原酶抑制劑的非限制性實例包括他汀類藥物，例如洛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、辛伐他汀、阿伐他汀、西伐他汀、CI-981、resuvastatin、rivastatin和匹伐他汀、瑞舒伐他汀；HMG CoA合成酶抑制劑，例如L-659，699((E，E)-11-[3′R-(羥基-甲基)-4′-氧代-2′R-氧雜環丁烷基]-3，5，7R-三甲基-2，4-十一碳二烯酸)；角鯊烯合成抑制劑，例如squalestatin 1；和角鯊烯環氧酶抑制劑，例如NB-598((E)-N-乙基-N-(6，6-二甲基-2-庚烯-4-炔基)-3-[(3，3′-聯噻吩-5-基)甲氧基]苯-甲胺鹽酸鹽)和其它固醇生物合成抑制劑，例如DMP-565。優選的HMG CoA還原酶抑制劑包括洛伐他汀、普伐他汀和辛伐他汀。最優選的HMG CoA還原酶抑制劑是辛伐他汀。
膽固醇生物合成抑制劑的總日劑量一般可以為約0.1-約160mg/天。在一個實施方案中，該劑量為約0.2-約80mg/天，以單劑或2-3次分劑量給予。
膽汁酸螯合劑結合腸中的膽汁酸，中斷膽汁酸的腸肝循環，並引起類固醇的糞便排洩增多。
適用於本發明方法的膽汁酸螯合劑的非限制性實例包括考來烯胺(能夠結合膽汁酸的含有季銨陽離子基團的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物，例如得自Bristol-Myers Squibb的

或QUESTRAN

考來烯胺)、考來替泊(二亞乙基三胺與1-氯-2，3-環氧丙烷的共聚物，例如得自Pharmacia的

片劑)、鹽酸考來維侖(例如得自Sankyo的

片劑(與表氯醇交聯並用1-溴癸烷和(6-溴己基)-三甲基溴化銨烷基化的聚(烯丙基胺鹽酸鹽))、水溶性衍生物如3，3-ioene、N-(環烷基)烷基胺和聚氨葡糖、不溶性季銨化聚苯乙烯、皂角苷及其混合物。合適的無機膽固醇螯合劑包括水楊酸鉍加蒙脫石粘土、氫氧化鋁和碳酸鈣抗酸藥。
PPAR激活劑或激動劑用作過氧化物酶體增殖物激活受體的激動劑。已經鑑定出了三種PPAR亞型，它們被稱為過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)、過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)和過氧化物酶體增殖物激活受體δ(PPARδ)。應當注意，PPARδ在文獻中還被稱為PPARβ和NUC1，這些名稱均指相同受體。
PPARα調控脂質的代謝。PPARα可由貝特類藥物和多種中鏈和長鏈脂肪酸激活，並且其參與刺激脂肪酸的β-氧化。PPARγ受體亞型參與激活脂肪細胞分化程序，並且不參與刺激肝臟的過氧化物酶體增殖。已經鑑定出PPARδ可用於提高人高密度脂蛋白(HDL)水平。參見例如WO 97/28149。
PPARα激活劑化合物尤其可用於降低甘油三酯水平、中等程度地降低LDL水平和提高HDL水平。PPARα激活劑的有用實例包括貝特類藥物。
適用於本發明方法的苯氧酸(fibric acid)衍生物(「貝特類藥物」)的非限制性實例包括氯貝特；吉非貝齊；環丙貝特；苯扎貝特；克利貝特；比尼貝特；利非貝羅；非諾貝特及其混合物。這些化合物可以以各種形式使用，包括但不限於酸形式、鹽形式、外消旋體、對映體、兩性離子和互變異構體。
可用於本發明方法的PPARα激活劑的其它實例包括如在U.S.6,028,109號中公開的合適的氟苯基化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO 00/75103中公開的一些取代的苯基丙酸化合物，該專利在此引入作為參考；和如在WO 98/43081中公開的PPARα激活劑化合物，該專利在此引入作為參考。
適用於本發明方法的PPARγ激活劑的非限制性實例包括格列酮或噻唑烷二酮的衍生物，例如曲格列酮；羅格列酮和匹格列酮。其它有用的噻唑烷二酮包括環格列酮、恩格列酮、達格列酮和如在WO98/05331中公開的BRL 49653，該專利在此引入作為參考；在WO00/76488中公開的PPARγ激活劑化合物，該專利在此引入作為參考；和在美國專利號5,994,554中公開的PPARγ激活劑化合物，該專利在此引入作為參考。
其它可用於本發明方法的PPARγ激活劑化合物包括如在美國專利號5,859,051中公開的一些乙醯基苯酚，該專利在此引入作為參考；如在WO 99/20275中公開的一些喹啉苯基化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO 99/38845中公開的芳基化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO 00/63161中公開的一些1，4-二取代的苯基化合物；如在WO 01/00579中公開的一些芳基化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO 01/12612和WO 01/12187中公開的苯甲酸化合物，所述專利在此引入作為參考；和如在WO 97/31907中公開的取代的4-羥基-苯基醛醣酸(phenylalconic acid)化合物，該專利在此引入作為參考。
PPARδ化合物尤其可用於降低甘油三酯水平或增高HDL水平。用於本發明方法的PPARδ激活劑的非限制性實例包括合適的噻唑和 唑衍生物，例如在WO 01/00603中公開的C.A.S.登記號317318-32-4，該專利在此引入作為參考；如在WO 97/28149中公開的一些氟、氯或硫代苯氧基苯乙酸，該專利在此引入作為參考；如在美國專利號5,093,365中公開的合適的非-β-可氧化的脂肪酸類似物，該專利在此引入作為參考；和如在WO 99/04815中公開的PPARδ化合物，該專利在此引入作為參考。
此外，具有激活PPARα、PPARγ和PPARδ的多種組合的多個功能的化合物也可用於本發明方法。非限制性實例包括如在美國專利號6，248,781；WO 00/23416；WO 00/23415；WO 00/23425；WO 00/23445；WO 00/23451；和WO 00/63153中公開的一些取代的芳基化合物，所有這些專利都在此引入作為參考，所述化合物被描述為有用的PPARα和/或PPARγ激活劑化合物。有用的PPARα和/或PPARγ激活劑化合物的其它非限制性實例包括如在WO 97/25042中公開的激活劑化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO 00/63190中公開的激活劑化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO 01/21181中公開的激活劑化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO 01/16120中公開的聯芳-(噻)唑化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO 00/63196和WO00/63209中公開的化合物，所述專利在此引入作為參考；如在美國專利號6,008,237中公開的取代的5-芳基-2，4-噻唑烷二酮化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO 00/78312和WO 00/78313G中公開的芳基噻唑烷二酮和芳基唑烷二酮化合物，所述專利在此引入作為參考；如在WO 98/05331中公開的GW2331或(2-(4-[二氟苯基]-1-庚基脲基)乙基]苯氧基)-2-甲基丁酸化合物，該專利在此引入作為參考；如在美國專利號6,166,049中公開的芳基化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO 01/17994中公開的唑化合物，該專利在此引入作為參考；和如在WO 01/25225和WO 01/25226中公開的二硫戊環化合物，所述專利在此引入作為參考。
其它可用於本發明方法的PPAR激活劑化合物包括如在WO01/14349、WO 01/14350和WO/01/04351中公開的取代的苄基噻唑烷-2，4-二酮化合物，所述專利在此引入作為參考；如在WO 00/50392中公開的巰基羧酸化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO 00/53563中公開的殼二孢呋喃酮化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO99/46232中公開的羧酸化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO99/12534中公開的化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO99/15520中公開的苯化合物，該專利在此引入作為參考；如在WO01/21578中公開的鄰甲氧基苯甲醯胺化合物，該專利在此引入作為參考；和如在WO01/40192中公開的PPAR激活劑化合物，該專利在此引入作為參考。
以治療有效量給予過氧化物酶體增殖物激活受體的活化劑以便治療特定病症，例如以優選為約50至約3000mg/天的日劑量。在一個實施方案中，日劑量為約50至約2000mg/天，以單劑或2-4次分劑量給予。然而，精確的劑量由臨床醫師確定，取決於諸如所給予化合物的效力、患者年齡、體重、健康狀況和反應這樣的因素。
在一個備選實施方案中，本發明包括使用一種或多種IBAT抑制劑或ASBT抑制劑。IBAT抑制劑可抑制膽汁酸運輸，從而降低LDL膽固醇水平。適用於本發明方法的IBAT抑制劑的非限制性實例包括苯並硫雜環庚三烯化合物(benzothiepine)，例如在PCT專利申請WO00/38727(其在此引入作為參考)中公開的包含2，3，4，5-四氫-1-苯並硫雜環庚三烯1，1-二氧化物結構的治療化合物。
IBAT抑制劑的總日劑量一般可以為約0.01至約1000mg/天。在一個實施方案中，該劑量為約0.1至約50mg/天，以單劑量或2-4次分劑量給予。
在又一個備選實施方案中，本發明的方法可進一步包括煙酸和/或煙酸受體(「NAR」)激動劑作為降脂藥。
本文所用的「煙酸受體激動劑」包括將用作煙酸受體激動劑的任何化合物。化合物包括具有吡啶-3-羧酸結構或吡嗪-2-羧酸結構的那些化合物，包括酸形式、鹽、酯、兩性離子和互變異構體(如果能獲得的話)。可用於本發明方法的煙酸受體激動劑的實例包括煙酸戊四醇酯、煙呋糖酯和阿西莫司。煙酸及NAR激動劑抑制VLDL及其代謝物LDL在肝臟中的生成，並提高HDL和apo A-1水平。合適的煙酸產品的一個實例是得自Kos Pharmaceuticals，Inc.(Cranbury，NJ)的NIASPAN

(煙酸緩釋片)。
煙酸的總日劑量一般可以為約500至約10,000mg/天。在一個實施方案中，該劑量為約1000至約8000mg/天。在又一個實施方案中，該劑量為約3000至約6000mg/天，以單劑量或分劑量給予。NAR激動劑的總日劑量一般可以為約1至約100mg/天。
在又一個備選實施方案中，本發明的方法可進一步包括一種或多種ACAT抑制劑作為降脂藥。ACAT抑制劑降低LDL和VLDL水平。ACAT是負責酯化過量細胞內膽固醇的酶，並且可降低VLDL(其是膽固醇酯化產物)的合成以及含有apo B-100的脂蛋白的過度生成。
可用於本發明方法的ACAT抑制劑的非限制性實例包括阿伐麥布、HL-004、來西貝特和CL-277082(N-(2，4-二氟苯基)-N-[[4-(2，2-二甲基丙基)苯基]-甲基]-N-庚基脲)。參見P.Chang等人，「Current，Newand Future Treatments in Dyslipidaemia and Atherosclerosis」，Drugs 2000Jul；60(1)；55-93，其在此引入作為參考。
ACAT抑制劑的總日劑量一般可以為約0.1至約1000mg/天，以單劑量或2-4次分劑量給予。
在又一個備選實施方案中，可用於本發明方法的組合物可進一步包括與一種或多種螺環氮雜環丁酮化合物共同給藥或聯合給藥的一種或多種膽固醇酯轉移蛋白(「CETP」)抑制劑。CETP負責交換或轉移攜帶HDL的膽固醇酯與VLDL中的甘油三酯。
適用於本發明方法的CETP抑制劑的非限制性實例公開於PCT專利申請號WO 00/38721和美國專利號6,147,090中，所述專利在此引入作為參考。胰腺膽固醇酯水解酶(pCEH)抑制劑如WAY-121898也可以與上述苯氧酸衍生物和固醇吸收抑制劑共同給藥或聯合給藥。
CETP抑制劑的總日劑量一般可以為約0.01至約1000mg/天，優選為約0.5至約20mg/kg體重/天，以單劑量或2次以上分劑量給予。
在又一個備選實施方案中，本發明的方法可進一步包括可降低LDL和HDL水平的普羅布考或其衍生物(例如在美國專利號6,121,319和6,147,250中公開的AGI-1067和其它衍生物)作為降膽固醇藥。
普羅布考或其衍生物的總日劑量一般可以為約10至約2000mg/天。在一個實施方案中，該劑量為約500至約1500mg/天，以單劑量或2-4次分劑量給予。
在又一個備選實施方案中，本發明的方法還可以包括一種或多種低密度脂蛋白(LDL)受體激活劑作為降脂藥。適用於本發明方法的LDL-受體激活劑的非限制性實例包括HOE-402，其是一種直接刺激LDL受體活性的咪唑烷基-嘧啶衍生物。參見M.Huettinger等人，「Hypolipidemic activity of HOE-402 is Mediated by Stimulation of theLDL Receptor Pathway」，Arterioscler.Thromb.1993；131005-12。
LDL受體激活劑的總日劑量一般可以為約1至約1000mg/天，以單劑量或2-4次分劑量給予。
在又一個備選實施方案中，本發明的方法還可以包括魚油作為降脂藥，其含有ω3脂肪酸(3-PUFA)，可降低VLDL和甘油三酯水平。魚油或ω3脂肪酸的總日劑量一般可以為約1至約30克/天，以單劑量或2-4次分劑量給予。
在又一個備選實施方案中，本發明的方法還可以包括可降低膽固醇水平的天然水溶性纖維，例如歐車前(psyllium)、瓜爾膠、燕麥和果膠。天然水溶性纖維的總日劑量一般可以為約0.1至約10克/天，以單劑量或2-4次分劑量給予。
在又一個備選實施方案中，本發明的方法還可以包括可降低膽固醇水平的植物甾醇、植物固醇和/或植物固醇的脂肪酸酯，例如在

人造奶油中使用的谷甾烷醇酯。植物甾醇、植物固醇和/或植物固醇的脂肪酸酯的總日劑量一般可以為約0.5至約20克/天，以單劑量或2-4次分劑量給予。
因此，本發明的又一個實施方案涉及抑制膽固醇的吸收，包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I的化合物。
本發明的又一個實施方案涉及抑制膽固醇的吸收，包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物連同有效量的至少一種治療脂質代謝紊亂的其它藥物。
本發明的又一個實施方案涉及抑制膽固醇的吸收，包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物連同有效量的至少一種煙酸受體激動劑(例如煙酸)。
本發明的又一個實施方案涉及抑制膽固醇的吸收，包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物連同有效量的至少一種HMG-CoA還原酶抑制劑(例如他汀類，例如辛伐他汀、阿託伐他汀鈣和瑞舒伐他汀鈣)。
本發明的又一個實施方案涉及抑制膽固醇的吸收，包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物連同有效量的至少一種CETP抑制劑(例如torcetrapib)。
本發明的又一個實施方案涉及抑制膽固醇的吸收，包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物連同有效量的至少一種NPC1L1拮抗劑(例如依替米貝，如Zetia

牌的依替米貝)。
本發明的又一個實施方案涉及抑制膽固醇的吸收，包括給予需要此治療的患者有效量的至少一種式I化合物連同有效量的至少一種HMG-CoA還原酶抑制劑(例如他汀類，例如辛伐他汀、阿託伐他汀鈣和瑞舒伐他汀鈣)，連同有效量的至少一種NPC1L1拮抗劑(例如依替米貝，如

牌的依替米貝)。可用於此實施方案的已包含HMG-CoA還原酶和NPC1L1拮抗劑組合的藥物的實例為

牌的依替米貝和辛伐他汀的組合。
在表A中給出了用作T-型鈣通道阻斷劑的優選的式I化合物。
表A

用作GPR119激動劑的優選式I化合物是表B中的化合物。
表B

以下給出了表1、2、3a、3b、3c、3d和4a。表1通過給各部分指定編號限定了在表3a、3b、3c、3d和4a中使用的R1部分，所述編號在表3a、3b、3c、3d和4a中使用。表2通過給各部分指定編號限定了在表3a、3b、3c和3d中使用的R2部分，所述編號在表3a、3b、3c和3d中使用。關於指定給表3a、3b、3c和3d的具體結構，其R1和R2部分由R2列和R1行交叉形成的框中的「X」限定的化合物包括在式I的定義中，因此可用於本發明的方法(即屬於本發明的範圍)。如果在框中沒有「X」，則具有此R1和R2部分的化合物不在式I的定義中(即不屬於本發明的範圍)。由指定給表4a的結構限定的、具有在表4a中限定的R1部分的化合物包括在式I化合物的定義中，因此可用於本發明的方法。
表1、2、3a、3b、3c、3d和4a定義式(I)的化合物
在表1中，「#」代表編號，其是被指定給R1部分的編號，且是在表3a、3b、3c、3d和4a中提到的編號。
在表2中，「#」代表編號，其是被指定給R2部分的編號，且是在表3a、3b、3c和3d中提到的編號。
在表1和2中，「Z」代表分子其餘部分的連接點(即「Z」代表其中R1和R2連接至分子剩餘部分的情況)。因此，例如，當表1中的R1為Z-CH(CH3)2(參見部分編號50)，式I的化合物為
表1 R1部分的定義
表1-繼續
表2 R2部分的定義
表2-繼續
表2繼續
表2-繼續
表2-繼續
表2-繼續
表2-繼續
表2-繼續
表2-繼續
表2-繼續
表2-繼續
表2-繼續
表2-繼續
表2-繼續
表2-繼續
表2-繼續
表2-繼續
表3a 表3a涉及式(IA)的化合物
其中R1和R2在表3a中定義。
由R2和R1行交叉形成的框中的「X」代表式IA的化合物的R2和R1組合，其包括在式I化合物的定義中，所述化合物可用於本發明的方法。例如，其中R2為部分1(參見表2的定義)和R1為部分2(參見表1的定義)的式IA化合物包括在式I的定義中(由R2列和R1行交叉形成的框中存在「X」)。
如果在框中沒有「X」，則該化合物不包括在式I化合物的定義中。例如，其中R2部分為2和R1部分為23的式IA化合物(在由R2列和R1行交叉形成的框中沒有「X」)不包括在式I化合物的定義中。
表3a
表3a-繼續
表3a-繼續
表3a-繼續
表3a-繼續
表3a-繼續
表3a-繼續
表3a-繼續
表3a-繼續
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表3a-繼續
表3a-繼續
表3a-繼續
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表3a-繼續
表3a-繼續
表3a-繼續
表3a-繼續
表3a-繼續
表3a-繼續
表3a-繼續
表3a-繼續
表3b 表3b涉及式(IB)的化合物
其中R1和R2如在表3b中定義。
由R2和R1行交叉形成的框中的「X」代表式IB化合物的R2和R1組合，其包括在可用於本發明方法的式I化合物的定義中。例如，其中R2為部分3(參見表2的定義)和R1為部分45(參見表1的定義)的式IB化合物包括在式I的定義中(由R2列和R1行交叉形成的框中有「X」)。
如果在框中沒有「X」，則該化合物不在式I化合物的定義中。例如，其中R2部分為3和R1部分為44的式IB化合物(由R2列和R1行交叉形成的框中沒有「X」)不在式I化合物的定義內。
表3b
表3b-繼續
表3b-繼續
表3b-繼續
表3b-繼續
表3c 表3c涉及式(IC)的化合物
其中R1和R2如在表3c中定義。
由R2和R1行交叉形成的框中的「X」代表式IC化合物的R2和R1組合，其包括在可用於本發明方法的式I化合物的定義中。例如，其中R2為部分3(參見表2的定義)和R1為部分44(參見表1的定義)的式IC化合物包括在式I的定義中(由R2列和R1行交叉形成的框中有「X」)。
如果在框中沒有「X」，則該化合物被排除在式I化合物的定義之外。例如，其中R2部分為3和R1部分為50的式IC化合物(由R2列和R1行交叉形成的框中沒有「X」)被排除在式I化合物的定義之外。
表3c
表3c-繼續
表3c-繼續
表3d 表3d涉及式(ID)化合物
其中R1和R2如在表3d中定義。
由R2和R1行交叉形成的框中的「X」代表式ID化合物的R2和R1組合，其包括在可用於本發明方法的式I化合物的定義中。例如，其中R2為部分3(參見表2的定義)和R1為部分46(參見表1的定義)的式ID化合物包括在式I的定義中(由R2列和R1行交叉形成的框中有「X」)。
如果在框中沒有「X」，則該化合物不在式I化合物的定義中。例如，其中R2部分為83和R1部分為46的式ID化合物被排除在式I化合物的定義之外(由R2列和R1行交叉形成的框中沒有「X」)。
表3d
表3d-繼續
表3d-繼續
表4a 表4a涉及式(IE)的化合物
其中R1在表4a中定義。
由表4a定義的化合物包括在可用於本發明方法的式I化合物的定義中。
表4a 本發明的代表性化合物包括例如表5中的化合物。在Cav3.2Ionworks測定中，表5中的化合物的IC50在23-23506nM的範圍內。
表5



























可用於本發明方法的代表性化合物也在表6中給出。在表6中的化合物的GPR 119cAMPIC50活性在1640-16,260nM的範圍內。
表6 式I的化合物










如上所述，在整個公開內容中，除非另有說明，否則以下術語應被理解為具有以下含義 「至少一種」式I的化合物是指1、2、3或4種不同的化合物，但優選在要求保護的方法中使用一種式I的化合物。同樣，當「至少一種」連同組合使用的其它藥物使用時，包括1、2、3或4種其它藥物，但優選使用一張或兩種其它藥物，更優選使用一種其它藥物。
「患者」包括人和動物這二者。「患者」是人或非人哺乳動物。在一個實施方案中，患者為人。在又一個實施方案中，患者為非人哺乳動物，包括但不限於猴、狗、狒狒、恆河猴、小鼠、大鼠、馬、貓或兔。在又一個實施方案中，患者是伴侶動物，包括但不限於狗、貓、兔、馬或白鼬。在一個實施方案中，患者為狗。在又一個實施方案中，患者為貓。
「PG」是指保護組。
「哺乳動物」是指人和其它哺乳動物。
用於化合物的術語「純化的」、「純化形式」或「分離和純化形式」是指所述化合物由合成過程(例如反應混合物)或天然來源或其組合分離後的物理狀態。因此，用於化合物的術語「純化的」、「純化形式」或「分離和純化形式」是指所述化合物以足夠純度由本文所述或技術人員熟知的一種或多種純化方法(例如色譜、重結晶等)獲得後的物理狀態，所述純度可通過本文所述或技術人員熟知的標準分析技術表徵。
還應注意到，假定在本文的文本、流程、實施例和表中具有不滿足的化合價的任何碳和雜原子均具有足夠數量的氫原子來滿足所述化合價態。
當將化合物中的官能團稱為「被保護」時，這意味著所述基團為修改形式，以阻止化合物在進行反應時在被保護部位發生不需要的副反應。適合的保護基應為本領域一般技術人員所知曉，並可參考標準教科書，例如T.W.Greene等人，Protective Groups in organic Synthesis(1991)，Wiley，New York。
本文所用術語「組合物」旨在包括這樣的產品包含指定量的指定成分的產品，以及直接或間接來源於指定量的指定成分組合的任何產品。
本文也包括用於本發明方法的化合物的前藥和溶劑化物。前藥的討論提供於T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs as Novel Delivery Systems(1987)14，the A.C.S.Symposium Series，以及Bioreversible CarriersinDrug Design，(1987)Edward B.Roche編輯，American PharmaceuticalAssociation and Pergamon Press。術語「前藥」是指在體內轉化而產生式(I)化合物或該化合物的藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物的化合物(例如，藥物前體)。轉化可通過不同機理(例如代謝過程或化學過程)發生，例如通過在血液中水解。前藥使用的討論提供於T.Higuchi和W.Stella，「Pro-drugs as Novel Delivery Systems」，14卷，the A.C.S.Symposium Series，以及Bioreversible Carriers in Drug Design，EdwardB.Roche編輯，American Pharmaceutical Association and PergamonPress，1987。
例如，如果式I化合物或該化合物的藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物包含羧酸官能團，則前藥可包括用一種基團代替酸基的氫原子形成的酯，所述基團例如為(C1-C8)烷基、(C2-C12)烷醯基氧基甲基、具有4-9個碳原子的1-(烷醯基氧基)乙基、具有5-10個碳原子的1-甲基-1-(烷醯基氧基)-乙基、具有3-6個碳原子的烷氧基羰基氧基甲基、具有4-7個碳原子的1-(烷氧基羰基氧基)乙基、具有5-8個碳原子的1-甲基-1-(烷氧基羰基氧基)乙基、具有3-9個碳原子的N-(烷氧基羰基)-氨基甲基、具有4-10個碳原子的1-(N-(烷氧基羰基)氨基)乙基、3-苯並[c]呋喃酮基(3-phthalidyl)、4-巴豆酸內酯基、γ-丁內酯-4-基、二-N，N-(C1-C2)烷基氨基(C2-C3)烷基(如β-二甲基氨基乙基)、氨基甲醯基-(C1-C2)烷基、N，N-二(C1-C2)烷基氨基甲醯基-(C1-C2)烷基和哌啶子基-、吡咯烷-1-基-或嗎啉代(C2-C3)烷基等。
類似地，如果式I的化合物包含醇官能團，則前藥可通過用一種基團代替醇基的氫原子來形成，所述基團例如為(C1-C6)烷醯基氧基甲基、1-((C1-C6)烷醯基氧基)乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷醯基氧基)乙基、(C1-C6)烷氧基羰基氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧基羰基氨基甲基、琥珀醯基、(C1-C6)烷醯基、α-氨基(C1-C4)鏈烷基(alkanyl)、芳基醯基和α-氨基醯基或α-氨基醯基-(α-氨基醯基，其中各α-氨基醯基獨立選自天然L-胺基酸、P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-C6)烷基)2或糖基(該基團由半縮醛型糖類去掉羥基產生)等。
如果式I的化合物結合有胺官能團，則前藥可通過用一種基團代替胺基中的氫原子形成，所述基團例如為R-羰基、RO-羰基、NRR′-羰基(其中R和R′分別獨立為(C1-C10)烷基、(C3-C7)環烷基、苄基，或者R-羰基為天然α-氨基醯基或天然α-氨基醯基)、-C(OH)C(O)OY1(其中Y1為H、(C1-C6)烷基或苄基)、-C(OY2)Y3(其中Y2為(C1-C4)烷基，Y3為(C1-C6)烷基、羧基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C4)烷基或單-N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基烷基)、-C(Y4)Y5(其中Y4為H或甲基，Y5為單N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基、嗎啉代、哌啶-1-基或吡咯烷-1-基等)。
式I的一種或多種化合物可以與藥學上可接受的溶劑(例如水、乙醇等)以非溶劑化形式以及溶劑化形式存在，本發明旨在包括溶劑化和非溶劑化兩種形式。「溶劑化物」是指本發明的化合物與一種或多種溶劑分子的物理締合。此物理締合包括不同程度的離子鍵合和共價鍵合，包括氫鍵鍵合。在某些情況下，溶劑化物能夠分離，例如，在一種或多種溶劑分子結合到結晶固體的晶格中時。「溶劑化物」包括溶液相的和可分離的溶劑化物。適合的溶劑化物的非限制實例包括乙醇化物、甲醇化物等。「水合物」是其中溶劑分子為H2O的溶劑化物。
任選地使一種或多種式I化合物轉化成溶劑化物。通常已知溶劑化物的製備。因此，例如M.Caira等人，J.Pharmaceutical Sci.，93(3)，601-611(2004)描述在乙酸乙酯中以及由水製備抗真菌藥氟康唑的溶劑化物。溶劑化物、半溶劑化物、水合物等的類似製備描述於E.C.vanTonder等人，AAPS PharmSciTech.，5(1)，article 12(2004)；和A.LBingham等人，Chem.Commun.，603-604(2001)。一般的非限制性方法包括，將本發明的化合物在高於環境溫度的溫度時溶於所需量的所需溶劑(有機溶劑或水或其混合物)，以足以形成晶體的速率使溶液冷卻，然後通過標準方法分離晶體。分析技術(例如I.R.光譜)顯示在作為溶劑化物(或水合物)的結晶中存在溶劑(或水)。
「有效量」或「治療有效量」旨在描述式I的化合物或組合物有效抑制上述疾病並因此產生所需治療、改善、抑制或預防效果的量。
用於本發明方法的式I化合物可形成鹽，這些鹽也在本發明的範圍內。應了解，除非另外指明，否則在本文中提及式I化合物時包括其鹽。本文所用術語「鹽」表示與無機酸和/有機酸形成的酸加成鹽，以及與無機鹼和/或有機鹼形成的鹼加成鹽。此外，在式I化合物同時包含鹼性部分(如但不限於吡啶或咪唑)和酸性部分(如但不限於羧酸)時，可形成兩性離子(「內鹽」)，其包括在本文所用的術語「鹽」內。儘管也可使用其它鹽，但優選藥學上可接受的(即無毒的、生理上可接受的)鹽。例如，可通過使式I化合物與一定量的酸或鹼(如等量)在介質(例如其中鹽沉澱的介質)或含水介質中反應，隨後凍幹，形成式I化合物的鹽。
示例性的酸加成鹽包括乙酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、磷酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽等。此外，一般認為適合由鹼性藥物化合物形成藥學上可用鹽的酸論述於例如P.Stahl等人，Camille G.(編輯)Handbook of Pharmaceutical Salts.Properties，Selection and Use.(2002)ZurichWiley-VCH；S.Berge等人，Journal of Pharmaceutical Sciences(1977)66(1) 1-19；P.Gould，International J.of Pharmaceutics(1986)33 201-217；Anderson等人，ThePractice of Medicinal Chemistry(1996)，Academic Press，New York；和The Orange Book(Food & Drug Administration，Washington，D.C.，在其網站上)。這些公開內容通過引用結合到本文中。
示例性的鹼加成鹽包括銨鹽、鹼金屬鹽(如鈉、鋰和鉀鹽)、鹼土金屬鹽(如鈣和鎂鹽)、與有機鹼(例如，有機胺，例如二環己基胺、叔丁胺)的鹽和與胺基酸(如精氨酸、賴氨酸等)的鹽。鹼性含氮基團可用一些試劑季銨化，如低級烷基滷(例如，甲基、乙基和丁基氯、溴和碘)、硫酸二烷酯(例如，硫酸二甲酯、硫酸二乙酯和硫酸二丁酯)、長鏈滷化物(例如，癸基、十二烷基和硬脂基氯、溴和碘)、芳烷基滷(例如，苄基溴和苯乙基溴)等。
所有這些酸加成鹽和鹼加成鹽旨在為本發明範圍內的藥學上可接受的鹽，並且按照本發明目的，所有這些酸鹽和鹼鹽均被認為是相當於相應化合物的游離形式。
本發明化合物的藥學上可接受的酯包括以下類別(1)由羥基酯化得到的羧酸酯，其中酯基的羧酸部分的非羰基部分選自直鏈或支鏈烷基(例如，乙醯基、正丙基、叔丁基或正丁基)、烷氧基烷基(例如，甲氧基甲基)、芳烷基(例如，苄基)、芳氧基烷基(例如，苯氧基甲基)、芳基(例如，任選地用例如滷素、C1-4烷基或C1-4烷氧基或氨基取代的苯基)；(2)磺酸酯，如烷基-或芳烷基磺醯基(例如，甲磺醯基)；(3)胺基酸酯(例如，L-纈氨醯或L-異亮氨醯)；(4)膦酸酯和(5)單、二或三磷酸酯。磷酸酯可進一步由例如C1-20醇或其反應性衍生物或2，3-二(C6-24)醯基甘油酯化。
式(I)的化合物及其鹽、溶劑化物、酯和前藥可以其互變異構體形式存在(例如作為醯胺或亞氨基醚)。所有這些互變異構體形式均作為本發明的部分包含在本文中。
式(I)的化合物可包含不對稱中心或手性中心，因此可以不同的立體異構體形式存在。式(I)化合物的所有立體異構體形式及其混合物，包括外消旋混合物，旨在形成本發明的部分。此外，本發明包括所有幾何異構體和位置異構體。例如，如果式I或II的化合物帶有雙鍵或稠合環，則其順式和反式形式以及它們的混合物也包括在本發明的範圍內。
可通過本領域技術人員熟知的方法，例如層析法和/或分級結晶，根據其物理化學差異將非對映體混合物分離成其各自的非對映體。可如下分離對映體通過與適合光學活性化合物(例如手性助劑，如手性醇或Mosher醯基氯)反應將對映體混合物轉化成非對映體混合物，分離非對映體並將各個非對映體轉化(例如水解)成相應的純對映體。式I的一些化合物也可以為阻轉異構體(例如，取代的聯芳基)，並且也被視為本發明的部分。對映體也可用手性HPLC柱分離。
在本發明範圍內包括式I化合物(包括化合物的鹽、溶劑化物、酯和前藥以及前藥的鹽、溶劑化物和酯)的所有立體異構體(例如，幾何異構體、光學異構體等)，例如，可因不同取代基上的不對稱碳而存在的那些異構體，包括對映體形式(其甚至可在缺少不對稱碳下存在)、旋轉異構體形式、阻轉異構體及非對映體形式，位置異構體(例如4-吡啶基和3-吡啶基)也是如此。(例如，如果式I的化合物結合雙鍵或稠合環，則順式和反式這二者以及混合物包括在本發明的範圍內。此外，例如，本發明也包括化合物的例如所有酮-烯醇和亞胺-烯胺形式。) 本發明化合物的各立體異構體例如可基本不含其它異構體，或者可為混合物，例如外消旋體混合物或與所有其它的立體異構體或其它選定的立體異構體的混合物。本發明的手性中心可具有S構型或R構型，如IUPAC 1974 Recommendations所定義。所用術語「鹽」、「溶劑化物」、「酯」、「前藥」等旨在同等適用於本發明化合物的對映異構體、立體異構體、旋轉異構體、互變異構體、位置異構體、外消旋體或前藥的鹽、溶劑化物、酯和前藥。
本發明也包括本發明化合物的同位素標記化合物，這些化合物與本文所述的那些相同，但一個或多個原子被原子質量或原子質量數與通常天然發現的原子質量或原子質量數不同的原子取代。可結合到本發明化合物的同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如分別是2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36Cl。
某些同位素標記的式I或II的化合物(例如，用3H和14C標記的化合物)用於化合物和/或基質組織分布分析。為易於製備和可檢測性，特別優選使用氚(即，3H)和碳-14(即，14C)同位素。此外，用較重同位素如氘(即2H)取代可給予由更高的代謝穩定性產生的某些治療優勢(例如，體內半衰期增加或劑量需求減少)，因此，在某些情況下可能是優選的。通常，可用適宜的同位素標記的試劑代替非同位素標記的試劑，通過類似於下文的流程和/或實施例中公開的以下步驟，製備式I的同位素標記化合物。
式I化合物的多晶型形式及式I化合物的鹽、溶劑化物、酯和前藥旨在包括在本發明內。
本領域技術人員將意識到，對於某些式I的化合物，一種異構體將顯示出比其它異構體更大的藥理學活性。
在本發明的方法中可給予1-3種式I化合物，優選1種。
為了由描述用於本發明方法的化合物製備藥物組合物，藥學上可接受的惰性載體可以為固體或液體。固體形式的製劑包括粉劑、片劑、可分散顆粒劑、膠囊劑、扁囊劑和栓劑。粉劑和片劑可包含約5％至約70％的活性成分。適合的固體載體是本領域已知的，例如碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、糖、乳糖。片劑、粉劑、扁囊劑和膠囊劑可作為固體劑型適用於口服給藥。
為製備栓劑，首先融化低熔點蠟，如脂肪酸甘油或可可脂的混合物，通過攪拌將活性成分均勻分散在其中。然後將溶化的均勻混合物傾入適宜大小的模具中，並使其冷卻，由此固化。
液體形式的製劑包括溶液劑、混懸劑和乳劑。可提起的實例為用於胃腸外注射的水劑或水-丙二醇溶液劑。
液體形式的製劑也可包括用於鼻內給藥的溶液劑。
適於吸入的氣霧劑可包括溶液劑和粉末形式的固體劑，其可與藥學上可接受的載體組合，所述載體如惰性壓縮氣體。
也包括這樣的固體型製劑其旨在使用前短時間轉化成液體型製劑，用於口服或胃腸外給藥。這種液體劑型包括溶液劑、混懸劑和乳劑。
用於本發明的化合物也可以透皮遞送。透皮組合物可採取乳膏劑、洗劑、氣霧劑和/或乳劑的形式，可包含在基質或儲庫型的透皮貼劑中，對於此用途這些都是本領域常規技術。
式I化合物優選口服給藥。
藥物製劑優選為單位劑型。在此類劑型中，將製劑再分成包含適量活性成分的單位劑量，例如達到所需目的的有效量。
單位劑量製劑中的活性式I化合物的量可根據具體應用由約0.1mg至約1000mg改變或調整，更優選由約1mg至約300mg改變或調整。
所用的實際劑量可根據患者的需求和所治療病症的嚴重性變化。對具體情況確定適合的劑量在本領域的技術範圍內。一般而言，治療以低於化合物的最佳劑量的較小劑量開始。此後，劑量以小增量增加，直至在所述環境下達到最佳效果。為方便起見，可根據需要將總的每日劑量分開，並在當天分批給藥。
可根據主治醫師鑑於患者的年齡、病症和身形大小及所治療症狀的嚴重性等因素的判斷，調節式I化合物的給藥量和頻率。口服給予式I化合物的典型推薦劑量方案為約10mg/天至約2000mg/天，優選10mg/天至1000mg/天，分2-4次給予，以減緩以上列出的疾病或病症。
用於以上列出的疾病或病症的治療的其它藥物的劑量和給藥方案將由主治醫師鑑於包裝插頁上已批准的劑量和給藥方案、考慮患者的年齡、性別和病症以及疾病嚴重性來確定。在聯合給予時，式I的化合物和用於治療以上列出的疾病或病症的其它藥物可同時或序貫給予。這在組合的組分優選以不同給藥程序給予時(例如一種組分每天1次給予，另一種組分每6小時1次給予)或在優選的藥物組合物不同時(例如一種優選為片劑，另一種為膠囊)尤其有用。因此，包括獨立劑型的藥盒是有利的。
可用於治療疼痛的其它藥物包括非阿片類(也稱為非類固醇抗炎藥)鎮痛藥，例如乙醯水楊酸、三水楊酸膽鹼鎂、對乙醯氨基酚、異丁苯丙酸、苯氧苯丙酸、氟苯水楊酸(diflusinal)和甲氧萘丙酸；阿片類鎮痛藥，例如嗎啡、二氫嗎啡酮、美沙酮、左啡諾、芬太尼、羥可酮和羥嗎啡酮；類固醇，例如氫化潑尼松、氟替卡松、去炎松、倍氯米松、莫美他松、budisamide、倍他米松、地塞米松、強的松、氟尼縮松和可的松；COX-I抑制劑，例如阿司匹林和吡羅昔康；COX-II抑制劑，例如羅非昔布、塞來昔布、伐地考昔和依託昔布；用於治療炎性腸病的藥物，例如IL-10、類固醇和柳氮磺胺吡啶；用於治療類風溼性關節炎的藥物，例如甲氨蝶呤、咪唑硫嘌呤、環磷醯胺、類固醇和黴酚酸嗎啉乙酯。
尤其優選用於治療神經性疼痛的藥物為阿片類和非阿片類鎮痛藥，包括乙醯水楊酸、三水楊酸膽鹼鎂、對乙醯氨基酚、異丁苯丙酸、苯氧苯丙酸、氟苯水楊酸、甲氧萘丙酸、嗎啡、二氫嗎啡酮、美沙酮、左啡諾、芬太尼、羥可酮和羥嗎啡酮。尤其優選用於治療炎性疼痛的藥物是類固醇和非阿片類鎮痛劑。
與式I的化合物組合用於治療II型糖尿病的藥物的實例包括磺醯脲、胰島素增敏劑(例如PPAR激動劑、DPPIV抑制劑、PTP-1B抑制劑和葡糖激酶活化劑)、α-葡糖苷酶抑制劑、胰島素促泌素、肝葡萄糖輸出降低化合物和胰島素。
PPAR的活化劑或激動劑如上所述。
磺醯脲藥物的非限制性實例包括格列吡嗪、甲苯磺丁脲、優降糖、格列美脲、氯磺丙脲、醋磺己脲、格列胺脲、格列齊特、格列本脲和妥拉磺脲。胰島素增敏劑包括上文詳述的PPAR-γ激動劑，優選為曲格列酮、羅格列酮、吡格列酮和英格列酮；雙胍類，例如甲福明和苯乙雙胍；DPPIV抑制劑，例如西他列汀(sitagliptin)、saxagliptin、denagliptin和維達列汀PTP-1B抑制劑；和葡糖激酶活化劑。可用於治療II型糖尿病的α-葡糖苷酶抑制劑包括米格列醇、阿卡波糖和伏格列波糖。肝葡萄糖輸出降低藥物包括格華止和格華止XR。胰島素促泌素包括磺醯脲和非磺醯脲藥物，例如GLP-1、exendin、GIP、分泌素、格列吡嗪、氯磺丙脲、那格列奈、美格列奈、格列本脲、瑞格列奈和格列美脲。胰島素包括所有胰島素製劑，包括長效和短效形式的胰島素。
本發明的化合物可與抗肥胖藥組合給予，用於治療糖尿病。抗肥胖藥的實例包括CB1拮抗劑或反向激動劑，例如利莫那班、神經肽Y拮抗劑、MCR4激動劑、MCH受體拮抗劑、組胺H3受體拮抗劑或反向激動劑、瘦素、食慾抑制劑如西布曲明和脂肪酶抑制劑如賽尼可。
為治療糖尿病，本發明的化合物還可以與抗高血壓藥組合給予，例如β-阻斷劑和鈣通道阻斷劑(例如地爾硫卓、維拉帕米、硝苯地平、氨氯地平(amlopidine)和mybefradil)、ACE抑制劑(例如卡託普利、賴諾普利、依那普利、螺普利、ceranopril、zefenopril、福辛普利、cilazopril和喹那普利)、AT-1受體拮抗劑(例如氯沙坦、依貝沙坦和纈沙坦)、腎素抑制劑和內皮縮血管肽受體拮抗劑(例如sitaxsentan)。
某些美格列奈藥物通過刺激胰島素由胰腺的釋放降低血糖水平。該作用依賴於胰腺胰島中的功能性β細胞。胰島素釋放是葡萄糖依賴性的，並於低葡萄糖濃度降低。美格列奈藥物通過在特徵性位點結合關閉β細胞膜中的ATP依賴性鉀通道。該鉀通道阻滯去極化β細胞，這導致鈣通道打開。產生的增加的鈣流誘導胰島素分泌。適宜的美格列奈藥物的非限制性實例包括瑞格列奈和那格列奈。
使機體對已存在的胰島素敏感的適合抗糖尿病藥物的非限制性實例包括某些雙胍和某些格列酮或噻唑烷二酮。某些適宜的雙胍通過減少肝葡萄糖生產、減少腸葡萄糖吸收和改善胰島素敏感性(增加外周葡萄糖吸收和利用)降低血糖。適宜的雙胍的非限制性實例為甲福明。甲福明的非限制性實例包括鹽酸甲福明(N，N-二甲基亞氨氫基雙碳亞氨基二醯胺鹽酸鹽，例如得自Bristol-Myers Squibb的GLUCOPHAGE

片)；含優降糖的鹽酸甲福明，例如得自Bristol-MyersSquibb的GLUCOVANCETM片)；丁福明。
減緩或阻斷澱粉和某些糖的分解並適用於本發明組合物的抗糖尿病藥的非限制性實例包括α-葡糖苷酶抑制劑和用於增加胰島素生產的某些肽。α-葡糖苷酶抑制劑通過延遲攝入的碳水化合物的消化來幫助身體降低血糖，由此造成飯後血糖濃度的升高較小。合適的α-葡糖苷酶抑制劑的非限制性實例包括阿卡波糖；米格列醇；卡格列波糖；如WO 01/47528(在此引入作為參考)中公開的某些聚胺；伏格列波糖。適用於增加胰島素生產的肽的非限制性實例包括amlintide(CAS登記號122384-88-7，來自Amylin)；普蘭林肽、exendin、如WO 00/07617(在此引入作為參考)中公開的具有胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)激動活性的某些化合物。
另外的抗糖尿病藥物的非限制性實例包括口服給予的胰島素。適宜口服給予的胰島素或含胰島素組合物的非限制性實例包括AutoImmune的AL-401，以及如在美國專利號4,579,730；4,849,405；4,963,526；5,642,868；5,763,396；5,824,638；5,843,866；6,153,632；6,191,105；和WO85/05029(每一個均在此引入作為參考)中公開的某些組合物。
抗糖尿病藥物以治療有效量給予以治療特定的病症，例如優選約1mg/天至約3000mg/天的日劑量，更優選約50mg/天至約2000mg/天的日劑量，所述劑量以單劑量或2-4次分劑量給予。然而，確切的劑量由主治醫師確定，並取決於所給予化合物的效力、患者的年齡、體重、一般身體狀況和藥物反應等因素。
在以下的流程和實施例中，使用以下的縮寫Ac(乙醯基)；Me(甲基)；Et(乙基)；Ph(苯基)；Bn(苄基)；Boc(叔丁氧基羰基)；DCE(二氯乙烷)；DMSO(d6-二甲基亞碸)；DIPEA(二異丙基乙胺)；Dioxane(1，4-二烷)；EtOAc(乙酸乙酯)；EtOH(乙醇)；Ether(二乙醚)；HOBT(1-羥基苯並三唑水合物)；IPA(異丙醇)；LCMS(液相色譜質譜)；LDA(二異丙基醯胺鋰)；LHMSD(雙(三甲基甲矽烷基)醯胺鋰)；MeOH(甲醇)；RT(室溫，約25℃)；SiO2(用於快速色譜的矽膠)；TFA(三氟乙酸)；TLC(薄層色譜)；THF(四氫呋喃)。
可用於本發明方法的化合物可按照以下描述的方法製備。可用於本發明方法的化合物還可以通過以下的實施例製備，所述實施例不應被理解為限制本文公開內容的範圍。在本發明範圍內的備選機制途徑和類似物結構對本領域技術人員是顯而易見的。
通用方法 除非另有說明，否則在以下的實施例中使用在本段落中描述的通用方法。所有的溶劑和試劑都按來樣使用。質子NMR光譜使用VarianXL-400(400MHz)設備獲得，並報告為百萬分之幾(ppm)Me4Si低磁場。LCMS分析使用Applied Biosystems API-100質譜儀進行，該質譜儀配有Shimadzu SCL-10A LC柱Altech鉑C18，3μm，33mm×7mmID；梯度流速0min，10％ CH3CN；5min，95％ CH3CN；7min，95％CH3CN；7.5min，10％ CH3CN；9min，停止。快速柱色譜使用SelectoScientiic快速矽膠32-63目進行。分析和製備型TLC使用AnaltechSilica gel GF板進行。手性HPLC使用配有Chiralpak OD柱(ChiralTechnologies)的Varian PrepStar系統進行。
通用合成路徑 流程1
可用式B2的化合物處理式B1的化合物，以得到式B3的化合物。式B4的化合物可用鹼(如LDA或LHMDS)於-78℃處理，之後用式B3的化合物於室溫處理，以得到式B5的化合物。可通過用式B5的化合物和鹼如NaH處理，將式B6的化合物(其中X3為離去基團，例如滷素或三氟甲磺酸鹽)轉變為式B7的化合物。然後用諸如LiAlH4、LiAH4/AlCl3、乙硼烷或二苯基矽烷和三(三苯基膦)羰基氫化銠(I)的混合物的試劑還原化合物B7，以得到化合物B8，其通過用TFA處理被製作為B9。根據需要用羧酸、或在適宜的偶聯劑如碳二亞胺存在下用醛或異氰酸鹽、或用還原劑如三乙醯氧基硼氫化鈉處理B9型的化合物，以製備式B10的化合物。
另外，可通過用還原劑如LiAH4和AlCl3處理，將B5型的化合物轉變為化合物B11，然後根據需要通過與羧酸、或在適宜的偶聯劑如碳二亞胺存在下與醛或異氰酸鹽、或與還原劑如三乙醯氧基硼氫化鈉反應，轉變為化合物B12，以製備式B12的化合物。通過用諸如TFA的酸處理除去B12的保護基，並根據需要使B13與羧酸、或在適宜的偶聯劑如碳二亞胺存在下與醯基氯或異氰酸鹽、或鹼反應，得到化合物B10。
流程2
實施例B10-1 2-{[1-(4-氯-苯基)-2-異丙基-2，7-二氮雜-螺[3.5]壬烷-7-羰基]-氨基}-3-甲基-戊酸甲酯
步驟A1-氧代-3-(4-氯苯基)-2，7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸1，1-二甲基乙酯(B5-1)的製備 在乾燥的250mL3-頸燒瓶中，加入4-氯苯甲醛(6.51g)和無水THF(20mL)，並冷卻至-30℃。滴加1M雙(三甲基甲矽烷基)醯胺鋰的THF(47mL)溶液並將溫度保持約30℃。然後，將反應混合物升溫至0℃持續30分鐘。(溶液A) 在乾燥的250mL燒瓶中，在氮氣氛下，加入二異丙胺(6.1mL)和無水THF(10mL)，並冷卻至0℃。滴加2.5M正丁基鋰的己烷溶液(17.4mL，43.5mmol)，於-60℃攪拌25分鐘。然後，滴加1-叔-丁氧基羰基哌啶-4-甲酸乙酯(1)(9.3g)的無水THF(10mL)溶液，並將溫度保持於-65℃至-55℃持續90分鐘。(溶液B) 將溶液A滴加至溶液B，將溫度保持於-55至-65℃2.5小時。升溫至室溫，並攪拌過夜。於25-30℃滴加飽和NH4Cl(50mL)猝滅。用EtOAc分部。真空濃縮乾燥的(MgSO4)EtOAc溶液，得到琥珀色泡沫狀物(14.72g)。在約55℃將琥珀色泡沫狀物溶解於EtOAc(15mL)中。加入己烷(3×10mL)，並使其靜置過夜。收集晶體，並在真空烘箱中乾燥，得到黃色固體狀的標題化合物(7.67g)。
步驟B1-氧代-3-(4-氯苯基)-2-異丙基-2，7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸1，1-二甲基乙酯(B7-1)的製備 在乾燥的100mL 3-頸燒瓶中，加入1-氧代-3-(4-氯苯基)-2，7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸1，1-二甲基乙酯(7.0g)和無水DMF(50mL)，並冷卻至約2℃。分批加入氫化鈉的60％油性分散液(1.10g)，將溫度保持於2-5℃。在5分鐘後，分批加入2-溴丙烷(2.6mL)，將溫度保持於3-8℃。將混合物升溫至50℃。在4.5小時後，冷卻至約20℃，並加入冰水(400mL)。用EtOAc(2×499mL)萃取。用鹽水(50mL)萃取EtOAc。真空濃縮乾燥的(MgSO4)EtOAc，得到琥珀色油狀物的標題化合物(8.80g)。加入EtOAc:己烷(1:2，20mL)，並於室溫保持過夜，得到黃色固體狀的標題化合物(5.75g)。
步驟C1-(4-氯苯基)-2-異丙基-2，7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸1，1-二甲基乙酯(B8-1)的製備
在氮氣氛下，在乾燥的500mL 3-頸燒瓶中，加入LiAlH4(0.87g)和THF(經Mol篩乾燥)(96mL)，並冷卻至10℃(冰浴)。分批加入AlCl3(3.33g)，並將溫度保持於約10℃。加熱至50-60℃持續30分鐘，然後冷卻至-40至-50℃。加入1-氧代-3-(4-氯苯基)-2-異丙基-2，7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸1，1-二甲基乙酯(5.75g的無水THF(150mL)溶液)。將反應混合物升溫至-20℃，並以15分鐘間隔監測，直至起始材料消失(約60分鐘)。在-30℃，於約-30℃時，用10％ NaOH猝滅反應混合物，然後升溫至室溫。用二乙醚萃取(2×300mL)。用鹽水萃取二乙醚。真空濃縮乾燥的(MgSO4)Et2O，得到粘性油狀物的標題化合物(9.79g)。加入EtOAc(5mL)和己烷(25ml)，使其於室溫靜置，得到白色固體狀的標題化合物(0.031g)。在EtOAc(30mL)和己烷(30mL)中的濾過液(4.47g)得到另外的化合物(3.56g)，將其放置在Analogix系統矽膠柱(115g)上，並用己烷/EtOAc洗脫，收集到20mL級分。濃縮級分54-145，得到白色固體狀的標題化合物(2.94g)。
步驟D1-(4-氯苯基)-2-異丙基-2，7-二氮雜螺[3.5]壬烷(B9-1)的製備 在氮氣氛下，用三氟乙酸(2×5mL)於室溫處理1-(4-氯苯基)-2-異丙基-2，7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸1，1-二甲基乙酯(2.74g)的無水CH2Cl2(10mL)溶液45分鐘。真空濃縮反應混合物。加入CH2Cl2(10mL)，並真空濃縮(3次)，得到無色粘性油狀物(5.76g)。將該油狀物分配在CH2Cl2和1N NaOH之間。真空濃縮乾燥的(MgSO4)CH2Cl2溶液，得到粘性油狀物的標題化合物(1.37g)。
步驟EN-[[1-(4-氯苯基)-2-異丙基-2，7-二氮雜螺[3.5]壬-7-基]羰基]-L-異亮氨酸鹽酸甲酯(B10-1)的製備 用(2S，3S)-2-異氰酸根合-3-甲基戊酸甲酯(70μL)處理1-(4-氯苯基)-2-異丙基-2，7-二氮雜螺[3.5]壬烷(0.068g)的ClCH2CH2Cl(2mL)溶液，於室溫攪拌產生的混合物48小時。加入P-S三羥甲基氨基甲烷(Argoonaut，4.64mmol/g)(250g)和ClCH2CH2Cl(2mL)，振搖獲得的混合物20小時。過濾反應混合物，用CH2Cl2(2mL)洗滌樹脂。真空濃縮產生的濾過液，然後放置在矽膠板上(1000μ)，用CH2Cl2:MeOH(95:5)洗脫，得到N-[[1-(4-氯苯基)-2-異丙基-2，7-二氮雜螺[3.5]壬-7-基]羰基]-L-異亮氨酸為白色殘留物(0.0464g)。加入MeOH(1mL)和0.1NHCl的MeOH溶液(2mL)，真空濃縮，得到為白色固體狀的標題化合物(0.0408g)。
用於製備B5-2、B5-3和B5-4的程序 使用和以上步驟A基本相同的程序，用適宜的醛，產生以下化合物 B5-2R3＝苯基 1H NMR(300MHz，DMSO)-δ7.4(d，2H)，7.3(br，3H)，4.6(s，1H)，3.5(br，2H)，3.2(br，1H)，3.0(br，1H)，1.9(br，2H)，1.3(s，9H)，1.2(br，1H)，1.0(br，1H) B5-3R3＝2-吡啶基 1H NMR(300MHz，CDCl3) δ8.7(d，1H)，7.8(t，1H)，7.4(d，1H)，7.2(m，1H)，6.2(s，1H)，4.5(s，1H)，3.8(br，1H)，3.6(m，1H)，3.2(br，2H)，2.1(br，1H)，1.9(m，1H)，1.5(m，1H)，1.4(s，9H)，1.1(m，1H) B5-4R3＝3-吡啶基 1H NMR(300MHz，CDCl3)- δ8.2(d，2H)，7.3(d，1H)，7.0(m，1H)，4.2(s，1H)，3.3(br，1H)，3.2(t，1H)，3.1(br，1H)，3.0(br，1H)，1.9(d，1H)，1.6(t，1H)，1.1(s，10H)，0.8(m，1H) B7-2的製備 R3＝苯基，R1＝苯基 向攪拌的內醯胺(B5-2，94mmol)的二烷溶液(200ml)加入溴苯(24g，104mmol)、N，N-二甲基乙二胺(1.1ml，94mmol)、CuI(3.6g，18mmol)和K2CO3(26g，188mmol)。過夜回流反應混合物。在冷卻至室溫後，通過過濾除去固體，用乙酸乙酯(1L)稀釋有機層，用鹽水洗滌，經MgSO4乾燥，並濃縮，經過濾獲得固體，用乙酸乙酯洗滌，得到標題化合物(Y92％)。
使用與如上所述基本相同的程序和根據需要取決於R2和R1基團的適宜試劑，得到在以下表9中的化合物和所示的反應得率和純化方法。(當R1為芳基或雜芳基時，優選的方法如對B7-2的製備所描述的方法一樣，當R1為烷基或取代的烷基時，優選的方法如對B7-1的製備所描述的方法一樣。) 表9











使用用於B7-1向B9-1轉變的條件，處理表9的化合物，得到對應體化合物，其中＝O基團被除去(通過用LAH/AlCl3還原)，BOC基團被除去(通過用TFA處理)。通過還原起始材料獲得的還原產物的得率％和還原產物的純化方法，以及脫羧產物的得率％和脫羧產物的純化方法，概述於表10。
表10







可通過加入NaOH，並用DCM萃取，將按照表10製備的化合物轉化為相應的游離鹼。可使用以下提供的通用方法，將式B9的化合物轉變為化合物B10 製備叔脲化合物文庫的通用方法
向化合物B9(0.025mmol)的DCE/MeOH(25:1 v/v，1mL)溶液加入0.5M異氰酸鹽(0.075mmol)的DCE溶液。將反應混合物於室溫攪拌20小時。加入二氯乙烷(0.5mL)、聚苯乙烯異氰酸酯樹脂(0.057g，0.087mmol)和聚苯乙烯三羥甲基氨基甲烷樹脂(0.049g，0.207mmol)。於室溫攪拌反應混合物16小時。過濾反應產物，用乙腈(0.5mL)洗滌樹脂。減壓蒸發有機溶劑，得到所需的式B10化合物。
製備醯胺化合物文庫的通用方法
向聚苯乙烯EDC樹脂(0.106g，0.146mmol)和B9型化合物(0.025mmol)在MeCN/THF(3:1 v/v，1mL)中的混合物加入1M羧酸(0.038mmol)的DMF溶液，然後加入0.5M HOBT(0.038mmol)的MeCN/THF(3:1 v/v，0.20mL)溶液。於室溫攪拌反應混合物20小時。加入乙腈(0.5mL)、聚苯乙烯異氰酸酯樹脂(0.049g，0.075mmol)和聚苯乙烯三羥甲基氨基甲烷樹脂(0.035g，0.148mmol)。於室溫攪拌反應混合物64小時。過濾反應產物，用乙腈(0.5mL)洗滌樹脂。減壓蒸發有機溶劑，得到所需化合物B10，其通過LCMS表徵。
製備N-烷基化合物文庫的通用方法
向化合物B9(0.025mmol)的DMF/THF(1:1 v/v，1mL)溶液加入適宜的醛(0.075mmol)的DCE溶液，之後加入三乙醯氧基硼氫化鈉(3當量)。於室溫攪拌反應混合物約20小時。將MeOH(0.5mL)加入每個柱筒，振搖10分鐘，或直至氣體停止產生。
將MP-TsOH樹脂(約100mg)加至反應器，振搖1-2小時。然後通過過濾除去溶劑，用DCE(3×)洗滌樹脂，然後用甲醇(3×)洗滌，通過與2N氨的甲醇溶液一起攪拌(1.5-2ml，1小時)將所需產物由樹脂洗脫下來，並過濾。減壓蒸發有機溶劑，得到化合物B10，其通過LCMS表徵。
實施例B11-1 製備1-苯基)-2，7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸1，1-二甲基乙酯
在氬氣氛下，將氫化鋁鋰(5.3g)置於乾燥的250mL RB3-頸燒瓶中。加入二乙醚(分子篩)(100mL)。冷卻混合物至0℃，分批加入氯化鋁(5.97g)，並將溫度保持於-5°至5°。將所獲混合物攪拌30分鐘。在氬氣下，將該混合物過濾到氮氣淨化的1升RB3-頸燒瓶中。用乾燥的二乙醚(100mL)洗滌濾餅。將濾過液冷卻至-45℃，滴加1-氧代-3-(4-氯苯基)-2，7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸1，1-二甲基乙酯(8.40g)的無水(分子篩)THF(300mL)溶液，並將溫度保持於-40℃至-45℃。將混合物緩慢升溫至-20℃(-25℃至-18℃)，通過在矽膠上使用CH2Cl2:MeOH9:1作為洗脫劑進行TLC監測用2.5N NaOH猝滅的等份試樣。2小時後，將反應混合物冷卻至-30℃，並用10％ NaOH(溫度至-5℃)緩慢猝滅。用二乙醚(2×400mL)萃取反應混合物。用鹽水萃取醚溶液，真空濃縮(MgSO4)醚溶液，得到白色泡沫狀物。在快速矽膠(650mL)上用2.5:97.5(3L)；5:95(5L)；10:90(2L)的MeOH:CH2Cl2對該泡沫狀物進行色譜法。收集500mL級分(1-6)，然後收集250mL級分。濃縮級分3-6，得到起始化合物(6.46g)，濃縮級分11-27，得到為琥珀色殘餘物的標題化合物(0.4995g)。
可按照流程2，使用在流程1中的步驟3、5和6，將化合物B11轉變為式B10的化合物，其對B8轉變為B9和B10也適合。
測定 評價對離子通道的功能性作用的方法 使用電壓門控離子通道的功能性評價確定專利化合物的功效和/或單一濃度效力。使用兩種不同的方法檢測離子電流IonWorks HT(Molecular Devices，Sunnyvale，CA)和用於低通量、高保真確定的常規全細胞膜片鉗，IonWorks HT是中等通量的電壓鉗篩選平臺，其使用96孔複合板。
細胞系 瞬時轉染HEK細胞，然後根據不同的目標通道蛋白的穩定異源表達進行選擇。鈣通道細胞系表達靜息鉀電流、人Kir2.1和電壓門控的鈣通道的成孔α-亞基。就Cav2.1細胞而言，還表達輔助亞基β2a。用於產生本文件中的數據的鈣通道系表達人Cav3.2、大鼠Cav3.2或人Cav2.1。人心臟鈉通道hNav1.5在CHO細胞中穩定表達。這些細胞得到賓夕法尼亞大學許可。
細胞繫於37℃在用95％空氣/5％CO2平衡的溼潤培養箱中培養。CHO細胞在Ham氏F-12培養基中生長。HEK細胞在DMEM中生長。所有的培養基都補加10％熱失活的胎牛血清、青黴素、鏈黴素和適宜的選擇抗生素(zeocin、遺傳黴素和/或潮黴素)。在80％或以下融合時傳代細胞。
用於hCaV3.2的IonWorks篩選 使用該設備的實驗的胞外緩衝液包含以下的物質(mM)(NaCl125，HEPES 10，KCl 5.4，CaCl2 1.8，MgCl2 1.8，0.2 BaCl2 pH7.35)。IonWorks使用兩性黴素得到細胞內部的電存取。內部溶液包含(mM濃度)130K-葡糖酸鹽、20KCl、5HEPES-KOH(pH7.25)、2 CaCl2、1MgCl2。兩性黴素在存在時以5mg的65ml溶液加入(在650μl DMSO中)。用於該實驗的所有內部和外部溶液都含有1％ DMSO。劇烈胰蛋白酶化T-75燒瓶中的細胞，並以2×105個細胞/ml的密度重懸浮在胞外緩衝液中。
實驗於室溫進行。跨膜電位於-100mV保持5秒，然後實施電壓方案。在該時間段當中，在變到或步移到-110mV的過程中(200毫秒)測量漏電流(leak currents)。T-型鈣電流以250毫秒變到-20mV被觸發。重複該去極化步驟總共10個脈衝，脈衝間隔時間1秒。數據如果不滿足以下的接受標準則被排除在外化合物前掃描的總阻抗>65MΩ，化合物前電流>250pA，化合物後的總阻抗>50MΩ。
T-型電流當峰值內部電流減去250毫秒變到-20mV結束時的電流時測量。在建立重編碼配置後，存在化合物前的電流幅值測量。化合物以含有1％ DMSO的3X溶液加入。在與化合物溫育10分鐘後，再測量電流。加入化合物後的電流幅值除以脈衝10的化合物前電流，以確定加入化合物後保留的電流比例。對於每種化合物，以1/2對數連續稀釋檢測8-點濃度-效力關係。然後將這些數據移至GraphPad Prism(v4)，使用非線性回歸分析評估每種測試化合物的IC50。
常規的全細胞膜片鉗 將細胞鋪板在9mm直徑圓形蓋玻片上的適宜生長培養基中，並放置在37℃培養箱中直至使用。使用常規方法於室溫進行全細胞膜片鉗研究。使用PCLAMP軟體(v8或9)連同適合的A/D D/A電路板、Pentium III個人計算機，並使用Multiclamp 700或AxoPatch 1D放大器，以產生電壓鉗方案、獲取數據和檢測電流。
在研究時，將附有細胞的一片蓋玻片轉移至倒置顯微鏡臺上的記錄槽中，並建立膜片鉗的全細胞構型。記錄槽用胞外溶液以約3ml/min的流速重力灌注。膜片電極在用電極液充滿時具有2-3MΩ的阻抗。胞外溶液是HEPES緩衝鹽水(149 NaCl，10 HEPES-NaOH(pH7.4)，10葡萄糖，5 CsCl，2 MgCl2，5 CaCl2；濃度為mM)。電極液包含(mM濃度)(115 CsCl，10 HEPES-CsOH(pH7.3)，4 MgATP，10 EGTA；用蔗糖滲透至310mM)。所有的溶液都包含0.1％ DMSO。
所有方案的保持電位都是-100mV。脈衝間間隔為15秒。以200毫秒測試脈衝至-35mV檢驗hCav3.2或rCav3.2電流的時程。Cav3.2電流以電壓變到-35mV後10-30毫秒的峰值電流測量。使用P/N4漏減(leak substraction)。將放大器低通濾波器設置於10kHz，並於10kHz採樣數據。數據用Gaussian濾波器以280Hz的-3dB截取值離線過濾。hCaV2.1電流的電壓方案差異僅在於用於去極化測試電位的電壓。對於hCav2.1，以200毫秒變到0mV觸發電流。以變到0mV後190-200毫秒之間的平均電流由已漏減的追蹤結果測量hCav2.1電流。用於鈉電流的電壓方案包含150毫秒超極化脈衝至-140mV，以優化通道利用度，之後為20毫秒測試脈衝至-20mV。由已漏減的追蹤結果檢測為峰值瞬時內部電流的鈉電流。
所有的藥物作用都在達到穩態作用後測量。濃度-效力關係通過使每個細胞接觸僅單一濃度的測試品來獲得。對於非線性回歸分析，將化合物後的電流幅值對每個細胞的化合物前的電流幅值標準化。如果給定的電流於10μM以下的濃度被抑制達>50％，則將多個濃度的化合物的數據以及相應的溶媒和時間對照細胞輸入GraphPad Prism(v4)進行非線性回歸分析，以確定IC50。
疼痛 式I的化合物用於治療或預防疼痛的作用可通過多種動物模型來評價，例如通過以下測試 (1)福馬林測試輕輕束縛小鼠，使用帶有27號針的微型注射器將30μl福馬林溶液(在1.5％鹽水中)皮下注射到小鼠右後爪的蹠表面。在福馬林注射後，立即將小鼠放回到有機玻璃觀察室(30×20×20cm)中，觀察動物對福馬林注射的疼痛反應60分鐘。記錄舔舐和回縮受注射爪的持續時間，在整個觀察階段每5分鐘定量1次。早期(第一期)記錄立即開始，並持續5分鐘。晚期(第二期)在福馬林注射後約10-15分鐘開始。
(2)坐骨神經的L5和L6脊神經結紮(神經性疼痛模型)基於先前Kim和Chung(1992)的方法，通過結紮右坐骨神經的L5和L6脊神經，產生外周神經病。簡而言之，用水合氯醛(400mg/kg，腹膜內)麻醉大鼠，使大鼠處於臥姿，右脊旁肌肉於L4-S2節段與神經突分開。用小骨鉗小心移開L5橫斷處理物，以鑑定L4-L5脊神經。分離右L5和L6脊神經，並用7/0絲線緊緊結紮。確認徹底止血後縫合傷口。
(3)坐骨神經的慢性壓迫性損傷(CCI)(神經性疼痛模型)按照Bennett & Xie(1987)描述的方法進行手術。用水合氯醛(400mg/kg，腹膜內)麻醉大鼠，並於大腿中部節段暴露總坐骨神經。在神經周圍打結間隔1mm的、距神經三根分叉部最近約1cm的4個鬆散結紮(4/0絲)。結紮延遲但沒有阻礙通過表面外膜血管系統的循環。實施相同的程序，只是在第二組動物中進行綁帶更換(假手術)。
(4)角叉菜膠(炎性疼痛模型)每隻動物的右後爪於蹠內節段注射0.1mL角叉菜膠(25GA針)。在角叉菜膠或藥物給予之前確定前測試。在後處理方案中，在角叉菜膠處理後3小時測試大鼠，以確定痛覺過敏的存在情況，然後於給藥後的不同時間測試大鼠。在處理前方案中，在給藥後1小時，用角叉菜膠處理大鼠，由3小時後開始測試它們。
(5)弗氏佐劑誘導的關節炎模型(炎性疼痛模型)動物接受單次蹠內注射100mL在石蠟油和乳化劑二縮甘露醇一油酸酯(完全弗氏佐劑)混合物中的500mg劑量的熱失活並乾燥的肺結核分枝桿菌(H37Ra，Difco Laboratories，Detroit，MI，USA)。對照動物注射0.1mL礦物油(不完全弗氏佐劑)。
(6)觸覺型痛覺異常的檢測(行為測試)在光周期中由不知道所實施的治療的觀察者進行行為測試，以避免晝夜節律波動。使用一系列已校準的Semmes-Weinstein(Stoelting，IL)von Frey絲評價觸覺敏感性，彎曲力在0.25-15g的範圍內。將大鼠放在具有金屬篩板的透明塑料盒中，並在實驗開始前適應該環境。將von Frey絲垂直施加在身體同側後爪的蹠中表面，通過順序增加和降低刺激強度確定機械痛覺異常(絲外觀的「升降」範式)。用Dixon非參數測試(Chaplan等人，1994)分析數據。在刺激後舔爪或劇烈晃動被認為是疼痛樣反應。
(7)熱痛覺過敏(行為測試)通過測量為熱疼痛指數的縮足潛伏期評價對輻射熱的熱痛覺過敏(Hargreaves等人，1998)。因為其對痛覺過敏的敏感性而選擇蹠測試(Basile，Comerio，Italy)。簡而言之，測試由置於玻璃板之下的可移動紅外光源組成，大鼠被放置在玻璃板之上。3個單獨的塑膠盒允許3隻大鼠同時測試。紅外光源被直接放置在後爪的蹠表面之下，縮足潛伏期(PWL)被定義為大鼠由熱源移開其後爪所耗用的時間。PWL對每隻大鼠的兩隻後爪都進行3次，每隻爪的平均值代表大鼠的熱疼痛閾值。調整輻射熱源，產生10-12秒的基線潛伏期。設備截取值被固定在21秒，以防止組織損傷。
(8)負重(行為測試)使用雙足平衡法測痛儀(incapacitance tester)確定後爪重量分布。將大鼠放置在成角度的有機玻璃室中定位，使得每個後爪都靜止在單獨的測力板上。負重測試代表關節炎大鼠的病況的直接檢測，不施加任何應力或刺激，因此該測試檢測動物的自發疼痛行為。
GPR119篩選測定 試劑準備 刺激緩衝液100ml HBSS(GIBCO#14025-092) +100mg BSA(MP Biomedicals faction V，#103703)＝0.1％ +500μl 1M HEPES(Cellgro#25-060-Cl)＝5mM +75μl RO-20(Sigma B8279；20mM在DMSO中的母液，以等份試樣儲存於-20℃)＝15μM (每日新鮮製備) B84(N-[4-(甲磺醯基)苯基]-5-硝基-6-[4-(苯硫基)-1-哌啶基]-4-嘧啶胺，參見WO 2004/065380)製備測試化合物在DMSO中的10mM母液，等分後儲存於-20℃。關於整體用DMSO 1:33.3稀釋，然後用刺激緩衝液1:50稀釋＝6μM的2％D MSO溶液(＝最終的3μM B84和1％ DMSO)。關於劑量反應曲線3μl母液+7μl DMSO+490μl刺激緩衝液＝60μM的2％DMSO溶液(＝最終的30μM B84和1％DMSO)。(每日新鮮製備)。
細胞系 人克隆3用人-SP9215(GPR119)/pcDNA3.1穩定轉染的HEK293細胞，其對pCRELuc，Stratagene也是穩定的。將細胞保持在含有10％FBS(Invitrogen #02-4006Dk，批號#1272302，熱失活)、1×MEM，1×Pen/Strep，0.1mg/ml潮黴素B和0.5mg/ml G418的DMEM中。每周2次將細胞以1:8拆分。
cAMP試劑盒LANCETM cAMP 384試劑盒，Perkin Elmer#AD0263 化合物稀釋 將DMSO加至含有化合物的小瓶，以產生1mg/ml溶液。
1.以刺激緩衝液稀釋化合物至60μM。使用epMotion機器人製備1/2對數稀釋度的含有2％ DMSO的刺激緩衝液。10點劑量反應曲線1nM至30μM。
2.化合物以一式四份操作，組1和1a的每個均有2個獨立的稀釋度。
測定程序 1.測定前的下午，用Optimem.(Gibco #11058-021)更換人克隆3細胞燒瓶中的培養基。注意細胞應培養6-8天。
2.第二天早晨，使用HBSS將細胞溫和地吸出燒瓶(RT)。
3.沉澱細胞(1300rpm，7min，RT)，並以2.5×10e6/ml(＝5-8,000個細胞/6μl)重懸浮在刺激緩衝液中。將1:100稀釋度的AlexaFluor 647-抗cAMP抗體(在試劑盒中提供)直接加入細胞懸浮液。
4.將6μl 2×B84、化合物或刺激緩衝液加入白色的384-孔板(Matrix)，用於nsb。它們全部都含有2％ DMSO(＝最終1％DMSO)。
5.將6μl細胞懸浮液加至孔。於室溫溫育30分鐘。
6.對於標準曲線，按照試劑盒指引加入在刺激緩衝液+2％DMSO中稀釋的6μl cAMP標準溶液(1000-3nM)。向標準孔加入6μl 1:100在刺激緩衝液中的抗-cAMP稀釋液。
7.按照試劑盒說明書製備檢測混合物，並於室溫溫育15分鐘。
8.將12μl檢測混合物加至所有孔。通過輕敲溫和混合，並於室溫溫育2-3小時。
9.按照方案「Lance/Delphia cAMP」用Envision讀取。
10.每個樣品的值(nM)通過由標準曲線外推確定。測定每個化合物的％對照、倍數和EC50(對照＝3μM B84)，平均組1和1a。
結果 在Cav3.2 Ionworks測定中，表5中化合物的IC50在23-23506nM的範圍內。表7還提供了化合物的Cav3.2 Ionworks測定數據。
表7

在GPR 119 cAMP測定中，表6中化合物的IC50活性在1640-16,260nM的範圍內。表8還提供了GPR 119數據。
表8

為測量NPC1L1，應使用以下的結合測定 可將表達人NPC1L1的HEK-293細胞鋪板在384-孔黑色/透明板(BD Biosciences，Bedford MA)中，以用於第二天的結合實驗。可吸出細胞生長培養基(DMEM，10％胎牛血清，1mg/ml遺傳黴素，100單位/ml青黴素)。可將含有250nM BODIPY-標記的糖醛酸化依替米貝的細胞生長培養基(20ml)加入每個孔。然後可將含有所示濃度的化合物的細胞生長培養基(20ml)加至各孔。未標記的糖醛酸化依替米貝(100mM)可用於確定非特異性結合。可使結合反應於37℃進行4小時。隨後可吸出細胞生長培養基，並可用PBS洗滌細胞1次。餘下的結合細胞的螢光標記的糖醛酸化依替米貝可以使用FlexStation讀板器(Molecular Devices，Sunnyvale CA)定量，以測量螢光強度。可以使用Prism和Activity Base軟體由競爭結合曲線確定Ki值(每個點n＝4)。
為檢測膽固醇吸收抑制，應使用以下的體內測定 可通過口服餵飼0.25ml玉米油或在玉米油中的化合物給藥雄性大鼠；半小時後，可口服給予每隻大鼠0.25ml玉米油和2μCi 14C-膽固醇、1.0mg冷膽固醇。
2小時後，可以用100mg/kg IP Inactin麻醉大鼠，可由腹主動脈收集10ml血樣。取出小腸，分為3部分，每部分用15ml冷鹽水衝洗。合併衝洗液。取出肝臟，稱重，取出約350mg的3等份csn。將5ml 1N NaOH加至每個腸部分，1ml加至肝的每等份，在40°過夜溶解。用0.25ml 4N HCl中和2×1ml等份試樣的SI消化物和肝消化物，並計數。計數2×1ml等份試樣的血漿和腸衝洗液。
儘管結合上述具體實施方案描述了本發明，但其許多替代、改進和變化對本領域一般技術人員是顯而易見的。所有這些替代、改進和變化都屬於本發明的精神和範圍。
權利要求
1.至少一種式(I)的化合物在製備用於治療疾病或病症的藥物中的用途，其中所述疾病或病症由T-鈣通道、GPR119受體或NPC1L1受體介導，其中所述式(I)化合物
選自表1、2、3a、3b、3c、3d和4a定義的化合物。
2.權利要求1的用途，其中所治療的病症為疼痛。
3.權利要求2的用途，其中所治療的疼痛為慢性疼痛。
4.權利要求2的用途，其中所治療的疼痛為炎性疼痛。
5.權利要求2的用途，其中所治療的疼痛為神經性疼痛。
6.權利要求2的用途，其中所述式I的化合物選自表5和7中的化合物。
7.權利要求1的用途，其中所治療的病症為疼痛，且所述方法進一步包括給予至少一種治療疼痛的其它藥物。
8.權利要求7的用途，其中所治療的疼痛為炎性疼痛，所述其它藥物為治療炎性疼痛的藥物。
9.權利要求7的用途，其中所治療疼痛為神經性疼痛，所述其它藥物為治療神經性疼痛的藥物。
10.權利要求7的用途，其中所述其它藥物選自非阿片類鎮痛藥、阿片類鎮痛、類固醇類、COX-I抑制劑、COX-II抑制劑、用於治療炎性腸病的藥物和用於治療類風溼性關節炎的藥物。
11.權利要求7的用途，其中所述其它藥物選自
非阿片類鎮痛藥選自乙醯水楊酸、三水楊酸膽鹼鎂、對乙醯氨基酚、異丁苯丙酸、苯氧苯丙酸、氟苯水楊酸和甲氧萘丙酸；
阿片類鎮痛藥選自嗎啡、二氫嗎啡酮、美沙酮、左啡諾、芬太尼、羥可酮和羥嗎啡酮；
類固醇選自氫化潑尼松、氟替卡松、去炎松、倍氯米松、莫美他松、budisamide、倍他米松、地塞米松、強的松、氟尼縮松和可的松；
COX-I抑制劑選自阿司匹林和吡羅昔康；
COX-II抑制劑選自羅非昔布、塞來昔布、伐地考昔和依託昔布；
用於治療炎性腸病的藥物選自IL-10、類固醇類和柳氮磺胺吡啶；和
用於治療類風溼性關節炎的藥物選自甲氨蝶呤、咪唑硫嘌呤、環磷醯胺、類固醇類和黴酚酸嗎啉乙酯。
12.權利要求11的用途，其中所述其它藥物選自乙醯水楊酸、三水楊酸膽鹼鎂、對乙醯氨基酚、異丁苯丙酸、苯氧苯丙酸、氟苯水楊酸、甲氧萘丙酸、嗎啡、二氫嗎啡酮、美沙酮、左啡諾、芬太尼、羥可酮和羥嗎啡酮。
13.權利要求10的用途，其中所治療的疼痛為炎性疼痛，所述其它藥物選自類固醇類和非阿片類鎮痛劑。
14.權利要求12的用途，其中所述治療的疼痛為神經性疼痛。
15.權利要求2的用途，其中所述式I的化合物為選自表5的化合物。
16.權利要求7的用途，其中所述式I的化合物為選自表5的化合物。
17.權利要求10的用途，其中所述式I的化合物為選自表5的化合物。
18.權利要求2的用途，其中所述式I的化合物為選自表7的化合物。
19.權利要求7的用途，其中所述式I的化合物為選自表7的化合物。
20.權利要求10的用途，其中所述式I的化合物為選自表7的化合物。
21.權利要求1的用途，其中所治療的病症為糖尿病。
22.權利要求21的用途，其中所述式I的化合物選自表6中的化合物。
23.權利要求21的用途，其中所述式I的化合物選自表8中的化合物。
24.權利要求21的用途，其進一步包括給予至少一種用於治療糖尿病的其它藥物。
25.權利要求24的用途，其中所述其它藥物選自磺醯脲類、胰島素增敏劑、α-葡糖苷酶抑制劑、胰島素促泌素、肝葡萄糖輸出降低化合物和胰島素。
26.權利要求25的用途，其中所述其它藥物選自
磺醯脲藥物選自格列吡嗪、甲苯磺丁脲、優降糖、格列美脲、氯磺丙脲、醋磺己脲、格列胺脲、格列齊特、格列本脲和妥拉磺脲。
PPAR-γ激動劑選自曲格列酮、羅格列酮、吡格列酮和英格列酮；
雙胍選自甲福明和苯乙雙胍；
DPPIV抑制劑選自西他列汀、saxagliptin、denagliptin和維達列汀；
PTP-1B抑制劑；
葡糖激酶活化劑；
α-葡糖苷酶抑制劑選自米格列醇、阿卡波糖和伏格列波糖；
肝葡萄糖輸出降低藥物選自格華止和格華止XR；
胰島素促泌素選自GLP-1、exendin、GIP、分泌素、格列吡嗪、氯磺丙脲、那格列奈、美格列奈、格列本脲、瑞格列奈和格列美脲；和
胰島素選自長效和短效形式的胰島素。
27.權利要求24的用途，其中所述式I的化合物選自表6中的化合物。
28.權利要求24的用途，其中所述式I的化合物選自表8中的化合物。
29.權利要求25的用途，其中所述式I的化合物選自表6中的化合物。
30.權利要求25的用途，其中所述式I的化合物選自表8中的化合物。
31.權利要求26的用途，其中所述式I的化合物選自表6中的化合物。
32.權利要求26的用途，其中所述式I的化合物選自表8中的化合物。
33.一種藥盒，其在單個包裝中包括至少一種權利要求1定義的式I化合物的藥物組合物和至少一種獨立的、包含至少一種用於治療疼痛的其它藥物的藥物組合物。
34.一種藥盒，其在單個包裝中包括至少一種權利要求1定義的式I化合物的藥物組合物和至少一種獨立的、包含至少一種用於治療炎性疼痛的其它藥物的藥物組合物。
35.一種藥盒，其在單個包裝中包括至少一種權利要求1定義的式I化合物的藥物組合物和至少一種獨立的、包含至少一種用於治療神經性疼痛的其它藥物的藥物組合物。
36.一種藥盒，其在單個包裝中包括至少一種權利要求1定義的式I化合物的藥物組合物和至少一種獨立的、包含至少一種用於治療糖尿病的其它藥物的藥物組合物。
37.一種藥盒，其在單個包裝中包括至少一種權利要求1定義的式I化合物的藥物組合物，所述藥物組合物用於治療糖尿病。
38.權利要求1的用途，其中抑制膽固醇的吸收。
39.權利要求38的用途，其中所述藥物與至少一種用於治療脂質代謝紊亂的其它藥物一起使用。
40.權利要求38的用途，其中所述藥物與至少一種煙酸受體激動劑一起使用。
41.權利要求38的用途，其中所述藥物與至少一種HMG-CoA還原酶抑制劑一起使用。
42.權利要求38的用途，其中所述藥物與至少一種CETP抑制劑一起使用。
43.權利要求38的用途，其中所述藥物與至少一種NPC1L1拮抗劑一起使用。
44.權利要求38的用途，其中所述藥物與至少一種HMG-CoA還原酶抑制劑和至少一種NPC1L1拮抗劑一起使用。
45.一種藥盒，其在單個包裝中包括至少一種權利要求1定義的式I化合物的藥物組合物和至少一種獨立的、包含至少一種治療脂質代謝紊亂的其它藥物的藥物組合物。
46.一種藥盒，其在單個包裝中包括至少一種權利要求1定義的式I化合物的藥物組合物和至少一種獨立的、包含至少一種抑制膽固醇吸收的其它藥物的藥物組合物。
全文摘要
本發明公開了治療疾病或病症(例如疼痛、糖尿病或脂質代謝紊亂)的方法，該方法包括給予式(I)的氮雜環丁烷衍生物，其選自由表1、2、3a、3b、3c、3d和4a定義的化合物。
文檔編號A61K31/438GK101534822SQ200780042323
公開日2009年9月16日 申請日期2007年9月13日 優先權日2006年9月15日
發明者J·M·哈裡斯, B·R·諾伊斯塔德特, S·C·索羅塔, A·W·斯坦福德, D·突珊, B·麥基崔克 申請人:先靈公司